Name: pressure-polishing pipettes for improved patch-clamp recording
Uploaded: 2008-10-22T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording at JoVE.com

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> تم تطوير تقنية الضغط تلميع بالتعاون مع Lockery ريال. </p>

<p class="jove_step" style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب ماصات </p><p style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام خيوط مجتذب مثل سوتر P - 97 يلهب / براون بولير Microelectrode ، سحب مجموعة من حوالي 10-20 الماصات. </p><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد الزجاج الخاص. نستخدم البورسليكات (BF150 - 86 - 10 ، OD = 1.5 ملم ، ID = 0.86 ملم). مخزن الزجاج بعناية...

<ol>
	<li>Goodman, M. B., Lockery, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure+polishing:+a+method+for+re-shaping+patch+pipettes+during+fire+polishing. .">Pressure polishing: a method for re-shaping patch pipettes during fire polishing. .</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci Methods</em>. <b>100</b>, 13-15 (2000).</li></ol>

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> نحن وضعت أصلا لجعل هذه الطريقة مفيدة لماصات التصحيح ، المشبك تسجيل 2-3 ميكرومتر الخلايا العصبية في <em>C. ايليجانس</em> <sup>1.</sup> هو في الاستخدام الروتيني في المختبر غودمان. ماصات ضغط تلميع نحن ليس فقط لتسجيل صغيرة من <em>C. ايليجانس</em> الخلايا العصبية ، ولكن أيضا من أجل الحصول على macropatch و?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Glass Capillaries</td>
<td>Consumable</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>BF150-85-10 (or similar)</td>
<td>The method works with any type of capillary except those made from quartz.  However, we recommend using capillaries with a filament.</td>
</tr>
<tr>
<td>Inverted Microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Leica</td>
<td>DM IL (or similar)</td>
<td>Any simple inverted microscope will do.  However, it is essential to have sufficient magnification to see pipettes during polishing.  We use a 100x metallurgical lens with a long working distance for this purpose.</td>
</tr>
<tr>
<td>Microforge Kit</td>
<td>Tool</td>
<td>ALA Science</td>
<td>CPM-2</td>
<td>Supplies polishing coil, controller and foot pedal.</td>
</tr>
<tr>
<td>Air pressure source</td>
<td>Tool</td>
<td>ALA Science</td>
<td>PR-60</td>
<td>Accessory for providing high pressure, includes a suitable valve.  Alternatively, compressed air from the building can be used together with a filter/regulator (set to 40 PSI) and a 4-way valve (see below)</td>
</tr>
<tr>
<td>4-way valve</td>
<td>Tool</td>
<td>Cole-Parmer</td>
<td>A-98150-01</td>
<td>Fittings will be needed to couple valve to tubing</td>
</tr>
<tr>
<td>Pipette Holder with Luer Connector</td>
<td>Tool</td>
<td>World Precision Instruments</td>
<td>MPH-6S20</td>
<td>Use a male luer-to-barb fitting to connect pipette holder to high-pressure tubing</td>
</tr>
<tr>
<td>Tygon&#174; tubing</td>
<td>Tool</td>
<td>Cole-Parmer</td>
<td>06408-62</td>
<td>Use this tubing to connect pipette holder to 4-way valve
</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

pressure-polishing pipettes for improved patch-clamp recording

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> الضغط التلميع وسيلة لتشكيل ماصات زجاجية للتسجيل التصحيح ، المشبك. نحن أول من طور هذه الطريقة لانتاج ماصات مناسبة للتسجيل من الصغيرة (&lt;3 م) هيئات الخلية العصبية. الرئيسية الأساسية هي مشابهة لنفخ الزجاج ويجمع بين الضغط الجوي والحرارة لتعديل شكل ماصات التصحيح أعدها مجتذب micropipette التقليدية. ويمكن تطبيقه على ما يسمى لينة (صودا الجير) والثابت النظارات (البورسليكات). ويمكن عموما تلميع الضغط ، والحد من المقاومة ماصة بنسبة 25 ٪ ، دون التقليل من قطر لافتتاح غيض (غودمان وLockery ، 2000). ويمكن تطبيقه على أي نوع تقريبا من الزجاج ويتطلب سوى إضافة صمام الضغط العالي وتركيب لmicroforge. هذا الأسلوب هو ضروري لتسجيل من خلايا ultrasmall (&lt;5 م) ويمكن أن تحسن أيضا على قناة واحدة تسجيل عن طريق تقليل مقاومة ماصة. الشكل السافر ما هو مفيد أيضا لتسجيل المشبك مثقوبة ، حيث أن هذه النتائج التصحيح شكل غيض في فقاعة أكبر ثقب غشاء متاح. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording at JoVE.com

Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording

<p class="jove_content">هذا هو دليل على تعديل شكل micropipettes الزجاج. على وجه التحديد ، وذلك باستخدام الحرارة والضغط الجوي وتوسيع تفتق دون زيادة افتتاح الطرف ، مما يؤدي إلى انخفاض المقاومة ماصة. هذا أمر بالغ الأهمية للحصول على تسجيلات ضوضاء منخفضة من خلايا صغيرة لكنها مفيدة في العديد من التطبيقات.</p>

الضغط تلميع الماصات لتسجيل باتش تحسين المشبك

Pressure-polishing is a method for shaping glass pipettes for patch-clamp recording.  We first developed this method for fabricating pipettes suitable for ...

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx

أساليب لتصحيح تسجيلات السعة المشبك من كاليكس

We demonstrate the basic techniques for presynaptic patch clamp recording at the calyx of Held, a mammalian central nervous system nerve terminal. ...

Patch Clamp Recording of Ion Channels Expressed in  Xenopus Oocytes

التصحيح تسجيل المشبك من القنوات ايون معبرا عنه البويضات القيطم

Since its development by Sakmann and Neher 1, 2, the patch clamp has become established as an extremely useful technique for electrophysiological ...

Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller

جعل التصحيح ، وماصات أقطاب شارب مع بولير برمجة

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in <em>Xenopus</em> oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

أعربت المشبك التصحيح وتقنيات الإرواء لدراسة في قنوات ايون<em> القيطم</em> البويضات

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

مختبر تقنيات العقيم: التحويلات الحجم مع الماصات المصلية وMicropipettors

Microorganisms are everywhere - in the air, soil, and human body as well as on inanimate surfaces like laboratory benches and computer keyboards. The ...

Exploring Arterial Smooth Muscle Kv7 Potassium Channel Function using Patch Clamp Electrophysiology and Pressure Myography

استكشاف الشرياني العضلات الملساء قناة البوتاسيوم Kv7 الدالة باستخدام المشبك التصحيح الكهربية وتخطيط العضل الضغط

Contraction  or relaxation of smooth muscle cells within the walls of resistance arteries  determines the artery diameter and thereby controls flow of ...

Giant Liposome Preparation for Imaging and Patch-Clamp Electrophysiology

إعداد الحويصلية عملاق التصوير والتصحيح، المشبك الكهربية

The reconstitution of ion channels into chemically defined lipid membranes for electrophysiological recording has been a powerful technique to identify ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

قناة واحدة الخلية المرفقة تسجيل التصحيح، المشبك

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

Reconstitution of a Transmembrane Protein, the Voltage-gated Ion Channel, KvAP, into Giant Unilamellar Vesicles for Microscopy and Patch Clamp Studies

إعادة تشكيل البروتين عبر الغشاء، وايون القناة بوابات الجهد، KvAP، إلى العملاق Unilamellar الحويصلات للفحص المجهري وتصحيح الدراسات المشبك

Giant Unilamellar Vesicles (GUVs) are a popular biomimetic system for studying membrane associated phenomena. However, commonly used protocols to grow ...

Implementing Patch Clamp and Live Fluorescence Microscopy to Monitor Functional Properties of Freshly Isolated PKD Epithelium

تنفيذ المشبك التصحيح وايف مضان المجهر لرصد خصائص الوظيفية للالمعزولة حديثا PKD الظهارة

Cyst initiation and expansion during polycystic kidney disease is a complex process characterized by abnormalities in tubular cell proliferation, luminal ...