Name: actin co-sedimentation assay; for the analysis of protein binding to f-actin
Uploaded: 2008-03-28T01:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin at JoVE.com

أشكر لك الدكتور برافين كومار في المختبر ويتمان في سان فرانسيسكو للفيلم من الأكتين في الخلايا HaCAT.

1. إعداد أكتين وكان مصدر أكتين المستخدمة في هذا الاختبار غير العضلات الصفائح الدموية البشرية (β - أكتين) تم الحصول عليها من أسهم شركة aliquots الهيكل الخلوي في 10 يتم الاحتفاظ ملغ / مل في الثلاجة -70 درجة مئوية. للفحص ، هو المخفف للأكتين إلى ...

<ol>
	<li>Senetar, M. A., Foster, S. J., McCann, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrasteric+inhibition+mediates+the+interaction+of+the+I/LWEQ+module+proteins+Talin1,+Talin2,+Hip1,+and+Hip12+with+actin.">Intrasteric inhibition mediates the interaction of the I/LWEQ module proteins Talin1, Talin2, Hip1, and Hip12 with actin.</a> Biochemistry. 14, 15418-15428 (2004).</li><li>Goldmann, W. H., Hess, D., Isenberg, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+intact+talin+and+talin+tail+fragment+on+actin+filament+dynamics+and+structure+depends+on+pH+and+ionic+strength.">The effect of intact talin and talin tail fragment on actin filament dynamics and structure depends on pH and ionic strength.</a> Eur J Biochem. 260, 439-445 (1999).</li><li>Lee, H., Bellin, R. M., Walker, D. L., Patel, B., Powers, P., Liu, H., Garcia-Alvarez, B., de Pereda, J., Liddington, R. C., Volkmann, N., Hanein, D., Critchley, D. R., Robson, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+an+Actin-binding+Site+within+the+Talin+FERM+Domain.">Characterization of an Actin-binding Site within the Talin FERM Domain.</a> J Mol Biol. 22, 771-784 (2004).</li></ol>

أكتين المشترك الترسيب هو بسيط في فحص المختبر لتحليل البروتينات specfic ملزمة لأكتين - F. في هذا الفيديو ، ونظهر مثال واحد بسيط كيف أكتين المشترك الترسيب يمكن الاضطلاع بها. نعرض كيفية تحضير F - أكتين ، وإعداد هذا البروتين لفحصها وإجراء أكتين المشترك الترسيب. وينبغي النظر في عدد من النق...

actin co-sedimentation assay; for the analysis of protein binding to f-actin

الهيكل الخلوي أكتين داخل الخلية هو عبارة عن شبكة من خيوط الأكتين الذي يسمح للحركة الخلايا والعمليات الخلوية ، والتي تولد التوتر ويساعد في شكل يحافظ الخلوية. على الرغم من أن الهيكل الخلوي أكتين هو بنية جامدة ، بل هو بنية ديناميكية التي يتم إعادة عرض باستمرار. ويمكن لعدد من البروتينات ربط الهيكل الخلوي أكتين. هو المطلوب في كثير من الأحيان ملزمة من بروتين خاص لأكتين - F لدعم الملاحظات الخلية أو البيولوجية لتعزيز فهم العمليات الحيوية نتيجة لإعادة تشكيل الهيكل الخلوي أكتين. شارك في فحص الترسيب أكتين هو المختبر في فحص روتيني لتحليل الملزمة للبروتينات معينة أو المجالات البروتين مع أكتين - F. المبادئ الأساسية للمقايسة تنطوي على حضانة للبروتين من الفائدة (الطول الكامل أو مجال) مع F - أكتين ، خطوة تنبيذ فائق لتكوير F - أكتين وتحليل البروتين المترسبة التعاون مع أكتين - F. ويمكن تصميم أكتين المشترك الترسيب المقايسات وفقا لقياس أكتين الانتماءات الملزمة والمقايسات في المنافسة.

Watch this Scientific Journal Video about Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin at JoVE.com

Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin

البروتينات ربط أكتين الخيطية (F - أكتين) من خلال وحدات أكتين متميزة ملزمة. في هذا الفيديو نبدي الداخلي أكتين شارك في الترسيب ، وهو المختبر في فحص روتيني لتحليل البروتينات أو المجالات المحددة التي تربط F - أكتين.

أكتين المشارك الترسيب الفحص ، وبالنسبة للتحليل البروتين ملزمة لF - أكتين

The actin cytoskeleton within the cell is a network of actin filaments that allows the movement of cells and cellular processes, and that generates ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

والخلايا العصبية ونجمية المشارك الثقافة الفحص لتحليل محتوى عال من العصبية

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

Detection of Protein Ubiquitination

اكتشاف بروتين Ubiquitination

Ubiquitination, the covalent attachment of the polypeptide ubiquitin to target proteins, is a key posttranslational modification carried out by a set of ...

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy (FSM)

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy FSM

يعيش التصوير خلية من طراز F - أكتين حيوية عن طريق الميكروسكوب الرقطة نيون (FSM)

In this protocol we describe the use of Fluorescent Speckle Microscopy (FSM) to capture high-resolution images of actin dynamics in PtK1 cells. A unique ...

Using the GELFREE 8100 Fractionation System for Molecular Weight-Based Fractionation with Liquid Phase Recovery

باستخدام نظام التقطير GELFREE 8100 لتقطير الوزن الجزيئي وبناء مع مرحلة الانتعاش السائل

The GELFREE 8100 Fractionation System is a novel protein fractionation system designed to maximize protein recovery during molecular weight based ...

Linearization of the Bradford Protein Assay

الخطية من الفحص البروتين برادفورد

Determination of microgram quantities of protein in the Bradford Coomassie brilliant blue assay is accomplished by measurement of absorbance at 590 nm. ...

PAR-CliP - A Method to Identify Transcriptome-wide the Binding Sites of RNA Binding Proteins

PAR كليب -- وسيلة لتحديد نطاق Transcriptome مواقع الربط من البروتينات الحمض النووي الريبي تجليد

RNA transcripts are subjected to post-transcriptional gene regulation by interacting with hundreds of RNA-binding proteins (RBPs) and microRNA-containing ...

Study of the Actin Cytoskeleton in Live Endothelial Cells Expressing GFP-Actin

دراسة الهيكل الخلوي أكتين في الخلايا البطانية لايف تعرب عن GFP - أكتين

The microvascular endothelium plays an important role as a selectively permeable barrier to fluids and solutes. The adhesive junctions between endothelial ...

A Liquid Phase Affinity Capture Assay Using Magnetic Beads to Study Protein-Protein Interaction: The Poliovirus-Nanobody Example

تقارب المرحلة السائلة الفحص التقاطها باستخدام الخرز المغناطيسي لدراسة البروتين البروتين التفاعل: المثال فيروس شلل الأطفال، Nanobody

In this article, a simple, quantitative, liquid phase affinity capture assay is presented. Provided that one protein can be tagged and another protein ...

A High Throughput MHC II Binding Assay for Quantitative Analysis of Peptide Epitopes

A تجليد الفحص إنتاجية عالية MHC II لتحليل الكمي لالببتيد الحواتم

Biochemical assays with recombinant human MHC II molecules can provide rapid, quantitative insights into immunogenic epitope identification, deletion, or ...

Reporter-based Growth Assay for Systematic Analysis of Protein Degradation

الفحص النمو القائم على مراسل لتحليل منهجي من تدهور البروتين

Protein degradation by the ubiquitin-proteasome system (UPS) is a major regulatory mechanism for protein homeostasis in all eukaryotes. The standard ...