Retroorbital injektion är en specialiserad injektionsmetod som används för att administrera föreningar i vencirkulationen. Djurförsök är ett viktigt steg mot kliniskt arbete. Som en del av djurförsök finns det ett behov av att administrera olika typer av föreningar via olika vägar.
Några av dessa vägar inkluderar subkutan, intraperitoneal och intravenös. Intravenös injektion är den vanligaste behandlingsvägen hos nyfödda som vårdas på intensivvårdsavdelningen. Men i gnagarforskning, särskilt på vuxna gnagare, utförs IV-injektioner rutinmässigt på svansvenen.
Hos nyfödda är det extremt svårt att utföra en svansvensinjektion framgångsrikt och reproducerbart. Därför kan den retroorbitala rutten användas som ett enklare alternativ. Först kommer vi att demonstrera hur man använder ett färgämne, trypanblått, så att betraktaren tydligt kan se att färgämnet kommer in i vencirkulationen.
Den neonatala råttan placeras under full narkos, med huvudet liggande på sidan, vilande ovanför en ljuskälla, så att ögat och laterala kärlen är exponerade och synliga. Nålen förs in på framsidan av ögonhålan, motsvarande den mediala kantusen. Injicera lösningen med mjuka, jämna och flytande rörelser.
För att bättre reproducera denna procedur är det viktigt att förstå den orbitala venösa anatomin. Hos råttan finns det ett nätverk av flera vener strax under ögat, vilket ger enkel och direkt tillgång till venös plexus. Hos nyfödd albinoråtta är det också synligt både de ytliga temporal- och ansiktsvenerna.
Denna procedur kan utföras på exakt samma sätt. Hos neonatala möss Använd en nål med 29 till 31 gauge runt 0,30 millimeter.
För exakta volymer, dra upp lösningen som ska injiceras från en pipetterad volym. Placera djuren på en plan yta i sidoläge. Inducera isofluranbedövning för hela kroppen.
5 % induktion, 3 % underhåll. Kontrollera anestesidjupet med hjälp av dragtillbakadragsreflexmetoden. Med huvudet vänt åt höger, administrera injektionen i den högra retroorbitala sinusen.
Stick ner nålavfasningen på framsidan av ögonhålan, motsvarande den mellersta kanten, i en vinkel på cirka 40 grader. Denna vinkel gör att nålen kan riktas mot den bakre delen av ögonhålan. Injicera med mjuka, mjuka och flytande rörelser.
Vänta en kort stund innan du drar ut nålen, långsamt, för att undvika återflöde. Använd en ny steril spruta för varje djur för att undvika kontaminering. Placera valpen i återhämtningslådan, vilande på en skyddad uppvärmningsanordning, cirka 35 till 37 grader Celsius.
Vänta på återhämtningen och kontrollera om det finns några tecken på nöd innan du återför valpen till dammen. Denna teknik användes för att administrera spårämnet biotin-dextran i hjärnans kärl hos djur som har genomgått germinal matrixblödning. Djur som fått en injektion med koksaltlösning som kontroll visar ingen synlig färgning av kärlen i hjärnan.
Framgångsrik retroorbital injektion av biotin-dextran-spårämnet möjliggjorde bedömning av dess närvaro i hjärnans kärl inom 10 minuter efter retroorbital administrering. Denna teknik användes sedan för att detektera det vaskulära läckaget av spårämnet på individuell blodkärlsnivå hos de GMH-skadade djuren. Detta resultat gör det till exempel möjligt att kvantifiera skadan genom att kvantifiera mängden blodkärl som läcker efter GMH-hjärnskada.
Dessutom kan denna procedur också utföras utan ljuskälla, vilket gör det till en enkel, okomplicerad och reproducerbar teknik som möjliggör sammansatt administrering direkt i den venösa cirkulationen hos neonatala råttor och möss. När den utförs korrekt bör denna procedur inte resultera i några negativa effekter. Denna administreringsrot möjliggör injektioner av antikroppar, celler och andra föreningar direkt i den venala cirkulationen hos neonatala djur.
Denna administreringsväg är av större klinisk relevans jämfört med andra administreringsvägar, såsom intraperitoneala eller subkutana injektioner.
