Retro-orbital injeksjon er en spesialisert injeksjonsmetode som brukes til å administrere forbindelser i venøs sirkulasjon. Dyreforskning er et viktig skritt mot klinisk arbeid. Som en del av dyreforsøk er det behov for å administrere ulike typer forbindelser via forskjellige ruter.
Noen av disse rutene inkluderer subkutan, intraperitoneal og intravenøs. Intravenøs injeksjon er den mest brukte ruten hos nyfødte som er i den nyfødte intensivavdelingen. Men i gnagerforskning, spesielt hos voksne gnagere, utføres IV-injeksjoner rutinemessig på halevenen.
Hos nyfødte er det ekstremt vanskelig å utføre en haleveneinjeksjon vellykket og reproduserbart. Derfor kan den retro-orbitale ruten brukes som et enklere alternativ. Først vil vi demonstrere å bruke et fargestoff, trypanblått, slik at betrakteren tydelig kan se fargestoffet som kommer inn i venøs sirkulasjon.
Den nyfødte rotten er plassert under full anestesi, med hodet liggende på siden, hviler over en lyskilde, slik at øyet og lateral vaskulatur er eksponert og synlig. Nålen settes inn på forsiden av øyehulen, tilsvarende mediale canthus. Injiser oppløsningen i en mild, jevn og flytende bevegelse.
For bedre å reprodusere denne prosedyren er det viktig å forstå orbital venøs anatomi. I rotte er det et nettverk av flere årer like under øyet, noe som gir enkel og direkte tilgang til venøs plexus. I neonatal albino rotte er det også synlig både overfladiske temporale og ansiktsårer.
Denne prosedyren kan utføres på nøyaktig samme måte. Hos nyfødte mus. Bruk en nål med 29 til 31 gauge rundt 0,30 millimeter.
For nøyaktige volumer, trekk opp løsningen som skal injiseres fra et pipettert volum. Plasser dyrene på en flat overflate i lateral hvile. Indusere isoflurananestesi i hele kroppen.
5 % induksjon, 3 % vedlikehold. Kontroller dybden av anestesi ved hjelp av trekkuttaksrefleksmetoden. Med hodet vendt mot høyre, administrer injeksjonen i høyre retro-orbital sinus.
Sett nålens skråkant ned på forsiden av øyehulen, tilsvarende den midterste kanten, i en vinkel på ca. 40 grader. Denne vinkelen gjør at nålen kan rettes mot baksiden av øyebanen. Injiser i en mild, jevn og flytende bevegelse.
Vent et kort øyeblikk før du trekker ut nålen, sakte, for å unngå tilbakestrømning. Bruk en ny steril sprøyte til hvert dyr for å unngå kontaminering. Plasser valpen i gjenopprettingsboksen, hvilt på en beskyttet oppvarmingsenhet, rundt 35 til 37 grader Celsius.
Vent på utvinningen, og sjekk for tegn på nød før du returnerer valpen til dammen. Denne teknikken ble brukt til å administrere sporstoffet biotin-dextran i hjernens vaskulatur hos dyr som har gjennomgått germinal matriksblødning. Dyr som fikk en saltvannsinjeksjon som kontroll, viser ingen synlig farging av vaskulaturen i hjernen.
Vellykket retro-orbital injeksjon av biotin-dextran tracer, tillot vurdering av dens tilstedeværelse i hjernevaskulaturen innen 10 minutter etter retro-orbital administrering. Denne teknikken ble deretter brukt til å oppdage vaskulær lekkasje av sporstoffet på det enkelte blodkarnivå i GMH-skadede dyr. Dette resultatet tillater for eksempel kvantifisering av skaden ved å kvantifisere mengden blodkar som lekker etter GMH hjerneskade.
I tillegg kan denne prosedyren også utføres uten en lyskilde, noe som gjør det til en enkel, grei og reproduserbar teknikk som tillater sammensatt administrasjon direkte inn i venøs sirkulasjon av nyfødte rotter og mus. Når det utføres riktig, bør denne prosedyren ikke føre til noen bivirkninger. Denne roten av administrasjon tillater injeksjoner av antistoffer, celler og andre forbindelser direkte inn i venal sirkulasjon av nyfødte dyr.
Denne ruten har større klinisk relevans sammenlignet med andre ruter, som intraperitoneale eller subkutane injeksjoner.