De inflammatoire cytokines interferon - gamma en TNF - bestaan al honderden miljoenen jaren en zijn van cruciaal belang voor een effectieve afweer van de gastheer tegen intercellulaire pathogenen. Onze onderzoeksgroep probeert te begrijpen hoe deze cytokinen werken om cellen te doden, zoals epitheelcellen in de darm en kankercellen. Veelgebruikte systemen om mechanismen voor de dood van intestinale epitheelcellen te bestuderen, zijn onder meer muismodellen en onsterfelijke kankercellijnen.
Menselijke testorganoïden zijn voordelig omdat ze rechtstreeks worden gegenereerd uit biopsieën van patiënten en veel fysiologische en morfologische kenmerken van het moederweefsel behouden. Dit betekent dat ze een verhoogde vertaalwaarde hebben. Orgaanonderzoek heeft problemen met de reproduceerbaarheid van experimenten en heeft verschillende technische uitdagingen in vergelijking met traditionele celcultuur.
De huidige technieken voor het meten van organoïde celdood hebben ook beperkingen. Sommige zijn slechts semi-kwantitatief, meten de celdood niet rechtstreeks, kunnen geen individuele organoïde responsen meten of vereisen dure apparatuur en complexe protocollen. Ons protocol voor kwantitatieve analyse van organoïde celdood is eenvoudig, robuust en goedkoop.
We hebben ons protocol gebruikt om individuele organoïde reacties op cytotoxische cytokinecombinaties te meten, maar het kan gemakkelijk worden aangepast om elk type perturbagen te bestuderen. Deze methode is nuttig voor onderzoek naar celdood, epitheliale barrièrefunctie of mucosale immunologie. Onlangs hebben we gerapporteerd dat interferon-gamma en TNF-synergiseren om inflammatoire celdood te induceren in darmepitheelcellen en darmkankercellen.
Ze doen dit via de JAK1/2-STAT1-signaleringsroute. In toekomstig werk willen we begrijpen welk type celdood dit is en hoe JAK1 en JAK2 de cellen doden.
