<p> सिकुड़ समाधान नुस्खा आरडब्ल्यू Aldrich की प्रयोगशाला से है. स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान, राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन, अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन, पेशी Dystrophy एसोसिएशन, डोनाल्ड बी और डेलिया ई. बैक्सटर फाउंडेशन, Klingenstein फंड और तंत्रिका विज्ञान के लिए McKnight बंदोबस्ती: हम निम्नलिखित वित्तपोषी एजेंसियों और नींव समर्थन के लिए धन्यवाद. </p>

<p class="jove_step"> भाग 1: vitelline झिल्ली हटाना </p><ol><li> संदंश के दो सेट तैयार. हम नहीं 5 संदंश, जहां एक सेट थोड़ा किया गया है एक फ़ाइल के साथ तेज पसंद करते हैं. इसके अलावा trimming और आग चमकाने एक 7 &quot;पाश्चर पिपेट एक गिलास हस्तांतरण विंदुक तै?...

<ol>
	<li>Neher, E., Sakmann, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-channel+currents+recorded+from+membrane+of+denervated+frog+muscle+fibres.">Single-channel currents recorded from membrane of denervated frog muscle fibres.</a> <em style='font-style: italic'>Nature</em>. <b>260</b>, 799-802 (1976).</li><li>Sackmann, B., Neher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Single-channel Recording</em>. , (1983).</li></ol>

<p> Electrophysiological रिकॉर्डिंग के कई मापदंडों चर्चा यहाँ नहीं हैं. रिग स्थापना, प्रणाली शोर प्रबंधन, चैनल अभिव्यक्ति, और रिकॉर्डिंग प्रोटोकॉल भी अच्छा प्रयोगात्मक परिणाम के लिए महत्वपूर्ण हैं. </p><p> हमारे अनुभव में, इन विश?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Patch Clamp Amplifier & Software</td>
<td>Instrument</td>
<td>HEKA or Axon</td>
<td>EPC-10</td>
<td>Or other similar device (e.g. HEKA EPC-9 or Axopatch 200B)</td>
</tr>
<tr>
<td>No. 5 forceps (two pairs)</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Oocyte shrinking solution</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ingredient                            In mM
N-methyl-D-glucamine     220
HEPES                                   10
MgCl2                                       1
EGTA                                       10
Aspartic Acid                        220
KCl                                             2
pH to 7.4 w/ N-methyl-D-glucamine</td>
</tr>
<tr>
<td>woven mesh</td>
<td>800 um</td>
<td>Spectrum Laboratories INC</td>
<td>146481</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

patch clamp recording of ion channels expressed in  xenopus oocytes

<p class="jove_content"> Sakmann और <sup>1 Neher, 2</sup> द्वारा अपने विकास के बाद से, पैच दबाना एकल या एकाधिक कक्षों में आयन चैनलों के electrophysiological माप के लिए एक अत्यंत उपयोगी तकनीक के रूप में स्थापित हो गया है. दोनों उनके पैतृक वातावरण में आयन चैनलों के लिए इस तकनीक को लागू किया जा सकता है और जैसे अफ्रीकी clawed मेंढक, Xenopus laevis से काटा oocytes heterologous कोशिकाओं में व्यक्त की. यहाँ, हम पैच Xenopus oocytes से दबाना रिकॉर्डिंग की अच्छी तरह से स्थापित तकनीक का वर्णन. इस तकनीक को व्यक्त आयन चैनल के गुणों (macropatch) आबादी या व्यक्तिगत (एकल चैनल रिकॉर्डिंग) में या तो उपाय करने के लिए प्रयोग किया जाता है. हम तकनीक पर ध्यान केंद्रित करने के लिए oocyte की तैयारी और मुहर पीढ़ी की गुणवत्ता को अधिकतम. सभी कारकों के साथ अनुकूलित किया है, इस तकनीक का 90 प्रतिशत से अधिक सफल मुहर पीढ़ी के एक प्रायिकता देता है. प्रक्रिया हर कारकों वह या वह सबसे महत्वपूर्ण पाता के आधार पर शोधकर्ता द्वारा अलग अनुकूलित कर सकते हैं, और हम दृष्टिकोण है कि हमारे हाथ में सबसे बड़ी सफलता के लिए नेतृत्व है मौजूद है. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Patch Clamp Recording of Ion Channels Expressed in  Xenopus Oocytes at JoVE.com

Patch Clamp Recording of Ion Channels Expressed in  Xenopus Oocytes

<p class="jove_content">यह एक परिचय Xenopus laevis oocytes से दबाना रिकॉर्डिंग पैच के रूप में इरादा है. यह vitelline झिल्ली हटाने, gigaohm मुहर (gigaseal) के गठन और बाहर - बाहर टोपोलॉजी करने के लिए पैच के वैकल्पिक रूपांतरण शामिल हैं.</p>

Xenopus oocytes में व्यक्त आयन चैनल के पैच दबाना रिकॉर्डिंग

Since its development by Sakmann and Neher 1, 2, the patch clamp has become established as an extremely useful technique for electrophysiological ...

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx

Calyx से पैच दबाना समाई रिकॉर्डिंग के लिए तरीके

We demonstrate the basic techniques for presynaptic patch clamp recording at the calyx of Held, a mammalian central nervous system nerve terminal. ...

Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording

बेहतर पैच दबाना रिकॉर्डिंग के लिए दबाव चमकाने pipettes

Pressure-polishing is a method for shaping glass pipettes for patch-clamp recording.  We first developed this method for fabricating pipettes suitable for ...

Microinjection of Xenopus Laevis Oocytes

Xenopus Laevis oocytes के Microinjection

Microinjection of Xenopus laevis oocytes followed by thin-sectioning electron microscopy (EM) is an excellent system for studying nucleocytoplasmic ...

Visualizing RNA Localization in <em>Xenopus</em> Oocytes

Visualizing RNA Localization in Xenopus Oocytes

Visualizing शाही सेना स्थानीयकरण में<em> Xenopus</em> Oocytes

RNA localization is a conserved mechanism of establishing cell polarity.  Vg1 mRNA localizes to the vegetal pole of Xenopus laevis oocytes and acts to ...

Fertilization of <em>Xenopus oocytes</em> using the Host Transfer Method

Fertilization of Xenopus oocytes using the Host Transfer Method

के निषेचन<em> Xenopus oocytes</em> होस्ट स्थानांतरण विधि का उपयोग

Studying the contribution of maternally inherited molecules to vertebrate early development is often hampered by the time and expense necessary to ...

Mutagenesis and Functional Analysis of Ion Channels Heterologously Expressed in Mammalian Cells

Mutagenesis और आयन चैनल के कार्यात्मक विश्लेषण Heterologously स्तनधारी कोशिकाओं में व्यक्त

We will demonstrate how to study the functional effects of introducing a point mutation in an ion channel. We study G protein-gated inwardly rectifying ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in <em>Xenopus</em> oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

पैच और आयन चैनल के अध्ययन के लिए दबाना छिड़काव तकनीक में व्यक्त<em> Xenopus</em> Oocytes

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Optimized Transfection Strategy for Expression and Electrophysiological Recording of Recombinant Voltage-Gated Ion Channels in HEK-293T Cells

अभिव्यक्ति और HEK-293T कक्ष में पुनः संयोजक वोल्टेज gated आयन चैनल के electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए अनुकूलित अभिकर्मक रणनीति

The in vitro expression and electrophysiological recording of recombinant voltage-gated ion channels in cultured human embryonic kidney cells (HEK-293T) ...

Giant Liposome Preparation for Imaging and Patch-Clamp Electrophysiology

इमेजिंग और पैच दबाना इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी के लिए विशालकाय Liposome तैयारी

The reconstitution of ion channels into chemically defined lipid membranes for electrophysiological recording has been a powerful technique to identify ...

The <em>Xenopus</em> Oocyte Cut-open Vaseline Gap Voltage-clamp Technique With Fluorometry

The Xenopus Oocyte Cut-open Vaseline Gap Voltage-clamp Technique With Fluorometry

<em&gt; Xenopus</emFluorometry साथ&gt; Oocyte कट खुला वैसलीन गैप वोल्टेज दबाना तकनीक

The cut-open oocyte Vaseline gap (COVG) voltage clamp technique allows for analysis of electrophysiological and kinetic properties of heterologous ion ...