Name: लेखक स्पॉटलाइट: बेहतर माउस मॉडल के साथ चिकित्सकीय लुगदी अनुसंधान को बढ़ाना
Uploaded: 2023-10-27T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishment of a Murine Pulp Exposure Model with a Novel Mouth-Gag for Pulpitis Research at JoVE.com

इस अध्ययन को नेशनल नेचुरल साइंस फाउंडेशन ऑफ चाइना U21A20368 (L. Y.), 82101000 (H. W.), और 82100982 (F. L.) और सिचुआन साइंस एंड टेक्नोलॉजी प्रोग्राम 2023NSFSC1499 (H. W.) के अनुदान से वित्त पोषित किया गया था। सभी मूल डेटा और चित्र इस पेपर में शामिल हैं।

इस अध्ययन में प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं को वेस्ट चाइना स्कूल ऑफ स्टोमैटोलॉजी, सिचुआन विश्वविद्यालय (WCHSIRB-D-2021-125) की नैतिक समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। वयस्क C57BL/6 चूहों को Gempharmatech प्रायोगिक पशु कंपनी, चें?...

एक उपन्यास मुंह-गैग का उपयोग करके एक लुगदी सूजन माउस मॉडल बनाना 

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	<li>Kleinert, A., Kleinert, L., Ozimirska, M., Cha&#322;as, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endodontium+-+together+or+separately.">Endodontium - together or separately.</a> Folia Morphol. 77 (3), 409-415 (2018).</li><li>Dhillon, H., Kaushik, M., Sharma, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+endodontics-Creating+new+horizons.">Regenerative endodontics-Creating new horizons.</a> J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 104 (4), 676-685 (2016).</li><li>Prati, C., Pirani, C., Zamparini, F., Gatto, M. R., Gandolfi, M. 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F., Zhao, Y. B., Zhang, F. M., Han, P. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+study+of+gene+expression+during+tooth+eruption+and+orthodontic+tooth+movement+in+mice.">Comparative study of gene expression during tooth eruption and orthodontic tooth movement in mice.</a> Oral Dis. 15 (8), 573-579 (2009).</li><li>Kwon, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+irritation+of+teeth+during+dental+treatment+procedures.">Thermal irritation of teeth during dental treatment procedures.</a> Restor Dent Endod. 38 (3), 105-112 (2013).</li><li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulpal+tissue+inflammatory+reactions+after+experimental+pulpal+exposure+in+mice.">Pulpal tissue inflammatory reactions after experimental pulpal exposure in mice.</a> J Endod. 43 (1), 90-95 (2017).</li><li>Karrar, R. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+biomarkers+for+objective+assessment+of+symptomatic+pulpitis:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Molecular biomarkers for objective assessment of symptomatic pulpitis: A systematic review and meta-analysis.</a> Int Endod J. 56 (10), 1160-1177 (2023).</li><li>Goldman, E., Reich, E., Abramovitz, I., Klutstein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducing+apical+periodontitis+in+mice.">Inducing apical periodontitis in mice.</a> J Vis Exp. (150), e59521 (2019).</li><li>Duncan, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Present+status+and+future+directions-Vital+pulp+treatment+and+pulp+preservation+strategies.">Present status and future directions-Vital pulp treatment and pulp preservation strategies.</a> Int Endod J. 55 (Suppl 3), 497-511 (2022).</li><li>Shi, X., Li, Z., He, Y., Jiang, Q., Yang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+different+dental+burs+for+experimental+induction+of+pulpitis+in+mice.">Effect of different dental burs for experimental induction of pulpitis in mice.</a> Arch Oral Biol. 83, 252-257 (2017).</li><li>Du, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indigenous+microbiota+protects+development+of+medication-related+osteonecrosis+induced+by+periapical+disease+in+mice.">Indigenous microbiota protects development of medication-related osteonecrosis induced by periapical disease in mice.</a> Int J Oral Sci. 14 (1), 16 (2022).</li></ol>

दांतों के भीतर एकान्त नरम ऊतक के रूप में, दंत लुगदी दांत की बायोएक्टिविटी को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है लेकिन अत्यधिक संवेदनशील रहती है। इस महत्वपूर्ण लुगदी का संरक्षण हाल ही में एंडोड?...

दंत लुगदी, दांत का एक अभिन्न अंग, पोषक तत्वों की आपूर्ति, डेंटिन गठन, संवेदी कार्य, औररक्षा प्रतिक्रियाओं जैसे कई आवश्यक कार्यों के लिए जिम्मेदार है। फिर भी, दंत लुगदी, कठोर ऊतक से घिरा हुआ, गहरी क्षय, पल्पिटिस, आघात, या बाद के उपचारों 2,3 से चोटों और क्षति के लिए अतिसंवेदनशील होता है। कार्यात्मक दंत लुगदी की अनुपस्थिति दांत नाजुकता का खतरा बढ़ जाताहै 4. इसके अलावा, युवा स्थायी दांतों में लुगदी जीवन शक्ति का नुकसान दांतों की परिपक्वता पर प्रतिकूल प्रभाव डाल सकता है, और वर्तमान डेन्चर तकनीक स्वस्थ लुगदी4 द्वारा दी गई तंत्रिका प्रतिक्रिया को बहाल करने में विफल रहती है। इस स्थिति ने शोधकर्ताओं को केवल हटाने से परे सूजन वाले लुगदी के प्रबंधन के लिए वैकल्पिक समाधान तलाशने के लिए प्रेरित किया है।
में 2007, मरे एट अल. पुनर्योजी endodontics में ऊतक इंजीनियरिंग के आवेदन की शुरुआत की, जिससे लुगदी संरक्षण और उत्थान में रुचि बढ़ गई5. हालांकि, सूजन लुगदी ऊतक एक चुनौती बन गया है के रूप में कोशिकाओं आईएल -6, जो भड़काऊ कोशिकाओं की भर्ती और सेल परिगलन में परिणाम, लुगदी जीवन शक्ति की हानि, और कार्यात्मक वसूली 6,7 में जटिलताओं के रूप में जारी करता है. सूजन और संबंधित कोशिका मृत्यु को समझना, इसलिए, महत्वपूर्ण लुगदी के संरक्षण में प्रगति के लिए महत्वपूर्ण है। वहाँ प्रयोगों है कि विवो में या इन विट्रो 8,9 में सूजन लुगदी के आणविक जीव विज्ञान का पता लगाने के लिए आयोजित किया गया है की एक संख्या रहे हैं. हालांकि 2 डी या 3 डी सेल संस्कृतियों की तरह इन विट्रो प्रयोगों में साल के लिए विकसित किया गया है और परिपक्व और व्यापक रूप से भड़काऊ कारकों के लिए लुगदी कोशिकाओं की प्रतिक्रियाओं का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया जा रहा है, इन प्रयोगों लुगदी ऊतक और प्रणालीगत प्रतिरक्षा प्रणाली10 के बीच बातचीत को प्रतिबिंबित नहीं कर सकते. यदि अध्ययन की जा रही घटना प्रतिरक्षा, संवहनी और तंत्रिका तंत्र जैसे अन्य ऊतक मूल की कोशिकाओं से ली गई है, तो शुद्ध लुगदी कोशिका संस्कृति एक मृत अंत की ओर ले जाएगी। इसलिए, विवो प्रयोगों में बहुत आवश्यक और संदर्भित हैं।
चूहे अपनी लागत-प्रभावशीलता, उच्च प्रजनन क्षमता और जीवन शक्ति के कारण विवो में सूजन अनुसंधान में तेजी से एक आम विकल्प बन गए हैं। हालांकि, चूहों pulpitis मॉडल के लिए एक व्यापक प्रोटोकॉल एक संदर्भ के रूप में सेवा कर सकते हैं जो वर्तमान में अनुपस्थित है. चूहों के छोटे आकार और उत्तेजना के प्रति उनकी संवेदनशीलता प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं के दौरान महत्वपूर्ण चुनौतियों का सामना करती है। माउस मुंह के भीतर गहरी छुपा छोटे दांतों का अवलोकन अक्सर एक ब्रैकट माइक्रोस्कोप के उपयोग की आवश्यकता होती है, प्रयोगशालाओं में डेस्कटॉप माइक्रोस्कोप की अधिक सामान्य उपस्थिति के बावजूद। माउथ ओपनर की अनुपस्थिति में दूसरों की सहायता की आवश्यकता होती है। इसे संबोधित करने के लिए, समूह ने आसानी से उपलब्ध सामग्रियों का उपयोग करके एक माउथ-गैग तैयार किया है जिसका उद्देश्य चूहों पल्पाइटिस मॉडल के निर्माण के लिए एक मानकीकृत और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य प्रोटोकॉल प्रदान करना है। यह लेख प्रक्रिया का विवरण, पूर्व शल्य चिकित्सा तैयारी, स्थिरीकरण, लुगदी जोखिम सर्जरी, और C57 चूहों पर नमूना संग्रह को कवर. यह प्रोटोकॉल माउथ-गैग के उपयोग की सिफारिश करता है, प्रक्रिया को दोहराने में अन्य शोधकर्ताओं की सुविधा के लिए इसकी संरचना, उत्पादन और आवेदन के बारे में जानकारी प्रदान करता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Animal</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57/B6J mice</td>
			<td>Gempharmatech Experimental Animals Company</td>
			<td>C57/B6J</td>
			<td>For the establishment of pulp exposure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus &#38; Instruments Co. LTD.</td>
			<td>SB1-074(IV)</td>
			<td>Apply in drug injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8# C+ file</td>
			<td>Readysteel</td>
			<td>0010047</td>
			<td>Apply in exposing the roof of pulp chamber.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Mix solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>10% ketamine hydrochloride+ 5% xylazine + 85% sterile isotonic saline.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Staining Solution</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>C1005</td>
			<td>Apply in immunofluorescence staining for counter-staining of nucleus.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental high-speed dental handpiece</td>
			<td>Jing yuan electronic commerce technology</td>
			<td>WJ-422</td>
			<td>Apply in pulp exposure.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heavy wire cutter</td>
			<td>Jirui Medical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>none</td>
			<td>Apply inarc cutting.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin and Eosin Stain kit</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BL700B</td>
			<td>For the histological analysis of the slides.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6 antibody</td>
			<td>Novus</td>
			<td>NBP2-89149</td>
			<td>Apply in immunofluorescence staining to detect the inflammation of the dental pulp.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine(Ketamine hydrochloride)</td>
			<td>Vet One, Boise, Idaho, USA</td>
			<td>C3N VT1</td>
			<td>100mg/kg, IP. Apply in nesthetization.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical tap</td>
			<td>3M</td>
			<td>1530</td>
			<td>Apply in mice immobilization.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orthodontic arch wire&#160;</td>
			<td>Shanghai Wei Rong Medical Apparatus Co. LTD.</td>
			<td>K417</td>
			<td>Diameter of 8&#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round dental burr (0.6 mm)</td>
			<td>Shofu global</td>
			<td>072208</td>
			<td>Apply in removing enamel and shallow layer of dentin.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Young loop bending plier</td>
			<td>Jirui Medical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>none</td>
			<td>Apply in arc bending.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment of a murine pulp exposure model with a novel mouth-gag for pulpitis research

पल्पिटिस, प्राकृतिक दांतों के नुकसान का एक सामान्य कारण, सूजन वाले दंत लुगदी में परिगलन और बायोएक्टिविटी के नुकसान की ओर जाता है। pulpitis अंतर्निहित तंत्र को सुलझाना और इसके कुशल उपचार endodontic अनुसंधान के एक सतत ध्यान केंद्रित है. इसलिए, लुगदी संरक्षण में सुधार के लिए दंत लुगदी के भीतर भड़काऊ प्रक्रिया को समझना महत्वपूर्ण है। इन विट्रो प्रयोगों में अन्य की तुलना में, एक murine pulpitis मॉडल pulpitis पल्पिटिस की रोग प्रगति का निरीक्षण करने के लिए एक अधिक प्रामाणिक और आनुवंशिक रूप से विविध संदर्भ प्रदान करता है. हालांकि, चूहों का उपयोग करना, उनकी लागत-प्रभावशीलता और पहुंच के बावजूद, उनके छोटे आकार, खराब समन्वय और कम सहनशीलता के कारण कठिनाइयों का सामना करना पड़ता है, जो इंट्राओरल और दंत प्रक्रियाओं को जटिल बनाता है। यह प्रोटोकॉल माउस लुगदी को उजागर करने के लिए एक उपन्यास डिजाइन और मुंह-गैग के अनुप्रयोग का परिचय देता है, जिससे अधिक कुशल इंट्राओरल प्रक्रियाओं की सुविधा मिलती है। माउथ-गैग, जिसमें अधिकांश दंत चिकित्सकों के लिए आसानी से उपलब्ध दंत आर्च शामिल है और पहली बार प्रक्रियाओं के लिए भी सर्जिकल तैयारी में काफी तेजी ला सकता है। माइक्रो-सीटी, हेमेटोक्सिलिन-ईोसिन (एचई) धुंधला हो जाना, और इम्यूनोफ्लोरेसेंस धुंधला आकृति विज्ञान और सेल अभिव्यक्ति में परिवर्तन की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया गया था। इस लेख का उद्देश्य शोधकर्ताओं को इस उपन्यास मुंह-गैग का उपयोग करके लुगदी सूजन मॉडल बनाने के लिए एक अधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और कम मांग वाली प्रक्रिया स्थापित करने में मदद करना है।

The dental pulp, an integral part of the tooth, is responsible for multiple essential functions such as nutrient supply, dentin formation, sensory function, and defense reactions1. Nevertheless, the dental pulp, surrounded by hard tissue, is susceptible to injuries and damages from deep caries, pulpitis, trauma, or subsequent therapies2,3. The absence of functional dental pulp increases the risk of tooth fragility4. Moreover, the loss of pulp vitality in young permanent teeth can adversely affect tooth maturation, and current denture techniques fail to restore the neural feedback offered by healthy pulp4. This situation has led researchers to explore alternative solutions for managing inflamed pulp beyond mere removal.
In 2007, Murray et al. initiated the application of tissue engineering in regenerative endodontics, thereby sparking increased interest in pulp preservation and regeneration5. However, inflamed pulp tissue poses a challenge as cells release inflammatory factors such as IL-6, which recruit inflammatory cells and results in cell necrosis, loss of pulp vitality, and complications in functional recovery6,7. Understanding inflammation and the associated cell death is, therefore, crucial for advancements in the preservation of vital pulp. There are a number of experiments that have been conducted to explore the molecular biology of the inflame pulp in vivo or in vitro8,9. Though in vitro&#160;experiments like 2D or 3D cell cultures have been developed for years and are becoming mature and widely used to test reactions of pulp cells to inflammatory factors, these experiments cannot reflect the interaction between pulp tissue and the systemic immune system10. If the phenomenon being studied is derived from cells of other tissue origin like immune, vascular and nervous system, then pure pulp cell culture will lead to a dead end. Therefore, in vivo experiments are very necessary and referential.
Mice have increasingly become a common choice in inflammation research in vivo&#160;due to their cost-effectiveness, high fertility, and vitality. However, a comprehensive protocol for mice pulpitis model is currently absent, which can serve as a reference. The small size of mice and their sensitivity to stimulation pose significant challenges during experimental procedures. Observing the minuscule teeth concealed deep within the mouse mouth often necessitates the use of a cantilever microscope, notwithstanding the more common presence of desktop microscopes in laboratories. The absence of a mouth opener requires assistance from others. To address this, the group has devised a mouth-gag using readily available materials which aims to provide a standardized and reproducible protocol for constructing the mice pulpitis model. This article details the procedure, covering preoperative preparation, immobilization, pulp exposure surgery, and sample collection on C57 mice. This protocol recommends the use of the mouth-gag, providing information on its structure, production, and application to facilitate other researchers in replicating the procedure.

लेखक स्पॉटलाइट: बेहतर माउस मॉडल के साथ चिकित्सकीय लुगदी अनुसंधान को बढ़ाना

पल्पिटिस अनुसंधान के लिए एक उपन्यास माउथ-गैग के साथ एक म्यूरिन पल्प एक्सपोजर मॉडल की स्थापना

Individual experiments like 2D or 3D cell cultures have been widely used to test the reactions of dental pulp cells. These experiments cannot reflect the interaction between pulp tissue and the systemic immune system. Therefore, in vivo experiments are becoming increasingly popular in endodontic research.C57 mice have increasingly become a common choice in inflammation research on dental pulp due to their cost effectiveness, high fertility and vitality. However, the small size of mice and lack of coordination posed significant challenges during experimental procedures. The fixation process is an important factor that higher the technical threshold.We devised a novel mouth gag using readily available materials and simple assemblies to assist researchers in pulp exposure surgery. According to our research, this mouth gag can significantly shorten the time required for beginners to immobilize the mouth and expose the maxillary first molar of mice.

ऊपर वर्णित प्रक्रिया 3, 6-8 सप्ताह पुराने C57BL/6 चूहों के दाहिने मैक्सिलरी पहले दाढ़ पर की गई थी, जबकि बाएं मैक्सिलरी पहले दाढ़ को नियंत्रण के रूप में संरक्षित किया गया था। रिक्त नियंत्रण से ऊतक विज्ञान और इम?...

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यह लेख एक अभिनव मुंह गैग का उपयोग कर चूहों में एक pulpitis मॉडल की स्थापना के लिए एक सुव्यवस्थित प्रोटोकॉल प्रस्तुत करता है, बाद में हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण के बाद.

Pulpitis, a common cause of natural tooth loss, leads to necrosis and loss of bioactivity in the inflamed dental pulp. Unraveling the mechanisms ...

2 डी या 3 डी सेल संस्कृतियों की तरह व्यक्तिगत प्रयोगों व्यापक रूप से दंत लुगदी कोशिकाओं की प्रतिक्रियाओं का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया गया है. ये प्रयोग लुगदी ऊतक और प्रणालीगत प्रतिरक्षा प्रणाली के बीच बातचीत को प्रतिबिंबित नहीं कर सकते हैं। इसलिये, इन विवो प्रयोगों में endodontic अनुसंधान में तेजी से लोकप्रिय होते जा रहे हैं.C57 चूहों तेजी से उनकी लागत प्रभावशीलता, उच्च प्रजनन क्षमता और जीवन शक्ति के कारण दंत लुगदी पर सूजन अनुसंधान में एक आम पसंद बन गए हैं। हालांकि, चूहों के छोटे आकार और समन्वय की कमी ने प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं के दौरान महत्वपूर्ण चुनौतियों का सामना किया। निर्धारण प्रक्रिया एक महत्वपूर्ण कारक है जो तकनीकी सीमा को अधिक करता है।हमने लुगदी एक्सपोजर सर्जरी में शोधकर्ताओं की सहायता के लिए आसानी से उपलब्ध सामग्रियों और सरल विधानसभाओं का उपयोग करके एक उपन्यास मुंह गैग तैयार किया। हमारे शोध के अनुसार, यह माउथ गैग शुरुआती लोगों के लिए मुंह को स्थिर करने और चूहों की मैक्सिलरी पहली दाढ़ को उजागर करने के लिए आवश्यक समय को काफी कम कर सकता है।

establishment-murine-pulp-exposure-model-with-novel-mouth-gag-for

Research

JoVE Journal

Medicine

Establishment of a Murine Pulp Exposure Model with a Novel Mouth-Gag for Pulpitis Research

Pulpitis, a common cause of natural tooth loss, leads to necrosis and loss of bioactivity in the inflamed dental pulp. Unraveling the mechanisms underlying pulpitis and its efficient treatment is an ongoing focus of endodontic research. Therefore, understanding the inflammatory process within the dental pulp is vital for improving pulp preservation. Compared to other in vitro experiments, a murine pulpitis model offers a more authentic and genetically diverse context to observe the pathological progression of pulpitis. However, using mice, despite their cost-effectiveness and accessibility, poses difficulties due to their small size, poor coordination, and low tolerance, complicating intraoral and dental procedures. This protocol introduces a novel design and application of a mouth-gag to expose mouse pulp, facilitating more efficient intraoral procedures. The mouth-gag, comprised of a dental arch readily available to most dentists and can significantly expedite surgical preparation, even for first-time procedures. Micro-CT, hematoxylin-eosin (HE) staining, and immunofluorescence staining were used to identify changes in morphology and cell expression. The aim of this article is to help researchers establish a more reproducible and less demanding procedure for creating a pulp inflammation model using this novel mouth-gag.

This article presents a streamlined protocol for establishing a pulpitis model in mice using an innovative mouth-gag, followed by subsequent histological analysis.

Preparation of the Mouth Gag for a Mouse Pulpitis Model

To begin, straighten an 8 micron thick orthodontic arch wire with your left hand while keeping the right hand slightly bent against the wire arc. Use a Young loop bending plier to bend the top edge of the trapezoid about eight millimeters at the midpoint of the bow wire. Ensure that point A is on the edge of the plier beak.Now hold the plier with the left hand. Clamp the free end of the bow wire with the right thumb and forefinger, then bend the bow wire from point A to make a 120-degree angle. Place the arch wire on a horizontal table to check if it is on a single plane.Leave about nine millimeters on each side of the wire and use pliers to bend the free end to a 75-degree angle. Now locate point C which is about five millimeters from point B.Bend the wire at point C to make a 105-degree angle. Similarly, bend the wire at points D and E.Clamp the IK and KJ parts simultaneously.Duplicate the A, B, C bending at points L, J, and K, then bend the free end at point J to make it vertical to the IKJ plane. Bend an extra tongue depressor for the mandibular part. Clamp point I five millimeters from point J and bend the free end to make it parallel to both the IKJ plane and the CD part.Next, leave a five millimeter gap from point I and at point H, bend the arch vertically to the IH and JIH planes. Locate point G five millimeters from H and clamp the JIHG lane. Then bend the arch at point G.Now bend the free end symmetrical to the KJ plane.The free end after point F should be symmetrical to the free end at point E.Finally, place rubber caps on the free ends.

एक माउस Pulpitis मॉडल के लिए मुंह गैग की तैयारी

Using A Mouth Gag for Pulpitis Assessment in Mice

To begin, fix an anesthetized mouse in a supine position on a fixation plate. Secure the limbs with skin tape. Compress the free ends of a prepared mouth gag with the thumb and the index finger.Fix the mouse's front incisors in the trapezoidal groove between the two arms of the mouth gag. Ensure the arm with the tongue depressor is placed on the mandibula. Check the maxillary first molar to ensure it is free of dental caries, trauma, and odontogenesis.Assess the surrounding gingiva to ensure absence of redness, swelling, or fistula. Then, check the health of the opposite teeth. Next, with a dental burr, drill the occlusal side of the maxillary first molar at 20, 000 RPM.Remove the enamel. With a syringe, drop normal saline every three minutes over the tooth to prevent overheating. Put a number 8 C+file on the lowest position of the drilled pit and pierce the last dentine to expose the pulp chamber.Clean the fragments around the tooth, then remove the mouth gag. The time taken to fix the mouth with the mouth gag and to find the maxillary first molar was significantly shortened relative to the traditional method. The pulp exposure was confirmed through micro CT and reconstruction modeling.At 24 hours post-surgery, most of the pulp tissue retained its morphology.