Name: paradigms for pharmacological characterization of c. elegans synaptic transmission mutants
Uploaded: 2008-08-18T17:08:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Paradigms for Pharmacological Characterization of C. elegans Synaptic Transmission Mutants at JoVE.com

Vogliamo riconoscere lo spirito di cooperazione di tutti i membri Lab Caldwell. Un Basilico O&#39;Connor Scholar Award dal March of Dimes e un premio alla carriera dalla National Science Foundation per GAC, così come una laurea Scienze Research Grant programma dal Howard Hughes Medical Institute a La University of Alabama, hanno finanziato l&#39;eccitabilità neuronale e ricerca epilessia nel laboratorio di Caldwell.

Aldicarb esposizione Paradigm <ol><li> Il primo giorno, in modo che almeno trenta giovani vermi adulti fase di ogni genotipo e di ogni replica sarà disponibile per saggi aldicarb il secondo giorno. E &#39;meglio se uno sperimentatore seleziona cinquanta o più vermi stadio L4 su piastre NGM fresco (meglio senza nistatina), che contengono E. coli (preferibilmente OP50) come fonte di cibo, e farle crescere per 12-24 ore ad una temperatura costante e permissiva (20 ° C a 22 ° C è meglio, anche se 25 ° C va ...

<ol>
	<li>Mahoney, T. R., Luo, S., Nonet, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+synaptic+transmission+in+Caenorhabditis+elegans+using+an+aldicarb-sensitivity+assay.">Analysis of synaptic transmission in Caenorhabditis elegans using an aldicarb-sensitivity assay.</a> Nat. Protoc. 1, 1772-1777 (2006).</li><li>Williams, S. N., Locke, C. J., Braden, A. L., Caldwell, K. A., Caldwell, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epileptic-like+convulsions+associated+with+LIS-1+in+the+cytoskeletal+control+of+neurotransmitter+signaling+in+Caenorhabditis+elegans.">Epileptic-like convulsions associated with LIS-1 in the cytoskeletal control of neurotransmitter signaling in Caenorhabditis elegans.</a> Hum. Mol. Genet.. 13, 2043-2059 (2004).</li></ol>

Attuali protocolli per l&#39;esposizione aldicarb con C. elegans sperimentatori non permettono di distinguere tra mutanti con deficit specifici nella trasmissione ACh e mutanti con un deficit generalizzato nella trasmissione sinaptica, in quanto entrambe le classi di mutanti mostrano resistenza al aldicarb. Allo stesso modo, aldicarb non può essere utilizzata per determinare se i mutanti hanno deficit specifici nella trasmissione GABA o fallimenti generalizzati di regolare negativamente ACh trasmissione, in quanto entrambe le clas...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Aldicarb</td>
<td>Reagent</td>
<td>Supelco, Inc.</td>
<td>PS734</td>
<td>Purchasable from Sigma</td>
</tr>
<tr>
<td>Pentylenetetrazole</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6500</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

paradigms for pharmacological characterization of c. elegans synaptic transmission mutants

Il nematode, Caenorhabditis elegans, è diventato un modello utile per lo studio di neurotrasmissione. C. elegans è unico tra i modelli animali, come l&#39;anatomia e la connettività del suo sistema nervoso è stata determinata dal microscopio elettronico e raffinato da saggi farmacologici. In questo video viene descritto come due stimolanti complementari neurali, un inibitore dell&#39;acetilcolinesterasi, chiamato aldicarb, e un acido gamma-aminobutirrico (GABA), antagonista dei recettori, chiamati pentylenetetrazole (PTZ), possono essere impiegate per caratterizzare specificamente segnalazione a C. elegans giunzioni neuromuscolari (NMJs) e facilitare la nostra comprensione di antagoniste circuiti neurali. C. elegans di 302 neuroni, diciannove GABAergici di tipo D motoneuroni innervano i muscoli del corpo a parete (BWMs), mentre quattro neuroni GABAergici, chiamato RMEs, testa innervano i muscoli. Al contrario, 39 motoneuroni esprimere il neurotrasmettitore eccitatorio, l&#39;acetilcolina (ACh), e antagonizzano la trasmissione GABA a BWMs per coordinare locomozione. La natura antagonista dei neuroni colinergici e GABAergici motore a corpo NMJs muro è stato inizialmente determinato da ablazione laser e poi sostenuta da esposizione aldicarb. Di esposizione acuta risultati aldicarb in una paralisi tempo portate o dose-risposta in wild-type vermi. Tuttavia, la perdita di trasmissione eccitatoria ACh conferisce resistenza agli aldicarb, come meno ACh si accumula a NMJs verme, portando a meno di stimolazione BWMs. Resistenza alla aldicarb può essere osservata con ACh-specifico o generale mutanti funzione sinaptica. Coerentemente con antagonisti GABA e ACh trasmissione, perdita di trasmissione GABA, o la mancata regolare negativamente ACh rilascio, conferisce ipersensibilità al aldicarb. Sebbene l&#39;esposizione aldicarb ha portato all&#39;isolamento di omologhi verme numerosi geni neurotrasmissione, l&#39;esposizione aldicarb da sola non può determinare in modo efficiente ruoli prevalente per i geni e sulle vie di specifiche C. elegans motoneuroni. A questo scopo, abbiamo introdotto un approccio complementare sperimentale, che utilizza PTZ. Mutanti neurotrasmissione visualizzare fenotipi chiaro, distinto da aldicarb indotta paralisi, in risposta alle PTZ. Wild-type worm, così come mutanti con specifiche incapacità di rilasciare o ricevere ACh, non mostrano sensibilità apparente PTZ. Tuttavia, mutanti GABA, così come generale mutanti funzione sinaptica, display convulsioni anteriore in modo tempo-corso o dose-risposta. Mutanti che non possono negativamente regolano il rilascio dei neurotrasmettitori generale e, quindi, secernono quantità eccessive di ACh su BWMs, diventano paralizzati su PTZ. Il PTZ-indotta fenotipi di discrete classi mutanti indicano che un approccio complementare con aldicarb e paradigmi esposizione PTZ in C. elegans possono accelerare la nostra comprensione della neurotrasmissione. Inoltre, i video che dimostrano come si eseguono i test farmacologici dovrebbero stabilire metodi coerenti per la ricerca C. elegans.

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Paradigms for Pharmacological Characterization of C. elegans Synaptic Transmission Mutants

Questo video dimostra come utilizzare due stimolanti neurali, aldicarb e pentylenetetrazole (PTZ), in modo complementare per studiare la funzione sinaptica nel nematode, C. elegans. Questo approccio complementare può essere utilizzato anche per far luce sui meccanismi evolutivamente conservata per modulare la sincronia dei neuroni e ha implicazioni per l&#39;epilessia e convulsioni.

Paradigmi per la caratterizzazione farmacologica di C. elegans Mutanti trasmissione sinaptica

The nematode, Caenorhabditis elegans, has become an expedient model for studying neurotransmission. C. elegans is unique among animal models, as the ...

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