Breng om te beginnen de met virus geïnfecteerde aardappelplanten over naar een groeikamer die op 22 graden Celsius wordt gehouden. Kies een plant om te observeren en gebruik plakband om het tweede geënte blad volledig te immobiliseren. Sluit vervolgens de digitale microscoop aan op de computer en start de software voor het vastleggen van afbeeldingen.
Leg het blad onder de microscoop. Gebruik vervolgens de draaiknop om scherp te stellen op het oppervlak van het blad. Om de camera-instellingen aan te passen, klikt u op de instellingenknop.
Stel nu de helderheid in op 64, het contrast op 14 en de tint op nul. Pas vervolgens de witbalans aan en stel vervolgens de verzadiging in op 47, de scherpte op nul en het gamma op vijf. Klik op het pictogram voor het vastleggen van afbeeldingen en selecteer de optie time-lapsed video.
Stel vervolgens de beeldopname in voor elke 15 minuten gedurende in totaal 24 uur. Druk op de startknop om de beeldopname te starten. Om de vastgelegde beelden op te slaan, selecteert u alle beelden en klikt u op het pictogram Opslaan.
Kies nu de exportopties en stel vervolgens dots per inch in op maximaal. Eenmaal opgeslagen, verwijdert u alle afbeeldingen uit het programma. Om de afbeeldingen te bewerken, start u bewerkingssoftware zoals ImageJ.
Klik op bestand, selecteer vervolgens importeren en kies afbeeldingsreeks om de tijdreeksen van afbeeldingen uit één gezichtsveld te importeren. Plak het pad van de map met opgeslagen foto's en druk op OK. Zodra de conversie is voltooid, start ImageJ automatisch een interne videospeler die de voltooide video weergeeft.
Klik op bestand, vervolgens opslaan als en selecteer het AVI-formaat om het videobestand te exporteren. Wanneer een klein venster wordt geopend, stelt u de framesnelheid in op 0.3 FPS en drukt u vervolgens op OK om de video op te slaan als een AVI-bestand. Drie tot vier weken oude geënte aardappelplanten met ten minste drie tot vier volledig ontwikkelde bladeren werden gebruikt voor digitale microscopische analyse.
Hetzelfde gebied op het geïnoculeerde blad werd met tussenpozen van 15 minuten waargenomen om het optreden en de uitbreiding van de laesie in de loop van de tijd te bepalen. Na 14 uur observatie was er geen laesie zichtbaar. Ongeveer 90 minuten later werd een zichtbare laesie geregistreerd.
De laesie begon twee uur later uit te zetten en bleef zich de volgende acht en een half uur uitbreiden.
