Name: a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse
Uploaded: 2008-11-10T00:00:00
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Unsere Arbeit wird von NIH gewährt NS048447 und AG017216to KD unterstützt. Li Liu möchte Dr. Heikki Tanila (University of Kuopio, Kuopio, Finnland) für seine Betreuung und Unterstützung danken, während die Entwicklung der Original-Protokoll.

Pulling der Glaskapillare <ol><li> Die Glaskapillare ist von der Sutter Instrument Inc (Borosilikatglas, B100-75 bis 10) gekauft. </li><li> Ziehen Sie die Kapillaren auf einer Sutter P-87 Flaming Mikropipette Abzieher, mit der Hitze Index 300 gesetzt und der Druck Index bei 330 gesetzt. </li><li> Schneiden Sie die Spitze des Glaskapillare mit einer Schere, so dass die verjüngte Spitze einen Innendurchmesser von etwa 0,5 mm hat. </li></ol> Cisterna magna Punktionstechnik für CSF CSF-Proben w...

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	<li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+observation+on+CSF+Abeta42+levels+in+young+to+middle-aged+amyloid+precursor+protein/presenilin-1+doubly+transgenic+mice.">Longitudinal observation on CSF Abeta42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice.</a> Neurobiol Dis. 17, 516 (2004).</li><li>Holcomb, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+Alzheimer-type+phenotype+in+transgenic+mice+carrying+both+mutant+amyloid+precursor+protein+and+presenilin+1+transgenes.">Accelerated Alzheimer-type phenotype in transgenic mice carrying both mutant amyloid precursor protein and presenilin 1 transgenes.</a> Nat Med. 4, 97 (1998).</li><li>Lewis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofibrillary+tangles,+amyotrophy+and+progressive+motor+disturbance+in+mice+expressing+mutant+(P301L)+tau+protein.">Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein.</a> Nat Genet. 25, 402 (2000).</li><li>DeMattos, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plaque-associated+disruption+of+CSF+and+plasma+amyloid-beta+(Abeta)+equilibrium+in+a+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Plaque-associated disruption of CSF and plasma amyloid-beta (Abeta) equilibrium in a mouse model of Alzheimer's disease.</a> J Neurochem. 81, 229 (2002).</li><li>Planel, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+leads+to+tau+hyperphosphorylation+through+inhibition+of+phosphatase+activity+by+hypothermia.">Anesthesia leads to tau hyperphosphorylation through inhibition of phosphatase activity by hypothermia.</a> J Neurosci. 27, 3090 (2007).</li><li>Refolo, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cholesterol-lowering+drug+reduces+beta-amyloid+pathology+in+a+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">A cholesterol-lowering drug reduces beta-amyloid pathology in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> Neurobiol Dis. 8, 890 (2001).</li></ol>

Wir beschrieben eine sehr zuverlässige Protokoll für serielle Probenahme von CSF aus Mäusen ohne nachweisbare Plasma Kontamination. 1. Die ganze Prozedur dauert in der Regel 10 min pro Maus (einschließlich Narkose). Das Volumen der CSF erhalten ist abhängig von der Maus-Stämme. In der PS / APP doppelte Tg Mäusen wir Gebraucht2, ist das durchschnittliche Volumen ca. 5 ul (3 bis 7 ul), während die P301L (JNPL3) Mäuse 3 geben eine Ausbeute von etwa 10 ul-15 ul. Für die serielle Probenahme, kann ein Maximum von 7-8 ul sicher g...

a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse 

Alzheimer-Krankheit (AD) ist eine fortschreitende neurodegenerative Erkrankung, die pathologisch durch extrazelluläre Ablagerung von β-Amyloid-Peptid (Aß) und intraneuronale Ansammlung von hyperphosphorylierte Tau-Protein ist aus. Da Liquor (CSF) ist in direktem Kontakt mit dem extrazellulären Raum des Gehirns, bietet es eine Reflexion der biochemischen Veränderungen im Gehirn als Reaktion auf pathologische Prozesse. CSF von AD-Patienten zeigt eine Abnahme in den 42 Aminosäure-Form von Aß (Aß42), und erhöht in Gesamt-tau und hyperphosphorylierte tau, obwohl die Mechanismen, die für diese Veränderungen noch nicht vollständig verstanden. Transgene (Tg) Mausmodellen der Alzheimer bieten eine ausgezeichnete Gelegenheit, um zu untersuchen, wie und warum Aß oder tau-Spiegeln im Liquor ändern, wenn die Krankheit fortschreitet. Hier zeigen wir eine raffinierte Cisterna magna Punktionstechnik für CSF Probenahme aus die Maus. Diese äußerst schonende Sampling-Technik ermöglicht serielle CSF Proben aus der gleichen Maus Abstand von 2-3 Monaten die stark minimiert die verwirrende Wirkung der zwischen-Maus-Variabilität in Aß oder tau-Spiegeln, die es ermöglicht, subtile Veränderungen im Laufe der Zeit zu erkennen eingeholt werden. In Kombination mit Aß und Tau-ELISA, wird diese Technik nützlich sein Studium konzipiert, um die Beziehung zwischen den Ebenen der CSF Aß42 und Tau, und deren Stoffwechsel im Gehirn in AD Mausmodellen untersuchen. Studies in Tg Mäusen konnten wichtige Bestätigung, um das Potenzial der CSF Aß oder tau-Spiegeln als biologische Marker für die Überwachung der Krankheitsprogression verwendet werden kann, und um die Wirkung von therapeutischen Interventionen zu überwachen. Da die Mäuse geopfert und das Gehirn kann für biochemische oder histologische Veränderungen untersucht werden, können die zugrunde liegenden Mechanismen der CSF Veränderungen besser beurteilt werden kann. Diese Daten sind wahrscheinlich informative zur Interpretation der menschlichen AD CSF Veränderungen.

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A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse

Transgene (Tg) Mausmodellen der Alzheimer bieten eine ausgezeichnete Gelegenheit, um zu untersuchen, wie und warum Aß oder tau-Spiegeln im Liquor ändern, wenn die Krankheit fortschreitet bei menschlichen Patienten. Hier zeigen wir eine raffinierte Cisterna magna Punktionstechnik für serielle CSF Probenahme aus die Maus.

Eine Technik für Serial Sammlung von Liquor aus der Cisterna Magna in Maus

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse 

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Vampiric Isolation der extrazellulären Flüssigkeit aus<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

The genetically tractable model organism C. elegans has provided insights into a myriad of biological questions, enabled by its short generation time, ...

Forschung

Biologie

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Generation der Mäuse aus induzierten pluripotenten Stammzellen

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells (SSCs) in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells SSCs in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Serielle Anreicherung von Spermatogonien Stamm-und Progenitorzellen (SSC) in der Kultur für die Ableitung des langfristigen adulten Maus SSC Linien

Spermatogonial stem and progenitor cells (SSCs) of the testis represent a classic example of adult mammalian stem cells and preserve fertility for nearly ...

RNA Isolation from Mouse Pancreas: A Ribonuclease-rich Tissue

RNA-Isolierung aus Maus Pankreas: Eine Ribonuklease-reichen Gewebe

Isolation of high-quality RNA from ribonuclease-rich tissue such as mouse pancreas presents a challenge.  As a primary function of the pancreas is to aid ...

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

Die Infiltration-Zentrifugation Technik zur Gewinnung von apoplastischen Flüssigkeit aus Pflanzenblättern verwenden<em&gt; Phaseolus vulgaris</em&gt; Als Beispiel

The apoplast is a distinct extracellular compartment in plant tissues that lies outside the plasma membrane and includes the cell wall. The apoplastic ...

The Assembly and Application of 'Shear Rings': A Novel Endothelial Model for Orbital, Unidirectional and Periodic Fluid Flow and Shear Stress

Die Montage und Anwendung der &quot;Shear Ringe &#39;: A Novel Endothelial Modell für Orbital, unidirektional und periodische Strömungs- und Scherspannung

Deviations from normal levels and patterns of vascular fluid shear play important roles in vascular physiology and pathophysiology by inducing adaptive as ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

Die Maus isoliert perfundierten Nieren-Technik

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

Gewebeentnahme und RNA-Extraktion aus dem humanen osteoarthritischen Kniegelenk

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Isolation and Culture of Primary Oral Keratinocytes from the Adult Mouse Palate

Isolierung und Kultur von primären oralen Keratinozyten aus dem erwachsenen Mausgaumen

For years, most studies involving keratinocytes have been conducted using human and mouse skin epidermal keratinocytes. Recently, oral keratinocytes have ...

Nuclei Isolation from Adult Mouse Kidney for Single-Nucleus RNA-Sequencing

Zellkernisolierung aus der Niere adulter Mäuse für die Einzelkern-RNA-Sequenzierung

The kidneys regulate diverse biological processes such as water, electrolyte, and acid-base homeostasis. Physiological functions of the kidney are ...