Vår forskning är inriktad på att studera hur den neurala stamcellspopulationen regleras i hjärnan hos vuxna däggdjur. Att förstå de inneboende och yttre molekylära mekanismerna som reglerar neurala stamceller inom de neurogena nischerna är viktigt för att förstå biologin och för att utveckla framtida potentiella terapeutiska tillämpningar. För att studera neurala stamcellers beteende används både in vivo och in vitro metoder i stor utsträckning.
In vitro neurala stamcellskulturer erbjuder kontrollerade miljöer och möjligheten att enkelt manipulera och övervaka denna population av celler. Tekniker för bevarande av genuttryck in vitro är ett mångsidigt tillvägagångssätt för att studera molekylära mekanismer som styr cellbiologi. En effektiv och reproducerbar metod för att överuttrycka och slå ut kandidatgener i neurala stamceller är dock fortfarande utmanande inom området.
Traditionella transfektionsmetoder för genleverans har visat sig vara effektiva i celler i centrala nervsystemet. Dessutom påverkar dessa metoder cellens viabilitet och funktionalitet. Således är förfining av alternativa tillvägagångssätt avgörande för att manipulera genuttryck i neurala stamceller.
Med detta protokoll presenterar vi ett förbättrat nukleofektionssystem som uppnår hög effektivitet av genleverans i neurala stamcellskulturer från den vuxna murina subventrikulära zonen, tillsammans med överlevnadsgrader högre än 80 %
