Name: a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse
Uploaded: 2008-11-10T00:00:00
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Notre travail est soutenu par des subventions du NIH et de NS048447 AG017216to KD. Li Liu tiens à remercier le Dr Heikki Tanila (Université de Kuopio, Kuopio, Finlande) pour sa supervision et du soutien lors du développement du protocole original.

Tirer sur le tube capillaire en verre <ol><li> Le tube capillaire en verre est acheté à La Inc Sutter Instrument (verre borosilicate, le B100-75-10). </li><li> Tirez les tubes capillaires sur une Sutter P-87 Flaming micropipette extracteur, avec l&#39;indice de chaleur fixé à 300 et l&#39;indice de pression fixé à 330. </li><li> Coupez le bout du tube capillaire en verre avec des ciseaux, de sorte que la pointe conique a un diamètre intérieur de 0,5 mm environ. </li></ol> Technique de la ponction Cist...

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	<li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+observation+on+CSF+Abeta42+levels+in+young+to+middle-aged+amyloid+precursor+protein/presenilin-1+doubly+transgenic+mice.">Longitudinal observation on CSF Abeta42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice.</a> Neurobiol Dis. 17, 516 (2004).</li><li>Holcomb, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+Alzheimer-type+phenotype+in+transgenic+mice+carrying+both+mutant+amyloid+precursor+protein+and+presenilin+1+transgenes.">Accelerated Alzheimer-type phenotype in transgenic mice carrying both mutant amyloid precursor protein and presenilin 1 transgenes.</a> Nat Med. 4, 97 (1998).</li><li>Lewis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofibrillary+tangles,+amyotrophy+and+progressive+motor+disturbance+in+mice+expressing+mutant+(P301L)+tau+protein.">Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein.</a> Nat Genet. 25, 402 (2000).</li><li>DeMattos, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plaque-associated+disruption+of+CSF+and+plasma+amyloid-beta+(Abeta)+equilibrium+in+a+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Plaque-associated disruption of CSF and plasma amyloid-beta (Abeta) equilibrium in a mouse model of Alzheimer's disease.</a> J Neurochem. 81, 229 (2002).</li><li>Planel, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+leads+to+tau+hyperphosphorylation+through+inhibition+of+phosphatase+activity+by+hypothermia.">Anesthesia leads to tau hyperphosphorylation through inhibition of phosphatase activity by hypothermia.</a> J Neurosci. 27, 3090 (2007).</li><li>Refolo, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cholesterol-lowering+drug+reduces+beta-amyloid+pathology+in+a+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">A cholesterol-lowering drug reduces beta-amyloid pathology in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> Neurobiol Dis. 8, 890 (2001).</li></ol>

Nous avons décrit un protocole très fiable pour l&#39;échantillonnage de série de LCR chez des souris sans contamination du plasma détectable. 1. Toute la procédure prend généralement 10 min par la souris (y compris l&#39;anesthésie). Le volume de LCR obtenus dépend du souches de souris. Dans le PS / APP doubles souris Tg, nous used2, le volume moyen est d&#39;environ 5 pl (3 à 7 pi), tandis que le P301L (JNPL3) souris 3 donnent un rendement d&#39;environ 10 ul ul-15. Pour l&#39;échantillonnage de série, un maximum de 7...

a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse 

La maladie d&#39;Alzheimer (MA) est une maladie neurodégénérative progressive qui est pathologiquement caractérisée par un dépôt extracellulaire de β-amyloïde de peptide (Aß) et l&#39;accumulation intraneuronale de protéines tau hyperphosphorylée. Parce que le liquide céphalorachidien (LCR) est en contact direct avec l&#39;espace extracellulaire du cerveau, il fournit un reflet des changements biochimiques dans le cerveau en réponse à des processus pathologiques. LCR de patients atteints de MA montre une baisse dans les 42 acides aminés sous forme de Aß (Aß42), et augmente au total tau et hyperphosphorylée tau, bien que les mécanismes responsables de ces changements ne sont pas encore entièrement compris. Modèles de souris transgéniques (Tg) de AD offrent une excellente occasion d&#39;examiner comment et pourquoi les niveaux de Aß ou de tau dans le LCR changements que la maladie progresse. Ici, nous démontrons une technique raffinée cisterna magna perforation pour l&#39;échantillonnage de LCR chez des souris. Cette technique d&#39;échantillonnage très doux permet série LCR d&#39;être obtenu à partir de la même souris à 2-3 mois d&#39;intervalle ce qui minimise considérablement l&#39;effet de confusion entre la souris variabilité des niveaux de Aß ou tau, ce qui permet de détecter de subtiles altérations dans le temps. En combinaison avec Aß et la protéine tau ELISA, cette technique sera utile pour des études visant à étudier la relation entre les niveaux de CSF Aß42 et tau, et leur métabolisme dans le cerveau de souris modèles AD. Des études chez des souris Tg pourrait fournir une validation importante que le potentiel de Aßi LCR ou les niveaux de tau d&#39;être utilisés comme marqueurs biologiques pour la surveillance progression de la maladie, et de surveiller les effets des interventions thérapeutiques. Comme les souris peuvent être sacrifiés et les cerveaux peuvent être examinés pour des changements biochimiques ou histologiques, les mécanismes sous-jacents aux changements CSF peut être mieux évaluée. Ces données sont susceptibles d&#39;être instructive pour l&#39;interprétation des changements humains LCR AD.

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A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse

Modèles de souris transgéniques (Tg) de AD offrent une excellente occasion d&#39;examiner comment et pourquoi les niveaux de Aß ou de tau dans le LCR changements que la maladie progresse chez les patients humains. Ici, nous démontrons une technique raffinée cisterna magna perforation pour l&#39;échantillonnage CSF de série de la souris.

Une technique de recueil de série du liquide céphalorachidien de la grande citerne de souris

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse 

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Isolation vampirique de fluide extracellulaire d&#39;<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

The genetically tractable model organism C. elegans has provided insights into a myriad of biological questions, enabled by its short generation time, ...

Recherche

Biologie

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Génération de souris dérivées de cellules souches pluripotentes induites

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells (SSCs) in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells SSCs in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Enrichissement de série de souches et des cellules progénitrices des spermatogonies (SSC) dans la culture de dérivation de long terme Lines adultes CSE de souris

Spermatogonial stem and progenitor cells (SSCs) of the testis represent a classic example of adult mammalian stem cells and preserve fertility for nearly ...

RNA Isolation from Mouse Pancreas: A Ribonuclease-rich Tissue

Isolement de l&#39;ARN de souris Pancréas: un tissu de Ribonuclease riche

Isolation of high-quality RNA from ribonuclease-rich tissue such as mouse pancreas presents a challenge.  As a primary function of the pancreas is to aid ...

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

La technique d&#39;infiltration-centrifugation pour l&#39;extraction de apoplastique Fluid feuilles des plantes Utilisation<em&gt; Phaseolus vulgaris</em&gt;, Un exemple

The apoplast is a distinct extracellular compartment in plant tissues that lies outside the plasma membrane and includes the cell wall. The apoplastic ...

The Assembly and Application of 'Shear Rings': A Novel Endothelial Model for Orbital, Unidirectional and Periodic Fluid Flow and Shear Stress

L&#39;Assemblée et l&#39;application des «Shear Anneaux»: A Novel Endothelial Modèle pour Orbital, unidirectionnel et périodique Fluid débit et contrainte de cisaillement

Deviations from normal levels and patterns of vascular fluid shear play important roles in vascular physiology and pathophysiology by inducing adaptive as ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

La perfusé Technique du rein de souris isolé

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

Prélèvement de tissus et extraction d’ARN de l’articulation ostéoarthritique humaine du genou

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Isolation and Culture of Primary Oral Keratinocytes from the Adult Mouse Palate

Isolement et culture de kératinocytes oraux primaires du palais de souris adulte

For years, most studies involving keratinocytes have been conducted using human and mouse skin epidermal keratinocytes. Recently, oral keratinocytes have ...

Nuclei Isolation from Adult Mouse Kidney for Single-Nucleus RNA-Sequencing

Isolement de noyaux à partir de reins de souris adultes pour le séquençage de l’ARN mononucléaire

The kidneys regulate diverse biological processes such as water, electrolyte, and acid-base homeostasis. Physiological functions of the kidney are ...