هدفنا البحثي هو إنشاء تقنيات قوية لتوليد واجهات أحادية الطبقة المعوية الأساسية المشتقة من الكائنات العضوية المعوية الصغيرة والكبيرة في الأبقار البالغة. استخدمنا نهجا تحليليا متعدد الوسائط لتأكيد تكوين الحاجز الظهاري الوظيفي داخل الطبقات الأحادية القائمة. على عكس النماذج ثلاثية الأبعاد ، توفر الطبقات الأحادية 2D سطحا لمعيا مكشوفا ويمكن الوصول إليه وهو أمر حاسم لدراسة تفاعلات مسببات الأمراض المضيفة.
توفر هذه الطبقات الأحادية التي تعكس الأمعاء في الجسم الحي مع سلالات خلايا متعددة الآن بروتوكولات مخصصة للتحقيق في مسببات الأمراض في أقسام الأمعاء المحددة مثل منافذ الأمعاء الصغيرة والكبيرة. حدد بحثنا ظروف الثقافة المثلى لإنشاء واستدامة أحاديات الطبقات 2D من خلايا مركز الأبقار والكائنات العضوية المعوية الكبيرة. أكدنا تشكيل حاجز ظهاري وظيفي داخل هذه الطبقات الأحادية باستخدام المسجلات الكهربائية عبر الظهارة ومقايسات النفاذية شبه الخلوية ، بالإضافة إلى تقنيات تلطيخ الكيمياء المناعية.
عالج بروتوكولنا الفجوة البحثية من خلال التركيز على عدم وجود نماذج أحادية الطبقة مشتقة من الأعضاء المعوية من الأبقار. تمت دراسة هذه النماذج جيدا في الفئران والبشر ، ومع ذلك ، فإن الأبقار ، التي تعد مستودعات رئيسية لمسببات الأمراض المعوية ذات الآثار الخطيرة على الصحة العامة ، لم يتم استكشافها بشكل كاف. بحثنا يؤسس ويميز نظام ثقافة أحادية الطبقة البقري 2D.
تسمح هذه الأداة المبتكرة باستكشاف الحالات الطبيعية والمرضية لفسيولوجيا الأمعاء البقرية ، مع تطبيقات محتملة تمتد إلى البحوث الطبية الحيوية والانتقالية ذات الأهمية الصحية العامة.