Vårt forskningsmål er å etablere robuste teknikker for å generere stifte tarmmonolagsgrensesnitt avledet fra voksne storfe små- og stortarmorganoider. Vi brukte en multimodal analytisk tilnærming for å bekrefte den funksjonelle epitelbarrieredannelsen i de etablerte monolagene. I motsetning til tredimensjonale modeller, tilbyr 2D-monolag en eksponert, tilgjengelig luminal overflate som er avgjørende for å studere vertspatogeninteraksjoner.
Disse monolagene som gjenspeiler in vivo-tarmen med flere cellelinjer gir nå skreddersydde protokoller for å undersøke patogener i spesifikke tarmseksjoner som tynn- og tykktarmsnisjer. Vår forskning identifiserte optimaliserte kulturforhold for å lage og opprettholde 2D-monolag fra celler fra storfe kjøpesenter og tykktarmsorganoider. Vi bekreftet dannelsen av funksjonell epitelbarriere i disse monolagene ved bruk av transepiteliale elektriske registranter og paracellulære permeabilitetsanalyser, samt immuncytokjemifargingsteknikker.
Protokollen vår adresserte forskningsgapet ved å fokusere på mangelen på tarmorganoidavledede monolagsmodeller av storfe. Disse modellene har blitt godt studert hos mus og mennesker, men storfe, som er viktige reservoarer for tarmpatogener med alvorlige folkehelseimplikasjoner, har ikke blitt tilstrekkelig utforsket. Vår forskning etablerer og karakteriserer et 2D-monolagskultursystem for storfe.
Dette innovative verktøyet gjør det mulig å utforske normale og sykdomstilstander i storfe tarmfysiologi, med potensielle anvendelser som strekker seg inn i biomedisinsk og translasjonell forskning av folkehelsebetydning.