intranuclear-microinjection-dna-into-dissociated-adult-mammalian

Intranuclear Microinjection of DNA into Dissociated Adult Mammalian Neurons

Primary neuronal cell cultures are valuable tools to study protein function since they represent a more biologically relevant system compared to ...

National Institutes of Health (NIH)

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-4 &#x6B63;&#x9010;&#x6E10;&#x6210;&#x4E3A;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x708E;&#x75C7;&#x548C;&#x81EA;&#x8EAB;&#x514D;&#x75AB;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5C06; IL-4 &#x5177;&#x6709;&#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x8110;) &#x4E2D;&#x5BF9;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x6216;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-2 (FGF-2&#xFF09; &#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x5E94;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; IL-4 &#x902E;&#x6355;&#x5728; G0 + G1 FGF-2 &#x523A;&#x6FC0;&#x8110;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;Subdiploid &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CA1;&#x6709;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x589E;&#x957F;&#x902E;&#x6355;&#x662F;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4; G0 + G1 &#x671F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x6765;&#x6CA1;&#x6709;&#x8D85;&#x8FC7; 85%&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; p53 &#x548C; p21(Waf1) &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; E IL-4&#xFF0C;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; IL-4 &#x6291;&#x5236;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x63A7;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-4 &#x6291;&#x5236;&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD; p53&#x3001; p21(Waf1)&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1&#x3001; &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F; E &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

IL-4 is emerging as a candidate cytokine for the treatment of inflammatory and autoimmune diseases. We have reported that IL-4 has anti-angiogenic activity and inhibits the growth of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) in response to vascular endothelial growth factor (VEGF) or fibroblast growth factor-2 (FGF-2). Cell cycle analysis of this effect revealed that IL-4 arrests the growth of FGF-2-stimulated HUVEC in G0 + G1 phases. The absence of subdiploid cells showed that it did not induce apoptosis. Growth arrest was dose-dependent, but the percentage of G0 + G1 phase cells never exceeded 85%. An immunoblot analysis demonstrated that expression of p53 and p21(Waf1) was increased and that of cyclin D1 and cyclin E decreased by IL-4. These results show that IL-4 inhibits endothelial cell growth by altering the expression of cell cycle regulatory molecules.

IL-4 inhibits cell cycle progression of human umbilical vein endothelial cells by affecting p53, p21(Waf1), cyclin D1, and cyclin E expression.

4 IL &eacute;merge comme une cytokine candidat pour le traitement de maladies inflammatoires et auto-immunes. Nous avons rapport&eacute; que IL-4 poss&egrave;de une activit&eacute; anti-angiog&eacute;nique et inhibe la croissance des cellules endoth&eacute;liales de veines ombilicales humaines (HUVEC) en r&eacute;ponse &agrave; un facteur de croissance endoth&eacute;lial vasculaire (VEGF) ou facteur de croissance des fibroblastes-2 (FGF-2). Analyse du cycle cellulaire de cet effet a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que 4 IL arr&ecirc;te la croissance des HUVEC stimul&eacute;e par le FGF-2 en phase G0 + G1 phases. L&#39;absence de cellules hypoplo&iuml;des a montr&eacute; qu&#39;il n&#39;a pas induit l&#39;apoptose. Arr&ecirc;t de la croissance a &eacute;t&eacute; dose-d&eacute;pendante, mais le pourcentage de G0 + des cellules en phase G1 n&#39;ont jamais d&eacute;passaient 85 %. Une analyse par immunotransfert a d&eacute;montr&eacute; que l&#39;expression de p53 et p21(Waf1) a &eacute;t&eacute; augment&eacute;e et celle de la cycline D1 et cycline E a diminu&eacute; de IL-4. Ces r&eacute;sultats montrent que IL-4 l&#39;inhibe la croissance des cellules endoth&eacute;liales en modifiant l&#39;expression de mol&eacute;cules r&eacute;gulatrices cycle cellulaire.

IL-4 inhibe la progression du cycle cellulaire des cellules endoth&eacute;liales humaines affectant la p53, p21(Waf1), cyclin D1, et la cycline expression E.

IL-4 hemmt den Ablauf des Zellzyklus von menschlichen Nabelschnur-Endothelzellen durch Einwirkung auf p53, p21 (Waf1), Cyclin D1 und Cyclin E Expression.

IL-4 sta emergendo come una citochina candidato per il trattamento delle malattie infiammatorie e autoimmuni. Abbiamo segnalato che IL-4 ha un&#39;attivit&agrave; anti-angiogenica e inibisce la crescita di cellule endoteliali di vena ombelicale umano (HUVEC) in risposta al fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) o fattore di crescita dei fibroblasti-2 (FGF-2). Analisi del ciclo delle cellule di questo effetto ha rivelato che IL-4 arresti la crescita di FGF-2-stimolato HUVEC G0 + G1 fasi. L&#39;assenza di cellule sia ha mostrato che esso non ha indotto apoptosi. L&#39;arresto di sviluppo era dose-dipendente, ma la percentuale di G0 + cellule in fase G1 mai superato l&#39;85%. Un&#39;analisi di immunoblot ha dimostrato che &egrave; stata aumentata espressione di p53 e p21(Waf1) e quella di cyclin D1 e cyclin E diminuito da IL-4. Questi risultati mostrano che IL-4 inibisce la crescita delle cellule endoteliali alterando l&#39;espressione di molecole regolatrici del ciclo cellulare.

IL-4 inibisce la progressione del ciclo cellulare delle cellule endoteliali di vena ombelicale umana che interessano p53, p21(Waf1), cyclin D1, e ciclina espressione di E.

IL-4 &#x5019;&#x88DC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x708E;&#x75C7;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;IL-4 &#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x304A;&#x308A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x3084;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-2 (FGF-2&#xFF09; &#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (&#x682A;) &#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F; IL-4 FGF 2 &#x523A;&#x6FC0;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE; G0 + G1 &#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x902E;&#x6355;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x3002;&#x4E0D;&#x5728; subdiploid &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#x902E;&#x6355;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x304C; G0 &#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x3060;&#x3063;&#x305F; + G1 &#x671F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C; 85% &#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x305F;&#x3002;P53 &#x304A;&#x3088;&#x3073; p21(Waf1) &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x306E;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; E IL-4 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;IL-4 &#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5236;&#x5FA1;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

IL-4 &#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306F; p53, p21(Waf1), &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; D1 &#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; E &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

IL-4 &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC790;&#xAC00; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4; cytokine&#xB85C; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCF4;&#xACE0; IL-4 &#xC548;&#xD2F0; angiogenic &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xD558; &#xACE0; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF) &#xB610;&#xB294; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 2 (FGF-2)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HUVEC)&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; IL-4 &#xCCB4;&#xD3EC; G0 + G1 HUVEC FGF 2 &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xACC4;. Subdiploid &#xC140;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB294; apoptosis&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC131;&#xC7A5; &#xAC80;&#xAC70; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; G0 &#xBE44;&#xC728; + g 1 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC140; 85%&#xB97C; &#xCD08;&#xACFC; &#xD558;&#xC9C0;. Immunoblot &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xC2DD; p53 &#xBC0F; p21(waf1)&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; cyclin d1&#xC758; cyclin E IL-4&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC; IL-4&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xADDC;&#xC81C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xC5EC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

IL-4 p53, p21(Waf1), cyclin D1, &#xC601;&#xD5A5; &#xBC0F; E &#xC2DD; &#xF06C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

IL-4 se perfila como una citoquina candidato para el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes. Nos han informado que IL-4 tiene actividad anti-angiog&eacute;nica e inhibe el crecimiento de las c&eacute;lulas endoteliales de la vena umbilical humano (HUVEC) en respuesta al factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) o factor de crecimiento de fibroblastos-2 (FGF-2). El an&aacute;lisis del ciclo celular de este efecto revel&oacute; que la IL-4 detiene el crecimiento de HUVEC FGF-2-estimulados en G0 + G1 fases. La ausencia de c&eacute;lulas subdiploid demostr&oacute; que no indujo apoptosis. Detenci&oacute;n de crecimiento dependiente de la dosis, pero el porcentaje de G0 + c&eacute;lulas en fase G1 nunca superaron el 85%. Un an&aacute;lisis de immunoblot demostr&oacute; que la expresi&oacute;n de p53 y p21(Waf1) fue aumentada de ciclina D1 y ciclina E disminuido por IL-4. Estos resultados demuestran que IL-4 inhibe el crecimiento de la c&eacute;lula endotelial alterando la expresi&oacute;n de mol&eacute;culas reguladoras del ciclo celular.

IL-4 inhibe la progresi&oacute;n del ciclo celular de las c&eacute;lulas endoteliales de la vena umbilical humana que afectan a p53, p21(Waf1), ciclina D1, y ciclina expresi&oacute;n E.

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x7531;&#x6D77;&#x4EBA;&#x9178;&#x81F4;&#x6BD2;&#x6027;&#x5728;&#x5927;&#x9F20;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x6F84;&#x6E05;&#x7684; &gamma;-&#x6C28;&#x57FA;&#x4E01;&#x9178; (GABA) &#x8FD0;&#x8F93;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x523A;&#x6FC0;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9499;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30; GABA &#x518D;&#x6444;&#x53D6;&#x548C;&#x9499;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;&#x4E4B;&#x540E;&#x7EA2;&#x85FB;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x7BA1;&#x7406;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; GABA &#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0D;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E; calbindin D-28 K &#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE; GAT 3 &#x8FD0;&#x8F93;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x662F;&#x4E0E;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; (GFAP) &#x5728;&#x6D77;&#x4EBA;&#x9178;&#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E0E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684; S100 &#x86CB;&#x767D;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x6D77;&#x4EBA;&#x9178;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80F6;&#x8D28; GABA &#x8F6C;&#x8FD0;&#x3001; S100 &#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F34;&#x968F;&#x5206;&#x5E03; shift &#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; endfeet &#x671F;&#x95F4;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21; 48 h&#x3002;

&#x4F34;&#x968F;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x8F6C;&#x79FB;&#x80F6;&#x8D28; GABA &#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E; S100 &#x9499;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x6D77;&#x4EBA;&#x9178;&#x81F4;&#x5174;&#x594B;&#x6BD2;&#x6027;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x5927;&#x9F20;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x3002;

The goal of this study was to elucidate the involvement of neuronal and glial calcium-binding proteins in the stimulation of gamma-aminobutyric acid (GABA) transport system by kainate-induced excitotoxicity in the rat retina. We used immunohistochemical method to assess the localization of GABA reuptake and calcium-binding proteins. After systemic administration of kainate, the neuronal GABA transporter does not show an association with calbindin D-28K. However, the localization of the GAT-3 transport system in MÃ¼ller glial cells is closely correlated with the S100 proteins interacting with glial fibrillary acidic protein (GFAP) in response to kainate injury. Furthermore, we demonstrate that kainate-mediated excitotoxicity induced concomitant distribution shift of glial GABA transporter, S100 proteins and GFAP in the distal processes and endfeet of glial cells during the first 48 h.

Concomitant distribution shift of glial GABA transporter and S100 calcium-binding proteins in the rat retina after kainate-induced excitotoxic injury.

L&#39;objectif de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;&eacute;lucider l&#39;implication des prot&eacute;ines de liaison du calcium neuronales et gliales dans la stimulation du syst&egrave;me de transport de l&#39;acide gamma - aminobutyrique (GABA) par l&#39;excitotoxicit&eacute; induite par le kainate dans la r&eacute;tine de rat. Nous avons utilis&eacute; la m&eacute;thode immunohistochimique d&#39;&eacute;valuer la localisation de la recapture de la GABA et les prot&eacute;ines liant le calcium. Apr&egrave;s une administration syst&eacute;mique de ka&iuml;nate, le transporteur de GABA neuronale n&#39;affiche pas une association avec calbindin D-28 K. Cependant, la localisation du syst&egrave;me de transport GAT-3 dans les cellules gliales M&uuml;ller est &eacute;troitement corr&eacute;l&eacute;e avec les prot&eacute;ines S100 interagissant avec la prot&eacute;ine acide fibrillaire gliale (GFAP) en r&eacute;action &agrave; une blessure de ka&iuml;nate. De plus, nous d&eacute;montrons que l&#39;excitotoxicit&eacute; induite par le ka&iuml;nate induite par Maj distribution concomitante du transporteur de GABA gliale, prot&eacute;ines S100 et GFAP dans les processus distales et endfeet des cellules gliales pendant les premi&egrave;res 48 h.

Transfert de distribution concomitante du transporteur de GABA glial et prot&eacute;ines liant le calcium S100 dans la r&eacute;tine de rat apr&egrave;s une l&eacute;sion excitotoxique induit par le ka&iuml;nate.

Die gleichzeitige Verschiebung der Verteilung glialen GABA-Transporter und S100 Calcium-bindenden Proteinen in der Netzhaut Ratte nach Kainat-induzierten exzitotoxische Verletzungen.

L&#39;obiettivo di questo studio &egrave; quello di spiegare il coinvolgimento di un neurone e glial calcio-binding proteins nella stimolazione del sistema di trasporto di acido gamma - aminobutirrico (GABA) dall&#39;eccitotossicit&agrave; indotta da Kainato nella retina di ratto. Abbiamo utilizzato il metodo immunoistochimica per valutare la localizzazione del reuptake del GABA e calcio-binding proteins. Dopo somministrazione sistemica di Kainato, il trasportatore neuronale GABA non mostrano un&#39;associazione con calbindin D-28 K. Tuttavia, la localizzazione del sistema di trasporto GAT-3 nelle cellule gliali M&uuml;ller &egrave; strettamente correlata con le proteine S100 interagendo con glial fibrillary acidic protein (GFAP) in risposta a lesioni Kainato. Inoltre, dimostriamo che eccitotossicit&agrave; mediata Kainato indotta concomitante distribuzione shift del trasportatore gliale di GABA, le proteine S100 e GFAP nei processi distali ed endfeet delle cellule gliale durante le prime 48 h.

Spostamento di distribuzione concomitante di glial GABA trasportatore e S100 calcio-binding proteins in retina di ratto dopo l&#39;infortunio di excitotoxic Kainato-indotta.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178;&#x8A98;&#x767A;&#x5FDC;&#x9700;&#x578B;&#x306B;&#x3088;&#x308B; &gamma;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x916A;&#x9178; (GABA) &#x8F38;&#x9001;&#x7CFB;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;GABA &#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x518D;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x5168;&#x8EAB;&#x6295;&#x4E0E;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; GABA &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30AB;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3; D-28 K &#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;GAT 3 &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; m &uuml; Ller &#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x6027;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; (GFAP) &#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178;&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3084;&#x308A;&#x53D6;&#x308A; S100 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x5FDC;&#x9700;&#x578B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2; GABA &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;S100 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9060;&#x4F4D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; GFAP &#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x5206;&#x5E03;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3068;&#x7D42;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x6700;&#x521D;&#x306E; 48 h &#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2; GABA &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068; excitotoxic &#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178;&#x8A98;&#x767A;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; S100 &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x5206;&#x5E03;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3002;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; kainate &#xC720;&#xB3C4; excitotoxicity &#xC950; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xB9C8;-aminobutyric &#xC0B0; (GABA) &#xC804;&#xC1A1; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xAD50; &#xCE7C;&#xC298; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xB97C; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xD588;&#xB2E4;. GABA &#xC7AC;&#xD761;&#xC218; &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD604;&#xC9C0;&#xD654; &#xD3C9;&#xAC00; immunohistochemical &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Kainate&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801; &#xAD00;&#xB9AC; &#xD6C4; &#xC2E0;&#xACBD; GABA &#xC6B4;&#xC1A1;&#xC5C5; &#xC790;&#xB294; K D-28 calbindin&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBB90;&#xB7EC; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; GAT-3 &#xAD50;&#xD1B5; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; S100 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; glial fibrillary &#xC0B0; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFAP) kainate &#xBD80;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; 48 h &#xB3D9;&#xC548; &#xAD50; GABA &#xC804;&#xC1A1;, S100 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; GFAP &#xC6D0;&#xC2EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBD80;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xD1B5; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; endfeet kainate &#xC911;&#xC7AC; excitotoxicity &#xADF8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xBC30;&#xD3EC; &#xC2DC;&#xD504;&#xD2B8; &#xAD50; GABA &#xC804;&#xC1A1; kainate &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; excitotoxic &#xBD80;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xC950; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; S100 &#xCE7C;&#xC298; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;

El objetivo de este estudio era aclarar la participaci&oacute;n de prote&iacute;nas de uni&oacute;n a calcio neuronales y gliales en la estimulaci&oacute;n del sistema de transporte de &aacute;cido gamma - aminobut&iacute;rico (GABA) por excitotoxicidad kainato-inducida en la retina de la rata. Se us&oacute; el m&eacute;todo de inmunohistoqu&iacute;mica para evaluar la localizaci&oacute;n de la recaptaci&oacute;n de GABA y prote&iacute;nas de uni&oacute;n a calcio. Tras la administraci&oacute;n sist&eacute;mica de kainato, el transportador neuronal de GABA no mostr&oacute; una asociaci&oacute;n con calbindin D - 28 K. Sin embargo, la localizaci&oacute;n del sistema de transporte de GAT-3 en c&eacute;lulas gliales de M&uuml;ller se correlaciona estrechamente con las prote&iacute;nas S100 interactuando con la prote&iacute;na &aacute;cida fibrilar glial (GFAP) en respuesta a la lesi&oacute;n de kainato. Adem&aacute;s, demostramos excitotoxicidad mediada por kainato inducida por cambio de distribuci&oacute;n concomitante del transportador de GABA glial, prote&iacute;nas S100 y GFAP en los procesos distales y endfeet de las c&eacute;lulas gliales durante las primeras 48 h.

Cambio de distribuci&oacute;n concomitante del transportador de GABA glial y prote&iacute;nas de enlace de calcio S100 en la retina de la rata despu&eacute;s de lesi&oacute;n inducida por kainato excitatoria.

&#x867D;&#x7136;&#x795E;&#x7ECF;&#x635F;&#x4F24;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x5411;&#x4E0A;&#x548C;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x8FF7;&#x8D70;&#x4F20;&#x5165;&#x795E;&#x7ECF;&#x7ED3;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; (NG) &#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x5DF2;&#x4E0D;&#x9610;&#x660E;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x662F;&#x5426;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC; Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x8C03;&#x5236;&#x5434;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x5355;&#x65B9;&#x9762;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x5207;&#x65AD;&#x672F;&#x662F;&#x4F7F;&#x7528;&#x96C4;&#x6027;&#x5927;&#x9F20;&#x6765;&#x6267;&#x884C;&#x7684;&#x3002;&#x4E00;&#x5468;&#x540E;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x5207;&#x65AD;&#x672F;&#xFF0C;Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x5F55;&#x9176;&#x6E38;&#x79BB;&#x5434;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x5728;&#x6DF1;&#x6C34;&#x63A7;&#x4EF6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20; (NE)-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x6291;&#x5236;&#x662F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5FFD;&#x7565;&#x4E0D;&#x8BA1;&#x3002;&#x540E;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x5207;&#x65AD;&#x672F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;NE &#x7684;&#x7B54;&#x590D;&#x662F;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x662F;&#x6309;&#x7167; alpha2A/B-&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x53D7;&#x4F53; mRNAs &#x4E0A;&#x8C03;&#x91CF;&#x5316;&#x4F7F;&#x7528;&#x5B9E;&#x65F6;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80BD; Y (NPY) &#x548C;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x7D20; E2 &#x54CD;&#x5E94;&#x4E86;&#x9002;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x6A2A;&#x65AD;&#x5434;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x6539;&#x53D8;&#x7684; NPY &#x53CD;&#x5E94;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x7531;&#x6D88;&#x6781;&#x8026;&#x5408;&#x5230; Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x7684; Y2 &#x53D7;&#x4F53;&#x4E0A;&#x8C03;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x635F;&#x4F24;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x963F;&#x7247;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269; (&#x4E0E; DAMGO &#x6D4B;&#x8BD5;)-Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x6291;&#x5236;&#x4E0E;&#x4E0B;&#x8C03;&#x5FAE;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x8BF1;&#x5BFC; Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x53D8;&#x5434;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x6001;&#x4E0B;&#x7684;&#x9996;&#x6B21;&#x3002;

&#x795E;&#x7ECF;&#x635F;&#x4F24;&#x6539;&#x53D8;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC; Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x8FF7;&#x8D70;&#x4F20;&#x5165;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x7ED3;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;

Although nerve injury is known to up- and down-regulate some metabotropic receptors in vagal afferent neurons of the nodose ganglia (NG), the functional significance has not been elucidated. In the present study, thus, we examined whether nerve injury affected receptor-mediated Ca2+ channel modulation in the NG neurons. In this regard, unilateral vagotomy was performed using male Sprague-Dawley rats. One week after vagotomy, Ca2+ currents were recorded using the whole-cell variant of patch-clamp technique in enzymatically dissociated NG neurons. In sham controls, norepinephrine (NE)-induced Ca2+ current inhibition was negligible. Following vagotomy, however, the NE responses were dramatically increased. This phenomenon was in accordance with up-regulation of alpha2A/B-adrenergic receptor mRNAs as quantified using real-time RT-PCR analysis. In addition, neuropeptide Y (NPY) and prostaglandin E2 responses were moderately augmented in vagotomized NG neurons. The altered NPY response appears to be caused by up-regulation of Y2 receptors negatively coupled to Ca2+ channels. In contrast, nerve injury significantly suppressed opioid (tested with DAMGO)-induced Ca2+ current inhibition with down-regulation of micro-receptors. Taken together, these results demonstrated for the first time that the profile of neurotransmitter-induced Ca2+ channel modulation is significantly altered in the NG neurons under pathophysiological state of nerve injury.

Nerve injury alters profile of receptor-mediated Ca2+ channel modulation in vagal afferent neurons of rat nodose ganglia.

Bien que les l&eacute;sions du nerf sont connue &agrave; haut - et bas-r&eacute;glementer certains r&eacute;cepteurs m&eacute;tabotropique dans des neurones aff&eacute;rents vagues des ganglions inf&Theta;rieur (NG), l&#39;importance fonctionnelle n&#39;a pas &eacute;t&eacute; &eacute;lucid&eacute;. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, par cons&eacute;quent, nous avons examin&eacute; si les l&eacute;sions du nerf touch&eacute; m&eacute;di&eacute;e par les r&eacute;cepteurs Ca2 + canal modulation dans les neurones de NG. &Agrave; cet &eacute;gard, la vagotomie unilat&eacute;rale a &eacute;t&eacute; effectu&eacute;e &agrave; l&#39;aide de rats m&acirc;les Sprague-Dawley. Une semaine apr&egrave;s une vagotomie, courants Ca2 + ont &eacute;t&eacute; enregistr&eacute;es &agrave; l&#39;aide de la variante de cellules enti&egrave;res de la technique du patch-clamp dans les neurones NG enzymatiquement dissoci&eacute;es. Chez les t&eacute;moins de l&#39;imposture, la nor&eacute;pin&eacute;phrine (NE)-inhibition actuelle induite Ca2 + est n&eacute;gligeable. Apr&egrave;s vagotomie, cependant, les r&eacute;ponses NE sont consid&eacute;rablement augment&eacute;s. Ce ph&eacute;nom&egrave;ne a &eacute;t&eacute; conform&eacute;ment &agrave; la r&eacute;gulation des ARNm alpha2A/B-adr&eacute;nergique, tel que quantifi&eacute; &agrave; l&#39;aide de l&#39;analyse par RT-PCR en temps r&eacute;el. En outre, le neuropeptide Y (NPY) et les r&eacute;ponses de la prostaglandine E2 ont &eacute;t&eacute; mod&eacute;r&eacute;ment augment&eacute;es dans les neurones NG vagotomis&eacute;s. La r&eacute;action NPY modifi&eacute;e semble &ecirc;tre caus&eacute;e par une r&eacute;gulation des r&eacute;cepteurs Y2 n&eacute;gativement coupl&eacute;s &agrave; des canaux Ca2 +. En revanche, les l&eacute;sions du nerf supprim&eacute; significativement aux opio&iuml;des (test&eacute; avec DAMGO)-induite par le Ca2 + actuelle inhibition avec r&eacute;gulation &agrave; la baisse de la micro-r&eacute;cepteurs. Pris ensemble, ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent pour la premi&egrave;re fois que le profil d&#39;induite par les neurotransmetteurs Ca2 + modulation canal est modifi&eacute; de fa&ccedil;on importante dans les neurones NG sous &eacute;tat physiopathologique de l&eacute;sion du nerf.

Les l&eacute;sions du nerf alt&egrave;re Voir le profil:: m&eacute;di&eacute;e par les r&eacute;cepteurs Ca2 + canal modulation dans des neurones aff&eacute;rents vagues du ganglion inf&Theta;rieur de rat.

Nervenverletzung Profil ver&#xE4;ndert der Rezeptor-vermittelten Ca2 +-Kanal-Modulation in vagalen afferenten Neuronen der Ratte nodosum Ganglien.

Anche se la lesione del nervo &egrave; noto per up-down-regolano alcuni recettori transmembrana nei neuroni afferenti vagale dei gangli nodoso (NG), il significato funzionale non &egrave; stato chiarito. Nel presente studio, quindi, abbiamo esaminato se la lesione del nervo interessato mediata dal recettore Ca2 + canale modulazione nei neuroni NG. A questo proposito, vagotomia unilaterale &egrave; stata eseguita utilizzando ratti Sprague-Dawley maschi. Una settimana dopo vagotomia, correnti Ca2 + sono state registrate utilizzando la variante di cellule intere di tecnica patch-clamp in neuroni NG enzimaticamente dissociati. Nei controlli di sham, noradrenalina (NE)-inibizione indotta Ca2 + corrente era trascurabile. Dopo vagotomia, tuttavia, le risposte NE notevolmente sono state aumentate. Questo fenomeno era in accordo con up-regolazione del recettore alpha2A/B-adrenergici mRNAs come quantificato mediante analisi di RT-PCR in tempo reale. Inoltre, neuropeptide Y (NPY) e prostaglandina E2 risposte erano moderatamente aumentate nei neuroni NG vagotomized. L&#39;alterata risposta NPY sembra essere causato da up-regulation dei recettori Y2 negativamente accoppiati a canali del Ca2 +. Al contrario, lesioni nervose significativamente soppressa oppioidi (testato con DAMGO)-induced Ca2 + corrente inibizione con down-regulation dei recettori micro. Presi insieme, questi risultati hanno dimostrato per la prima volta che il profilo del neurotrasmettitore-indotta di modulazione canale Ca2 + &egrave; significativamente alterato nei neuroni NG sotto stato fisiopatologico della lesione del nervo.

Lesione del nervo altera il profilo di recettore-mediata Ca2 + canale modulazione nei neuroni afferenti vagale dei gangli nodoso ratto.

&#x795E;&#x7D4C;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;- &#x3068;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x8ABF;&#x6574;&#x3092;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0; (NG) &#x306E;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x610F;&#x7FA9;&#x306F;&#x89E3;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5909;&#x8ABF; NG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x70B9;&#x3067;&#x3001;&#x7247;&#x5074;&#x6027;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x5207;&#x96E2;&#x96C4;&#x6027; Sd &#x7CFB;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x5207;&#x96E2;&#x5F8C;&#x3001;1 &#x9031;&#x9593;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x7684;&#x89E3;&#x96E2;&#x306E; NG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x8A18;&#x9332;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x507D;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3; (NE) &#x3067;-&#x8A98;&#x5C0E; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3054;&#x304F;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x3002;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x5207;&#x96E2;&#x5F8C;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;NE &#x306E;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;.&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x306F; alpha2A/B-&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; Mrna &#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; RT-PCR &#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; Y (NPY) &#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3; E2 &#x53CD;&#x5FDC;&#x9069;&#x5EA6;&#x306B;&#x8FF7;&#x8D70; NG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x5F37;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5426;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x306E; Y2 &#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x5909;&#x8CEA; NPY &#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;(DAMGO &#x3067;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x6E08;&#x307F;&#xFF09; &#x30AA;&#x30D4;&#x30AA;&#x30A4;&#x30C9;&#x795E;&#x7D4C;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6291;&#x5236;-ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x8A98;&#x767A;&#x6027; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5165;&#x308C;&#x66FF;&#x3048;&#x305F; NG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x795E;&#x7D4C;&#x50B7;&#x5BB3;&#x306E;&#x75C5;&#x614B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3002;

&#x795E;&#x7D4C;&#x640D;&#x50B7;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5909;&#x8ABF;&#x306E;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC0C1; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xB300;-&#xBC0F; &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xADDC;&#xC81C; nodose &#xC911;&#xCD94; (NG)&#xC758; vagal &#xC131;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBD80; metabotropic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xD574;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; &#xAC83;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; Ca2 + &#xCC44;&#xB110; &#xBCC0;&#xC870; NG &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;, &#xC77C;&#xBC29;&#xC801;&#xC778; vagotomy &#xB0A8;&#xC131; Sprague-Dawley &#xC950;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;. 1 &#xC8FC;&#xC77C; &#xD6C4; vagotomy, Ca2 + &#xC804;&#xB958; enzymatically &#xCC9C;&#xC5F0;&#xB41C; NG &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; variant&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xB85D; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xC9DC; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;, &#xB178;&#xB974; (&#xB124;&#xBE0C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xCE74;)-&#xC720;&#xB3C4; Ca2 + &#xD604;&#xC7AC; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB294; &#xBB34;&#xC2DC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; vagotomy, &#xB2E4;&#xC74C;, &#xB3D9;&#xBD81;&#xB3D9; &#xC751;&#xB2F5; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; RT-PCR &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815;&#xB7C9;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1; alpha2A/B-&#xC544;&#xB4DC;&#xB808;&#xB0A0;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; Mrnas&#xC758; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, neuropeptide Y (NPY) &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD0C0; &#xAE00;&#xB780; &#xB518; e 2 &#xC751;&#xB2F5; &#xC54C;&#xB9DE;&#xAC8C; vagotomized NG &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC15; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; NPY &#xC751;&#xB2F5; Y2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Ca2 + &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xACB0;&#xD569;&#xC758; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; opioid (DAMGO&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;)&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C;-Ca2 + &#xD604;&#xC7AC; &#xAE08;&#xC9C0; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xACFC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;-&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; Ca2 + &#xCC44;&#xB110; &#xBCC0;&#xC870; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xD06C;&#xAC8C; NG &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; pathophysiological &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC544;&#xB798;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; Ca2 + &#xCC44;&#xB110; &#xBCC0;&#xC870; vagal &#xC131;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC950; nodose &#xC911;&#xCD94;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aunque la lesi&oacute;n del nervio es conocido para arriba - y abajo-regulan algunos receptores metabotr&oacute;picos en neuronas aferentes vagales de los ganglios nodular (NG), la significaci&oacute;n funcional no ha sido aclarada. En el presente estudio, por lo tanto, se examin&oacute; si la lesi&oacute;n del nervio afectado mediada por receptor Ca2 + modulaci&oacute;n del canal en las neuronas de NG. En este sentido, Vagotom&iacute;a unilateral se realiz&oacute; con ratas Sprague-Dawley macho. Una semana despu&eacute;s de Vagotom&iacute;a, corrientes de Ca2 + se registraron con la variante de c&eacute;lulas completas de la t&eacute;cnica de patch-clamp en neuronas de NG enzim&aacute;ticamente disociadas. En los controles de la farsa, norepinefrina (NE)-inhibici&oacute;n inducida Ca2 + actual era insignificante. Tras Vagotom&iacute;a, sin embargo, las respuestas NE se incrementaron dram&aacute;ticamente. Este fen&oacute;meno fue seg&uacute;n la para arriba-regulaci&oacute;n del receptor alpha2A/B-adren&eacute;rgico mRNAs cuantificados usando an&aacute;lisis de RT-PCR en tiempo real. Adem&aacute;s, neurop&eacute;ptido Y (NPY) y prostaglandina E2 respuestas fueron moderadamente aumentadas en las neuronas de NG vagotomized. La respuesta alterada del NPY parece deberse a la para arriba-regulaci&oacute;n de receptores Y2 negativamente juntada a los canales de Ca2 +. Por el contrario, lesi&oacute;n del nervio suprimi&oacute; significativamente opi&aacute;ceos (probado con DAMGO)-inducida por Ca2 + inhibici&oacute;n actual con regulaci&oacute;n de micro-receptores. Tomados en conjunto, estos resultados demuestran por primera vez que el perfil del neurotransmisor-inducida Ca2 + modulaci&oacute;n del canal est&aacute; alterado en las neuronas NG bajo estado fisiopatol&oacute;gico de lesi&oacute;n del nervio.

Lesi&oacute;n del nervio altera el perfil de mediada por receptor Ca2 + modulaci&oacute;n del canal en las neuronas aferentes vagales de ganglios nodular de rata.

&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#xFF0C;&#x652F;&#x914D;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x751F;&#x6B96;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76C6;&#x8154;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; (MPG) &#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; colocalized &#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x80F6;&#x56CA;&#x5185;&#x3002;MPG &#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D7;&#x5230;&#x6B67;&#x89C6;&#x4ECE;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x7531;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x4F4E;&#x7535;&#x538B;-&#x6FC0;&#x6D3B; Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; T &#x578B; alpha1H &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x548C;&#x4F4E;&#x95E8;&#x69DB;&#x7684;&#x5CF0;&#x503C;&#x4EE3;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x7535;&#x538B;&#x6FC0;&#x6D3B; (HVA) Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x79CD;&#x7FA4;&#x7684; MPG &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x4ECD;&#x7136;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89E3;&#x5256;&#x51FA; HVA Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x4F7F;&#x7528;&#x836F;&#x7406;&#x5B66;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; MPG &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6240;&#x8F7D;&#x8A8A;&#x672C;&#x7F16;&#x7801;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x5DF2;&#x77E5; HVA Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53; &#xFF08;alpha1B&#x3001; alpha1C&#x3001; alpha1D &#x548C; alpha1E&#xFF09;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86; alpha1A&#x3002;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#x53CA;&#x836F;&#x7406;&#x5B66;&#x6B27;&#x7C73;&#x8304; agatoxin IVA (1 microM) &#x8BC1;&#x5B9E; MPG &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7F3A;&#x4E4F; alpha1A Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684; MPG HVA Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x3002;&#x6B27;&#x7C73;&#x8304;-&#x828B;&#x87BA;&#x6BD2;&#x7D20; GVIA &#x654F;&#x611F; N &#x578B; (alpha1B) &#x7535;&#x6D41;&#x603B; Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x6784;&#x6210; 57 + /-5%(n = 9) &#x548C; 60 + /-3%(n = 6)&#x3001; &#x5206;&#x522B;&#x4E3A;&#x4F55; &#xFF1B;&#x5C3C;&#x83AB;&#x5730;&#x5E73;&#x654F;&#x611F; L &#x578B; &#xFF08;alpha1C &#x548C; alpha1D&#xFF09; &#x7535;&#x6D41; + /-4 %17 &#x548C; 14 + /-2%&#xFF0C;&#x7EC4;&#x6210;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A;&#x4F55; &#xFF1B;&#x548C;&#x5C3C;&#x83AB;&#x5730;&#x5E73;&#x6297;&#x53CA;&#x6B27;&#x7C73;&#x8304;-&#x828B;&#x87BA;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8010; GVIA R &#x578B;&#x7535;&#x6D41;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; + /-3%&#x7684; 25 &#x548C; 22 + /-2%&#x3002;R &#x578B; Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x90FD;&#x5BF9; NiCl2 &#x654F;&#x611F; (IC50 = 22 + /-0.1 microM&#xFF09; &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5411; SNX-482&#xFF0C;&#x53EF;&#x5230;&#x5148;&#x5929; (IC50 = 76 + /-0.4 nM&#xFF09; &#x963B;&#x6B62;&#x4EBA;&#x80DA;&#x80BE; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; alpha1E/beta2a/alpha2delta Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF; MPG &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5206;&#x4EAB; HVA Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;

&#x9AD8;&#x7535;&#x538B;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9499;&#x901A;&#x9053;&#x5728;&#x652F;&#x914D;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x751F;&#x6B96;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x76C6;&#x8154;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x3002;

Among the autonomic ganglia, major pelvic ganglia (MPG) innervating the urogenital system are unique because both sympathetic and parasympathetic neurons are colocalized within one ganglion capsule. Sympathetic MPG neurons are discriminated from parasympathetic ones by expression of low voltage-activated Ca2+ channels that primarily arise from T-type alpha1H isoform and contribute to the generation of low-threshold spikes. Until now, however, expression profiles of high voltage-activated (HVA) Ca2+ channels in these two populations of MPG neurons remain unknown. Thus, in the present study, we dissected out HVA Ca2+ channels using pharmacological and molecular biological tools. Reverse transcription-polymerase chain reaction analysis showed that MPG neurons contained transcripts encoding all of the known HVA Ca2+ channel isoforms (alpha1B, alpha1C, alpha1D and alpha1E), with the exception of alpha1A. Western blot analysis and pharmacology with omega-agatoxin IVA (1 microM) confirmed that MPG neurons lack the alpha1A Ca2+ channels. Unexpectedly, the expression profile of HVA Ca2+ channel isoforms was identical in the sympathetic and parasympathetic neurons of the MPG. Of the total Ca2+ currents, omega-conotoxin GVIA-sensitive N-type (alpha1B) currents constituted 57 +/- 5% (n = 9) and 60 +/- 3% (n = 6), respectively; nimodipine-sensitive L-type (alpha1C and alpha1D) currents made up 17 +/- 4% and 14 +/- 2%, respectively; and nimodipine-resistant and omega-conotoxin GVIA-resistant R-type currents were 25 +/- 3% and 22 +/- 2%, respectively. The R-type Ca2+ currents were sensitive to NiCl2 (IC50 = 22 +/- 0.1 microM) but not to SNX-482, which was able to potently (IC50 = 76 +/- 0.4 nM) block the recombinant alpha1E/beta2a/alpha2delta Ca2+ currents expressed in human embryonic kidney 293 cells. Taken together, our data suggest that sympathetic and parasympathetic MPG neurons share a similar but unique profile of HVA Ca2+ channel isoforms.

Expression profiles of high voltage-activated calcium channels in sympathetic and parasympathetic pelvic ganglion neurons innervating the urogenital system.

Parmi les ganglions autonomes, principale ganglions pelviennes (MPG) innervant le syst&egrave;me urog&eacute;nital sont uniques parce que les neurones sympathiques et parasympathiques sont log&eacute;es au sein de la capsule d&#39;un ganglion. Les neurones sympathiques MPG sont discrimin&eacute;s du parasympathique ceux par expression de basses tension-lanc&eacute;s canaux Ca2 + qui principalement d&eacute;coulent de l&#39;isoforme alpha1H type T et contribuer &agrave; la production de pointes de bas seuil. Jusqu&#39;&agrave; pr&eacute;sent, cependant, les profils d&#39;expression de la hautes tension-lanc&eacute;s (HVA) canaux Ca2 + dans ces deux populations de neurones MPG demeurent inconnus. Ainsi, dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, nous avons diss&eacute;qu&eacute; des canaux Ca2 + de HVA &agrave; l&#39;aide d&#39;outils biologiques mol&eacute;culaires et pharmacologiques. Transcription inverse-amplification PCR analyse a montr&eacute; que les transcriptions de neurones contenues MPG tous du connu HVA Ca2 + codage canal isoformes (alpha1B, alpha1C, alpha1D et alpha1E), &agrave; l&#39;exception d&#39;alpha1A. Analyse par Western blot et pharmacologie avec om&eacute;ga-agatoxin IVA (1 microM) a confirm&eacute; que les neurones MPG n&#39;ont pas les canaux Ca2 + alpha1A. Contre toute attente, le profil d&#39;expression des isoformes de canal HVA Ca2 + a &eacute;t&eacute; identique dans les neurones sympathiques et parasympathiques de la MPG. Les courants Ca2 + totales, courants d&#39;om&eacute;ga-conotoxine GVIA sensibles type N (alpha1B) constituent 57 +/-5 % (n = 9) et 60 &plusmn; 3 % (n = 6), respectivement ; courants de (alpha1C et alpha1D) type L nimodipine sensibles compos&eacute;s de 17 &plusmn; 4 % et 14 + /-2 %, respectivement ; et r&eacute;sistant &agrave; la nimodipine et om&eacute;ga-conotoxine GVIA r&eacute;sistant type R courants &eacute;taient de 25 &plusmn; 3 % et 22 &plusmn; 2 %, respectivement. Les courants Ca2 + de type R ont &eacute;t&eacute; sensibles &agrave; NiCl2 (IC50 = 22 +/-0.1 microM) mais pas de SNX-482, qui put puissamment (IC50 = 76 +/-0,4 nM) bloquer les courants Ca2 + alpha1E/beta2a/alpha2delta recombinants exprim&eacute;s dans les cellules humaines embryonnaires de rein 293. Ensemble, nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les neurones sympathiques et parasympathiques du MPG partagent un profil similaire mais unique de canal isoformes de HVA Ca2 +.

Profils d&#39;expression des canaux activ&eacute;s par tension &eacute;lev&eacute;e en calcium dans les neurones sympathiques et parasympathiques ganglionnaires pelviens innervant le syst&egrave;me urog&eacute;nital.

Unter den autonomen Ganglien sind gro&szlig;e Becken Ganglien (MPG) nervenst&auml;rkend Urogenitale System eindeutig, da sowohl sympathische und parasympathische Neuronen innerhalb einer Ganglion Kapsel colocalized sind. Sympathische MPG Neuronen sind von parasympathischen diejenigen durch Ausdruck der niedrigen Spannung aktiviert Ca2 + Kan&auml;le diskriminiert werden, die in erster Linie vom T-Typ-alpha1H-Isoform entstehen und tragen zu der Generation von niedrigschwelligen Spikes. Bis jetzt bleiben jedoch Ausdruck Profile von hoher Spannung aktiviert (HVA) Ca2 + Kan&auml;le in diese zwei Populationen von MPG Neuronen unbekannt. Daher in der vorliegenden Studie seziert wir heraus HVA Ca2 + Kan&auml;le mit pharmakologischen und molekularen biologischen Tools. Reverse Transkription-Polymerase-Kettenreaktion-Analyse zeigte, dass MPG Neuronen enthalten Transkripte Codierung alle der bekannten HVA Ca2 +--Isoformen (alpha1B, alpha1C, alpha1D und alpha1E), mit Ausnahme von alpha1A Kanal. Western-Blot-Analyse und Pharmakologie mit Omega-Agatoxin IVA (1 MicroM) best&auml;tigt, dass MPG Neuronen die alpha1A Ca2 + Kan&auml;le fehlen. Unerwartet war das Profil Ausdruck des HVA Ca2 + Kanal Isoformen in den sympathischen und parasympathischen Neuronen der MPG identisch. Der Gesamt Ca2 + Str&ouml;me, Omega-Conotoxin GVIA-Sensitive N-Typ (alpha1B) Str&ouml;mungen bildeten 57 +/-5 % (n = 9) und 60 +/-3 % (n = 6); Nimodipin-Sensitive L-Typ (alpha1C und alpha1D) Str&ouml;mungen 17 +/-4 % und 14 +/-2 %, gebildet; und Nimodipin-best&auml;ndig und Omega-Conotoxin GVIA s&auml;urefeste R-Typ Str&ouml;mungen waren 25 +/-3 % und 22 +/-2 %, beziehungsweise. Die R-Typ Ca2 +-Str&ouml;me waren sensibel auf NiCl2 (IC50 = 22 +/-0,1 MicroM) aber nicht zu SNX-482, die konnte dabei wirksam (IC50 = 76 +/-0,4 nM) blockieren die rekombinanten alpha1E/beta2a/alpha2delta Ca2 + Str&ouml;mungen in menschlichen embryonalen Nierenzellen 293 ausgedr&uuml;ckt. Zusammen genommen, zufolge unsere Daten sympathische und parasympathische MPG Neuronen eine &auml;hnliche aber eindeutige Profil der HVA-Ca2 +-Kanal-Isoformen teilen.

Ausdruck Profile und hohe Spannung aktiviert Kalzium-Kan&auml;le in sympathische und parasympathische Becken Ganglion Neuronen nervenst&auml;rkend Urogenitale System.

Tra i gangli autonomici, principali gangli pelvici (MPG) che innerva il sistema urogenitale sono unici perch&eacute; i neuroni del simpatici e parasimpatici sono colocalized all&#39;interno della capsula di un ganglio. Simpatici neuroni MPG sono discriminati dal parasimpatico quelli dall&#39;espressione di basse tensione-attivato Ca2 + canali che principalmente derivano da T-tipo alpha1H isoform e contribuiscono alla generazione di picchi di bassa soglia. Fino ad ora, tuttavia, profili di espressione di alte tensione-attivato (HVA) Ca2 + canali in queste due popolazioni di neuroni MPG rimangono sconosciuti. Cos&igrave;, nel presente studio, abbiamo sezionato fuori HVA Ca2 + canali utilizzando strumenti biologici farmacologici e molecolari. Analisi di reverse transcription-polymerase chain reaction ha mostrato che le trascrizioni di neuroni contenuti MPG codifica tutti di noto HVA Ca2 + canale isoforme (alpha1B, alpha1C, alpha1D e alpha1E), con l&#39;eccezione di alpha1A. Analisi Western blot e farmacologia con omega-agatoxin IVA (1 microM) ha confermato che i neuroni MPG mancano i canali Ca2 + alpha1A. Inaspettatamente, il profilo di espressione di HVA Ca2 + canale isoforme era identico nei neuroni simpatici e parasimpatici del MPG. Delle correnti Ca2 + totale, correnti di omega-conotossina GVIA sensibili N-tipo (alpha1B) costituivano 57 + /-5% (n = 9) e 60 + /-3% (n = 6), rispettivamente; Nimodipine sensibili L (alpha1C e alpha1D) correnti di tipo compone di 17 + 4% e 14 &plusmn; 2%, rispettivamente; e nimodipina-resistente e correnti di tipo R GVIA-resistente omega-conotossina erano 25 + /-3% e 22 + /-2%, rispettivamente. Le correnti di R-type Ca2 + sono stati sensibili a NiCl2 (CL50 = 22 + /-0,1 microM) ma non a SNX-482, che era in grado di potentemente (CL50 = 76 + /-0,4 nM) bloccare l&#39;alpha1E/beta2a/alpha2delta Ca2 + correnti ricombinante espresse in cellule renali embrionali umane 293. Presi insieme, i nostri dati suggeriscono che i neuroni MPG simpatici e parasimpatici condividono un profilo simile ma unico di HVA Ca2 + canale isoforme.

Profili di espressione dei canali del calcio attivati dal voltaggio elevato nei neuroni del ganglio pelvico simpatico e parasimpatico innervano il sistema urogenitale.

&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x7BC0;&#x9593;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x9AA8;&#x76E4;&#x795E;&#x7D4C; (MPG) &#x306F;&#x4E00;&#x610F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;MPG &#x306E;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x4E3B;&#x306B; T &#x578B; alpha1H &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x304B;&#x3089;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x4F4E;&#x95BE;&#x5024;&#x306E;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x4F4E;&#x96FB;&#x5727;&#x4F5C;&#x52D5;&#x3057;&#x305F; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3082;&#x306E;&#x304B;&#x3089;&#x5DEE;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ECA;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x96FB;&#x5727;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#xFF08;HVA&#xFF09; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3; MPG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3046;&#x3061;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30FB;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; HVA ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x89E3;&#x5256;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; HVA ca 2 + &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; mpg &#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x6210;&#x7E3E;&#x8A3C;&#x660E;&#x66F8;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E; alpha1A &#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; (alpha1B&#x3001;alpha1C&#x3001;alpha1D&#x3001;alpha1E) &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x897F;&#x90E8;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30AA;&#x30E1;&#x30AC; &#x30FB; &#x30A2;&#x30AC;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; IVA (1 microM) &#x78BA;&#x8A8D; MPG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; alpha1A ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7A81;&#x7136;&#x3001;HVA ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;mpg &#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x540C;&#x4E00;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7DCF; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x30B3;&#x30CE;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; GVIA &#x654F;&#x611F;&#x306A; N &#x578B; (alpha1B) &#x96FB;&#x6D41;&#x69CB;&#x6210; 57 &plusmn; 5% (n = 9) &#x3068; 60 &plusmn; 3% (n = 6)&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;;17 +/-4% &#x3068; &plusmn; 2 %14 &#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x4F5C;&#x3063;&#x305F;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A; L &#x578B; (alpha1C &#x3068; alpha1D) &#x96FB;&#x6D41;;&#x767A;&#x75C7;&#x8010;&#x6027;&#x3068;&#x30B3;&#x30CE;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; GVIA &#x62B5;&#x6297; R &#x578B;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; 25 &plusmn; 3%&#x3001;&plusmn; 2 %22&#x3002;R &#x578B; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41; NiCl2 &#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3060;&#x3063;&#x305F; &#xFF08;IC50 = 22 &plusmn; 0.1 microM) &#x3057;&#x304B;&#x3057; SNX 482 &#x306B;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x5F37;&#x529B; &#xFF08;IC50 = 76 &plusmn; 0.4 nM) &#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x814E;&#x81D3; 293 &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; alpha1E/beta2a/alpha2delta ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E; MPG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; HVA ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6CCC;&#x5C3F;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9AA8;&#x76E4;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9AD8;&#x96FB;&#x5727;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3002;

&#xC790;&#xC728; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50;&#xAC10; &#xBC0F; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808;&#xC758; &#xCEA1;&#xC290; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; colocalized &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB1E8; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; innervating &#xC8FC;&#xC694; &#xACE8;&#xBC18; &#xC2E0;&#xACBD; (MPG) &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACF5;&#xAC10; MPG &#xB274;&#xB7F0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC804;&#xC555; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Ca2 + &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC8FC;&#xB85C; T &#xD615; alpha1H isoform&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xC2A4;&#xD30C;&#xC774;&#xD06C;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; parasympathetic &#xAC83;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0;,, &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xC555; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; (HVA) Ca2 + &#xCC44;&#xB110; MPG &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC758;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC; HVA Ca2 + &#xCC44;&#xB110; &#xC57D;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xD574; &#xBD80;. &#xC5ED; &#xC804;&#xC0AC; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751; &#xBD84;&#xC11D; MPG &#xB274;&#xB7F0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C;&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; HVA Ca2 +&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; isoforms&#xB97C; alpha1A &#xC81C;&#xC678;&#xD55C; (alpha1B, alpha1C, alpha1D &#xBC0F; alpha1E) &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC624;&#xBA54;&#xAC00; agatoxin&#xC640; &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559; IVA (1 microM) MPG &#xB274;&#xB7F0; alpha1A Ca2 + &#xCC44;&#xB110; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C;, HVA Ca2 + &#xCC44;&#xB110; isoforms &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC740; MPG&#xC758; &#xAD50;&#xAC10; &#xBC0F; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCD1D; Ca2 + &#xC804;&#xB958;, &#xC624;&#xBA54;&#xAC00; conotoxin GVIA &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; N &#xD615; (alpha1B) &#xC804;&#xB958; &#xAD6C;&#xC131; 57 &plusmn; 5% (n = 9) 60 &plusmn; 3% (n = 6), &#xAC01;&#xAC01;; nimodipine &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; L &#xD0C0;&#xC785; (alpha1C &#xBC0F; alpha1D) &#xC804;&#xB958; &#xAC01;&#xAC01;; 17 &plusmn; 4% &#xBC0F; 14 &plusmn; 2%&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; nimodipine &#xC800;&#xD56D; &#xBC0F; &#xC624;&#xBA54;&#xAC00; conotoxin GVIA &#xC800;&#xD56D; R &#xD615; &#xC804;&#xB958; 25 &plusmn; 3%&#xC640; 22 &plusmn; 2%&#xB97C; &#xAC01;&#xAC01; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4;. R &#xD615; Ca2 + &#xC804;&#xB958; &#xD588;&#xB2E4; Nicl2&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; (IC50 = 0.1 microM + 22) &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; SNX-482, &#xD558;&#xB294; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; potently (IC50 = 0.4 + 76 nM) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC2E0;&#xC7A5; 293 &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; alpha1E/beta2a/alpha2delta Ca2 + &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xAD50;&#xAC10; &#xBC0F; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; MPG &#xB274;&#xB7F0; HVA Ca2 + &#xCC44;&#xB110; isoforms &#xBE44;&#xC2B7;&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACE0;&#xC720; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC744; &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DD; &#xAD50;&#xAC10; &#xBC0F; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xACE8;&#xBC18; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBE44;&#xB1E8; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; innervating&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xC555; &#xD65C;&#xC131; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;.

Entre los ganglios auton&oacute;micos, principales ganglios p&eacute;lvicos (MPG) inervan el sistema urogenital son &uacute;nicos porque las neuronas tanto simp&aacute;ticas y parasimp&aacute;ticas son colocalized dentro de la c&aacute;psula de un ganglio. Neuronas simp&aacute;ticas de MPG son discriminadas de parasimp&aacute;tico que por expresi&oacute;n de bajos voltaje-Ca2 + canales activados que principalmente provienen de la isoforma alpha1H de tipo T y contribuir a la generaci&oacute;n de espigas de bajo umbral. Hasta ahora, sin embargo, los perfiles de expresi&oacute;n de altos voltaje (HVA) Ca2 + canales activados en estas dos poblaciones de neuronas MPG siguen siendo desconocidos. As&iacute;, en el presente estudio, diseca HVA Ca2 + canales utilizando herramientas biol&oacute;gicas moleculares y farmacol&oacute;gicas. An&aacute;lisis de la reacci&oacute;n en cadena reversa de la transcripci&oacute;n-polimerasa demostr&oacute; que las transcripciones de las neuronas que contienen MPG codificaci&oacute;n todos del conocido HVA Ca2 + canal isoformas (alpha1B, alpha1C, alpha1D y alpha1E), con la excepci&oacute;n de alpha1A. An&aacute;lisis de Western blot y Farmacolog&iacute;a con omega-agatoxin IVA (1 microM) confirm&oacute; que las neuronas MPG carecen de los canales Ca2 + alpha1A. Inesperadamente, el perfil de expresi&oacute;n de las isoformas de canal HVA Ca2 + era id&eacute;ntico en las neuronas simp&aacute;ticas y parasimp&aacute;ticas del MPG. De las corrientes totales de Ca2 +, corrientes de omega-Conotoxina GVIA sensibles tipo N (alpha1B) constituyeron 57 +/-5% (n = 9) y 60 +-3% (n = 6), respectivamente; (nimodipina sensible tipo L alpha1C y alpha1D) las corrientes compuestas por 17 +/-4% y 14 +-2%, respectivamente; y resistente a la nimodipina y corrientes de R-type GVIA-resistente omega-Conotoxina fueron 25 +-3% y 22 +-2%, respectivamente. Las corrientes de Ca2 + de tipo R fueron sensibles a NiCl2 (IC50 = 22 +/-0.1 microM) pero no a SNX-482, que fue capaz de potentemente (IC50 = 76 + /-0,4 nM) bloquear las alpha1E/beta2a/alpha2delta Ca2 + corrientes recombinantes expresadas en c&eacute;lulas de ri&ntilde;&oacute;n embrionario humano 293. Tomados juntos, nuestros datos sugieren que las neuronas simp&aacute;ticas y parasimp&aacute;ticas de MPG comparten un perfil similar pero &uacute;nico de HVA Ca2 + canal isoformas.

Perfiles de expresi&oacute;n de los canales de calcio activados por voltaje alto en las neuronas del ganglio p&eacute;lvico simp&aacute;ticas y parasimp&aacute;ticas inervan el sistema urogenital.

&#x5982; 2-arachidonylglycerol (2 &#x94F6;) Endocannabinoids (eCB) &#x662F;&#x8102;&#x8D28;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5408;&#x6210;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6839;&#x636E; CB(1) &#x5927;&#x9EBB;&#x53D7;&#x4F53; (CB(1)R) &#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2;&#x3002;&#x8FD9;&#x9006;&#x884C;&#x7684;&#x4F20;&#x8F93;&#x662F;&#x57FA;&#x7840;&#x77ED;&#x671F;&#x548C;&#x957F;&#x671F;&#x4E00;&#x8BCD;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5185;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x7684;&#x51E0;&#x79CD;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6784;&#x9020;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5B64;&#x7ACB;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x53EF;&#x5728;&#x51CF;&#x5C11;&#x3001; &#x7A7A;&#x95F4;&#x7D27;&#x51D1;&#x3001; &#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x739B;&#x94A2;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7814;&#x7A76;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7EA7;&#x8054;&#x6B27;&#x6D32;&#x592E;&#x884C;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x9020;&#x5B8C;&#x6210;&#x6B27;&#x6D32;&#x592E;&#x884C;&#x751F;&#x4EA7;/&#x8C03;&#x52A8;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x987A;&#x5E8F;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3002;&#x5F02;&#x6E90;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x6B27;&#x6D32;&#x592E;&#x884C;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#xFF1A; &#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53; 5a (mGluR5a) &#x8377;&#x9A6C; 2b&#x3001; &#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F;&#x8102;&#x80AA;&#x9176; alpha &#x548C; CB (1) R.&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;l-&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x5E94;&#x7528; 2 &#x94F6;&#x8DDF; CB (1) R.&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5FEB;&#x901F;&#x9176;&#x6CD5;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x8C03;&#x5236;&#x7684; N &#x578B;&#x7ECF;&#x901A;&#x9053;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; CB (1) R.&#x4F7F;&#x7528;&#x5206;&#x5B50;&#x89E3;&#x5256;&#x548C;&#x836F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x5546;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684; mGluR5a &#x7ED3;&#x679C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x91CD;&#x8FF0;&#x9006;&#x884C;&#x6B27;&#x6D32;&#x592E;&#x884C;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x5916;&#x56F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8981;&#x7D20;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x6280;&#x672F;&#x751F;&#x7406;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x751F;&#x4EA7;/&#x8C03;&#x52A8;&#x7684;&#x6B27;&#x6D32;&#x592E;&#x884C;&#x3002;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5019;&#x9009;&#x5206;&#x5B50;&#x8DE8;&#x819C;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x6B27;&#x6D32;&#x592E;&#x884C;&#x4EA4;&#x901A;&#x4FBF;&#x5229;&#x3002;

&#x5206;&#x5B50;&#x91CD;&#x5EFA;&#x4ECB;&#x5BFC; mGluR5a endocannabinoid &#x4FE1;&#x53F7;&#x5355;&#x4E00;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EA7;&#x8054;&#x3002;

Endocannabinoids (eCB) such as 2-arachidonylglycerol (2-AG) are lipid metabolites that are synthesized in a postsynaptic neurons and act upon CB(1) cannabinoid receptors (CB(1)R) in presynaptic nerve terminals. This retrograde transmission underlies several forms of short and long term synaptic plasticity within the CNS. Here, we constructed a model system based on isolated rat sympathetic neurons, in which an eCB signaling cascade could be studied in a reduced, spatially compact, and genetically malleable system. We constructed a complete eCB production/mobilization pathway by sequential addition of molecular components. Heterologous expression of four components was required for eCB production and detection: metabotropic glutamate receptor 5a (mGluR5a), Homer 2b, diacylglycerol lipase alpha, and CB(1)R. In these neurons, application of l-glutamate produced voltage-dependent modulation of N-type Ca(2+) channels mediated by activation of CB(1)R. Using both molecular dissection and pharmacological agents, we provide evidence that activation of mGluR5a results in rapid enzymatic production of 2-AG followed by activation of CB(1)R. These experiments define the critical elements required to recapitulate retrograde eCB production and signaling in a single peripheral neuron. Moreover, production/mobilization of eCB can be detected on a physiologically relevant time scale using electrophysiological techniques. The system provides a platform for testing candidate molecules underlying facilitation of eCB transport across the plasma membrane.

Molecular reconstruction of mGluR5a-mediated endocannabinoid signaling cascade in single rat sympathetic neurons.

Les endocannabino&#xEF;des (BCE) comme le 2-arachidonylglyc&#xE9;rol (2-AG) sont des m&#xE9;tabolites lipidiques qui sont synth&#xE9;tis&#xE9;es dans un neurone post-synaptique et agissent sur des r&#xE9;cepteurs cannabino&#xEF;des CB (1) (CB (1) R) dans les terminaisons nerveuses pr&#xE9;synaptiques. Cette transmission r&#xE9;trograde sous-tend plusieurs formes de court et &#xE0; long terme la plasticit&#xE9; synaptique dans le SNC. Ici, nous avons construit un syst&#xE8;me de mod&#xE8;le bas&#xE9; sur des neurones de rat isol&#xE9;s sympathiques, dans lesquels une cascade de signalisation BCe pourraient &#xEA;tre &#xE9;tudi&#xE9;s dans un r&#xE9;duit, le syst&#xE8;me spatialement compact et g&#xE9;n&#xE9;tiquement mall&#xE9;able. Nous avons construit une compl&#xE8;te BCe production / mobilisation voie par addition successive de composants mol&#xE9;culaires. L&#x26;#39;expression h&#xE9;t&#xE9;rologue de quatre &#xE9;l&#xE9;ments a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour la production de BCE et de d&#xE9;tection: m&#xE9;tabotropique 5a r&#xE9;cepteur du glutamate (mGluR5a), Homer 2b, diacylglyc&#xE9;rol lipase alpha, et CB (1) R. Dans ces neurones, l&#x26;#39;application de la l-glutamate d&#xE9;pendant de la tension produite de modulation de type N Ca (2 +) &#xE0; m&#xE9;diation par les canaux d&#x26;#39;activation de la BC (1) R. Utilisant &#xE0; la fois la dissection mol&#xE9;culaire et des agents pharmacologiques, nous apportons la preuve que l&#x26;#39;activation des r&#xE9;sultats mGluR5a dans la production enzymatique rapide de 2-AG suivie d&#x26;#39;une activation de la CB (1) R. Ces exp&#xE9;riences d&#xE9;finissent les &#xE9;l&#xE9;ments essentiels n&#xE9;cessaires pour r&#xE9;capituler r&#xE9;trograde de production BCE et de signalisation dans un seul neurone p&#xE9;riph&#xE9;rique. En outre, la production / la mobilisation de la BCE peut &#xEA;tre d&#xE9;tect&#xE9; sur une &#xE9;chelle de temps physiologiquement pertinente en utilisant des techniques &#xE9;lectrophysiologiques. Le syst&#xE8;me fournit une plate-forme pour tester des mol&#xE9;cules candidates qui sous-tendent la facilitation de la BCE le transport &#xE0; travers la membrane plasmique.

Reconstruction mol&#xE9;culaire de Cascade endocannabino&#xEF;de MGluR5a la signalisation m&#xE9;di&#xE9;e dans les neurones sympathiques seul rat

Endocannabinoide (EZB) wie 2-Arachidonylglyzerol (2-AG) sind Lipid Stoffwechselprodukte, die in ein postsynaptisches Neuronen synthetisiert und danach handeln CB1 Cannabinoid-Rezeptoren (CB(1)R) in pr&auml;synaptischen Nervenenden. Diese retrograde &Uuml;bertragung zugrunde liegt, verschiedene Formen von kurzen und langen Begriff synaptische Plastizit&auml;t im CNS. Hier errichteten wir ein Modell-System basierend auf isolierte Ratte sympathischen Neuronen, in denen eine EZB Signalisierung Kaskade in einem reduzierten, r&auml;umlich kompakt und genetisch Klemmverbinder System untersucht werden konnte. Durch fortlaufende Zugabe von molekularen Bestandteilen konstruierten wir einen kompletten EZB Produktion/Mobilisierung Weg. Heterologe Expression von vier Komponenten war bei der EZB-Produktion und -Erkennung: Metabotropic Glutamate Rezeptor 5a (mGluR5a), Homer, 2b, Diacylglycerol Lipase Alpha und CB (1) R. In diese Neuronen produziert Anwendung von l-Glutamat in schnelle enzymatische Produktion von 2-AG, gefolgt von der Aktivierung des CB (1) R. Spannung-abh&auml;ngigen Modulation der Ca(2+) N-Typ-Kan&auml;le vermittelt durch Aktivierung des CB (1) R. mit molekularen Dissektion und pharmakologische Agenten, wir die Aktivierung des mGluR5a Ergebnisse nachweisen Diese Experimente definieren die kritischen Elemente ben&ouml;tigt, um die retrograde EZB Produktions- und signalisieren in ein einzelnes periphere Neuron zu rekapitulieren. Produktion/Mobilisierung der EZB k&ouml;nnen dar&uuml;ber hinaus auf eine physiologisch relevante Zeitskala mit elektrophysiologische Methoden nachgewiesen werden. Das System bietet eine Plattform f&uuml;r die Pr&uuml;fung der Kandidaten-Molek&uuml;le, die Erleichterung der EZB-Transport &uuml;ber die Plasmamembran zugrunde.

Molekulare Rekonstruktion des mGluR5a-vermittelte Endocannabinoid Signalling Kaskade in einzelne Ratte sympathischen Neuronen.

Gli endocannabinoidi (BCE) come il 2-arachidonilglicerolo (2-AG) sono metaboliti dei lipidi che sono sintetizzati in un neuroni postsinaptici e agiscono sui recettori dei cannabinoidi CB1 (CB(1)R) nei terminali nervosi presinaptica. Questa trasmissione retrograda sottende diverse forme di breve e di plasticit&agrave; sinaptica a lungo termine all&#39;interno del SNC. Qui, abbiamo costruito un modello del sistema basato su neuroni simpatico ratto isolato, in cui una cascata di segnalazione di BCE potrebbe essere studiata in un sistema ridotto, spazialmente compatto e malleabile geneticamente. Abbiamo costruito un percorso di produzione/mobilizzazione completa della BCE da aggiunta sequenziale di componenti molecolari. Espressione eterologa di quattro componenti &egrave; stato richiesto per la produzione della BCE e rilevamento: metabotropic glutammato recettore 5a (mGluR5a), Homer 2b, diacilglicerolo lipasi alfa e CB (1) R. In questi neuroni, applicazione del l-glutammato prodotto modulazione di voltaggio-dipendente dei canali tipo N Ca(2+) mediato dall&#39;attivazione di CB (1) R. mediante dissezione molecolare sia agenti farmacologici, forniamo prove che attivazione di mGluR5a risultati in rapida produzione enzimatica del 2-AG, seguita dall&#39;attivazione del R. CB (1) Questi esperimenti di definiscono gli elementi critici necessari per ricapitolare produzione BCE retrograda e segnalazione in un singolo neurone periferico. Inoltre, produzione/mobilitazione della BCE pu&ograve; essere rilevato su una scala di tempo fisiologicamente rilevanti utilizzando tecniche elettrofisiologiche. Il sistema fornisce una piattaforma per testare molecole candidato sottostante facilitazione della BCE trasporto attraverso la membrana del plasma.

Ricostruzione molecolare di mGluR5a-mediata endocannabinoide segnalazione cascata nei neuroni simpatici singolo ratto.

&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;2  -  arachidonylglycerol&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;ECB&#xFF09;&#xFF08;2-AG&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D42;&#x672B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CB&#xFF08;1&#xFF09;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;CB&#xFF08;1&#xFF09;R&#xFF09;&#x200B;&#x200B;&#x306B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x884C;&#x52D5;&#x3067;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8102;&#x8CEA;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; CNS&#x5185;&#x306E;&#x77ED;&#x671F;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x9006;&#x884C;&#x6027;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ECB&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3067;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x878D;&#x901A;&#x306E;&#x5229;&#x304F;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5206;&#x5B50;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x9010;&#x6B21;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;ECB&#x306E;&#x751F;&#x7523;/&#x52D5;&#x54E1;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;5A&#xFF08;mGluR5a&#xFF09;&#x3001;&#x30DB;&#x30FC;&#x30DE;&#x30FC;2b&#x306F;&#x3001;&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x3B1;&#x3068;&#x3001;CB&#xFF08;1&#xFF09;&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#xFF1A;4&#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;ECB&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3068;&#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;L-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CB&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;N&#x578B;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5909;&#x8ABF;&#xFF08;1&#xFF09;R&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x3084;&#x85AC;&#x5264;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2-AG&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x9175;&#x7D20;&#x751F;&#x7523;&#x306E;mGluR5a&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;CB&#xFF08;1&#xFF09;R.&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x672B;&#x68A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9006;&#x884C;&#x6027;ECB&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x518D;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x751F;&#x7523;/ ECB&#x306E;&#x52D5;&#x54E1;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x819C;&#x3092;&#x6A2A;&#x5207;&#x3063;ECB&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x5186;&#x6ED1;&#x5316;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x5019;&#x88DC;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;MGluR5a&#x5A92;&#x4ECB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5FA9;&#x8208;

2-Arachidonylglycerol (2-AG) &#xB4F1; Endocannabinoids (eCB)&#xC740; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; postsynaptic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; CB(1) cannabinoid &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (presynaptic &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0; CB(1)R). &#xC774; &#xC5ED;&#xD589; &#xC804;&#xC1A1; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00; &#xC9E7;&#xACE0; &#xAE34; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; CNS &#xB0B4; &#xC18C;&#xC131;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD615;&#xD0DC;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC10;&#xC18C;, &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCF64;&#xD329;&#xD2B8; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC131; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; eCB &#xACF5;&#xBD80; &#xC218; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC950; &#xACF5;&#xAC10; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAD6C;&#xCD95;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801; &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; eCB &#xC0DD;&#xC0B0;/&#xB3D9;&#xC6D0; &#xD1B5;&#xB85C; &#xAC74;&#xC124;. &#xB124; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC2DD; eCB &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;: metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 5a (mGluR5a), &#xD648; &#xB7F0; 2b, diacylglycerol lipase &#xC54C;&#xD30C; &#xBC0F; CB (1) r. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; l-glutamate&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB4A4;&#xC5D0; CB (1) r.&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; 2-AG&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; CB (1) R. &#xBD84;&#xC790; &#xD574; &#xBD80; &#xBC0F; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; mGluR5a &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; N &#xD615; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC5ED;&#xD589; eCB &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB9D0; &#xCD08; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC815;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Ecb&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;/&#xB3D9;&#xC6D0; &#xC21C;&#xC218; &#xAD00;&#xB828; &#xC2DC;&#xAC04; &#xADDC;&#xBAA8; electrophysiological &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xBD84;&#xC790; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; eCB &#xAD50;&#xD1B5; &#xCD09;&#xC9C4; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MGluR5a &#xC911;&#xC7AC; endocannabinoid &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC950; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790; &#xC7AC;&#xAC74;.

Los endocannabinoides (BCE) como el 2-araquidonilglicerol (2-AG) son metabolitos de los l&#xED;pidos que se sintetizan en unos neuronas postsin&#xE1;pticas y actuar sobre CB (1) los receptores cannabinoides (CB (1) R) en las terminales nerviosas presin&#xE1;pticas. Esta transmisi&#xF3;n retr&#xF3;grada subyace a varias formas de corto y largo plazo, la plasticidad sin&#xE1;ptica en el SNC. Aqu&#xED;, hemos construido un modelo de sistema basado en las neuronas simp&#xE1;ticas de rata aislados, en los que podr&#xED;a ser una cascada de se&#xF1;alizaci&#xF3;n del BCE estudian en un sistema reducido, espacialmente compacta y maleable gen&#xE9;ticamente. Hemos construido una completa BCE producci&#xF3;n / movilizaci&#xF3;n v&#xED;a por la adici&#xF3;n secuencial de los componentes moleculares. Expresi&#xF3;n heter&#xF3;loga de cuatro componentes se requiere para la producci&#xF3;n del BCE y la detecci&#xF3;n de: 5a metabotr&#xF3;picos receptores de glutamato (mGluR5a), Homero 2b, diacilglicerol lipasa alfa, y CB R. (1) En estas neuronas, la aplicaci&#xF3;n de L-glutamato dependiente de la tensi&#xF3;n producida modulaci&#xF3;n de tipo N de Ca (2 +) canales mediadas por la activaci&#xF3;n de CB (1) R. Utilizando tanto disecci&#xF3;n molecular y agentes farmacol&#xF3;gicos, que proporcionan evidencia de que la activaci&#xF3;n de los resultados en la producci&#xF3;n r&#xE1;pida mGluR5a enzim&#xE1;tica de 2-AG seguido por la activaci&#xF3;n de CB (1) R. Estos experimentos definir los elementos cr&#xED;ticos necesarios para recapitular retr&#xF3;grada de producci&#xF3;n BCE y de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en una neurona perif&#xE9;rica &#xFA;nica. Por otra parte, la producci&#xF3;n / la movilizaci&#xF3;n del BCE se pueden detectar en una escala de tiempo fisiol&#xF3;gicamente relevantes usando t&#xE9;cnicas electrofisiol&#xF3;gicas. El sistema proporciona una plataforma para probar las mol&#xE9;culas candidatas que subyacen a la facilitaci&#xF3;n del BCE transporte a trav&#xE9;s de la membrana plasm&#xE1;tica.

Reconstrucci&#xF3;n molecular de la cascada endocannabinoide MGluR5a se&#xF1;alizaci&#xF3;n mediada por neuronas de rata simp&#xE1;ticas individuales

&#x7535;&#x53EF;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5BF9;&#x7279;&#x5B9A;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x900F;&#x6027;&#x7684;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x3002;&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x6027;&#x7ECF;&#x9891;&#x9053; (VGCCs) &#x662F;&#x7ECF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x65E2;&#x8D1F;&#x8D23;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x5C24;&#x5176;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; (&#x8868;&#x8FBE;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x7B7E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF09; &#x90FD;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x3001; &#x7535;&#x8DEF;&#x3001; &#x548C;&#x884C;&#x4E3A;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; VGCCs &#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x4ECD;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x51C6;&#x5907;&#xFF0C;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;Rohon-&#x80E1;&#x5B50; (R B) &#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x793A;&#x5BF9;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x80CC;&#x6839;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; (DRG) &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E3A;&#x6B64;&#x76EE;&#x7684;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x80DE;&#x4F53;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x3002;R-B &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; &#xFF08;Isl2b:EGFP)(ZC7)&#xFF0C;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BC6;&#x522B;&#x6E38;&#x79BB;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x9002;&#x5408;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x548C;&#x836F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; R B &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9AD8;-&#x548C;&#x4F4E;-&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x7535;&#x6D41;&#x7ECF; (HVA &#x548C; LVA-I(Ca)&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;)&#x3002;Ni (+)-&#x654F;&#x611F; LVA-I(Ca) &#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x5C11;&#x6570;&#x4EBA;&#x7684; R B &#x795E;&#x7ECF;&#x5143; &#xFF08;30%&#xFF09; &#x548C; &omega;-&#x828B;&#x87BA;&#x6BD2;&#x7D20; GVIA &#x654F;&#x611F; Ca (V) 2.2 (N &#x578B;) &#x7ECF;&#x6E20;&#x9053;&#x57FA;&#x7840; HVA-I(Ca) &#x7684;&#x7EDD;&#x5927;&#x591A;&#x6570; (90%)&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6; G &#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53D7;&#x4F53; (GPCRs) &#x8C03;&#x8282; HVA-I(Ca)&#xFF0C;&#x653E;&#x6620;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x3002;GABA/&#x5DF4;&#x6C2F;&#x915A;&#x6216; 5-&#x7F9F;&#x8272;&#x80FA;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x4EA7;&#x751F;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x540C;&#x65F6;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7535;&#x538B;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BFC;&#x81F4; DAMGO &#x4EA9;&#x963F;&#x7247;&#x7C7B;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x8C03;&#x5236;&#x7684; I(Ca) &#x4F3C;&#x4E4E;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4E3B;&#x8981;&#x901A;&#x8FC7;&#x970D;&#x4E71;&#x6BD2;&#x7D20;&#x654F;&#x611F; G&alpha; &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E3A;&#x4F7F;&#x7528;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E86;&#x89E3;&#x7ECF;&#x901A;&#x9053;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4F9D;&#x636E;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x5982;&#x4F55;&#x7ECF;&#x6E20;&#x9053;&#x8D21;&#x732E; mechanosensory &#x51FD;&#x6570;&#x3002;

&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; Rohon &#x80E1;&#x5B50;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7; Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#x3002;

Electrically excitable cells have voltage-dependent ion channels on the plasma membrane that regulate membrane permeability to specific ions. Voltage-gated Ca(2+) channels (VGCCs) are especially important as Ca(2+) serves as both a charge carrier and second messenger. Zebrafish (Danio rerio) are an important model vertebrate for studies of neuronal excitability, circuits, and behavior. However, electrophysiological properties of zebrafish VGCCs remain largely unexplored because a suitable preparation for whole cell voltage-clamp studies is lacking. Rohon-Beard (R-B) sensory neurons represent an attractive candidate for this purpose because of their relatively large somata and functional homology to mammalian dorsal root ganglia (DRG) neurons. Transgenic zebrafish expressing green fluorescent protein in R-B neurons, (Isl2b:EGFP)(ZC7), were used to identify dissociated neurons suitable for whole cell patch-clamp experiments. Based on biophysical and pharmacological properties, zebrafish R-B neurons express both high- and low-voltage-gated Ca(2+) current (HVA- and LVA-I(Ca), respectively). Ni(+)-sensitive LVA-I(Ca) occur in the minority of R-B neurons (30%) and Ï‰-conotoxin GVIA-sensitive Ca(V)2.2 (N-type) Ca(2+) channels underlie the vast majority (90%) of HVA-I(Ca). To identify G protein coupled receptors (GPCRs) that modulate HVA-I(Ca), a panel of neurotransmitters was screened. Application of GABA/baclofen or serotonin produced a voltage-dependent inhibition while application of the mu-opioid agonist DAMGO resulted in a voltage-independent inhibition. Unlike in mammalian neurons, GPCR-mediated voltage-dependent modulation of I(Ca) appears to be transduced primarily via a cholera toxin-sensitive GÎ± subunit. These results provide the basis for using the zebrafish model system to understanding Ca(2+) channel function, and in turn, how Ca(2+) channels contribute to mechanosensory function.

Identification and modulation of voltage-gated Ca2+ currents in zebrafish Rohon-Beard neurons.

Cellules &#xE9;lectriquement excitables ont canaux ioniques voltage-d&#xE9;pendants sur la membrane plasmique qui r&#xE9;gulent la perm&#xE9;abilit&#xE9; membranaire aux ions sp&#xE9;cifiques. Voltage-d&#xE9;pendants Ca (2 +) des canaux (VGCCs) sont particuli&#xE8;rement importants en tant que Ca (2 +) sert &#xE0; la fois un porteur de charge et de second messager. Le poisson z&#xE8;bre (Danio rerio) sont un vert&#xE9;br&#xE9; mod&#xE8;le important pour les &#xE9;tudes de l&#x26;#39;excitabilit&#xE9; neuronale, circuits, et le comportement. Cependant, les propri&#xE9;t&#xE9;s &#xE9;lectrophysiologiques de poisson-z&#xE8;bre VGCCs restent largement inexplor&#xE9;es, car une pr&#xE9;paration adapt&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;ensemble des cellules voltage-clamp &#xE9;tudes font d&#xE9;faut. Rohon-Beard (RB) des neurones sensoriels repr&#xE9;sentent un candidat int&#xE9;ressant pour cette fin en raison de leur soma relativement importante et homologie fonctionnelle de ganglions de la racine dorsale des mammif&#xE8;res (DRG) neurones. Le poisson-z&#xE8;bre transg&#xE9;nique exprimant la prot&#xE9;ine fluorescente verte dans RB neurones, (Isl2b: EGFP) (ZC7), ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour identifier les neurones dissoci&#xE9;s appropri&#xE9;s pour l&#x26;#39;ensemble des cellules de patch-clamp exp&#xE9;riences. Bas&#xE9; sur les propri&#xE9;t&#xE9;s biophysiques et pharmacologiques, poisson-z&#xE8;bre neurones RB exprimer &#xE0; la fois haute et basse-voltage-d&#xE9;pendants Ca (2 +) en cours (HVA-et LVA-I (Ca), respectivement). Ni (+)-sensibles LVA-I (Ca) se produisent dans la minorit&#xE9; de RB neurones (30%) et &#x3C9;-conotoxine GVIA sensible Ca (V) 2,2 (de type N) Ca (2 +) des canaux sous-tendent la grande majorit&#xE9; (90%) de HVA-I (Ca). Pour identifier les r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s aux prot&#xE9;ines G (RCPG) qui modulent HVA-I (Ca), un panneau de neurotransmetteurs a &#xE9;t&#xE9; projet&#xE9;. Application de GABA / baclof&#xE8;ne ou de la s&#xE9;rotonine a entra&#xEE;n&#xE9; une inhibition d&#xE9;pendant de la tension alors que l&#x26;#39;application de la DAMGO agoniste mu-opio&#xEF;de a entra&#xEE;n&#xE9; une inhibition de tension ind&#xE9;pendante. Contrairement &#xE0; dans les neurones de mammif&#xE8;res, GPCR m&#xE9;diation d&#xE9;pendant de la tension de modulation de I (Ca) semble &#xEA;tre transduites principalement par une &#xE9;pid&#xE9;mie de chol&#xE9;ra sensibles &#xE0; la toxine sous-unit&#xE9; Ga. Ces r&#xE9;sultats fournissent la base pour l&#x26;#39;utilisation du syst&#xE8;me de mod&#xE8;le de poisson z&#xE8;bre &#xE0; la compr&#xE9;hension Ca (2 +) la fonction du canal, et &#xE0; son tour, comment ca (2 +) des canaux contribuent au bon fonctionnement m&#xE9;canosensorielle.

Identification et modulation de voltage-d&#xE9;pendants Ca 2 + Courants chez le poisson z&#xE8;bre Rohon-Barbe neurones

Elektrisch erregbar Zellen haben Spannung-abh&auml;ngigen Ionenkan&auml;le auf der Plasmamembran, die Durchl&auml;ssigkeit der Membran f&uuml;r bestimmte Ionen regulieren. Spannung-Gating Ca(2+) Kan&auml;le (VGCCs) sind besonders wichtig, da Ca(2+) Da beide ein kostenlos Carrier und zweite Bote dient. Zebrab&auml;rbling (Danio Rerio) sind ein wichtiges Modell f&uuml;r Studien &uuml;ber neuronale Erregbarkeit, Schaltungen und Verhalten Wirbeltiere. Elektrophysiologische Eigenschaften des Zebrafish VGCCs bleiben jedoch weitgehend unerforscht, weil eine geeignete Aufbereitung f&uuml;r die gesamte Zelle Spannung Klemm-Studien fehlt. Rohon-Bart (R-B) sensorische Neuronen stellen einen attraktiven Kandidaten f&uuml;r diesen Zweck aufgrund ihrer relativ gro&szlig;en Somata und funktionelle Homologie zu S&auml;ugetier-Spinalganglien Ganglien (DRG) Neuronen dar. Transgene Zebrafisch Ausdr&uuml;cken gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein in R-B-Neuronen, (Isl2b:EGFP)(ZC7), wurden zur getrennten Neuronen geeignet f&uuml;r ganze Zelle Patch-Clamp-Experimenten zu identifizieren. Basierend auf biophysikalischen und pharmakologische Eigenschaften, Zebrafish R-B Neuronen schnelles beide hoch - und niedrig-Spannung-Gating Ca(2+) Strom (HVA- und LVA-I(Ca), beziehungsweise). NI (+)-sensible LVA-I(Ca) auftreten, in der Minderheit von R-B-Neuronen (30 %) und &omega;-Conotoxin GVIA-Sensitive-Ca (V) 2.2 (N-Typ) Ca(2+) Kan&auml;le zugrunde liegen, die &uuml;berwiegende Mehrheit (90 %) des HVA-I(Ca). Um G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCRs) zu identifizieren, die HVA-I(Ca) zu modulieren, wurde ein Gremium von Neurotransmittern gezeigt. Anwendung von GABA/Baclofen oder Serotonin produziert eine Spannung-abh&auml;ngigen Hemmung w&auml;hrend der Anwendung von den Mu-Opioid-Agonisten, die, den DAMGO eine Hemmung der Spannung unabh&auml;ngig gef&uuml;hrt. Im Gegensatz zu scheint GPCR-vermittelte Spannung-abh&auml;ngigen Modulation des I(Ca) in den S&auml;ugetier-Neuronen, in erster Linie &uuml;ber eine Cholera-Toxin-Sensitive G&alpha;-Untereinheit ausgestrahlt werden. Diese Ergebnisse bilden die Grundlage f&uuml;r die Verwendung der Zebrafisch-Modellsystem f&uuml;r das Verst&auml;ndnis Ca(2+)-Kanal-Funktion, und im Gegenzug wie Ca(2+) Kan&auml;le zur Mechanosensory-Funktion.

Identifizierung und Modulation der Spannung-Gating Ca2 + Str&ouml;mungen im Zebrafisch Rohon-Bart Neuronen.

Le cellule eccitabili elettricamente hanno canali ionici voltaggio-dipendenti sulla membrana del plasma che regolano la permeabilit&agrave; della membrana agli ioni specifici. Tensione-gated Ca(2+) canali (VGCCs) sono particolarmente importanti come Ca(2+) serve sia come carica vettore e secondo messaggero. Danio zebrato (Danio rerio) sono un importante modello vertebrato per studi di eccitabilit&agrave; neuronale, circuiti e comportamento. Propriet&agrave; elettrofisiologiche di zebrafish VGCCs rimangono tuttavia in gran parte inesplorata perch&eacute; manca un&#39;adeguata preparazione per gli studi di tensione-fascetta intera cellula. I neuroni sensoriali Rohon-barba (R-B) rappresentano un&#39;attraente candidato per questo scopo a causa della loro relativamente grande somata e omologia funzionale di neuroni (DRG) gangli spinali dei mammiferi. Zebrafish transgenici che esprimono la proteina fluorescente verde in neuroni R-B, (Isl2b:EGFP)(ZC7), sono stati utilizzati per identificare neuroni dissociati adatti per esperimenti di patch-clamp intera cellula. Basato sulle propriet&agrave; biofisiche e farmacologico, zebrafish R-B neuroni esprimono entrambi alta - e basso-tensione-gated Ca(2+) corrente (HVA - e LVA-I(Ca), rispettivamente). NI (+)-LVA-I(Ca) sensibili si verificano nella minoranza dei neuroni R-B (30%) e &omega;-conotossina GVIA sensibili Ca (V) 2.2 (tipo N) Ca(2+) canali sottendono la stragrande maggioranza (90%) di HVA-I(Ca). Per identificare i recettori accoppiati proteine G (GPCR) che modulano HVA-I(Ca), &egrave; stato proiettato un pannello di neurotrasmettitori. Applicazione del GABA/baclofen o serotonina prodotta un&#39;inibizione voltaggio-dipendenti, mentre l&#39;applicazione del mu-opioid agonista che DAMGO ha provocato un&#39;inibizione indipendente dalla tensione. A differenza di nei neuroni dei mammiferi, GPCR-mediata di modulazione di voltaggio-dipendenti di I(Ca) appare essere transduced principalmente tramite una subunit&agrave; G&alpha; di colera tossina-sensibili. Questi risultati forniscono la base per l&#39;utilizzo del sistema modello zebrafish per comprendere la funzione dei canali Ca(2+), e a sua volta, come Ca(2+) canali contribuiscono alla funzione che mechanosensory.

Identificazione e modulazione di tensione-gated Ca2 + correnti nei neuroni zebrafish Rohon-barba.

&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x819C;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x96FB;&#x8377;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x3068;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C9;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF08;VGCCs&#xFF09;&#x306F;&#x7279;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF08;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF09;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x3001;&#x56DE;&#x8DEF;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x884C;&#x52D5;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5168;&#x30BB;&#x30EB;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x6E96;&#x5099;&#x304C;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;VGCCs&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x672A;&#x8E0F;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Rohon&#xB7;&#x30D3;&#x30A2;&#x30FC;&#x30C9;&#xFF08;RB&#xFF09;&#x306E;&#x611F;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5F8C;&#x6839;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#xFF08;DRG&#xFF09;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x5019;&#x88DC;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; RB&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;Isl2b&#xFF1A;EGFP&#xFF09;&#x306E;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;ZC7&#xFF09;&#x3001;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x89E3;&#x96E2;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;RB&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x9AD8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4F4E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;Ca&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x96FB;&#x6D41;&#xFF08;HVA&#x3068;LVA-I&#xFF08;Ca&#xFF09;&#x3092;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#xFF09;&#x3002;&#x30CB;&#x30C3;&#x30B1;&#x30EB;&#xFF08;+&#xFF09; - &#x654F;&#x611F;LVA-I&#xFF08;CA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;RB&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5C11;&#x6570;&#xFF08;30&#xFF05;&#xFF09;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x3C9;-&#x30B3;&#x30CE;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;GVIA&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x306E;Ca&#xFF08;V&#xFF09;2.2&#xFF08;N&#x578B;&#xFF09;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x534A;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#xFF08;90&#xFF05;&#xFF09;&#x3001;HVA-I&#xFF08;CA&#xFF09;&#x306E;&#x3002; HVA-I&#xFF08;Ca&#xFF09;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;GPCR&#xFF09;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#x3BC;-&#x30AA;&#x30D4;&#x30AA;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;DAMGO&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x96FB;&#x5727;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;GABA /&#x30D0;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x5727;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x305F;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x79C1;&#x306E;GPCR&#x5A92;&#x4ECB;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5909;&#x8ABF;&#xFF08;CA&#xFF09;&#x304C;&#x4E3B;&#x306B;&#x30B3;&#x30EC;&#x30E9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;G&#x3B1;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7406;&#x89E3;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x523A;&#x6FC0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Rohon&#xB7;&#x30D3;&#x30A2;&#x30FC;&#x30C9;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;Ca2 +&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;

&#xC804;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xB974;&#xAE30;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC774;&#xC628;&#xC744; &#xB9C9; &#xD22C;&#xACFC;&#xC728;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC744;. &#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110; (VGCCs) ca(2+)&#xB85C; &#xBAA8;&#xB450; &#xCDA9;&#xC804; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; &#xC5ED;&#xD560; &#xD2B9;&#xD788; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. Zebrafish (Danio rerio)&#xB294; &#xCC99;&#xCD94;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD765;&#xBD84;, &#xD68C;&#xB85C; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC791; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, zebrafish VGCCs electrophysiological &#xC18D;&#xC131; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xC804;&#xC555; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC900;&#xBE44; &#xBD80;&#xC871; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBBF8;&#xAC1C;&#xCC99; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rohon-&#xC218;&#xC5FC; (R-B) &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC9C0; &#xB8E8;&#xD2B8; (DRG) &#xC911;&#xCD94; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xC801; &#xD070; somata &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; homology&#xC774;&#xC774; &#xBAA9;&#xC801;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. R B &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; zebrafish (Isl2b:EGFP)(ZC7), &#xB04A;&#xB41C; &#xB274;&#xB7F0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xBC0F; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, zebrafish R B &#xB274;&#xB7F0; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB450; &#xB192;&#xC740; &#xB0AE;&#xC740;-&#xC804;&#xC555;-&#xAC1C;&#xD3D0; Ca(2+) &#xC804;&#xB958; (HVA-&#xBC0F; LVA-I(Ca), &#xAC01;&#xAC01;). Ni (+)-(N &#xD0C0;&#xC785;) R B &#xB274;&#xB7F0; (30%)&#xC640; &omega;-conotoxin GVIA-&#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; Ca (V) 2.2&#xC758; &#xC18C;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; LVA-I(Ca) Ca(2+) &#xCC44;&#xB110; &#xAE30;&#xCD08; hva-i(ca)&#xC758; &#xB300;&#xB2E4;&#xC218; (90%). G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPCRs) hva-i(ca)&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xD328;&#xB110; &#xC0C1;&#xC601; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. GABA/baclofen &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xB85C;&#xD1A0;&#xB2CC;&#xC758; &#xC801;&#xC6A9; &#xC804;&#xC555;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC800;&#xD574; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; DAMGO mu opioid &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB97C; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xC800;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC640; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; i(ca)&#xC758; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xBCC0;&#xC870; GPCR &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xCF5C;&#xB808;&#xB77C; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; G&alpha; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBD88;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. Zebrafish &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; mechanosensory &#xD568;&#xC218;.

&#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xC870; &#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0; Ca2 + &#xC804;&#xB958; zebrafish Rohon &#xC218;&#xC5FC; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC758;.

C&#xE9;lulas el&#xE9;ctricamente excitables tienen dependientes de voltaje canales de iones en la membrana plasm&#xE1;tica que regulan permeabilidad de la membrana a los iones espec&#xED;ficos. Voltaje de Ca (2 +) canales (VGCCs) son especialmente importantes como Ca (2 +) sirve como un portador de carga y el segundo mensajero. El pez cebra (Danio rerio) es un vertebrado importante modelo para el estudio de la excitabilidad neuronal, circuitos, y el comportamiento. Sin embargo, las propiedades electrofisiol&#xF3;gicas de VGCCs pez cebra siguen siendo en gran parte inexplorado debido a una preparaci&#xF3;n adecuada para las c&#xE9;lulas de fijaci&#xF3;n de voltaje se carece de estudios. Beard Rohon (RB) neuronas sensoriales representan un candidato atractivo para este fin debido a su relativamente grande y somata homolog&#xED;a funcional a los ganglios de la ra&#xED;z dorsal de mam&#xED;feros (GRD) neuronas. Pez cebra transg&#xE9;nico que expresa la prote&#xED;na verde fluorescente en RB neuronas, (Isl2b: EGFP) (ZC7), se utilizaron para identificar las neuronas disociadas adecuados para c&#xE9;lulas enteras patch-clamp experimentos. Sobre la base de las propiedades biof&#xED;sicas y farmacol&#xF3;gicas, el pez cebra neuronas RB expresar tanto de alta y baja tensi&#xF3;n gated-Ca (2 +) actual (HVA y LVA-I (Ca), respectivamente). Ni (+)-sensible LVA-I (Ca) se producen en la minor&#xED;a de RB neuronas (30%) y &#x3C9;-conotoxina GVIA sensible Ca (V) 2,2 (tipo N) de Ca (2 +) canales subyacen a la gran mayor&#xED;a (90%) de HVA-I (Ca). Para identificar los receptores acoplados a prote&#xED;nas G (GPCR) que modulan la HVA-I (Ca), un grupo de neurotransmisores se proyect&#xF3;. Aplicaci&#xF3;n de GABA / baclofeno o serotonina produjo una inhibici&#xF3;n dependiente de la tensi&#xF3;n mientras que la aplicaci&#xF3;n de la DAMGO agonista mu-opioide result&#xF3; en una inhibici&#xF3;n de voltaje independiente. A diferencia de las neuronas de mam&#xED;feros, GRCP mediada dependiente de la tensi&#xF3;n de modulaci&#xF3;n de I (Ca) parece ser transducidas principalmente a trav&#xE9;s de una toxina del c&#xF3;lera sensible subunidad G&#x3B1;. Estos resultados proporcionan la base para utilizar el sistema de modelo de pez cebra a la comprensi&#xF3;n de Ca (2 +) la funci&#xF3;n del canal, ya su vez, la forma de Ca (2 +) canales de contribuir a la funci&#xF3;n mecanosensorial.

Identificaci&#xF3;n y modulaci&#xF3;n del voltaje-dependientes de Ca2 + en el pez cebra Corrientes Beard Rohon-neuronas

&#x9AA8;&#x76C6;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; (PG) &#x4E2D;&#x7EE7;&#x9634;&#x830E;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4ECE;&#x810A;&#x9AD3;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x606F;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x9634;&#x830E;&#x53CD;&#x5C04;&#x4F5C;&#x7528;&#x975E;&#x5E38;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x52A8;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7;&#x9609;&#x5272;&#x96C4;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5265;&#x593A;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x52C3;&#x8D77;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D; (ED)&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x57FA;&#x672C;&#x836F;&#x7269;&#x53BB;&#x52BF;&#x8BF1;&#x5BFC; ED &#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x662F;&#x5426;&#x96C4;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5265;&#x593A;&#x4E0B;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53; (nAchRs)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8C03;&#x89E3;&#x5FEB;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7A81;&#x89E6;&#x4F20;&#x9012;&#x7684;&#x9875;&#x5BF9;&#x6B64;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6E90;&#x6027; ED &#x8BC1;&#x660E;&#x4E86;&#x53BB;&#x52BF;&#x5927;&#x9F20;&#x9634;&#x830E;&#x6D77;&#x7EF5;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x538B;&#x529B;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x7F16;&#x7801; nAchR &alpha;3/&alpha;5/&beta;4 &#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x662F;&#x5927;&#x5E45;&#x4E0B;&#x8C03; PG &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E0B;&#x8C03; nAchR &#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;&#x626D;&#x8F6C;&#x4E86;&#x66F4;&#x6362;&#x7684;&#x777E;&#x916E;&#x3002;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; nAchR &#x7535;&#x6D41;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x8870;&#x51CF;&#x7684; PG &#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x9634;&#x830E;&#x8840;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5176;&#x4E2D;&#x8BF1;&#x53D1;&#x9634;&#x830E;&#x52C3;&#x8D77;&#x3002;&#x91C7;&#x53D6;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; nAchRs PG &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x4E0B;&#x8C03;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x53BB;&#x52BF;&#x5927;&#x9F20;&#x795E;&#x7ECF;&#x6E90;&#x6027;&#x6559;&#x80B2;&#x7F72;&#x3002;

&#x4E2D;&#x7684;&#x9AA8;&#x76C6;&#x7684;&#x53BB;&#x52BF;&#x5927;&#x9F20;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x4E0B;&#x8C03;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x6027;&#x52C3;&#x8D77;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Pelvic ganglia (PG) play critical roles in relaying sympathetic and parasympathetic information from the spinal cord to the penile vasculature and, controlling the penile reflex. Animal studies have shown that androgen deprivation by castration causes erectile dysfunction (ED). Until now, however, neural mechanisms underlying castration-induced ED remain unclear. Therefore, we examined whether androgen deprivation down-regulates nicotinic acetylcholine receptors (nAchRs), which mediate fast excitatory synaptic transmission in the PG. Toward this end, neurogenic ED was demonstrated by measuring the intracavernous pressure in castrated rats. Real-time PCR analysis revealed that the transcripts encoding nAchR Î±3/Î±5/Î²4 subunits were significantly down-regulated in the PG neurons. In addition, down-regulation of the nAchR subunits was reversed by replacement of testosterone. Patch-clamp experiments showed that the nAchR currents were selectively attenuated in the parasympathetic PG neurons innervating the penile vasculature, activation of which elicits penile erection. Taken together, our data suggest that phenotype-specific down-regulation of nAchRs in the PG neurons may contribute to the neurogenic ED in castrated rats.

Phenotype-specific down-regulation of nicotinic acetylcholine receptors in the pelvic ganglia of castrated rats: implications for neurogenic erectile dysfunction.

Les ganglions pelviennes (PG) jouent un r&ocirc;le crucial en relayant des informations sympathiques et parasympathiques de la moelle &eacute;pini&egrave;re &agrave; la vascularisation du p&eacute;nis et contr&ocirc;ler le r&eacute;flexe du p&eacute;nis. Les &eacute;tudes animales ont montr&eacute; que la privation androg&eacute;nique par castration provoque la dysfonction &eacute;rectile (ED). Jusqu&#39;&agrave; pr&eacute;sent, toutefois, les m&eacute;canismes neuronaux qui sous-tendent ED induite par la castration demeurent incertains. Par cons&eacute;quent, nous avons examin&eacute; si la privation androg&eacute;nique bas-r&eacute;gule les r&eacute;cepteurs nicotiniques de l&#39;ac&eacute;tylcholine (nAChR), qui n&eacute;gocient la transmission synaptique excitatrice rapide dans les pages vers cette fin, ED neurog&egrave;ne a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute; par la mesure de la pression intracaverneuse chez les rats castr&eacute;s. Analyse PCR en temps r&eacute;el a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les transcriptions encodage CNCDH &alpha;3/&alpha;5/&beta;4 sous-unit&eacute;s &eacute;taient significativement diminu&eacute;es dans les neurones de PG. En outre, vers le bas-r&egrave;glement des sous-unit&eacute;s des CNCDH a &eacute;t&eacute; infirm&eacute; par remplacement de la testost&eacute;rone. Patch-clamp exp&eacute;riences ont montr&eacute; que les courants de la CNCDH ont &eacute;t&eacute; s&eacute;lectivement att&eacute;nu&eacute;s dans les neurones parasympathiques de PG innervant la vascularisation du p&eacute;nis, activation qui provoque l&#39;&eacute;rection du p&eacute;nis. Prises ensemble, nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que cette r&eacute;gulation n&eacute;gative ph&eacute;notype-sp&eacute;cifique de nAChR dans les neurones PG peut contribuer &agrave; l&#39;ED neurog&egrave;ne chez les rats castr&eacute;s.

R&eacute;gulation n&eacute;gative des r&eacute;cepteurs nicotiniques de l&#39;ac&eacute;tylcholine dans les ganglions pelviennes de rats castr&eacute;s ph&eacute;notype-sp&eacute;cifique : implications pour la dysfonction &eacute;rectile neurog&egrave;ne.

Becken-Ganglien (PG) spielen wichtige Rollen in Bereitstellung von sympathische und parasympathische Informationen &uuml;ber das R&uuml;ckenmark zum Penis Gef&auml;&szlig;system und Steuerung des Penis Reflexes. Tierversuche haben gezeigt, dass Androgen-Entzug durch Kastration erektilen Dysfunktion (ED) verursacht. Bis jetzt sind Neuronale Mechanismen induziert durch Kastration ED jedoch noch unklar. Daher wir gepr&uuml;ft, ob Androgen-Entzug nach unten-nikotinische Acetylcholin-Rezeptoren (nAchRs), regelt die schnelle erregenden synaptischen &Uuml;bertragung in PG. in Richtung diesem Ende vermitteln, neurogene ED zeigte sich den intracavernous Druck bei kastrierten Ratten gemessen. Echtzeit-PCR-Analyse ergab, dass die Transkripte Codierung nAchR &alpha;3/&alpha;5/&beta;4-Untereinheiten deutlich unten-geregelt in den PG-Neuronen. Dar&uuml;ber hinaus wurde Herunterregulation der nAchR-Untereinheiten durch Ersatz des Testosterons r&uuml;ckg&auml;ngig machen. Patch-Clamp-Experimenten zeigte, dass die nAchR-Str&ouml;me selektiv in den parasympathischen PG-Neuronen, die den Penis Gef&auml;&szlig;system, der Aktivierung, die Erektion des Penis entlockt nervenst&auml;rkend abgeschw&auml;cht wurden. Genommen kann zu die neurogene ED bei kastrierten Ratten zusammen, unsere Daten deuten darauf hin, dass Ph&auml;notyp-spezifische Herunterregulation der nAchRs in den PG-Neuronen beitragen.

Ph&auml;notyp-spezifische Herunterregulation nikotinische Acetylcholin-Rezeptoren in der Beckenh&ouml;hle Ganglien von kastrierten Ratten: Implikationen f&uuml;r neurogene erektile Dysfunktion.

Gangli pelvici (PG) svolgono un ruolo critico nel convogliare informazioni simpatici e parasimpatici dal midollo spinale per la vascolarizzazione del pene e, controllando il riflesso del pene. Studi sugli animali hanno dimostrato che la deprivazione androgenica da castrazione provoca la disfunzione erettile (de). Fino ad ora, tuttavia, meccanismi neurali sottostanti ED indotta da castrazione rimangono poco chiari. Pertanto, abbiamo esaminato se la deprivazione androgenica gi&ugrave;-regola i recettori nicotinici acetilcolina (nAchRs), che mediano Trasmissione sinaptica veloce eccitatorio in PG. verso questo fine, neurogeno ED &egrave; stato dimostrato misurando la pressione intracavernous in ratti castrati. Analisi PCR in tempo reale ha rivelato che le trascrizioni subunit&agrave; &alpha;3/&alpha;5/&beta;4 nAchR erano significativamente gi&ugrave;-regolato nei neuroni PG. Inoltre, down-regulation delle subunit&agrave; nAchR &egrave; stato stornato dalla sostituzione del testosterone. Esperimenti di patch-clamp ha mostrato che le correnti di nAchR furono attenuate selettivamente nei neuroni PG parasimpatici innervano il sistema vascolare del pene, attivazione di che suscita l&#39;erezione del pene. Presi insieme, che i nostri dati suggeriscono quello specifico fenotipo down-regulation dei nAchRs nei neuroni PG possono contribuire al neurogena ed in ratti castrati.

Specifiche del fenotipo down-regulation dei recettori nicotinici acetilcolina nei gangli pelvici di ratti castrati: implicazioni per la disfunzione erettile neurogena.

&#x9AA8;&#x76E4;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0; (PG) &#x810A;&#x9AC4;&#x304B;&#x3089;&#x9670;&#x830E;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x306B;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x4E2D;&#x7D99;&#x3057;&#x3001;&#x9670;&#x830E;&#x306E;&#x53CD;&#x5C04;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x52D5;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30F3;&#x9664;&#x53BB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x53BB;&#x52E2;&#x304C;&#x52C3;&#x8D77;&#x4E0D;&#x5168; &#xFF08;ED&#xFF09; &#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ECA;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x53BB;&#x52E2;&#x8A98;&#x8D77;&#x30A8;&#x30C9;&#x795E;&#x7D4C;&#x6A5F;&#x69CB;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x306E;&#x9805;&#x3067;&#x901F;&#x304F;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (nAchRs) &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30F3;&#x9664;&#x53BB;&#x691C;&#x8A0E;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x56E0;&#x6027; ED &#x306F;&#x53BB;&#x52E2;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x6D77;&#x7DBF;&#x9759;&#x8108;&#x6D1E;&#x5727;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; PCR &#x89E3;&#x6790; nAchR &beta;4/&alpha;3/&alpha; 5 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6210;&#x7E3E;&#x8A3C;&#x660E;&#x66F8;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; PG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;nAchR &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x7F6E;&#x63DB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9006;&#x8EE2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F; nAchR &#x96FB;&#x6D41;&#x304C;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x9670;&#x830E;&#x306E;&#x52C3;&#x8D77;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x3001;&#x9670;&#x830E;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x306E;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C; PG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x5F31;&#x6BD2;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x64AE;&#x5F71;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x305D;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; PG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; nAchRs &#x306E;&#x63D0;&#x6848;&#x306B;&#x53BB;&#x52E2;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x795E;&#x7D4C;&#x56E0;&#x6027; ED &#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x53BB;&#x52E2;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x9AA8;&#x76E4;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x306E;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;: &#x795E;&#x7D4C;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x52C3;&#x8D77;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x542B;&#x610F;&#x3002;

&#xACE8;&#xBC18; &#xC2E0;&#xACBD; (PG) &#xC74C; &#xACBD; &#xD608;&#xAD00;&#xC744; &#xCC99;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50;&#xAC10; &#xBC0F; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xB9B4;&#xB808;&#xC774; &#xD558; &#xACE0;, &#xC74C; &#xACBD; &#xBC18;&#xC0AC; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAC70;&#xC138; &#xD558; &#xC5EC; &#xC548; &#xB4DC;&#xB85C; &#xAC90; &#xBD80;&#xC871; &#xD558;&#xBA74; &#xBC1C;&#xAE30; &#xBD80;&#xC804; (ED) &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0;,, &#xAC70;&#xC138; &#xC720;&#xB3C4; &#xB4DC; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC548; &#xB4DC;&#xB85C; &#xAC90; &#xBC15;&#xD0C8; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC870;&#xC808; nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; (nAchRs) &#xBE68;&#xB9AC; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC774; &#xC911;&#xC7AC; &#xC5EC;&#xBD80; &#xAC80;&#xC0AC;, neurogenic ED &#xAC70;&#xC138; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; intracavernous &#xC555;&#xB825;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xC131;&#xC801;&#xD45C; nAchR &alpha;3/&alpha;5/&beta;4 subunits &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xC6B4; PG &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xADDC;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; nAchR subunits&#xC758; &#xB0A8;&#xC131; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC758; &#xBCF4;&#xCDA9;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xC804; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC2E4;&#xD5D8; nAchR &#xC804;&#xB958; innervating&#xB294; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; elicits &#xC131; &#xAE30; &#xBC1C;&#xAE30;&#xB294; &#xC74C; &#xACBD; &#xD608;&#xAD00; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; PG &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCD2C;&#xC601; &#xD568;&#xAED8; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; nAchRs PG &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC815; &#xADF8; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC70;&#xC138; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; neurogenic&#xC5D0; &#xB4DC;.

&#xAC70;&#xC138; &#xC950;&#xC758; &#xACE8;&#xBC18; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C;: neurogenic &#xBC1C;&#xAE30; &#xC131; &#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;.

Los ganglios p&eacute;lvicos (PG) juegan un papel cr&iacute;tico en la retransmisi&oacute;n de informaci&oacute;n simp&aacute;tica y parasimp&aacute;tica de la m&eacute;dula espinal a la vasculatura del pene y controlar el reflejo del pene. Estudios en animales han demostrado que la privaci&oacute;n de andr&oacute;genos por castraci&oacute;n causa la disfunci&oacute;n er&eacute;ctil (ED). Hasta ahora, sin embargo, los mecanismos neuronales subyacentes a ED inducida por castraci&oacute;n todav&iacute;a no est&aacute;n claros. Por lo tanto, se examin&oacute; si la privaci&oacute;n de andr&oacute;genos abajo-regula los receptores nicot&iacute;nicos de la acetilcolina (nAchRs), que median la transmisi&oacute;n sin&aacute;ptica excitatoria r&aacute;pida en la p&aacute;g. hacia ello, ED neurog&eacute;nico se demostr&oacute; mediante la medici&oacute;n de la presi&oacute;n intracavernosa en ratas castradas. An&aacute;lisis PCR en tiempo real revelaron que los transcritos codifican subunidades de &alpha;3/&alpha;5/&beta;4 nAchR eran significativamente regula en las neuronas de la PG. Adem&aacute;s, abajo-regulaci&oacute;n de las subunidades nAchR fue invertida por el reemplazo de testosterona. Patch-clamp experimentos demostraron que las corrientes nAchR se aten&uacute;an selectivamente en las neuronas parasimp&aacute;ticas de PG inervan la vasculatura del pene, activaci&oacute;n que provoca la erecci&oacute;n del pene. Tomados juntos, que nuestros datos sugieren fenotipo espec&iacute;fico abajo-regulaci&oacute;n de nAchRs en las neuronas PG pueden contribuir al ED neurog&eacute;nico en ratas castradas.

Fenotipo espec&iacute;fico abajo-regulaci&oacute;n de los receptores nicot&iacute;nicos de la acetilcolina en los ganglios p&eacute;lvicos de ratas castradas: implicaciones para la disfunci&oacute;n er&eacute;ctil neurog&eacute;nica.

Yu-Jin Won

Laboratory of Molecular Physiology,
National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA),
Laboratory of Molecular Physiology, National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA)

National Institutes of Health (NIH)

Intranuclear Microinjection of DNA into Dissociated Adult Mammalian Neurons

Yu-Jin Won

Laboratory of Molecular Physiology,National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA),Laboratory of Molecular Physiology, National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA)

National Institutes of Health (NIH)

Intranuclear Microinjection of DNA into Dissociated Adult Mammalian Neurons

Laboratory of Molecular Physiology,
National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA),
Laboratory of Molecular Physiology, National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA)