Vårt laboratorium undersöker den cellulära mekanismen som involverar proteinaggregering i samband med Parkinsons sjukdom. Dessutom använder vi cell- och djurmodeller för att testa potentiella behandlingar mot Parkinsons sjukdom. I den här artikeln föreslår vi ett protokoll för studier av mitokondriell morfologi in situ som en indikator på deras hälsa baserat på immunfärgning och bildanalys i paraffininbäddade vävnadssnitt.
Mitokondriell morfologi har studerats utförligt vid Parkinsons sjukdom och andra sjukdomar in vitro. Ändå saknas fortfarande protokoll för att studera mitokondriell morfologi in vivo. Detta protokoll ger en robust metod för färgning av mitokondrier i hjärnvävnad, och det förklarar i detalj hur man utför den morfologiska analysen.
Denna studie visar att immunfärgning i kombination med bildanalys är en tillförlitlig metod för att förstå mitokondriell morfologi. Faktum är att det gör det möjligt att kvantifiera antalet mitokondrier såväl som andra morfologiska parametrar, såsom bildförhållandet i både cellkultur och vävnad. Eftersom denna metod är immunofluorescensbaserad är det möjligt att relatera morfologierna tillbaka till specifika cellulära populationer.
Här presenterar vi ett protokoll för att studera mitokondriell morfologi vid Parkinsons sjukdom, men detta protokoll kan tillämpas på vilken in vivo sjukdomsmodell som helst. Dessutom kan det hjälpa till att screena ledande föreningar för behandling av inte bara Parkinsons sjukdom, utan även alla andra sjukdomar som kännetecknas av mitokondriell dysreglering.