Name: लेखक स्पॉटलाइट: आंतरिक कान दवा वितरण अनुसंधान की सुविधा के लिए गिनी पिग दौर खिड़की झिल्ली का निष्कर्षण
Uploaded: 2024-02-23T13:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Author Spotlight: Extraction of Guinea Pig Round Window Membrane to Facilitate Inner Ear Drug Delivery Research at JoVE.com

इस काम को NIDCD अनुदान संख्या 1K08DC020780 और 5T32DC000027-33, और रूबेनस्टीन हियरिंग रिसर्च फंड द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी पशु प्रक्रियाओं संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (GP18M226) द्वारा अनुमोदित किया गया. हार्टले अल्बिनो गिनी सूअरों (नर और मादा दोनों, वजन 500-700 ग्राम) का उपयोग वर्तमान अध्ययन में किया गया था।
1. ...

गिनी पिग गोल खिड़की झिल्ली explantation

<ol>
	<li>Duan, M. I., Zhi-qiang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeability+of+round+window+membrane+and+its+role+for+drug+delivery:+our+own+findings+and+literature+review.">Permeability of round window membrane and its role for drug delivery: our own findings and literature review.</a> J Otol. 4 (1), 34-43 (2009).</li><li>Kelso, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microperforations+significantly+enhance+diffusion+across+round+window+membrane.">Microperforations significantly enhance diffusion across round window membrane.</a> Otol Neurotol. 36 (4), 694-700 (2015).</li><li>Salt, A. N., Plontke, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetic+principles+in+the+inner+ear:+Influence+of+drug+properties+on+intratympanic+applications.">Pharmacokinetic principles in the inner ear: Influence of drug properties on intratympanic applications.</a> Hear Res. 368, 28-40 (2018).</li><li>Szeto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inner+ear+delivery:+Challenges+and+opportunities.">Inner ear delivery: Challenges and opportunities.</a> Laryngoscope Investig Otolaryngol. 5 (1), 122-131 (2020).</li><li>Carpenter, A. M., Muchow, D., Goycoolea, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+studies+of+the+human+round+window+membrane.">Ultrastructural studies of the human round window membrane.</a> Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 115 (5), 585-590 (1989).</li><li>Forouzandeh, F., Borkholder, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microtechnologies+for+inner+ear+drug+delivery.">Microtechnologies for inner ear drug delivery.</a> Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg. 28 (5), 323-328 (2020).</li><li>Leong, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microneedles+facilitate+small-volume+intracochlear+delivery+without+physiologic+injury+in+guinea+pigs.">Microneedles facilitate small-volume intracochlear delivery without physiologic injury in guinea pigs.</a> Otol Neurotol. 44 (5), 513-519 (2023).</li><li>Singh, R., Birru, B., Veit, J. G. S., Arrigali, E. M., Serban, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+characterization+of+an+in+vitro+round+window+membrane+model+for+drug+permeability+evaluations.">Development and characterization of an in vitro round window membrane model for drug permeability evaluations.</a> Pharmaceuticals (Basel). 15 (9), 1105 (2022).</li><li>Du, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+targeted+delivery+of+dexamethasone+acetate+across+the+round+window+membrane+in+guinea+pigs.">Magnetic targeted delivery of dexamethasone acetate across the round window membrane in guinea pigs.</a> Otol Neurotol. 34 (1), 41-47 (2013).</li><li>Kopke, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+nanoparticles:+inner+ear+targeted+molecule+delivery+and+middle+ear+implant.">Magnetic nanoparticles: inner ear targeted molecule delivery and middle ear implant.</a> Audiol Neurootol. 11 (2), 123-133 (2006).</li><li>AVMA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AVMA+Guidelines+for+the+Euthanasia+of+Animals:+2020+Edition.">AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals: 2020 Edition.</a> AVMA. , (2020).</li><li>Goksu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+guinea+pig+temporal+bone.">Anatomy of the guinea pig temporal bone.</a> Ann Otolaryngol. 101 (8), 699-704 (1992).</li><li>Wysocki, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topographical+anatomy+of+the+guinea+pig+temporal+bone.">Topographical anatomy of the guinea pig temporal bone.</a> Hear Res. 199 (1), 103-110 (2005).</li><li>Veit, J. G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+the+drug+permeability+properties+of+human+cadaveric+in+situ+tympanic+and+round+window+membranes.">An evaluation of the drug permeability properties of human cadaveric in situ tympanic and round window membranes.</a> Pharmaceuticals (Basel). 15 (9), 1037 (2022).</li><li>Kansara, V., Mitra, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+an+ex+vivo+model+implication+for+carrier-mediated+retinal+drug+delivery).">Evaluation of an ex vivo model implication for carrier-mediated retinal drug delivery).</a> Curr Eye Res. 31 (5), 415-426 (2006).</li><li>Lundman, L., Bagger-Sj&#246;b&#228;ck, D., Holmquist, L., Juhn, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Round+window+membrane+permeability.+An+in+vitro+model.">Round window membrane permeability. An in vitro model.</a> Acta Otolaryngol Suppl. 457, 73-77 (1989).</li><li>Moatti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+drug+permeability+through+an+ex+vivo+porcine+round+window+membrane+model.">Assessment of drug permeability through an ex vivo porcine round window membrane model.</a> iScience. 26 (6), 106789 (2023).</li><li>Lin, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+microbubble-facilitated+inner+ear+delivery+of+gold+nanoparticles+involves+transient+disruption+of+the+tight+junction+barrier+in+the+round+window+membrane.">Ultrasound microbubble-facilitated inner ear delivery of gold nanoparticles involves transient disruption of the tight junction barrier in the round window membrane.</a> Front Pharmacol. 12, 689032 (2021).</li><li>Jeong, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Junctional+modulation+of+round+window+membrane+enhances+dexamethasone+uptake+into+the+inner+ear+and+recovery+after+NIHL.">Junctional modulation of round window membrane enhances dexamethasone uptake into the inner ear and recovery after NIHL.</a> Int J Mol Sci. 22 (18), 10061 (2021).</li></ol>

कान में स्थानीय दवा वितरण में, आरडब्ल्यूएम चिकित्सीय के लिए आंतरिक कान तक पहुंचने के लिए मार्ग का प्राथमिक मार्ग है। उपन्यास वितरण वाहनों में परिवहन तंत्र और पारगम्यता को बेहतर ढंग से समझने और दवा विक...

सेंसरिनुरल श्रवण हानि के उपचार के लिए चिकित्सीय के उपन्यास वर्ग उभरे हैं। नैदानिक आबादी के लिए इन चिकित्सीय का अनुवाद आंतरिक कान में परिवहन के सुरक्षित और प्रभावोत्पादक मार्गों द्वारा सीमित है। जानवरों के अध्ययन में विवो डिलीवरी के वर्तमान तरीके या तो आंतरिक कान में फेनेस्ट्रेशन या गोल खिड़की झिल्ली (आरडब्ल्यूएम) के माध्यम से प्रसार पर निर्भर करते हैं, एक गैर-अस्थि अवरोध जो मध्य कान की जगह को कोक्लीअ1 से अलग करता है।
आंतरिक कान में सर्जिकल फेनेस्ट्रेशन और माइक्रोइंजेक्शन दोनों आक्रामक हैं और अवशिष्ट आंतरिक कान समारोह के लिए जोखिम पैदा कर सकते हैं2. इसलिए, आरडब्ल्यूएम स्थानीय दवा वितरण के लिए एक महत्वपूर्ण मार्ग है, और गिनी सूअरों प्राथमिक पूर्व नैदानिक पशु मॉडल आरडब्ल्यूएम भर में और दवा विकास 3,4 के लिए भीतरी कान में स्थानीय दवा फार्माकोकाइनेटिक्स का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं. हालांकि मानव आरडब्ल्यूएम की तुलना में पतला, गिनी पिग आरडब्ल्यूएम एक समान तीन-स्तरित संरचना साझा करता है। यह व्यास में लगभग 1 मिमी, 15-25 माइक्रोन मोटी है, और एक संयोजी ऊतक परत5 सैंडविच दो उपकला सेल परतों के शामिल है. मध्य कान का सामना करने वाली उपकला परत घनी रूप से पैक की जाती है और तंग जंक्शनों के माध्यम से जुड़ी होती है, जबकि आंतरिक कान और स्कैला टिम्पानी का सामना करने वाली परत में शिथिल वास्तुकला होती है और इसमें महत्वपूर्ण अंतरकोशिकीय आसंजन नहीं होते हैं।
गिनी पिग आरडब्ल्यूएम में दवा पारगम्यता की जांच करने वाले वर्तमान पूर्व-नैदानिक अध्ययन विवो मध्य कान इंजेक्शन में निर्भर करते हैं, इसके बाद आंतरिक कान के भीतर पेरिलिम्फ द्रव का नमूना लिया जाता है, जो आरडब्ल्यूएम परिवहन 6,7के विशिष्ट अध्ययन की अनुमति नहीं देता है। आरडब्ल्यूएम एक्सप्लांट्स के टुकड़ों का उपयोग प्रीक्लिनिकल अध्ययनों में किया गया है, लेकिन उनकी नाजुकता और छोटे आकार के कारण, वे आरडब्ल्यूएम2 में वाटरटाइट सील की आवश्यकता वाले दवा और वाहन परिवहन की व्यवस्थित, माइक्रोफ्लुइडिक जांच के लिए उपयुक्त नहीं हैं। अन्य समूहों ने आरडब्ल्यूएम 8,9,10 को अनुमानित करने के लिए सुसंस्कृत मानव उपकला कोशिकाओं के साथ इन विट्रो मॉडल में नियोजित किया है। हालांकि, इनमें से अधिकांश निर्माण पूरी तरह से बाहरी उपकला परत पर ध्यान केंद्रित करते हैं और देशी ऊतक वास्तुकला की जटिलता पर कब्जा नहीं करते हैं। आरडब्ल्यूएम में परिवहन तंत्र की अधिक विस्तृत समझ के लिए, लक्षित, पूर्व विवो अध्ययन की आवश्यकता है।
इस अध्ययन में, हम झिल्ली अखंडता को संरक्षित करने के लिए आसपास के बोनी समर्थन के साथ एक गिनी पिग आरडब्ल्यूएम के विस्तार का प्रदर्शन करते हैं और दवा वितरण वाहनों के आरडब्ल्यूएम परिवहन के विशिष्ट अध्ययन के लिए डिज़ाइन किए गए प्रयोगात्मक प्रतिमान में उनके उपयोग का वर्णन करते हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mm Diamond Ball Drill Bit</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>1SD-G1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mm Diamond Ball Drill Bit</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>2SD-G1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 mm Diamond Ball Drill Bit</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>6D-G1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ANSPACH EMAX 2 Plus System</td>
			<td>Anspach</td>
			<td>EMAX2PLUS</td>
			<td>Any bone cutting drilling system will work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Eclipse Needle 27 G x 1/2 in. with detachable 1 mL BD Luer-Lok Syringe</td>
			<td>Becton, Dickinson, and Co.&#160;</td>
			<td>382903057894</td>
			<td>Any 27-28 G needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gorilla Epoxy</td>
			<td>Gorilla</td>
			<td>4200101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kwik-CAST</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>KWIK-CAST</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

guinea pig round window membrane explantation for ex vivo studies

आंतरिक कान में कुशल और न्यूनतम इनवेसिव दवा वितरण एक महत्वपूर्ण चुनौती है। गोल खिड़की झिल्ली (आरडब्ल्यूएम), आंतरिक कान के कुछ प्रवेश बिंदुओं में से एक होने के नाते, जांच का एक महत्वपूर्ण केंद्र बन गया है। हालांकि, आरडब्ल्यूएम को अलग करने की जटिलताओं के कारण, इसके फार्माकोकाइनेटिक्स की हमारी समझ सीमित है। आरडब्ल्यूएम में तीन अलग-अलग परतें शामिल हैं: बाहरी उपकला, मध्य संयोजी ऊतक परत, और आंतरिक उपकला परत, प्रत्येक संभावित रूप से अद्वितीय वितरण गुण रखते हैं।
आरडब्ल्यूएम में परिवहन की जांच के लिए वर्तमान मॉडल विवो पशु मॉडल या पूर्व विवो आरडब्ल्यूएम मॉडल में उपयोग करते हैं जो सेल संस्कृतियों या झिल्ली के टुकड़ों पर भरोसा करते हैं। गिनी सूअर आंतरिक कान के भीतर दवा फार्माकोकाइनेटिक्स की जांच के लिए एक मान्य प्रीक्लिनिकल मॉडल के रूप में काम करते हैं और कोक्लीअ में डिलीवरी वाहनों के अनुवाद संबंधी विकास के लिए एक महत्वपूर्ण पशु मॉडल हैं। इस अध्ययन में, हम बेंचटॉप दवा वितरण प्रयोगों के लिए आसपास के कर्णावत हड्डी के साथ एक गिनी पिग आरडब्ल्यूएम के विस्तार के लिए एक दृष्टिकोण का वर्णन करते हैं। यह विधि देशी आरडब्ल्यूएम वास्तुकला के संरक्षण की अनुमति देती है और वर्तमान बेंचटॉप मॉडल की तुलना में परिवहन के लिए बाधाओं का अधिक यथार्थवादी प्रतिनिधित्व प्रदान कर सकती है।

Novel classes of therapeutics have emerged for the treatment of sensorineural hearing loss. The translation of these therapeutics to clinical populations is limited by safe and efficacious routes of transport into the inner ear. Current methods of in vivo delivery in animal studies rely on either fenestration into the inner ear or diffusion through the round window membrane (RWM), a non-osseous barrier that separates the middle ear space from the cochlea1.
Surgical fenestration and microinjection into the inner ear are both invasive and can pose risks to residual inner ear function2. Therefore, the RWM is an important route for local drug delivery, and guinea pigs are the primary preclinical animal model used to study local drug pharmacokinetics across the RWM and in the inner ear for pharmaceutical development3,4. Although thinner than the human RWM, the guinea pig RWM shares an identical three-layered structure. It is approximately 1 mm in diameter, 15-25 &#181;m thick, and comprised of two epithelial cell layers sandwiching a connective tissue layer5. The epithelial layer facing the middle ear is densely packed and connected via tight junctions, while the layer facing the inner ear and scala tympani has looser architecture and does not have significant intercellular adhesions.
Current pre-clinical studies investigating drug permeability in the guinea pig RWM rely on in vivo middle ear injections followed by the sampling of the perilymph fluid within the inner ear, which does not allow for the specific study of RWM transport6,7. Fragments of RWM explants have been used in preclinical studies, but due to their fragility and small size, they are not suitable for systematic, microfluidic investigations of drug and vehicle transport requiring a watertight seal across the RWM2. Other groups have employed in vitro models with cultured human epithelial cells to approximate the RWM8,9,10. However, the majority of these constructs focus solely on the outer epithelial layer and do not capture the complexity of native tissue architecture. For a more detailed understanding of transport mechanisms across the RWM, targeted, ex vivo studies are required.
In this study, we demonstrate the explantation of a guinea pig RWM with surrounding bony support to preserve membrane integrity and illustrate their use in an experimental paradigm designed for the specific study of the RWM transport of drug delivery vehicles.

लेखक स्पॉटलाइट: आंतरिक कान दवा वितरण अनुसंधान की सुविधा के लिए गिनी पिग दौर खिड़की झिल्ली का निष्कर्षण

पूर्व विवो अध्ययन के लिए गिनी पिग दौर खिड़की झिल्ली विस्तार

Our group is investigating drugs and drug delivery vehicles for the treatment of inner ear diseases such as hearing loss. The round window membrane is the critical barrier that prevents locally applied drugs from getting into the cochlea and we're currently working to understand how nanoparticle delivery vehicles can be engineered to pass through this barrier. Understanding how the round window membrane works in terms of drug transport is crucial in developing effective drug delivery strategies to the ear.Guinea pig is an important preclinical animal model for studying drug delivery to the ear. However, isolating this fragile membrane, which is only 17 microns thick, for drug transport studies remains a significant challenge. Here, we describe a method for extracting the guinea pig round window membrane that allows for efficient bench top drug transport studies.Current investigations of drug delivery to the inner year rely primarily on in vivo experimental models followed by perilymph sampling which do not allow for a specific and targeted study of round window membrane transport mechanisms. In this study, we demonstrate the extraction of the guinea pig round window membrane with surrounding bony support. This method preserves native tissue architecture integrity and allows for precise and targeted studies of drug delivery across the round window membrane.

जैसा कि चित्रा 3 ए में दिखाया गया है, यह विधि कठोर हड्डी के आसपास की अंगूठी के साथ बरकरार गिनी पिग दौर खिड़की झिल्ली के विस्तार के लिए अनुमति देती है। आरडब्ल्यूएम को परिधि के अनुसार बोनी एनुलस...

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यह प्रोटोकॉल गिनी पिग लौकिक हड्डियों से गोल खिड़की झिल्ली के विस्तार के लिए एक विधि की रूपरेखा, पूर्व विवो अध्ययन के लिए एक मूल्यवान संसाधन प्रदान करता है।

Efficient and minimally invasive drug delivery to the inner ear is a significant challenge. The round window membrane (RWM), being one of the few entry ...

हमारा समूह सुनवाई हानि जैसे आंतरिक कान रोगों के उपचार के लिए दवाओं और दवा वितरण वाहनों की जांच कर रहा है। गोल खिड़की झिल्ली महत्वपूर्ण बाधा है जो स्थानीय रूप से लागू दवाओं को कोक्लीअ में जाने से रोकती है और हम वर्तमान में यह समझने के लिए काम कर रहे हैं कि नैनोपार्टिकल डिलीवरी वाहनों को इस बाधा से गुजरने के लिए कैसे इंजीनियर किया जा सकता है। यह समझना कि दवा परिवहन के संदर्भ में गोल खिड़की झिल्ली कैसे काम करती है, कान में प्रभावी दवा वितरण रणनीतियों को विकसित करने में महत्वपूर्ण है।गिनी पिग कान में दवा वितरण का अध्ययन करने के लिए एक महत्वपूर्ण प्रीक्लिनिकल पशु मॉडल है। हालांकि, इस नाजुक झिल्ली को अलग करना, जो दवा परिवहन अध्ययन के लिए केवल 17 माइक्रोन मोटी है, एक महत्वपूर्ण चुनौती बनी हुई है। यहां, हम गिनी पिग गोल खिड़की झिल्ली निकालने के लिए एक विधि का वर्णन करते हैं जो कुशल बेंच टॉप ड्रग ट्रांसपोर्ट अध्ययन की अनुमति देता है।आंतरिक वर्ष के लिए दवा वितरण की वर्तमान जांच मुख्य रूप से विवो प्रयोगात्मक मॉडल में पेरिलिम्फ नमूनाकरण के बाद निर्भर करती है जो गोल खिड़की झिल्ली परिवहन तंत्र के एक विशिष्ट और लक्षित अध्ययन की अनुमति नहीं देती है। इस अध्ययन में, हम आसपास के बोनी समर्थन के साथ गिनी पिग दौर खिड़की झिल्ली के निष्कर्षण का प्रदर्शन. यह विधि देशी ऊतक वास्तुकला अखंडता को बरकरार रखती है और गोल खिड़की झिल्ली में दवा वितरण के सटीक और लक्षित अध्ययन की अनुमति देती है।

guinea-pig-round-window-membrane-explantation-for-ex-vivo-studies

Research

JoVE Journal

Biology

Guinea Pig Round Window Membrane Explantation for Ex Vivo Studies

Efficient and minimally invasive drug delivery to the inner ear is a significant challenge. The round window membrane (RWM), being one of the few entry points to the inner ear, has become a vital focus of investigation. However, due to the complexities of isolating the RWM, our understanding of its pharmacokinetics remains limited. The RWM comprises three distinct layers: the outer epithelium, the middle connective tissue layer, and the inner epithelial layer, each potentially possessing unique delivery properties.
Current models for investigating transport across the RWM utilize in vivo animal models or ex vivo RWM models which rely on cell cultures or membrane fragments. Guinea pigs serve as a validated preclinical model for the investigation of drug pharmacokinetics within the inner ear and are an important animal model for the translational development of delivery vehicles to the cochlea. In this study, we describe an approach for explantation of a guinea pig RWM with surrounding cochlear bone for benchtop drug delivery experiments. This method allows for preservation of native RWM architecture and may provide a more realistic representation of barriers to transport than current benchtop models.

This protocol outlines a method for the explantation of the round window membrane from guinea pig temporal bones, providing a valuable resource for ex vivo studies.