Name: vertical immobilization method for time-lapse microscopy analysis in filamentous cyanobacteria
Uploaded: 2023-09-25T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vertical Immobilization Method for Time-Lapse Microscopy Analysis in Filamentous Cyanobacteria at JoVE.com

Finansman için Ulusal doktora burslarına (ANID 21211333; 21191389) minnettarız. Grant Fondecyt 1161232.
Bu çalışma de Advanced Microscopy Facility UMA UC tarafından desteklenmiştir.

1. Dikkat edilmesi gereken noktalar ve hücresel modelin seçimi
NOT: Siyanobakteriler, fotosentetik pigmentlerin varlığı nedeniyle güçlü bir otofloresansa sahiptir. Bu sinyal spektrumun kırmızı kısmındadır, bu nedenle siyanobakterilerde görüntüleme için uygun floresan proteinler kırmızı emisyondan uzak olanlardır. Örneğin, GFP, YFP, Venüs, Turkuaz ve BFP.
<ol><li>Hedef filamentli siyanobakteriyel suşta bulunan bir bölücü bileşen seçin. Deneyler ...

<ol>
	<li>L&#246;we, J., Amos, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crystal+structure+of+the+bacterial+cell-division+protein+FtsZ.">Crystal structure of the bacterial cell-division protein FtsZ.</a> Nature. 391 (6663), 203-206 (1998).</li><li>Erickson, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FtsZ,+a+prokaryotic+homolog+of+tubulin.">FtsZ, a prokaryotic homolog of tubulin.</a> Cell. 80 (3), 367-370 (1995).</li><li>Huang, K., Mychack, A., Tchorzewski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+FtsZ+C-terminal+variable+(+CTV+)+region+in+Z-ring+assembly+and+interaction+with+the+Z-ring+stabilizer+ZapD+in+E.">Characterization of the FtsZ C-terminal variable ( CTV ) region in Z-ring assembly and interaction with the Z-ring stabilizer ZapD in E.</a> coli cytokinesis. , 1-24 (2016).</li><li>Perez, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Movement+dynamics+of+divisome+proteins+and+PBP2x:FtsW+in+cells+of+Streptococcus+pneumoniae.">Movement dynamics of divisome proteins and PBP2x:FtsW in cells of Streptococcus pneumoniae.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 116 (8), 3211-3220 (2019).</li><li>Bisson-Filho, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treadmilling+by+FtsZ+filaments+drives+peptidoglycan+synthesis+and+bacterial+cell+division.">Treadmilling by FtsZ filaments drives peptidoglycan synthesis and bacterial cell division.</a> Science. 355 (6326), 739-743 (2017).</li><li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GTPase+activity-coupled+treadmilling+of+the+bacterial+tubulin+FtsZ+organizes+septal+cell+wall+synthesis.">GTPase activity-coupled treadmilling of the bacterial tubulin FtsZ organizes septal cell wall synthesis.</a> Science. 355 (6326), 744-747 (2017).</li><li>Whitley, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FtsZ+treadmilling+is+essential+for+Z-ring+condensation+and+septal+constriction+initiation+in+Bacillus+subtilis+cell+division.">FtsZ treadmilling is essential for Z-ring condensation and septal constriction initiation in Bacillus subtilis cell division.</a> Nature Communications. 12 (1), (2021).</li><li>Maz&#243;n, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LexA-binding+sequences+in+Gram-positive+and+cyanobacteria+are+closely+related.">LexA-binding sequences in Gram-positive and cyanobacteria are closely related.</a> Molecular Genetics and Genomics. 271 (1), 40-49 (2004).</li><li>Mandakovic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CyDiv,+a+conserved+and+novel+filamentous+cyanobacterial+cell+division+protein+involved+in+septum+localization.">CyDiv, a conserved and novel filamentous cyanobacterial cell division protein involved in septum localization.</a> Frontiers in Microbiology. 7 (FEB), 1-11 (2016).</li><li>Camargo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ZipN+is+an+essential+FtsZ+membrane+tether+and+contributes+to+the+septal+localization+of+SepJ+in+the+filamentous+cyanobacterium+Anabaena.">ZipN is an essential FtsZ membrane tether and contributes to the septal localization of SepJ in the filamentous cyanobacterium Anabaena.</a> Scientific Reports. 9 (1), 1-15 (2019).</li><li>Thiel, T., Peter Wolk, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conjugal+Transfer+of+Plasmids+to+Cyanobacteria.">Conjugal Transfer of Plasmids to Cyanobacteria.</a> Methods in Enzymology. 153 (C), 232-243 (1987).</li><li>Moffitt, J. R., Lee, J. B., Cluzel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+single-cell+chemostat:+An+agarose-based,+microfluidic+device+for+high-throughput,+single-cell+studies+of+bacteria+and+bacterial+communities.">The single-cell chemostat: An agarose-based, microfluidic device for high-throughput, single-cell studies of bacteria and bacterial communities.</a> Lab on a Chip. 12 (8), 1487-1494 (2012).</li></ol>

Bölücü proteinlerin dinamiklerinin incelenmesi şüphesiz bir meydan okumadır. Özellikle, filamentli siyanobakterilerde, zorluklardan biri, hücrelerin dikey olarak yönlendirilmesi gereken yatay düzlemde Z-halkasının görselleştirilmesidir. Burada tarif ettiğimiz yöntem, farklı analizleri gerçekleştirmek için Z-halkasının XY düzleminde konumlandırılmasını sağlar. Bu, Z-halkasının tam olarak görselleştirilmesini sağlayan filamentli siyanobakteriler için ilk basit yöntemdir. 
<p class="jo...

Bakteriyel hücre bölünmesi, bir ana hücrenin, çoğu durumda ikili fisyon olarak bilinen mekanizma ile iki yavru hücre ürettiği süreçtir. Septasyon sürecindeki en erken olaylardan biri, FtsZ'ninhücre 1'in ortasında lokalizasyonudur. Yapısal olarak tübülin2'ye homolog olan bu protein, çoğu bakteride korunur ve yaygın olarak dağıtılır ve polimerizasyonu Z-halka3 olarak bilinen bir kasılma yapısı oluşturur. Bu halka, diğer bölünme proteinleri için bir iskele görevi görür ve birlikte bölücü adı verilen moleküler bir makine oluştururlar. Birçok çalışma, Z-halkasının oldukça dinamik olduğunu ve FtsZ protofilamentlerinin 4,5,6 koşu bandı ile hareket ettiğini göstermiştir. Hızlandırılmış deneylerde Z-halkasını incelemek için, daha iyi çözünürlük ve hızlı örnekleme için bölme bölgesini XY düzleminde kaydetmeniz önerilir. Bunu başarmak için, genellikle mikrodelik hücre tuzaklarının ve karmaşık mikroakışkan cihazların nanofabrikasyonunu içeren dikey hücre immobilizasyon yöntemlerinin geliştirilmesi gerekmektedir7.
Siyanobakteriler, hücresel morfolojilerine göre gram-negatif olarak sınıflandırılan fotosentetik mikroorganizmalardır. Bununla birlikte, filogenetik olarak gram-pozitif bakterilere daha yakındırlar8. Bu organizmalar, gram-pozitif ve gram-negatif bakterilerde yaygın olan hücre bölünme genlerine sahiptir, ancak bölücüleri de benzersiz elementler içerir9. Anabaena sp. PCC 7120 (bundan böyle Anabaena sp.) bir bölünme düzlemine sahip filamentli siyanobakterilerdir ve çok hücreli siyanobakterilerde hücre bölünmesinin incelenmesi için bir modeldir. Bu suşta, FtsZ'nin hücrelerin ortasındaki konumunu belirlemek mümkün olmuştur10. Bununla birlikte, bu modelde FtsZ'nin in vivo dinamiklerini gösteren hiçbir çalışma bulunmamaktadır. Laboratuvarımızda, triparental çiftleşme ve homolog rekombinasyon yoluyla, tam endojen ftsZ geninin yerini alan sfGFP'ye kaynaşmış FtsZ proteinini ifade eden tamamen ayrılmış bir Anabaena sp. mutantı elde ettik. Filamentli siyanobakterilerdeki bölünme proteinlerini görselleştirmek için hızlandırılmış deneyler için mutant suş filamentlerinin dikey oryantasyonunu destekleyen hızlı ve basit bir hücre immobilizasyon yöntemi geliştirdik. Bu yöntem, pahalı ve geliştirilmesi zor olabilecek mikroakışkan cihazlara ihtiyaç duymaz. Örnek olarak, bu protokolü FtsZ-sfGFP mutantındaki Z-halkasını konfokal mikroskopi ile görselleştirmek için kullandık.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>Qingdao Agna Medical Technology Co., Ltd.</td>
			<td>-</td>
			<td>The disposable medical plastic syringe with 1 ml needle generally used to pump liquid or injection liquid, in this experiment it is used to suck the sample and make it polymerize.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Attofluor Cell Chamber</td>
			<td>ThermoFischer Scientific</td>
			<td>A7816</td>
			<td>The Attofluor Cell Camera is a durable and practical coverslip holder designed for viewing live cell samples in upright or inverted microscopes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axygen MaxyGene II Thermal Cycler with 96 well block</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>THERM-1001</td>
			<td>The new MaxyGene II Thermal Cycler increased speed and advanced features, providing the premium performance you have come to expect from Axygen brand products. Unique flexible programming. Rapid run times. Improved workflow over traditional gradient cyclers. Ramping rates up to 5&#176;C/sec. Adjustable heated lid accommodates strips, tubes and microplates.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand Cover Glasses: Circles</td>
			<td>ThermoFischer Scientific</td>
			<td>12-546-2P</td>
			<td>Made of finest optical borosilicate glass, with uniform thickness and size. Circular shape. Corrosion-resistant.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Melting Point agarose</td>
			<td>Promega</td>
			<td>V3841</td>
			<td>Agarose, Low Melting Point, Analytical Grade, is ideal for applications that require recovery of intact DNA fragments after gel electrophoresis.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 880 microscope from Zeiss Airyscan</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>-</td>
			<td>The Zeiss Airyscan LSM 880 microscope is a laser scanning focal microscope that can acquire images under the resolution limit (lateral resolution ~ 120nm and axial resolution ~ 350nm). The detectors are highly sensitive making it possible to acquire super-resolution images at high speed.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentr&#237;fuga Fresco 17</td>
			<td>ThermoFischer Scientific</td>
			<td>75002402</td>
			<td>Speed up routine sample preparation processes up to 17,000 &#215; g with our standard microcentrifuge, available with refrigeration. These microcentrifuges offer productivity, versatility, safety and convenience in an easy-to-use, compact design laboratory instrument.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Timelapse Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>-</td>
			<td>The Nikon C2 laser scanning confocal microscope is an ideal microscope for long-term timelapse, because thanks to its incubation chamber it is possible to keep samples in optimal conditions for more than 8 hours.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thin razor blades Schick Super Chromium</td>
			<td>Farmazon</td>
			<td>SKU: 401146</td>
			<td>&#160;The thin razor blades is used to cut the agarose matrix, allowing us to obtain the disks with the sample while maintaining the integrity of the matrix.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

vertical immobilization method for time-lapse microscopy analysis in filamentous cyanobacteria

Bakteriyel hücre bölünmesindeki ana olay, FtsZ proteininin anahtar element olduğu septasyon işlemidir. FtsZ, hücrenin ortasında, diğer bölünme proteinleri için bir iskele görevi gören halka benzeri bir yapı (Z-halkası) oluşturan polimerize olur. Bakteriyel modellerde süper çözünürlüklü mikroskopi Escherichia coli ve Bacillus subtilis , Z-halkasının süreksiz olduğunu gösterirken, canlı hücre görüntüleme çalışmaları FtsZ'nin halka boyunca koşu bandı olarak bilinen bir mekanizma ile hareket ettiğini gösterdi. FtsZ'nin dinamiklerini in vivo olarak incelemek için, XY düzlemindeki halkanın tüm yapısını görüntülemek için dikey konumda özel bir hücre yerleşimi gereklidir. Anabaena sp. PCC7120 gibi çok hücreli siyanobakterilerde FtsZ görüntüleme durumunda, filamentlerin dikey konumda tutulması, hücrelerin büyüklüğü ve filamentlerin uzunluğu nedeniyle zordur. Bu makalede, Z-halkasını bir FtsZ-sfGFP füzyon proteinini ifade eden bir mutantta kaydetmek için Anabaena sp. PCC 7120 filamentlerinin düşük erime noktalı agaroz ve şırıngalar kullanılarak dikey immobilizasyonuna izin veren bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, konfokal mikroskopi kullanarak bölünme bölgesinde protein dinamiklerini kaydetmenin hızlı ve ucuz bir yoludur.

Anabaena sp.'deki Z-halkasının dikey immobilizasyon yöntemi kullanılarak görselleştirilmesi Bakterilerdeki Z-halka bileşenlerinin dinamiklerini incelemek için, dikey olarak yönlendirilmiş hücrelerde görüntüler elde etmek gerekir. Bu pozisyonda, hızlandırılmış mikroskopi ile protein dinamiklerini izlemek için Z-halkasını ve bölücünün ana proteinlerini görselleştirmek mümkündür. Bakteriler için klasik numune hazırlama, filamentli siyanobakteriler için çalışm...

Watch this Scientific Journal Video about Vertical Immobilization Method for Time-Lapse Microscopy Analysis in Filamentous Cyanobacteria at JoVE.com

Vertical Immobilization Method for Time-Lapse Microscopy Analysis in Filamentous Cyanobacteria

XY düzleminde filamentli siyanobakteriyel görselleştirme için basit ve erişilebilir bir yöntem sunuyoruz. Düşük erime noktalı bir agaroz matrisi kullanıldı ve bölünmede yer alan proteinlerin görüntülerinin dikey bir yönde elde edilmesine izin verildi. Bu nedenle, bu metodoloji herhangi bir filamentli organizmaya ve farklı protein türlerine uygulanabilir.

Filamentli Siyanobakterilerde Hızlandırılmış Mikroskopi Analizi için Dikey İmmobilizasyon Yöntemi

A main event in bacterial cell division is the septation process, where the protein FtsZ is the key element. FtsZ polymerizes forming a ring-like ...

Bakterilerde, hücre bölünmesi proteinlerinin dinamiklerinin incelenmesi, hücrelerin uzamsal bir yönelimini gerektirir. Örneğin, bakteriyel hücre bölünmesindeki ana bileşen olan Z-halkası durumunda, tüm yapıyı XY düzleminde kaydetmek için dikey bir yönelim esastır. Bu videoda, filamentli siyanobakteriler Anabaena'da bu özel oryantasyonu elde etmek için bir yöntem geliştiriyoruz.Anabaena, çok hücreli fotosentetik bir organizmadır ve atmosferik diazotu azot kaynağı olarak kullanma yeteneğini diğer bakterilerle paylaşır. Bu elementin yokluğunda, Anabaena azot fiksasyonunda uzmanlaşmış hücreleri farklılaştırır. Bu nedenle, hücresel bölünme ve çok hücrelilik arasındaki ilişkiyi analiz etmek için mükemmel bir model sağlar.İlk olarak, hedef filamentli siyanobakteriyel suşta bulunan bir bölücü bileşen seçin. Deney için, bir floresan proteinine kaynaşmış seçilmiş bölücü bileşeni ifade eden filamentli bir siyanobakteriyel mutant oluşturmak gerekir. Bu protokolde, örnek olarak GFP ile kaynaşmış FtsZ'yi ifade eden bir Anabaena mutantı kullanıyoruz.İlk olarak, sabit fazda 10 mililitre bir kültür ve 90 mililitre sıvı ortam ile mutantın taze bir alt kültürünü yapın. Daha sonra yeni hücre kültürünü üstel faza ulaşana kadar sabit ışıkta ve optimum sıcaklıkta büyütün. Örneğimizde, mutant yedi gün boyunca 25 santigrat derecede yetiştirildi.Şimdi büyüme kültürünün iki mililitresini alın ve bir santrifüj tüpüne koyun. Oda sıcaklığında 10 dakika boyunca 2.500 x g'de santrifüj. Santrifüjlemeden sonra, tüm hücrelerin tüpün dibinde olup olmadığını kontrol edin.Yeniden askıya alınmayı önlemek için numuneleri kullanırken dikkatli olun. % 3 düşük erime noktalı agaroz çözeltisini bir mikrodalgada ısıtın. Bunu kısa zaman aralıklarında yapmak ve çözeltiyi tamamen sıvı olana kadar kontrol etmek önemlidir.Eritildikten sonra soğuması için bir kenara koyun. Önceki adımın santrifüj tüplerini alın, süpernatanın 1,9 mililitresini atın ve kalan hacimdeki hücreleri en az üç kez yukarı ve aşağı pipetleyerek yeniden askıya alın. İş yerinize, tüpü hücrelere, erimiş agaroz çözeltisine, ucunda kesilmiş bir mililitrelik bir şırıngaya ve yeni ve temiz bir bıçağa sahip bir neşter koyun.Daha sonra hücreleri en az üç kez pipetleyerek 900 mikrolitre% 3 agaroz çözeltisi ile karıştırın. Agaroz çözeltisinin çok sıcak olmadığından, ancak sıvı kaldığından emin olmak gerçekten önemlidir. Bununla, bu işlem sırasında hücre hasarını önlüyoruz.Bir sonraki adım hızlı bir şekilde ve agaroz çözeltisi jelleşmeden önce yapılmalıdır. Agaroz matrisini bir mililitrelik bir şırıngada dikkatlice emin. Numune emilirken kabarcıkların oluşmasını önlemek önemlidir.Bundan sonra, şırıngayı iki saat boyunca oda sıcaklığında yatay konuma getirerek numuneyi inkübe edin. İnkübasyondan sonra, pistonu temiz ve düz bir yüzeyde kullanarak matrisi hücrelerle dikkatlice çıkarın. Neşteri kullanarak, jel numunesini matrisin bütünlüğünü koruyarak mümkün olduğunca ince dilimler halinde kesin.Daha sonra numuneleri ilgili kapak fişine yan yana koyun. Videoda gösterildiği gibi, bu adımda, numunenin işleme sürecine yardımcı olması için bir ipucu kullanabilirsiniz. Hızlandırılmış deneyler için, mikroskopi analizi için yapılmış bir hücre odasının kullanılması önerilir.Bu durumda, videoda görebileceğiniz gibi, bu tür odalara uyan dairesel kapak fişleri kullanıyoruz. Son olarak, numunenin dehidrasyonunu önlemek için, odanın içine fazladan bir hacimde% 3 erimiş agaroz çözeltisi ekleyin. Görüntülemeden önce, agaroz tamamen jelleşene kadar bekleyin.Şimdi odayı görüntüleme için mikroskoptaki hücrelerle birlikte koyun. Sıcaklık ve nem kontrolü olan bir ekipman kullanılması tavsiye edilir. Numuneyi parlak alanda maksimum büyütme ile görselleştirin ve dikey olarak yönlendirilmiş bir filament arayın.İlgilendiğiniz bölme bölgesini, Z düzlemi boyunca otofloresan sinyalini kullanarak ilk taramayla bulabilirsiniz. Bununla, bölünme bölgesinde ilgilendiğiniz proteinin sinyalini görselleştirmek için floresan protein işaretleyicinizin parametrelerini kullanın. Artık biyolojik modele ve ilgilendiğiniz proteine göre hızlandırılmış deneyler yapabilirsiniz.Bu durumda, Z-halkasının tüm yapısını FtsZ-GFP mutantında, XY düzleminde görebiliriz. Yöntemimiz ile bu halkaların dinamiklerini uzun sürede kayıt altına alabildik. Son olarak, floresan yoğunluğundaki değişikliklerle, bu yapının modelimizde oldukça dinamik olduğu sonucuna varıyoruz.Bu yöntem, Anabaena'yı model olarak kullanarak, filamentli siyanobakteriler olarak karmaşık morfolojilere uygulanan konfokal mikroskopi ile bölünme bölgesindeki protein dinamiklerini kaydetmek için hızlı ve ucuz bir protokoldür.

Research

JoVE Journal

Biology

Monitoring Actin Disassembly with Time-lapse Microscopy

Zaman atlamalı Mikroskopi Sökme Aktin İzlenmesi

Biyoloji

Time-lapse Imaging of Mitosis After siRNA Transfection

Zaman atlamalı Görüntüleme siRNA Transfeksiyon sonra Mitoz

Changes in cellular organization and chromosome dynamics that occur during mitosis are tightly coordinated to ensure accurate inheritance of genomic and ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Erken Embriyo Oluşumu Zaman atlamalı Mikroskopi Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Quantitative Analysis of Random Migration of Cells Using Time-lapse Video Microscopy

Time-lapse video Mikroskop ile Hücrelerinin Rastgele Göç Kantitatif Analiz

Cell migration is a dynamic process, which is important for embryonic development, tissue repair, immune system function, and tumor invasion 1, 2. During ...

Use of Time Lapse Microscopy to Visualize Anoxia-induced Suspended Animation in C. elegans Embryos

Use of Time Lapse Microscopy to Visualize Anoxia-induced Suspended Animation in C. elegans Embryos

In Oksijen yetersizliği kaynaklı Asma Animasyon Visualize&#39;a Time Lapse Mikroskopi kullanın<em&gt; C. elegans</em&gt; Embriyolar

Caenorhabdits elegans has been used extensively in the study of stress resistance, which is facilitated by the transparency of the adult and embryo stages ...

Visualization of Craniofacial Development in the sox10: kaede Transgenic Zebrafish Line Using Time-lapse Confocal Microscopy

Sox10 içinde Kraniyofasiyal Kalkınma Görselleştirme: kaede Transgenik Zebra balığı Hattı Time-lapse konfokal mikroskopi kullanılarak

Vertebrate palatogenesis is a highly choreographed and complex developmental process, which involves migration of cranial neural crest (CNC) cells, ...

Time-Lapse Video Microscopy for Assessment of EYFP-Parkin Aggregation as a Marker for Cellular Mitophagy

Hücresel Mitophagy için bir Marker olarak EYFP-Parkin Toplama Değerlendirme Time-Lapse video Mikroskopi

Time-lapse video microscopy can be defined as the real time imaging of living cells. This technique relies on the collection of images at different time ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Yüksek çözünürlüklü Time-lapse Görüntüleme ve Yaşayan İnsan Umbilikal Ven Endotelyal Hücrelerinde Mikrotubul Dinamiği Otomatik Analizi

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

Arabidopsis montaj için çok yönlü bir yöntem Intravital zaman hata görüntüleme için yaprakları

The plant immune response associated with a genome-wide transcriptional reprogramming is initiated at the site of infection. Thus, the immune response is ...

Specific Labeling of Mitochondrial Nucleoids for Time-lapse Structured Illumination Microscopy

Hızlandırılmış Yapılandırılmış Aydınlatma Mikroskomu için Mitokondriyal Nükleoidlerin Özel Etiketlemesi

Mitochondrial nucleoids are compact particles formed by mitochondrial DNA molecules coated with proteins. Mitochondrial DNA encodes tRNAs, rRNAs, and ...