Name: principles of site-specific recombinase (ssr) technology
Uploaded: 2008-05-29T12:11:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Principles of Site-Specific Recombinase SSR Technology at JoVE.com

principles of site-specific recombinase (ssr) technology

אתר ספציפי recombinase (SSR) הטכנולוגיה מאפשרת מניפולציה של מבנה הגן כדי לחקור את תפקוד הגן הפך לכלי אינטגרלי של הביולוגיה המולקולרית. אתר ספציפי recombinases הם חלבונים אשר נקלטות על ידי רצפי DNA יעד מובחנים. המערכת Cre / לקס תוארה לראשונה בשנות ה 1980 של ב bacteriophages. Cre recombinase הוא סוג אני topoisomerase המזרז אתר ספציפי רקומבינציה של דנ&quot;א בין שני loxP (מוקד P1-X ומעלה) באתרים. מערכת ה Cre / לקס אינו דורש שום cofactors. רצפים LoxP מכילים אתרי קישור נפרדים עבור recombinases Cre המקיפים רצף הליבה כיוונית בה רקומבינציה וגם סידור מתרחש. כאשר התאים מכילים אתרי loxP ומבטאים את recombinase Cre, אירוע רקומבינציה מתרחשת. פעמיים גדילי דנ&quot;א נחתך בשני אתרים loxP ידי recombinase Cre, מחדש, ligated (&quot;מספריים ודבק&quot;). מוצרים של האירוע רקומבינציה תלוי בכיוון היחסי של רצפים סימטרית. טכנולוגיית SSR משמש לעתים קרובות ככלי לחקור את תפקוד הגן. הנה הגן של עניין הוא מוקף עם Cre היעד אתרי loxP (&quot;floxed&quot;). חיות הן חצו אז עם חיות המבטא את recombinase Cre בשליטת היזם רקמות ספציפיות. ברקמות המבטאים את recombinase Cre הוא נקשר רצפים היעד excises הגן floxed. המחיקה גן מבוקרת מאפשרת חקירה של הפונקציה גנים ברקמות ספציפיות בנקודות זמן שונות. ניתוח של תפקוד הגן העסקת טכנולוגיית SSR --- mutagenesis מותנה - יש יתרונות משמעותיים על פני דפיקה-outs המסורתי שבו המחיקה הגן לעתים קרובות קטלני.

Watch this Scientific Journal Video about Principles of Site-Specific Recombinase SSR Technology at JoVE.com

Principles of Site-Specific Recombinase SSR Technology

הופעתו של אתר ספציפי טכנולוגיה recombinase (SSR) ומערכת Cre / לקס הובילה להתקדמות רבים בתחום הביולוגיה המולקולרית, וכן הוכיחה את עצמה ככלי רב ערך להערכת תפקוד גן חיות טרנסגניות. בראיון זה מתאר את מנגנון רקומבינציה אתר ספציפי על ידי Cyclization recombinase (Cre) וכיצד להשתמש אנזים זה הוביל לפיתוח של mutagenesis מותנה, אשר יש יתרונות משמעותיים על פני המסורתיים לדפוק את אסטרטגיות.

עקרונות אתר ספציפיות recombinase (SSR) טכנולוגיה

Site-specific recombinase (SSR) technology allows the manipulation of gene structure to explore gene function and has become an integral tool of molecular ...

Research

JoVE Journal

Biology

Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology

Molecular Evolution of the Tre Recombinase

אבולוציה מולקולרית של recombinase Tre

Here we report the generation of Tre recombinase through directed, molecular evolution. Tre recombinase recognizes a pre-defined target sequence within ...

Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase

ראיון: HIV-1-DNA כריתה Proviral שימוש recombinase התפתח

HIV-1 integrates into the host chromosome of infected cells and persists as a provirus flanked by long terminal repeats. Current treatment strategies ...

Closed System Cell Culture Protocol Using HYPERStack Vessels with Gas Permeable Material Technology

מערכת סגורה Cell תרבות פרוטוקול באמצעות כלי HYPERStack עם טכנולוגיה חומר חדיר גז

Large volume adherent cell culture is currently standardized on stacked plate cell growth products when microcarrier beads are not an optimal choice.   ...

Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon

עקרונות של ניתוח מכרסמים למנתח חדש

For both scientific and animal welfare reasons, training in basic surgical concepts and techniques should be undertaken before ever seeking to perform ...

Discovering Protein Interactions and Characterizing Protein Function Using HaloTag Technology

גילוי אינטראקציות חלבון ואפיון תפקוד חלבון באמצעות HaloTag טכנולוגיה

Research in proteomics has exploded in recent years with advances in mass spectrometry capabilities that have led to the characterization of numerous ...

Reduced-gravity Environment Hardware Demonstrations of a Prototype Miniaturized Flow Cytometer and Companion Microfluidic Mixing Technology

הפגנות חומרת הסביבה מופחתת כובד של טכנולוגיה cytometer זרימה וCompanion Microfluidic אב טיפוס מוקטנת ערבוב

Until recently, astronaut blood samples were collected in-flight, transported to earth on the Space Shuttle, and analyzed in terrestrial laboratories. If ...

Development of a Quantitative Recombinase Polymerase Amplification Assay with an Internal Positive Control

פיתוח של כמותי recombinase פולימראז ההגברה Assay עם בקרה פנימית חיובית

It was recently demonstrated that recombinase polymerase amplification (RPA), an isothermal amplification platform for pathogen detection, may be used to ...

Inducing a Site Specific Replication Blockage in E. coli Using a Fluorescent Repressor Operator System

Inducing a Site Specific Replication Blockage in E. coli Using a Fluorescent Repressor Operator System

התרמת סתימה שכפול לאתרים ספציפיים ב<i&gt; E. coli</i&gt; באמצעות מערכת מפעיל פלורסנט מדכא

Obstacles present on DNA, including tightly-bound proteins and various lesions, can severely inhibit the progression of the cell&#39;s replication ...

Quantification of Site-specific Protein Lysine Acetylation and Succinylation Stoichiometry Using Data-independent Acquisition Mass Spectrometry

כימות של חלבון ספציפי לאתר ליזין Acetylation ו- Succinylation סטויכיומטריה באמצעות ספקטרומטר מסה רכישה עצמאית נתונים

Post-translational modification (PTM) of protein lysine residues by N&#400;-acylation induces structural changes that can dynamically regulate protein ...

Parallel High Throughput Single Molecule Kinetic Assay for Site-Specific DNA Cleavage

תפוקה גבוהה מקבילה מולקולה קינטית Assay עבור מחשוף DNA ספציפי לאתר

Site-specific DNA cleavage (SSDC) is a key step in many cellular processes, and it is crucial to gene editing. This work describes a kinetic assay capable ...