Name: method for whole mount antibody staining in chick
Uploaded: 2009-02-02T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick at JoVE.com

मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (PAX7 15.3B9) (जे डोड, टीएम Jessell और ए Kawakami) विकसित विकासात्मक अध्ययन हाइब्रिडोमा NICHD और आयोवा विश्वविद्यालय द्वारा बनाए रखा, जीव विज्ञान के विभाग के तत्वावधान में विकसित बैंक से प्राप्त किया गया , आयोवा. डीपी रुथ Kirschstein पुरस्कार DA021977 01A1-1F32 के नशीली दवाओं के सेवन पर राष्ट्रीय संस्थान से प्राप्तकर्ता है. यह काम मार्गरेट एम. Alkek RHF फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया.

मैं योजनाबद्ध अवलोकन: इस वीडियो लड़की भ्रूण में पूरे माउंट immunohistochemistry में विभिन्न चरणों को दर्शाता है. सबसे पहले, भ्रूण पीएफए ​​में तय हो गई है [IHC1] फिर, अंतर्जात peroxidase गतिविधि बुझती है [IHC2] भ्रूण तो प?...

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	<li>Yamada, T., Placzek, M., Tanaka, H., Dodd, J., Jessell, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+cell+pattern+in+the+developing+nervous+system:+Polarizing+activity+of+the+floor+plate+and+notochord.">Control of cell pattern in the developing nervous system: Polarizing activity of the floor plate and notochord.</a> Cell. 64, 635-647 (1991).</li><li>Streit, A., Stern, C. D., Thery, C., Ireland, G. W., Aparicio, S., Sharpe, M. J., Gherardi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+HGF/SF+in+neural+induction+and+its+expression+in+Hensen's+node+during+gastrulation.">A role for HGF/SF in neural induction and its expression in Hensen's node during gastrulation.</a> Development. 121, 813-824 (1995).</li><li>Basch, M., Bronner-Fraser, M., Garcia-Castro, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specification+of+neural+crest+occurs+during+gastrulation+and+requires+Pax7.">Specification of neural crest occurs during gastrulation and requires Pax7.</a> Nature. 441, 218-222 (2006).</li><li>Psychoyos, D., Stern, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+the+organizer+after+radical+ablation+of+Hensen's+node+and+the+anterior+primitive+streak+in+the+chick+embryo.">Restoration of the organizer after radical ablation of Hensen's node and the anterior primitive streak in the chick embryo.</a> Development. 122, 3263-3273 (1996).</li></ol>

इस वीडियो युवा लड़की भ्रूण में पूरे माउंट एंटीबॉडी धुंधला प्रदर्शन में विभिन्न चरणों को दर्शाता है. इस प्रोटोकॉल अनिवार्य रूप से 2,3 चूजा में उपन्यास एंटीबॉडी के स्थानिक और लौकिक लक्षण वर्णन के लि?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Eggs</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Charles River Laboratories</td>
<td>Premium Fertile</td>
<td>Fertilized, HH4 (16 hr)</td>
</tr>
<tr>
<td>Stereomicroscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Leica Microsystems</td>
<td>MZ9.5 or similar</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Marsh Automatic Incubator</td>
<td>Other</td>
<td>Lyon</td>
<td>RX</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Curved Forceps (1)</td>
<td>Tool</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>72991-4C</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps (2)</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11002-13</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fine scissors</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14161-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td> Plastic dishes</td>
<td>Tool</td>
<td>Falcon</td>
<td>353001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rubber Bulb</td>
<td>Tool</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>70980</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pasteur Capillary Pipette</td>
<td>Tool</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>70950-12</td>
<td>round edge under flame</td>
</tr>
<tr>
<td>Microdissecting knife</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>10056-12</td>
<td>Use to cut embryo from surrounding membranes following fixation</td>
</tr>
<tr>
<td>Sylgard 184 Silicon Elastomer Curing Agent and Base</td>
<td>Reagent</td>
<td>Dow Corning</td>
<td>0001986475</td>
<td>Mix 1 part Curing Agent, 9 parts Base; set O/N at 37C</td>
</tr>
<tr>
<td>16% PFA</td>
<td>Reagent</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>15710</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>30% H2O2</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>H1009</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BSA</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>A3803</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>NGS</td>
<td>Reagent</td>
<td>Jackson Immuno</td>
<td>005-000-121</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Primary Antibodies</td>
<td>Reagent</td>
<td>Developmental studies Hybridoma Bank</td>
<td>4G11, 15.3B9, PAX7</td>
<td>For these antibodies, investgators used mouse donnors</td>
</tr>
<tr>
<td>Peroxidase conjugated-Goat Anti-Mouse IgG (H+L) </td>
<td>Reagent</td>
<td>Jackson Immuno</td>
<td>115-035-003</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>3,3&#x2019;-diaminobenzidine tetrahydrochloride</td>
<td>Reagent</td>
<td>Pierce</td>
<td>34001</td>
<td>Store at -20; Allow bottle to warm to RT before use.</td>
</tr>
<tr>
<td>Cedar wood oil</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>W522503</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fast green FCF</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>F7252</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Minuten pins 0.2mm diam</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>26002-20 </td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

method for whole mount antibody staining in chick

लड़की भ्रूण जल्दी भ्रूण के विकास के अध्ययन में एक महत्वपूर्ण उपकरण है. इसकी पारदर्शिता, पहुंच, और हेरफेर की आसानी, यह मस्तिष्क, न्यूरल ट्यूब और somite विकास में एंटीबॉडी की अभिव्यक्ति का अध्ययन करने के लिए एक आदर्श उपकरण बनाते हैं. यह वीडियो पूरी माउंट एंटीबॉडी एचआरपी संयुग्मित माध्यमिक एंटीबॉडी का उपयोग कर धुंधला में विभिन्न चरणों को दर्शाता है, पहला, भ्रूण अंडे से dissected है और paraformaldehyde में तय है. दूसरा, अंतर्जात peroxidase निष्क्रिय है, भ्रूण तो प्राथमिक एंटीबॉडी के संपर्क में है. कई washes के बाद, भ्रूण माध्यमिक एचआरपी को संयुग्मित एंटीबॉडी के साथ incubated है. Peroxidase की गतिविधि diaminobenzidine सब्सट्रेट के साथ प्रतिक्रिया का उपयोग करने के लिए पता चला है. अंत में, भ्रूण तय है और फोटोग्राफी और सेक्शनिंग के लिए कार्रवाई की जाती है. फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी के उपयोग पर इस विधि का लाभ यह है कि भ्रूण मोम सेक्शनिंग के लिए संसाधित किया जा सकता है, इस प्रकार सक्षम पार अनुभाग में प्रतिजन साइटों का अध्ययन. इस पद्धति का मूल रूप से जेन डोड और टॉम Jessell द्वारा शुरू की गई थी<sup&gt; 1</sup&gt;.

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Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

यह वीडियो पूरी माउंट immunohistochemistry, एक विधि है जिसके द्वारा एक प्रतिजन के स्थानिक और लौकिक अभिव्यक्ति पैटर्न जवान लड़की भ्रूण में visualized किया जा सकता है दर्शाता है. इस पद्धति का मूल रूप से जेन डोड और टॉम Jessell द्वारा पेश किया गया था.

चिकी में पूरे माउंट एंटीबॉडी धुंधला के लिए विधि

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Research

JoVE Journal

Biology

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

प्रारंभिक चिकी भ्रूण पूर्व vivo (नई संस्कृति) की संस्कृति के लिए विधि

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

प्रारंभिक चिकी भ्रूण के स्वस्थानी संकरण में डबल पूरा पर्वत

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Zebrafish पूरा पर्वत उच्च संकल्प डबल प्रतिदीप्त स्वस्थानी में संकरण

Whole mount in situ hybridization is one of the most widely used techniques in developmental biology.  Here, we present a high-resolution double ...

Using Whole Mount in situ Hybridization to Link Molecular and Organismal Biology

Using Whole Mount in situ Hybridization to Link Molecular and Organismal Biology

पूरे पर्वत का उपयोग बगल में आण्विक और organismal जीवविज्ञान लिंक संकरण

Whole mount in situ hybridization (WISH) is a common technique in molecular biology laboratories used to study gene expression through the localization of ...

Whole Mount in Situ Hybridization of E8.5 to E11.5 Mouse Embryos

Whole Mount in Situ Hybridization of E8.5 to E11.5 Mouse Embryos

पूरे माउंट<em&gt; स्वस्थानी में</em&gt; E8.5 E11.5 माउस भ्रूण संकरण

Whole mount in situ hybridization is a very informative approach for defining gene expression patterns in embryos. The in situ hybridization procedures ...

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

पूरे माउंट आरएनए प्रतिदीप्त<em&gt; स्वस्थानी में</em&gt; संकरण<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; भ्रूण

Assessing  the expression pattern of a gene, as well as the subcellular localization  properties of its transcribed RNA, are key features for ...

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

आरएनए<em&gt; सीटू में</em&gt; पूरे माउंट भ्रूण और सेल हिस्टोलॉजि में संकरण समुद्री Elasmobranchs के लिए अनुकूलित

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Antibody Staining in C. Elegans Using &quot;Freeze-Cracking&quot;

Antibody Staining in C. Elegans Using "Freeze-Cracking"

एंटीबॉडी धुंधला में<em&gt; सी. एलिगेंस</em&gt; &quot;रुक क्रैकिंग&quot; का प्रयोग

To stain C.  elegans with antibodies, the relatively impermeable cuticle must be  bypassed by chemical or mechanical methods.  "Freeze-cracking" is one ...

An Efficient Method for Quantitative, Single-cell Analysis of Chromatin Modification and Nuclear Architecture in Whole-mount Ovules in Arabidopsis

An Efficient Method for Quantitative, Single-cell Analysis of Chromatin Modification and Nuclear Architecture in Whole-mount Ovules in Arabidopsis

साबुत माउंट बीजाणु में में chromatin संशोधन और परमाणु वास्तुकला के मात्रात्मक, एकल कोशिका विश्लेषण के लिए एक कारगर तरीका<em&gt; एराबिडोप्सिस</em

In flowering plants, the somatic-to-reproductive cell fate transition is marked by the specification of spore mother cells (SMCs) in floral organs of the ...

Flat Mount Preparation for Observation and Analysis of Zebrafish Embryo Specimens Stained by Whole Mount In situ Hybridization

Flat Mount Preparation for Observation and Analysis of Zebrafish Embryo Specimens Stained by Whole Mount In situ Hybridization

पूरा पर्वत से zebrafish भ्रूण नमूने सना का अवलोकन और विश्लेषण के लिए फ्लैट माउंट तैयारी<em&gt; सीटू</em&gt; संकरण

The zebrafish embryo is now commonly used for basic and biomedical research to investigate the genetic control of developmental processes and to model ...