Name: Author Spotlight: Advancing Gene Editing in Bamboo Leaves for Sustainable Plastic Alternatives
Uploaded: 2023-08-18T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Advancing Gene Editing in Bamboo Leaves for Sustainable Plastic Alternatives at JoVE.com

Författarna vill tacka National Key Research and Development Program of China (Grant No. 2021YFD2200502), National Natural Science Foundation of China (Grant No. 31971736) för det ekonomiska stödet.

1. Beredning av bambuplantor
<ol><li>Förbered mosobambuplantor (Phyllostachys edulis) med frön skördade i Guilin, Guangxi, Kina. Börja med att blötlägga fröna i vatten i 2-3 dagar, se till att byta vatten dagligen. Skapa sedan ett substrat genom att blanda jord och vermikulit i förhållandet 3:1.</li>
	<li>Så de blötlagda fröna i substratet för groning. Behåll plantorna under laboratorieförhållanden och håll temperaturen mellan 18-25 °C. Säkerställ en ljusperiod på 16 timm...

Developing Gene Transformation and Editing Methods in Bamboo

<ol>
	<li>Jiang, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> World Bamboo and Rattan (in Chinese). , (2002).</li><li>Ye, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+plant+regeneration+and+transformation+system+of+ma+bamboo+(Dendrocalamus+latiflorus+Munro)+started+from+young+shoot+as+explant.">An efficient plant regeneration and transformation system of ma bamboo (Dendrocalamus latiflorus Munro) started from young shoot as explant.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 1298 (2017).</li><li>Ye, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Robust+CRISPR/Cas9+mediated+genome+editing+and+its+application+in+manipulating+plant+height+in+the+first+generation+of+hexaploid+Ma+bamboo+(Dendrocalamus+latiflorus+Munro).">Robust CRISPR/Cas9 mediated genome editing and its application in manipulating plant height in the first generation of hexaploid Ma bamboo (Dendrocalamus latiflorus Munro).</a> Plant Biotechnology Journal. 18 (7), 1501-1503 (2020).</li><li>Xiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+purple+Ma+bamboo+(Dendrocalamus+latiflorus+Munro)+with+enhanced+drought+and+cold+stress+tolerance+by+engineering+anthocyanin+biosynthesis.">Production of purple Ma bamboo (Dendrocalamus latiflorus Munro) with enhanced drought and cold stress tolerance by engineering anthocyanin biosynthesis.</a> Planta. 254 (3), 50 (2021).</li><li>Huang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+genetic+transformation+and+CRISPR/Cas9-based+genome+editing+system+for+moso+bamboo+(Phyllostachys+edulis).">An efficient genetic transformation and CRISPR/Cas9-based genome editing system for moso bamboo (Phyllostachys edulis).</a> Frontiers in Plant Science. 13, 822022 (2022).</li><li>Lee, M. W., Yang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+expression+assay+by+agroinfiltration+of+leaves.">Transient expression assay by agroinfiltration of leaves.</a> Methods in Molecular Biology. 323, 225-229 (2006).</li><li>Canto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+expression+systems+in+plants:+potentialities+and+constraints.">Transient expression systems in plants: potentialities and constraints.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 896, 287-301 (2016).</li><li>Chen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+the+production+and+expedient+screening+of+CRISPR/Cas9-mediated+non-transgenic+mutant+plants.">A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutant plants.</a> Horticulture Research. 5, 13 (2018).</li><li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+biotechnology+for+in-planta+gene+editing+and+its+application+in+promoting+flavonoid+biosynthesis+in+bamboo+leaves.">A new biotechnology for in-planta gene editing and its application in promoting flavonoid biosynthesis in bamboo leaves.</a> Plant Methods. 19 (1), 20 (2023).</li><li>He, Y., Zhang, T., Sun, H., Zhan, H., Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reporter+for+noninvasively+monitoring+gene+expression+and+plant+transformation.">A reporter for noninvasively monitoring gene expression and plant transformation.</a> Horticulture Research. 7 (1), 152 (2020).</li><li>Wang, C., Shen, L., Fu, Y., Yan, C., Wang, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+CRISPR/Cas9+system+for+multiplex+genome+editing+in+rice.">A simple CRISPR/Cas9 system for multiplex genome editing in rice.</a> Journal of Genetics and Genomics. 42 (12), 703-706 (2015).</li><li>McCormick, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leaf+disc+transformation+of+cultivated+tomato+(L.+esculentum)+using+Agrobacterium+tumefaciens.">Leaf disc transformation of cultivated tomato (L. esculentum) using Agrobacterium tumefaciens.</a> Plant Cell Reports. 5 (2), 81-84 (1986).</li><li>Lou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+violaxanthin+de-epoxidase+gene+from+moso+bamboo,+confers+photoprotection+ability+in+transgenic+Arabidopsis+under+high+light.">a violaxanthin de-epoxidase gene from moso bamboo, confers photoprotection ability in transgenic Arabidopsis under high light.</a> Frontiers in Plant Science. 13, 927949 (2022).</li><li>Zhou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+cinnamoyl+CoA+reductases+involved+in+parallel+routes+to+lignin+in+Medicago+truncatula.">Distinct cinnamoyl CoA reductases involved in parallel routes to lignin in Medicago truncatula.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (41), 17803-17808 (2010).</li><li>De Roeck, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deleterious+ABCA7+mutations+and+transcript+rescue+mechanisms+in+early+onset+Alzheimer's+disease.">Deleterious ABCA7 mutations and transcript rescue mechanisms in early onset Alzheimer's disease.</a> Acta Neuropathologica. 134 (3), 475-487 (2017).</li></ol>

Denna metod minskar avsevärt tidsåtgången jämfört med traditionella genetiska transformationsmetoder, som vanligtvis tar 1-2 år, och uppnår övergående uttryck av exogena gener och genredigering av endogena gener inom 5 dagar. Denna metod har dock begränsningar eftersom den bara kan omvandla en liten del av cellerna, och de genredigerade bladen är chimära och saknar förmåga att regenerera till kompletta plantor. Icke desto mindre ger detta i planta-genuttryck och genredigeringsteknik ett kraftfullt tillväga...

Undersökningen av genfunktionen i bambu är mycket lovande för den avancerade förståelsen av bambu och för att låsa upp dess potential för genetisk modifiering. Ett effektivt sätt att uppnå detta kan uppnås genom processen med Agrobacterium-medierad infektion i bambublad, varigenom T-DNA-fragmentet som innehåller exogena gener förs in i cellerna, vilket därefter leder till att generna uttrycks i bladcellerna.
Bambu är en värdefull och förnybar resurs med ett brett användningsområde inom tillverkning, konst och forskning. Bambu har utmärkta träegenskaper såsom hög mekanisk hållfasthet, seghet, måttlig styvhet och flexibilitet1, som nu används i stor utsträckning i en mängd olika hushålls- och industriförnödenheter, inklusive tandborstar, sugrör, knappar, engångsserviser, underjordiska rörledningar och kyltornsfyllmedel för termisk kraftproduktion. Därför spelar bambuförädling en avgörande roll för att få fram bambusorter med utmärkta träegenskaper för att ersätta plast och minska plastanvändningen, skydda miljön och ta itu med klimatförändringarna, samt generera betydande ekonomiskt värde.
Traditionell bambuförädling står dock inför utmaningar på grund av det långa vegetativa tillväxtstadiet och den osäkra blomningsperioden. Även om molekylära förädlingstekniker har utvecklats och tillämpats på bambuförädling, är processen för bambugentransformation tidskrävande, arbetsintensiv och komplicerad på grund av kallusinduktions- och regenereringsprocesserna 2,3,4,5. Stabil genetisk transformation kräver ofta Agrobacterium-medierade metoder, som involverar vävnadsodlingsprocesser som induktion och regenerering av förhårdnader. Bambu har dock en låg förmåga till regenerering av förhårdnader, vilket kraftigt begränsar tillämpningen av stabil genetisk transformation i bambu. Efter att Agrobacterium infekterat växtceller kommer T-DNA-fragmentet in i växtcellerna, och majoriteten av T-DNA-fragmenten förblir icke-integrerade i cellerna, vilket resulterar i övergående uttryck. Endast en liten del av T-DNA-fragmenten integreras slumpmässigt i kromosomen, vilket leder till ett stabilt uttryck. De transienta uttrycksnivåerna visar en ackumuleringskurva som kan variera för varje gen som uttrycks från ett T-DNA som levereras av Agrobacterium. I de flesta fall uppträder de högsta uttrycksnivåerna 3-4 dagar efter infiltration och minskar snabbt efter 5-6 dagar 6,7. Tidigare studier har visat att mer än 1/3 av mutationerna i genredigerade växter som erhålls utan selektionstryck för resistens kommer från det övergående uttrycket av CRISPR/Cas9, medan de återstående mindre än 2/3 kommer från stabilt uttryck efter DNA-integration i genomet8. Detta indikerar att T-DNA-integration i växtgenomet inte är nödvändig för genredigering. Dessutom hämmar selektionstrycket för resistens avsevärt tillväxten av icke-transgena celler, vilket direkt påverkar regenereringsprocessen hos infekterade explantat. Därför, genom att använda transient uttryck utan selektionstryck för resistens i bambu, är det möjligt att uppnå icke-integrerat uttryck av exogena gener och studera genfunktion direkt i växtorgan. Därför kan en enkel och tidsbesparande metod utvecklas för exogent genuttryck och redigering i bambu9.
Den utvecklade exogena genuttrycks- och genredigeringsmetoden kännetecknas av sin enkelhet, kostnadseffektivitet och frånvaron av dyr utrustning eller komplexa procedurer9. I denna metod användes den endogena violaxantin-epoxidasgenen (PeVDE) för exogent genuttryck utan selektionstryck. Detta beror på att den redigerade PeVDE i bambublad minskar ljusskyddsförmågan under starkt ljus och visar en minskning av det icke-fotokemiska släckningsvärdet (NPQ), vilket kan detekteras genom klorofyllfluorescensavbildning. För att demonstrera effektiviteten av denna metod slogs en annan endogen gen av bambu, cinnamoyl-CoA-reduktasgenen (PeCCR5)9, ut med hjälp av detta system och genererade framgångsrikt mutanter av denna gen. Denna teknik kan användas för funktionell karakterisering av gener som har funktioner i bambublad. Genom att överuttrycka dessa gener tillfälligt i bambublad kan deras uttrycksnivåer förbättras, eller genom genredigering kan deras uttryck slås ner, vilket möjliggör studier av nedströms genuttrycksnivåer, bladfenotyper och produktinnehåll. Detta ger ett mer effektivt och genomförbart tillvägagångssätt för forskning om genfunktioner i bambu. Denna teknik kan tillämpas på funktionell karakterisering av gener som fungerar i bambublad. Genom att överuttrycka dessa gener tillfälligt i bambublad kan deras uttrycksnivåer förbättras, eller genom genredigering kan deras uttryck slås ner, vilket möjliggör studier av nedströms genuttrycksnivåer, bladfenotyper och produktinnehåll. Dessutom är det viktigt att notera att på grund av omfattande polyploidisering finns majoriteten av kommersiellt viktiga gener i bambugenom i flera kopior, vilket resulterar i genetisk redundans. Detta utgör en utmaning för att utföra multiplex genomredigering i bambu. Innan man tillämpar stabil genetisk transformation eller genredigeringstekniker är det viktigt att snabbt validera genfunktioner. För att ta itu med problemet med multipla genkopior är ett tillvägagångssätt att analysera transkriptomuttrycksprofiler för att identifiera gener som uttrycks aktivt under specifika stadier. Att rikta in sig på de bevarade funktionella domänerna för dessa genkopior gör det dessutom möjligt att utforma gemensamma målsekvenser eller införliva flera målplatser i samma CRISPR/Cas9-vektor, vilket möjliggör samtidig knockout av dessa gener. Detta ger ett mer effektivt och genomförbart tillvägagångssätt för forskning om genfunktioner i bambu.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>35S::RUBY</td>
			<td>Addgene, United States</td>
			<td>160908</td>
			<td>Plamid construct</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agrobacterium competent cells of GV3101, EHA105,LBA4404, and AGL1</td>
			<td>Biomed, China</td>
			<td>BC304-01, BC303-01, BC301-01, and BC302-01</td>
			<td>For Agrobacterium infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTAB</td>
			<td>Sigma-Aldrich, United States</td>
			<td>57-09-0</td>
			<td>DNA extraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging-PAM fluorometer</td>
			<td>Walz, Effeltrich, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Detect chlorophyll fluorescence of bamboo leaves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImagingWin</td>
			<td>Walz, Effeltrich, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Software for Imaging-PAM fluorometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paq CI or Aar I</td>
			<td>NEB, United States</td>
			<td>R0745S</td>
			<td>Incorporate the target sequence onto the CRISPR/Cas9 vector.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrimeSTAR Max DNA polymerase</td>
			<td>Takara, Japan</td>
			<td>R045Q</td>
			<td>For gene cloning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 DNA ligase</td>
			<td>NEB, United States</td>
			<td>M0202V</td>
			<td>Incorporate the target sequence onto the CRISPR/Cas9 vector.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in planta gene expression and gene editing in moso bamboo leaves

En ny metod för gentransformation av planta har utvecklats för bambu, vilket gör att man slipper behovet av tidskrävande och arbetsintensiva processer för induktion och regenerering av förhårdnader. Denna metod involverar Agrobacterium-medierat genuttryck via sår och vakuum för bambuplantor. Den visade framgångsrikt uttrycket av exogena gener, såsom RUBY-reportern och Cas9-genen , i bambublad. Den högsta omvandlingseffektiviteten för ackumulering av betalain i RUBY-plantor uppnåddes med hjälp av GV3101-stammen, med en procentandel på 85,2 % efter infektion. Även om det främmande DNA:t inte integrerades i bambugenomet var metoden effektiv när det gällde att uttrycka de exogena generna. Dessutom har ett genredigeringssystem också utvecklats med en infödd reporter som använder denna metod, från vilken en in situ-mutant genereras av den redigerade bambuviolaxantinde-epoxidasgenen (PeVDE) i bambublad, med en mutationshastighet på 17,33%. Mutationen av PeVDE resulterade i minskade värden för icke-fotokemisk kylning (NPQ) under starkt ljus, vilket kan detekteras exakt med en fluorometer. Detta gör den redigerade PeVDE till en potentiell infödd rapportör för både exogena och endogena gener i bambu. Med reportern av PeVDE redigerades framgångsrikt en cinnamoyl-CoA-reduktasgen med en mutationshastighet på 8,3 %. Denna operation undviker processen med vävnadsodling eller induktion av förhårdnader, vilket är snabbt och effektivt för att uttrycka exogena gener och endogen genredigering i bambu. Denna metod kan förbättra effektiviteten av verifiering av genfunktioner och kommer att hjälpa till att avslöja de molekylära mekanismerna för viktiga metaboliska vägar i bambu.

The investigation of gene function in bamboo holds great promise for the advanced understanding of bamboo and unlocking its potential for genetic modification. An effective way of this can be achieved through the process of Agrobacterium-mediated infection in bamboo leaves, whereby the T-DNA fragment containing exogenous genes is introduced into the cells, subsequently leading to the expression of the genes within the leaf cells.
Bamboo is a valuable and renewable resource with a wide range of applications in manufacturing, art, and research. Bamboo possesses excellent wood properties such as high mechanical strength, toughness, moderate stiffness, and flexibility1, which is now widely used in a variety of household and industrial supplies, including toothbrushes, straws, buttons, disposable tableware, underground pipelines, and cooling tower fillers for thermal power generation. Therefore, bamboo breeding plays a crucial role in obtaining bamboo varieties with excellent wood properties for replacing plastics and reducing plastic usage, protecting the environment, and tackling climate change, as well as generating significant economic value.
However, traditional bamboo breeding faces challenges due to the lengthy vegetative growth stage and uncertain flowering period. Although molecular breeding techniques have been developed and applied to bamboo breeding, the process of bamboo gene transformation is time-consuming, labor-intensive, and complicated due to the callus induction and regeneration processes2,3,4,5. Stable genetic transformation often requires Agrobacterium-mediated methods, which involve tissue culture processes such as callus induction and regeneration. However, bamboo has a low ability for callus regeneration, greatly limiting the application of stable genetic transformation in bamboo. After Agrobacterium infects plant cells, the T-DNA fragment enters the plant cells, with the majority of T-DNA fragments remaining non-integrated in the cells, resulting in transient expression. Only a small portion of T-DNA fragments randomly integrate into its chromosome, leading to stable expression. The transient expression levels show an accumulation curve that can vary for each gene expressed from an Agrobacterium-delivered T-DNA. In most cases, the highest expression levels occur 3-4 days after infiltration and quickly decrease after 5-6 days6,7. Previous studies have shown that more than 1/3rd of mutations in gene-edited plants obtained without selection pressure for resistance come from the transient expression of CRISPR/Cas9, while the remaining less than 2/3rd come from stable expression after DNA integration into the genome8. This indicates that T-DNA integration into the plant genome is not necessary for gene editing. Moreover, selection pressure for resistance significantly inhibits the growth of non-transgenic cells, directly affecting the regeneration process of infected explants. Therefore, by using transient expression without selection pressure for resistance in bamboo, it is possible to achieve non-integrated expression of exogenous genes and study gene function directly in plant organs. Hence, an easy and time-saving method can be developed for exogenous gene expression and editing in bamboo9.
The developed exogenous gene expression and gene editing method is characterized by its simplicity, cost-effectiveness, and the absence of expensive equipment or complex procedures9. In this method, the bamboo endogenous violaxanthin de-epoxidase gene (PeVDE) was used as the reporter for exogenous gene expression without selection pressure. This is because the edited PeVDE in bamboo leaves reduces the photoprotection ability under high light and demonstrates a decrease in the non-photochemical quenching (NPQ) value, which can be detected through chlorophyll fluorescence imaging. To demonstrate the effectiveness of this method, another bamboo endogenous gene, the cinnamoyl-CoA reductase gene (PeCCR5)9, was knocked out using this system and successfully generated mutants of this gene. This technique can be used for the functional characterization of genes that have functions in bamboo leaves. By overexpressing these genes transiently in bamboo leaves, their expression levels can be enhanced, or by gene editing, their expression can be knocked down, allowing for the study of downstream gene expression levels, leaf phenotypes, and product contents. This provides a more efficient and feasible approach for gene function research in bamboo. This technique can be applied to the functional characterization of genes that function in bamboo leaves. By overexpressing these genes transiently in bamboo leaves, their expression levels can be enhanced, or by gene editing, their expression can be knocked down, allowing for the study of downstream gene expression levels, leaf phenotypes, and product contents. Additionally, it is important to note that, due to extensive polyploidization, the majority of commercially important genes in bamboo genomes are present in multiple copies, resulting in genetic redundancy. This poses a challenge for performing multiplex genome editing in bamboo. Prior to the application of stable genetic transformation or gene editing techniques, it is crucial to quickly validate gene functions. In addressing the issue of multiple gene copies, one approach is to analyze transcriptome expression profiles to identify genes that are actively expressed during specific stages. Furthermore, targeting the conserved functional domains of these gene copies allows for the design of common target sequences or the incorporation of multiple target sites into the same CRISPR/Cas9 vector, enabling the simultaneous knockout of these genes. This provides a more efficient and feasible approach for gene function research in bamboo.

Author Spotlight: Advancing Gene Editing in Bamboo Leaves for Sustainable Plastic Alternatives 

I Planta Genuttryck och genredigering i Moso bambublad

Agrobacterium-medierad i planta-genuttryck i bambublad RUBY-reportergenen har visat sig vara effektiv för att visualisera övergående genuttryck på grund av dess förmåga att producera levande rött betalain från tyrosin10. I denna studie användes Agrobacterium-medierad transformation för att tillfälligt uttrycka den exogena RUBY-genen i bambublad (Figur 1). Vid den 3:e dagen efter inf...

Watch this Scientific Journal Video about Advancing Gene Editing in Bamboo Leaves for Sustainable Plastic Alternatives at JoVE.com

I denna studie utvecklades en ny metod för planta-genuttryck och genredigering som medierats av Agrobacterium i bambu. Denna metod förbättrade avsevärt effektiviteten av genfunktionsvalidering i bambu, vilket har betydande konsekvenser för att påskynda processen för bambuförädling.

A novel in planta gene transformation method was developed for bamboo, which avoids the need for time-consuming and labor-intensive callus induction and ...

I den här studien använde vi Agrobacterium som vektor för att introducera främmande DNA-fragment i bambublad. De flesta DNA-fragment är inte integrerade i kromosomer och genomgår övergående uttryck. Vi utnyttjade detta transienta uttryck för att utföra genredigering.Den största utmaningen är begränsningen av genredigering av bambublad, som inte kan regenereras. Detta tyder på svårigheter med att utföra redigering i regenerativa organ, som unga skott, och att få redigerade grenar eller efterföljande generationer med önskade genetiska utmaningar. Dess främsta fördel är den tidsbesparande aspekten av principen.Genom att kunna redigera bambugener direkt i bambublad möjliggör det snabb verifiering av genfraktioner. Detta eliminerar behovet av tidskrävande procedurer, som vävnadsodling eller transformation, vilket avsevärt påskyndar forskningen om bambugenfraktioner. Den primära forskningen kommer att fokusera på att undersöka den molekylära mekanismen för bildandet av bambubiomassa.Detta kommer att innebära att förstå varför bambu växer snabbt och använda den kunskapen för att utveckla bambusorter som är lämpliga som plastsubstituent.