Retro-orbitale injectie is een gespecialiseerde injectiemethode die wordt gebruikt om verbindingen in de veneuze circulatie toe te dienen. Dierproeven zijn een belangrijke stap in de richting van klinisch werk. In het kader van dierproeven is er de noodzaak om verschillende soorten verbindingen via verschillende routes toe te dienen.
Sommige van deze routes omvatten subcutaan, intraperitoneaal en intraveneus. Intraveneuze injectie is de meest gebruikte route bij pasgeborenen die op de intensive care-afdeling voor pasgeborenen liggen. Bij onderzoek naar knaagdieren, met name bij volwassen knaagdieren, worden echter routinematig IV-injecties uitgevoerd op de staartader.
Bij pasgeborenen is het uiterst moeilijk om een staartaderinjectie met succes en reproduceerbaar uit te voeren. Daarom kan de retro-orbitale route als een gemakkelijker alternatief worden gebruikt. Eerst zullen we demonstreren hoe we een kleurstof kunnen gebruiken, trypan blauw, zodat de kijker duidelijk kan zien dat de kleurstof de veneuze circulatie binnendringt.
De neonatale rat wordt onder volledige anesthesie geplaatst, met zijn kop op zijn zij, rustend boven een lichtbron, zodat het oog en het laterale vaatstelsel zichtbaar en zichtbaar zijn. De naald wordt aan de voorkant van de oogkas ingebracht, het equivalent van de mediale canthus. Injecteer de oplossing in een zachte, soepele en vloeiende beweging.
Om deze procedure beter te reproduceren, is het belangrijk om de orbitale veneuze anatomie te begrijpen. Bij de rat is er een netwerk van verschillende aderen net onder het oog, die gemakkelijke en directe toegang tot de veneuze plexus mogelijk maken. Bij neonatale albinoratten is het ook zichtbaar zowel de oppervlakkige temporale als de gezichtsaders.
Deze procedure kan op exact dezelfde manier worden uitgevoerd. Bij neonatale muizen. Gebruik een naald met een dikte van 29 tot 31 ongeveer 0.30 millimeter.
Voor nauwkeurige volumes zuigt u de te injecteren oplossing op uit een gepipetteerd volume. Plaats de dieren op een vlakke ondergrond in zijligging. Induceer isofluraananesthesie voor het hele lichaam.
5% inductie, 3% onderhoud. Controleer de diepte van de anesthesie met behulp van de pull-terugtrekkingsreflexmethode. Met het hoofd naar rechts gericht, dient u de injectie toe in de rechter retro-orbitale sinus.
Steek de naaldafschuining naar beneden aan de voorkant van de oogkas, het equivalent van de middelste canthus, in een hoek van ongeveer 40 graden. Door deze hoek kan de naald naar de achterkant van de oogkas worden gericht. Injecteer in een zachte, soepele en vloeiende beweging.
Wacht even voordat u de naald langzaam terugtrekt om terugstroming te voorkomen. Gebruik voor elk dier een nieuwe steriele spuit om besmetting te voorkomen. Plaats de pup in de herstelbox, rustend op een beschermd verwarmingsapparaat, rond de 35 tot 37 graden Celsius.
Wacht op het herstel en controleer op tekenen van nood voordat u de pup terugbrengt naar de dam. Deze techniek werd gebruikt om de tracer biotine-dextran toe te dienen in het vaatstelsel van de hersenen van dieren die een germinale matrixbloeding hebben ondergaan. Dieren die een injectie met zoutoplossing kregen als controle, vertonen geen zichtbare kleuring van het vaatstelsel in de hersenen.
Succesvolle retro-orbitale injectie van de biotine-dextraan-tracer maakte het mogelijk om de aanwezigheid ervan in het hersenvaatstelsel binnen 10 minuten na retro-orbitale toediening te beoordelen. Deze techniek werd vervolgens gebruikt om de vasculaire lekkage van de tracer op het niveau van de individuele bloedvaten in de GMH-gewonde dieren te detecteren. Dit resultaat maakt het bijvoorbeeld mogelijk om het letsel te kwantificeren door het aantal bloedvaten te kwantificeren dat lekt na GMH-hersenletsel.
Bovendien kan deze procedure ook zonder lichtbron worden uitgevoerd, waardoor het een eenvoudige, ongecompliceerde en reproduceerbare techniek is die toediening van verbindingen rechtstreeks in de veneuze circulatie van neonatale ratten en muizen mogelijk maakt. Als deze procedure correct wordt uitgevoerd, zou deze niet tot nadelige effecten moeten leiden. Deze toedieningswortel maakt injecties van antilichamen, cellen en andere verbindingen rechtstreeks in de geslachtscirculatie van neonatale dieren mogelijk.
Deze route is van groter klinisch belang in vergelijking met andere routes, zoals intraperitoneale of subcutane injecties.