Name: a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse
Uploaded: 2008-11-10T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse at JoVE.com

Nuestro trabajo es apoyado por el NIH subvenciones NS048447 y KD AG017216to. Li Liu gustaría agradecer al Dr. Heikki Tanila (Universidad de Kuopio, Kuopio, Finlandia) para su supervisión y apoyo durante el desarrollo del protocolo original.

Tirar del tubo capilar de vidrio <ol><li> El tubo capilar de vidrio se compra a La Inc Sutter Instrument (vidrio borosilicato, B100-75-10). </li><li> Tire de los tubos capilares en un Sutter P-87 Flaming micropipeta extractor, con el índice de calor en 300 y el índice de presión de 330. </li><li> Recorte el extremo del tubo capilar de vidrio con unas tijeras, de modo que la punta cónica tiene un diámetro interior de 0,5 mm. </li></ol> Cisterna magna técnica de punción de líquido cefalorraquídeo</stro...

<ol>
	<li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+observation+on+CSF+Abeta42+levels+in+young+to+middle-aged+amyloid+precursor+protein/presenilin-1+doubly+transgenic+mice.">Longitudinal observation on CSF Abeta42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice.</a> Neurobiol Dis. 17, 516 (2004).</li><li>Holcomb, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+Alzheimer-type+phenotype+in+transgenic+mice+carrying+both+mutant+amyloid+precursor+protein+and+presenilin+1+transgenes.">Accelerated Alzheimer-type phenotype in transgenic mice carrying both mutant amyloid precursor protein and presenilin 1 transgenes.</a> Nat Med. 4, 97 (1998).</li><li>Lewis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofibrillary+tangles,+amyotrophy+and+progressive+motor+disturbance+in+mice+expressing+mutant+(P301L)+tau+protein.">Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein.</a> Nat Genet. 25, 402 (2000).</li><li>DeMattos, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plaque-associated+disruption+of+CSF+and+plasma+amyloid-beta+(Abeta)+equilibrium+in+a+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Plaque-associated disruption of CSF and plasma amyloid-beta (Abeta) equilibrium in a mouse model of Alzheimer's disease.</a> J Neurochem. 81, 229 (2002).</li><li>Planel, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+leads+to+tau+hyperphosphorylation+through+inhibition+of+phosphatase+activity+by+hypothermia.">Anesthesia leads to tau hyperphosphorylation through inhibition of phosphatase activity by hypothermia.</a> J Neurosci. 27, 3090 (2007).</li><li>Refolo, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cholesterol-lowering+drug+reduces+beta-amyloid+pathology+in+a+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">A cholesterol-lowering drug reduces beta-amyloid pathology in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> Neurobiol Dis. 8, 890 (2001).</li></ol>

Se describe un protocolo de alta fiabilidad para la toma de muestras de LCR en serie de los ratones sin contaminación detectable en plasma. 1. El procedimiento completo generalmente toma 10 minutos por ratón (incluyendo la anestesia). El volumen de líquido cefalorraquídeo obtenido depende de las cepas de ratones. En el PS / APP ratones Tg doble que used2, el volumen promedio es de aproximadamente 5 l (3 a 7 l), mientras que el P301L (JNPL3) 3 ratones dan un rendimiento de alrededor de 10 l-15 l. Para el muestreo de serie, un má...

a technique for serial collection of cerebrospinal fluid from the cisterna magna in mouse 

La enfermedad de Alzheimer (EA) es una enfermedad neurodegenerativa progresiva que es caracterizada patológicamente por depósito extracelular de péptidos β-amiloide (Aß) y la acumulación intraneuronal de proteína tau hiperfosforilada. Debido a que el líquido cefalorraquídeo (LCR) está en contacto directo con el espacio extracelular del cerebro, que proporciona un reflejo de los cambios bioquímicos en el cerebro en respuesta a procesos patológicos. LCR de pacientes con EA muestra una disminución de los 42 aminoácidos forma de Aß (Aß42), y el aumento de tau total y tau hiperfosforilada, aunque los mecanismos responsables de estos cambios aún no se entienden completamente. Transgénicos (Tg) los modelos de ratón de Alzheimer proporcionan una excelente oportunidad para investigar cómo y por qué los niveles de Aß y tau en el LCR cambio a medida que progresa la enfermedad. Este sentido, demuestran una refinada técnica de punción cisterna magna para el muestreo de la enfermedad por el ratón. Esta técnica de muestreo muy suave permite que las muestras de LCR en serie que se obtenga de el mismo ratón a intervalos de 2-3 meses, que minimiza en gran medida el efecto de confusión de la variabilidad entre el ratón en los niveles de Aß o tau, por lo que es posible detectar alteraciones sutiles en el tiempo. En combinación con Aß y ELISA tau, esta técnica será útil para los estudios diseñados para investigar la relación entre los niveles de CSF Aß42 y tau, y su metabolismo en el cerebro en modelos de ratón de Alzheimer. Los estudios en ratones Tg podría proporcionar validación importante en cuanto a la posibilidad de Aß CSF o los niveles de tau para ser utilizados como marcadores biológicos de progresión de la vigilancia de las enfermedades, y para controlar el efecto de las intervenciones terapéuticas. Como los ratones pueden ser sacrificados y los cerebros pueden ser examinadas por los cambios bioquímicos o histológicos, los mecanismos subyacentes a los cambios del LCR puede ser mejor evaluado. Estos datos pueden ser de carácter informativo para la interpretación de los cambios humanos AD CSF.

Watch this Scientific Journal Video about A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse at JoVE.com

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse

Transgénicos (Tg) los modelos de ratón de Alzheimer proporcionan una excelente oportunidad para investigar cómo y por qué los niveles de Aß y tau en el cambio CSF ​​conforme progresa la enfermedad en pacientes humanos. Este sentido, demuestran una refinada técnica de punción cisterna magna para el muestreo de LCR de serie del ratón.

Una técnica para la recolección de serie del líquido cefalorraquídeo de la cisterna magna en el ratón

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid ...

Research

JoVE Journal

Biology

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse 

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Vampiric Isolation of Extracellular Fluid from Caenorhabditis elegans

Vampiric Aislamiento de líquido extracelular de<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

The genetically tractable model organism C. elegans has provided insights into a myriad of biological questions, enabled by its short generation time, ...

Investigación

Biología

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Generación de ratones derivados de células madre pluripotentes inducidas

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells (SSCs) in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells SSCs in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Enriquecimiento de serie de la madre de espermatogonias y células progenitoras (SSC) en Cultura para la derivación de largo plazo de ratones adultos Líneas SSC

Spermatogonial stem and progenitor cells (SSCs) of the testis represent a classic example of adult mammalian stem cells and preserve fertility for nearly ...

RNA Isolation from Mouse Pancreas: A Ribonuclease-rich Tissue

Aislamiento de ARN de ratón Páncreas: Un tejido de ribonucleasa-rica

Isolation of high-quality RNA from ribonuclease-rich tissue such as mouse pancreas presents a challenge.  As a primary function of the pancreas is to aid ...

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

The Infiltration-centrifugation Technique for Extraction of Apoplastic Fluid from Plant Leaves Using Phaseolus vulgaris as an Example

La técnica de infiltración-centrifugación para extracción de apoplástico fluido procedente de hojas de la planta Uso<em&gt; Phaseolus vulgaris</em&gt; Como ejemplo

The apoplast is a distinct extracellular compartment in plant tissues that lies outside the plasma membrane and includes the cell wall. The apoplastic ...

The Assembly and Application of 'Shear Rings': A Novel Endothelial Model for Orbital, Unidirectional and Periodic Fluid Flow and Shear Stress

La Asamblea y la Aplicación de &#39;Shear Anillos&#39;: A Novel endotelial Modelo de Orbital, unidireccional y periódica flujo de fluido y la tensión de cizallamiento

Deviations from normal levels and patterns of vascular fluid shear play important roles in vascular physiology and pathophysiology by inducing adaptive as ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

La Técnica del riñón perfundido aislado del ratón

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

Recolección de tejidos y extracción de ARN de la articulación de la rodilla osteoartrítica humana

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Isolation and Culture of Primary Oral Keratinocytes from the Adult Mouse Palate

Aislamiento y cultivo de queratinocitos orales primarios del paladar del ratón adulto

For years, most studies involving keratinocytes have been conducted using human and mouse skin epidermal keratinocytes. Recently, oral keratinocytes have ...

Nuclei Isolation from Adult Mouse Kidney for Single-Nucleus RNA-Sequencing

Aislamiento de núcleos de riñón de ratón adulto para secuenciación de ARN de un solo núcleo

The kidneys regulate diverse biological processes such as water, electrolyte, and acid-base homeostasis. Physiological functions of the kidney are ...