Name: vertical immobilization method for time-lapse microscopy analysis in filamentous cyanobacteria
Uploaded: 2023-09-25T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vertical Immobilization Method for Time-Lapse Microscopy Analysis in Filamentous Cyanobacteria at JoVE.com

We zijn de nationale doctoraatsbeurzen (ANID 21211333; 21191389) dankbaar voor de financiering. Grant Fondecyt 1161232.
Dit werk werd ondersteund door de Advanced Microscopy Facility UMA UC.

1. Overwegingen en selectie van het cellulaire model
OPMERKING: Cyanobacteriën hebben een sterke autofluorescentie als gevolg van de aanwezigheid van fotosynthetische pigmenten. Dit signaal bevindt zich in het rode deel van het spectrum, daarom zijn de fluorescerende eiwitten die geschikt zijn voor beeldvorming in cyanobacteriën degenen die ver van de rode emissie verwijderd zijn. Bijvoorbeeld GFP, YFP, Venus, Turquoise en BFP.
<ol><li>Selecteer een divisoomcomponent die a...

<ol>
	<li>L&#246;we, J., Amos, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crystal+structure+of+the+bacterial+cell-division+protein+FtsZ.">Crystal structure of the bacterial cell-division protein FtsZ.</a> Nature. 391 (6663), 203-206 (1998).</li><li>Erickson, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FtsZ,+a+prokaryotic+homolog+of+tubulin.">FtsZ, a prokaryotic homolog of tubulin.</a> Cell. 80 (3), 367-370 (1995).</li><li>Huang, K., Mychack, A., Tchorzewski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+FtsZ+C-terminal+variable+(+CTV+)+region+in+Z-ring+assembly+and+interaction+with+the+Z-ring+stabilizer+ZapD+in+E.">Characterization of the FtsZ C-terminal variable ( CTV ) region in Z-ring assembly and interaction with the Z-ring stabilizer ZapD in E.</a> coli cytokinesis. , 1-24 (2016).</li><li>Perez, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Movement+dynamics+of+divisome+proteins+and+PBP2x:FtsW+in+cells+of+Streptococcus+pneumoniae.">Movement dynamics of divisome proteins and PBP2x:FtsW in cells of Streptococcus pneumoniae.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 116 (8), 3211-3220 (2019).</li><li>Bisson-Filho, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treadmilling+by+FtsZ+filaments+drives+peptidoglycan+synthesis+and+bacterial+cell+division.">Treadmilling by FtsZ filaments drives peptidoglycan synthesis and bacterial cell division.</a> Science. 355 (6326), 739-743 (2017).</li><li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GTPase+activity-coupled+treadmilling+of+the+bacterial+tubulin+FtsZ+organizes+septal+cell+wall+synthesis.">GTPase activity-coupled treadmilling of the bacterial tubulin FtsZ organizes septal cell wall synthesis.</a> Science. 355 (6326), 744-747 (2017).</li><li>Whitley, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FtsZ+treadmilling+is+essential+for+Z-ring+condensation+and+septal+constriction+initiation+in+Bacillus+subtilis+cell+division.">FtsZ treadmilling is essential for Z-ring condensation and septal constriction initiation in Bacillus subtilis cell division.</a> Nature Communications. 12 (1), (2021).</li><li>Maz&#243;n, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LexA-binding+sequences+in+Gram-positive+and+cyanobacteria+are+closely+related.">LexA-binding sequences in Gram-positive and cyanobacteria are closely related.</a> Molecular Genetics and Genomics. 271 (1), 40-49 (2004).</li><li>Mandakovic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CyDiv,+a+conserved+and+novel+filamentous+cyanobacterial+cell+division+protein+involved+in+septum+localization.">CyDiv, a conserved and novel filamentous cyanobacterial cell division protein involved in septum localization.</a> Frontiers in Microbiology. 7 (FEB), 1-11 (2016).</li><li>Camargo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ZipN+is+an+essential+FtsZ+membrane+tether+and+contributes+to+the+septal+localization+of+SepJ+in+the+filamentous+cyanobacterium+Anabaena.">ZipN is an essential FtsZ membrane tether and contributes to the septal localization of SepJ in the filamentous cyanobacterium Anabaena.</a> Scientific Reports. 9 (1), 1-15 (2019).</li><li>Thiel, T., Peter Wolk, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conjugal+Transfer+of+Plasmids+to+Cyanobacteria.">Conjugal Transfer of Plasmids to Cyanobacteria.</a> Methods in Enzymology. 153 (C), 232-243 (1987).</li><li>Moffitt, J. R., Lee, J. B., Cluzel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+single-cell+chemostat:+An+agarose-based,+microfluidic+device+for+high-throughput,+single-cell+studies+of+bacteria+and+bacterial+communities.">The single-cell chemostat: An agarose-based, microfluidic device for high-throughput, single-cell studies of bacteria and bacterial communities.</a> Lab on a Chip. 12 (8), 1487-1494 (2012).</li></ol>

De studie van de dynamiek van divisoomeiwitten is zonder twijfel een uitdaging. Met name bij filamenteuze cyanobacteriën is een van de uitdagingen de visualisatie van de Z-ring in het horizontale vlak, waarvoor de cellen verticaal georiënteerd moeten zijn. De methode die we hier hebben beschreven, maakt het mogelijk om de positie van de Z-ring in het XY-vlak uit te voeren van de verschillende analyses. Dit is de eerste eenvoudige methode voor filamenteuze cyanobacteriën die de volledige visualisatie van de Z-ring moge...

Bacteriële celdeling is het proces waarbij een moedercel twee dochtercellen genereert, in de meeste gevallen door het mechanisme dat bekend staat als binaire splijting. Een van de vroegste gebeurtenissen in het septatieproces is de lokalisatie van FtsZ in het midden van de cel1. Dit eiwit, dat structureel homoloog is aan tubuline2, is geconserveerd en wijd verspreid in de meeste bacteriën, en de polymerisatie ervan genereert een contractiele structuur die bekend staat als de Z-ring3. Deze ring dient als een steiger voor andere delingseiwitten en samen vormen ze een moleculaire machinerie die een divisoom wordt genoemd. Verschillende studies hebben aangetoond dat de Z-ring zeer dynamisch is en dat FtsZ-protofilamenten bewegen door loopband 4,5,6. Om de Z-ring in time-lapse-experimenten te bestuderen, is het raadzaam om de delingsplaats in het XY-vlak vast te leggen voor een betere resolutie en snelle bemonstering. Om dit te bereiken, is het noodzakelijk om verticale celimmobilisatiemethoden te ontwikkelen die gewoonlijk de nanofabricage van microgatcelvallen en complexe microfluïdische apparaten omvatten7.
Cyanobacteriën zijn fotosynthetische micro-organismen die door hun cellulaire morfologie als gramnegatief worden geclassificeerd. Fylogenetisch staan ze echter dichter bij grampositieve bacteriën8. Deze organismen hebben celdelingsgenen die veel voorkomen in grampositieve en gramnegatieve bacteriën, maar hun divisoom bevat ook unieke elementen9. Anabaena sp. PCC 7120 (hierna Anabaena sp.) is filamenteuze cyanobacteriën met één delingsvlak en is een model voor de studie van celdeling in meercellige cyanobacteriën. In deze stam is het mogelijk geweest om de positionering van FtsZ in het midden van de cellente bepalen 10. Toch zijn er geen studies die de in vivo dynamiek van FtsZ in dit model aantonen. In ons laboratorium verkregen we door triparentale paring en homologe recombinatie een volledig gescheiden mutant van Anabaena sp. die het FtsZ-eiwit tot expressie brengt dat is gefuseerd met sfGFP, dat het volledige endogene ftsZ-gen verving. We ontwikkelden een snelle en eenvoudige celimmobilisatiemethode die de verticale oriëntatie van de mutante stamfilamenten bevordert voor time-lapse-experimenten om de delingseiwitten in filamenteuze cyanobacteriën te visualiseren. Deze methode heeft geen microfluïdische apparaten nodig die duur en moeilijk te ontwikkelen kunnen zijn. Als voorbeeld gebruikten we dit protocol om de Z-ring in de FtsZ-sfGFP-mutant te visualiseren door confocale microscopie.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>Qingdao Agna Medical Technology Co., Ltd.</td>
			<td>-</td>
			<td>The disposable medical plastic syringe with 1 ml needle generally used to pump liquid or injection liquid, in this experiment it is used to suck the sample and make it polymerize.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Attofluor Cell Chamber</td>
			<td>ThermoFischer Scientific</td>
			<td>A7816</td>
			<td>The Attofluor Cell Camera is a durable and practical coverslip holder designed for viewing live cell samples in upright or inverted microscopes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axygen MaxyGene II Thermal Cycler with 96 well block</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>THERM-1001</td>
			<td>The new MaxyGene II Thermal Cycler increased speed and advanced features, providing the premium performance you have come to expect from Axygen brand products. Unique flexible programming. Rapid run times. Improved workflow over traditional gradient cyclers. Ramping rates up to 5&#176;C/sec. Adjustable heated lid accommodates strips, tubes and microplates.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand Cover Glasses: Circles</td>
			<td>ThermoFischer Scientific</td>
			<td>12-546-2P</td>
			<td>Made of finest optical borosilicate glass, with uniform thickness and size. Circular shape. Corrosion-resistant.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Melting Point agarose</td>
			<td>Promega</td>
			<td>V3841</td>
			<td>Agarose, Low Melting Point, Analytical Grade, is ideal for applications that require recovery of intact DNA fragments after gel electrophoresis.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 880 microscope from Zeiss Airyscan</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>-</td>
			<td>The Zeiss Airyscan LSM 880 microscope is a laser scanning focal microscope that can acquire images under the resolution limit (lateral resolution ~ 120nm and axial resolution ~ 350nm). The detectors are highly sensitive making it possible to acquire super-resolution images at high speed.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentr&#237;fuga Fresco 17</td>
			<td>ThermoFischer Scientific</td>
			<td>75002402</td>
			<td>Speed up routine sample preparation processes up to 17,000 &#215; g with our standard microcentrifuge, available with refrigeration. These microcentrifuges offer productivity, versatility, safety and convenience in an easy-to-use, compact design laboratory instrument.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Timelapse Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>-</td>
			<td>The Nikon C2 laser scanning confocal microscope is an ideal microscope for long-term timelapse, because thanks to its incubation chamber it is possible to keep samples in optimal conditions for more than 8 hours.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thin razor blades Schick Super Chromium</td>
			<td>Farmazon</td>
			<td>SKU: 401146</td>
			<td>&#160;The thin razor blades is used to cut the agarose matrix, allowing us to obtain the disks with the sample while maintaining the integrity of the matrix.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

vertical immobilization method for time-lapse microscopy analysis in filamentous cyanobacteria

Een belangrijke gebeurtenis bij bacteriële celdeling is het septatieproces, waarbij het eiwit FtsZ het belangrijkste element is. FtsZ polymeriseert en vormt een ringachtige structuur (Z-ring) in het midden van de cel die dient als steiger voor andere delingseiwitten. Superresolutiemicroscopie in bacteriële modellen Escherichia coli en Bacillus subtilis toonden aan dat de Z-ring discontinu is, terwijl live cell imaging-studies aantoonden dat FtsZ langs de ring beweegt door een mechanisme dat bekend staat als loopband. Om de dynamica van FtsZ in vivo te bestuderen, is een speciale celplaatsing in een verticale positie nodig om de volledige structuur van de ring in het XY-vlak in beeld te brengen. In het geval van FtsZ-beeldvorming in meercellige cyanobacteriën, zoals Anabaena sp. PCC7120, is het een uitdaging om de filamenten in een verticale positie te houden vanwege de grootte van de cellen en de lengte van de filamenten. In dit artikel beschrijven we een methode die de verticale immobilisatie van Anabaena sp. PCC 7120-filamenten mogelijk maakt met behulp van agarose met een laag smeltpunt en spuiten, om de Z-ring vast te leggen in een mutant die een FtsZ-sfGFP-fusie-eiwit tot expressie brengt. Deze methode is een snelle en goedkope manier om eiwitdynamica op de delingsplaats te registreren met behulp van confocale microscopie.

Visualisatie van de Z-ring in Anabaena sp. met behulp van de verticale immobilisatiemethode Om de dynamiek van Z-ringcomponenten in bacteriën te bestuderen, is het noodzakelijk om afbeeldingen in verticaal georiënteerde cellen te verkrijgen. In deze positie is het mogelijk om de Z-ring en de belangrijkste eiwitten van het divisoom te visualiseren om de eiwitdynamiek te volgen door middel van time-lapse microscopie. De klassieke monstervoorbereiding voor bacteriën werkt niet voor filamenteu...

Watch this Scientific Journal Video about Vertical Immobilization Method for Time-Lapse Microscopy Analysis in Filamentous Cyanobacteria at JoVE.com

Vertical Immobilization Method for Time-Lapse Microscopy Analysis in Filamentous Cyanobacteria

We presenteren een eenvoudige en toegankelijke methode voor filamenteuze cyanobacteriële visualisatie in het XY-vlak. Er werd een agarosematrix met een laag smeltpunt gebruikt, waardoor beelden van eiwitten die betrokken zijn bij de deling, in een verticale oriëntatie konden worden verkregen. Daarom kan deze methodologie worden toegepast op elk filamenteus organisme en verschillende soorten eiwitten.

Verticale immobilisatiemethode voor time-lapse microscopieanalyse in filamenteuze cyanobacteriën

A main event in bacterial cell division is the septation process, where the protein FtsZ is the key element. FtsZ polymerizes forming a ring-like ...

Bij bacteriën vereist de studie van de dynamiek van celdelingseiwitten een ruimtelijke oriëntatie van de cellen. In het geval van de Z-ring, het hoofdbestanddeel van bacteriële celdeling, is een verticale oriëntatie bijvoorbeeld fundamenteel om de hele structuur in het XY-vlak vast te leggen. In deze video ontwikkelen we een methode om deze specifieke oriëntatie te bereiken in de filamenteuze cyanobacteriën Anabaena.Anabaena is een meercellig fotosynthetisch organisme en deelt met andere bacteriën het vermogen om atmosferische dinitrogen als stikstofbron te gebruiken. Bij afwezigheid van dit element differentiëren Anabaena cellen die gespecialiseerd zijn in stikstoffixatie. Daarom biedt het een uitstekend model om de relatie tussen cellulaire deling en meercelligheid te analyseren.Selecteer eerst een divisoomcomponent die aanwezig is in de doelfilamenteuze cyanobacteriestam. Voor het experiment is het noodzakelijk om een filamenteuze cyanobacteriële mutant te construeren die de geselecteerde divisoomcomponent tot expressie brengt die is gefuseerd met een fluorescerend eiwit. In dit protocol gebruiken we een Anabaena-mutant die FtsZ uitdrukt gefuseerd met GFP als voorbeeld.Maak eerst een nieuwe subcultuur van de mutant met 10 milliliter van een cultuur in stationaire fase en 90 milliliter vloeibaar medium. Laat vervolgens de nieuwe celcultuur groeien in constant licht en bij de optimale temperatuur, totdat de exponentiële fase wordt bereikt. In ons voorbeeld werd de mutant zeven dagen lang gekweekt bij 25 graden Celsius.Neem nu twee milliliter van de groeicultuur en doe deze in een centrifugebuis. Centrifugeer op 2.500 x g gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur. Controleer na de centrifugatie of alle cellen zich op de bodem van de buis bevinden.Wees voorzichtig bij het hanteren van de monsters om te voorkomen dat u opnieuw suspensie gebruikt. Verwarm de agarose-oplossing met een laag smeltpunt in een magnetron. Het is belangrijk om dit in korte tijdsintervallen te doen en de oplossing te controleren totdat deze volledig vloeibaar is.Zodra het is gesmolten, zet het opzij om af te koelen. Neem de centrifugebuizen van de vorige stap, gooi 1,9 milliliter van het supernatant weg en suspensie de cellen opnieuw in het resterende volume door minstens drie keer op en neer te pipetteren. Plaats op uw werkplek de buis met de cellen, de gesmolten agarose-oplossing, een spuit van één milliliter in de punt gesneden en een scalpel met een nieuw en schoon mes.Meng vervolgens de cellen met 900 microliter van de 3% agarose-oplossing door minstens drie keer te pipetteren. Het is echt belangrijk om ervoor te zorgen dat de agarose-oplossing niet te heet is, maar vloeibaar blijft. Hiermee voorkomen we celschade tijdens dit proces.De volgende stap moet snel worden gedaan en voordat de agarose-oplossing gelifieert. Zuig de agarosematrix voorzichtig op in een spuit van één milliliter. Het is belangrijk om het genereren van bubbels te voorkomen terwijl het monster wordt opgezogen.Incubeer daarna het monster en plaats de spuit gedurende twee uur in horizontale positie bij kamertemperatuur. Verwijder na de incubatie voorzichtig de matrix met de cellen met behulp van de zuiger in een schoon en vlak oppervlak. Snijd het gelmonster met behulp van het scalpel in plakjes zo dun mogelijk, waarbij de integriteit van de matrix behouden blijft.Deponeer vervolgens de monsters in de bijbehorende coverslip, naast elkaar. Zoals te zien is in de video, kunt u in deze stap een tip gebruiken om te helpen bij het verwerkingsproces van het monster. Voor time-lapse-experimenten wordt het gebruik van een celkamer voor microscopie-analyse aanbevolen.In dit geval gebruiken we ronde coverslips die in dit soort kamers passen, zoals je in de video kunt zien. Ten slotte, om uitdroging van het monster te voorkomen, voegt u een extra volume gesmolten 3% agarose-oplossing toe in de kamer. Wacht voor de beeldvorming tot de agarose volledig gelated is.Plaats nu de kamer met de cellen in de microscoop voor beeldvorming. Het is aan te raden om een apparaat te gebruiken met temperatuur- en vochtigheidsregeling. Visualiseer het monster in een helder veld met maximale vergroting en zoek een verticaal georiënteerde gloeidraad.U kunt de divisiesite van belang vinden met een eerste scan met behulp van het autofluorescentiesignaal langs het Z-vlak. Gebruik hiermee de parameters van uw fluorescerende eiwitmarker om het signaal van uw eiwit van belang in de delingsplaats te visualiseren. Nu kunt u time-lapse-experimenten uitvoeren volgens het biologische model en het eiwit van belang.In dit geval kunnen we de hele structuur van de Z-ring zien in de FtsZ-GFP-mutant, in het XY-vlak. Met onze methode waren we in staat om de dynamiek van deze ringen in een lange periode vast te leggen. Ten slotte concluderen we met de veranderingen in fluorescentie-intensiteit dat deze structuur zeer dynamisch is in ons model.Deze methode is een snel en goedkoop protocol om de eiwitdynamica in de delingsplaats te registreren door middel van confocale microscopie toegepast op complexe morfologieën als filamenteuze cyanobacteriën, met Anabaena als model.

Research

JoVE Journal

Biology

Monitoring Actin Disassembly with Time-lapse Microscopy

Monitoring Actin Demontage met Time-lapse Microscopie

Time-lapse Imaging of Mitosis After siRNA Transfection

Time-lapse Imaging van mitose Na siRNA transfectie

Changes in cellular organization and chromosome dynamics that occur during mitosis are tightly coordinated to ensure accurate inheritance of genomic and ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse microscopie van de vroege embryogenese in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Quantitative Analysis of Random Migration of Cells Using Time-lapse Video Microscopy

Kwantitatieve analyse van Random migratie van cellen met behulp van time-lapse video Microscopie

Cell migration is a dynamic process, which is important for embryonic development, tissue repair, immune system function, and tumor invasion 1, 2. During ...

Use of Time Lapse Microscopy to Visualize Anoxia-induced Suspended Animation in C. elegans Embryos

Use of Time Lapse Microscopy to Visualize Anoxia-induced Suspended Animation in C. elegans Embryos

Het gebruik van Time lapse microscopie om Anoxie-geïnduceerde Suspended Animation Visualiseer in<em&gt; C. elegans</em&gt; Embryo&#39;s

Caenorhabdits elegans has been used extensively in the study of stress resistance, which is facilitated by the transparency of the adult and embryo stages ...

Visualization of Craniofacial Development in the sox10: kaede Transgenic Zebrafish Line Using Time-lapse Confocal Microscopy

Visualisatie van craniofaciale ontwikkeling in de SOX10: kaede transgene zebravis Line Met behulp van Time-lapse confocale microscopie

Vertebrate palatogenesis is a highly choreographed and complex developmental process, which involves migration of cranial neural crest (CNC) cells, ...

Time-Lapse Video Microscopy for Assessment of EYFP-Parkin Aggregation as a Marker for Cellular Mitophagy

Time-lapse video microscopie voor de Beoordeling van EYFP-Parkin Aggregation als marker voor Cellular mitofagie

Time-lapse video microscopy can be defined as the real time imaging of living cells. This technique relies on the collection of images at different time ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Hoge-resolutie time-lapse beeldvorming en geautomatiseerde analyse van de dynamiek van microtubuli in Living humane navelstreng endotheelcellen

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

Een veelzijdige methode voor de montage van Arabidopsis vertrekt naar Intravital Time-lapse Imaging

The plant immune response associated with a genome-wide transcriptional reprogramming is initiated at the site of infection. Thus, the immune response is ...

Specific Labeling of Mitochondrial Nucleoids for Time-lapse Structured Illumination Microscopy

Specifieke etikettering van Mitochondriale nucleoïden voor time-lapse Structured Illumination Microscopie

Mitochondrial nucleoids are compact particles formed by mitochondrial DNA molecules coated with proteins. Mitochondrial DNA encodes tRNAs, rRNAs, and ...