Vi är intresserade av överhörning mellan sammandragande muskler och de fettceller som bildas mellan muskelfibrer vid skada och sjukdom som kallas intramuskulär fettvävnad, eller IMAT. Genteknik i celler i möss är ett kraftfullt verktyg för att mekanistiskt dissekera överhörning av fettmuskulatur. Analys av signalering via transkriptomik och proteomik identifierar mediatorer, och sedan kan biomaterialbaserad läkemedelstillförsel ingripa i dessa vägar.
En av de främsta utmaningarna är att isolera och kvantifiera IMAT-fettceller. Speciellt i smådjursmodeller tvättas IMAT-signalen ut av analys av hela muskler som transkriptomik eller lipidomik, och kvantifiering av IMAT genom icke-invasiv avbildning lider av liknande urtvättning, eftersom de flesta voxlar innehåller en blandning av muskler och IMAT. Vi använde nyligen denna teknik som beskrivs i den här artikeln för att visa att IMAT direkt försämrar muskelkontraktiliteten.
Med exakta mätningar av IMAT-deponering visade vi att det inte bara ersätter kontraktilt material, utan hindrar en sammandragning i den återstående muskelmassan. Detta protokoll tar itu med utmaningar med att kvantifiera IMAT. Den nuvarande standarden för att mäta IMAT hos smådjur är enkelsektionshistologi, som inte är heltäckande eller icke-invasiv avbildning, vilket är dyrt och lågupplöst.
Vi tror att detta har begränsat vår förståelse av IMAT-muskelöverhörning. Denna teknik ger en omfattande och billig metod för att bedöma IMAT genom kvalitativ visualisering och kvantifiering i flera skalor. Vi hoppas att denna tekniks enkelhet kommer att uppmuntra fler forskare att mäta IMAT i sina djurmodeller.
Denna teknik kommer också att ge ett verktyg med högre precision för de forskare som är intresserade av IMAT för att avslöja mer subtila relationer mellan IMAT-fettceller och andra celler.