डीएनए क्षति प्रतिक्रिया जीवन के लिए अपरिहार्य है। चूंकि डीएनए लगातार विभिन्न हानिकारक इंजनों के संपर्क में रहता है, इसलिए उनकी मरम्मत की कमी से जीनोम की अस्थिरता और बीमारियां होती हैं। हमने विभिन्न सेल चक्र चरणों में डीएनए की मरम्मत के दौरान एकल स्ट्रैंड डीएनए पथ की कल्पना करने के लिए आरपीए 2 की जैविक संपत्ति के आधार पर एक विधि विकसित की।
एकल स्ट्रैंड डीएनए का पता लगाने के लिए पारंपरिक विधि BrdU एंटीबॉडी का उपयोग करती है। इस दृष्टिकोण का उपयोग सक्रिय रूप से कोशिकाओं की प्रतिकृति के लिए किया जा सकता है। इसके अतिरिक्त, यह एंटीबॉडी अन्य न्यूक्लियोटाइड एनालॉग्स के साथ क्रॉस-रिएक्ट करते हैं, जिससे उनका उपयोग सीमित हो जाता है।
बीआरडीयू के विपरीत, हमारे दृष्टिकोण में शोर अनुपात के लिए एक उच्च संकेत है, जो इसे हर चक्र चरण में प्रयोग करने योग्य बनाता है। विभिन्न सेल चक्र चरणों में विभिन्न डीएनए मरम्मत मार्गों की कार्रवाई को समझना और संभावित रूप से गैर प्रतिकृति कोशिकाओं महत्वपूर्ण है। हमारा प्रोटोकॉल एकल फंसे डीएनए foci की कल्पना करने के लिए एक नया दृष्टिकोण और उपकरण प्रदान करता है, जहां BrdU का उपयोग करने वाले शास्त्रीय दृष्टिकोण सीमित हैं।
डीएनए की मरम्मत प्रक्रियाओं की एक व्यापक समझ कैंसर, उम्र बढ़ने और तंत्रिका संबंधी रोगों के इलाज के लिए चिकित्सीय लक्ष्य के रूप में काम कर सकती है। हमारी अधिकांश कोशिकाएं टर्मिनल रूप से विभेदित होती हैं और इसलिए प्रतिकृति और विभाजित नहीं होती हैं। यह समझना महत्वपूर्ण है कि ये कोशिकाएं विभिन्न डीएनए घावों की मरम्मत कैसे करती हैं।
इसलिए, हमारी प्रयोगशाला मुख्य रूप से पोस्ट प्रतिकृति डीएनए मरम्मत प्रक्रियाओं पर ध्यान केंद्रित करेगी और उनका अध्ययन करने के लिए नए उपकरण विकसित करेगी।