DD PCR is een veelgebruikte techniek voor het bepalen van de AAV-genoomtiter, maar een consensusprotocol ontbreekt momenteel. Ons protocol is een gevalideerde stap-voor-stap handleiding voor het voorbereiden van monsters en het uitvoeren van DD PCR voor nauwkeurige genoomtitratie. In vergelijking met QPCR biedt DD PCR verschillende voordelen, waaronder een grotere precisie, grotere robuustheid en een meer absolute en directe kwantificering van doelsequenties zonder dat er standaardcurves nodig zijn.
Bovendien zorgt DD PCR met een goed ontworpen primer-sondeset voor specifieke tragedie bij detectie, in tegenstelling tot andere technieken die al het DNA detecteren. Het ontwikkelen van een gestandaardiseerd consensusprotocol voor de kwantificering van vectorgenoom zal de betrouwbaarheid en uniformiteit van de recombinante AAV-kwaliteitscontrole in verschillende laboratoria verbeteren. Dit zal zowel het onderzoek als de klinische toepassingen van recombinante AAV-vectoren voor de bredere gemeenschap vergemakkelijken.
