Name: pressure-polishing pipettes for improved patch-clamp recording
Uploaded: 2008-10-22T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording at JoVE.com

<p> 압력 연마 기법은 SR의 Lockery와 공동으로 개발되었습니다. </p>

<p class="jove_step"> 풀링 pipettes </p><p> 풀러와 같은 필라멘트를 사용하면 셔터는 P - 97 / 브라운 Microelectrode의 풀러 플라밍 약 10-20 pipettes 세트를 가져옵니다. </p><ol><li> 당신의 유리를 선택합니다. 우리는 borosilicate을 (BF150 - 86 - 10, OD = 1.5 mm, ID = 0.86 mm)을 사용합니다. 그것이 깨끗하고 먼지가 무료로 남아 있도록 신중하게 유리를 저장합니다. </li><li> 당기는 프로그램을 디자인합니다. 기본 목표는 응용 프로그램에 따라 달?...

<ol>
	<li>Goodman, M. B., Lockery, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure+polishing:+a+method+for+re-shaping+patch+pipettes+during+fire+polishing. .">Pressure polishing: a method for re-shaping patch pipettes during fire polishing. .</a> <em style='font-style: italic'>J Neurosci Methods</em>. <b>100</b>, 13-15 (2000).</li></ol>

<p> 우리는 원래 <em>C로</em> 2-3 μm의 뉴런에서 패치 - 클램프 녹음 pipettes 유용하게이 방법을 개발 <em>엘레간스</em> <sup>1.</sup> 그것은 굿맨 실험실에서 일상 사용할 수 있습니다. 작은 <em>C.에서뿐만</em> 아니라, 레코딩을위한 우리 압력 폴란드어 pipettes <em>엘레간스의</em> 뉴런뿐만 아니라 Xenopus oocytes의 표현 이온 채널의 macropatch 및 단일 채널 녹음을 얻는. 주어진 팁 - 오프닝 지름은 뭉툭한 형태는 낮은 저항 피펫을 생?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Glass Capillaries</td>
<td>Consumable</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>BF150-85-10 (or similar)</td>
<td>The method works with any type of capillary except those made from quartz.  However, we recommend using capillaries with a filament.</td>
</tr>
<tr>
<td>Inverted Microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Leica</td>
<td>DM IL (or similar)</td>
<td>Any simple inverted microscope will do.  However, it is essential to have sufficient magnification to see pipettes during polishing.  We use a 100x metallurgical lens with a long working distance for this purpose.</td>
</tr>
<tr>
<td>Microforge Kit</td>
<td>Tool</td>
<td>ALA Science</td>
<td>CPM-2</td>
<td>Supplies polishing coil, controller and foot pedal.</td>
</tr>
<tr>
<td>Air pressure source</td>
<td>Tool</td>
<td>ALA Science</td>
<td>PR-60</td>
<td>Accessory for providing high pressure, includes a suitable valve.  Alternatively, compressed air from the building can be used together with a filter/regulator (set to 40 PSI) and a 4-way valve (see below)</td>
</tr>
<tr>
<td>4-way valve</td>
<td>Tool</td>
<td>Cole-Parmer</td>
<td>A-98150-01</td>
<td>Fittings will be needed to couple valve to tubing</td>
</tr>
<tr>
<td>Pipette Holder with Luer Connector</td>
<td>Tool</td>
<td>World Precision Instruments</td>
<td>MPH-6S20</td>
<td>Use a male luer-to-barb fitting to connect pipette holder to high-pressure tubing</td>
</tr>
<tr>
<td>Tygon&#174; tubing</td>
<td>Tool</td>
<td>Cole-Parmer</td>
<td>06408-62</td>
<td>Use this tubing to connect pipette holder to 4-way valve
</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

pressure-polishing pipettes for improved patch-clamp recording

<p class="jove_content"> 압력 연마는 패치 - 클램프 녹음 유리 pipettes을 형성하는 방법이다. 우리가 먼저 작은 (&lt;3m)의 연결을 세포 기관에서 녹화에 적합한 pipettes를 fabricating이 방법을 개발했습니다. 기본 교장 유리 불어와 유사하며 일반 micropipette의 풀러 준비한 패치 pipettes의 모양을 수정하는 공기 압력과 열을 결합되어 있습니다. 이것은 소위 소프트 (소다 석회)와 하드 (borosilicate) 안경에 적용할 수 있습니다. 일반적으로 압력 연마는 팁 오프닝 (굿맨과 Lockery, 2000)의 직경을 감소하지 않고 25 % 피펫 저항을 줄일 수 있습니다. 이것은 유리의 거의 모든 유형에 적용 고압 밸브와 microforge에 맞는만을 추가 요구하실 수 있습니다. 이 기술은 ultrasmall 세포 (&lt;5m)에서 녹음을 위해 필수적이며, 또한 피펫의 저항을 최소화하여 단일 채널 녹음을 향상시킬 수 있습니다. 무딘 모양이 천공 - 패치 클램프 녹음에도 유용합니다 천공에 사용할 수있는 큰 막 물집이 끝 모양 결과 때문이다. </p>

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Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording

<p class="jove_content">이것은 유리 micropipettes의 모양을 수정하는 가이드입니다. 특히, 열 및 공기 압력을 사용하여 테이퍼가 낮은 피펫 저항을 선도 팁 오프닝을 증가하지 않고 확대됩니다. 이것은 작은 세포의 낮은 소음 녹음을 얻는 것이 중요합니다하지만 많은 응용 프로그램에서 유용합니다.</p>

향상된 패치 - 클램프 녹음 압력 연마 Pipettes

Pressure-polishing is a method for shaping glass pipettes for patch-clamp recording.  We first developed this method for fabricating pipettes suitable for ...

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx

칼리에서 패치 클램프 커패시턴스 레코딩을위한 방법

We demonstrate the basic techniques for presynaptic patch clamp recording at the calyx of Held, a mammalian central nervous system nerve terminal. ...

연구

생물학

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Xenopus Oocytes의 표현 이온 채널 패치 클램프 녹음

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프로그래밍 풀러와 패치 - pipettes와 샤프 전극을 만들기

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

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Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

이온 채널 유학을위한 패치 클램프 및 재관류 기법으로 표현<em> Xenopus</em> oocytes

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