high-throughput-microrna-profiling-optimized-multiplex-qrt-pcr-at

High Throughput MicroRNA Profiling: Optimized Multiplex qRT-PCR at Nanoliter Scale on the Fluidigm Dynamic ArrayTM IFCs

The broad involvement of miRNAs in critical processes underlying development, tissue homoeostasis and disease has led to a surging interest among the ...

University of California San Francisco 

&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x81EA;&#x81A8;&#x94FC; 188 (188Re) radiochemically &#x6807;&#x8BB0;&#x653E;&#x5C04;&#x6027;&#x652F;&#x67B6;&#x5728;&#x7F8A;&#x3002;

188Re &#x6807;&#x8BB0;&#x954D;&#x949B;&#x5408;&#x91D1;&#x652F;&#x67B6;&#x5728;&#x7F8A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E0E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x819C;&#x589E;&#x751F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

To evaluate a self-expanding rhenium 188 (188Re) radiochemically labeled radioactive stent in sheep.

Inhibition of neointimal proliferation with 188Re-labeled self-expanding nitinol stent in a sheep model.

Pour &eacute;valuer une endoproth&egrave;se rh&eacute;nium 188 (188Re) &eacute;tiquet&eacute; techniques stent radioactif chez le mouton.

Inhibition de la prolif&eacute;ration n&eacute;ointimale avec endoproth&egrave;se en nitinol autoexpansible 188Re marqu&eacute;e dans un mod&egrave;le de moutons.

Die Hemmung der Proliferation der Neointima mit 188Re-markierten selbstexpandierenden Nitinol Stent in einem Schaf-Modell.

Per valutare un renio autoespandente 188 (188Re) etichettati radiochemically stent radioattivo negli ovini.

Inibizione della proliferazione neointimale con 188Re-etichetta autoespandibile in nitinol stent in un modello di pecore.

&#x81EA;&#x5DF1;&#x5C55;&#x958B;&#x30EC;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0; 188 &#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;(188Re) &#x306F; radiochemically &#x653E;&#x5C04;&#x6027;&#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C8;&#x7F8A;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x3002;

188Re &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x5C55;&#x958B;&#x578B;&#x306E;&#x30CB;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB; &#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C8;&#x7F8A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5185;&#x65B0;&#x751F;&#x5185;&#x819C;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xD3C9;&#xAC00; &#xC790;&#xCCB4; rhenium 188 (188Re) radiochemically &#xC591; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC131; &#xC2A4;&#xD150; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C;.

&#xC591; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC790;&#xCCB4; nitinol &#xC2A4;&#xD150; 188Re &#xBD84;&#xB958;&#xC640; neointimal &#xD655;&#xC0B0;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;.

Para evaluar un autoexpandible renio 188 (188Re) etiquetado radiochemically stent radiactivo en ovejas.

Inhibici&oacute;n de la proliferaci&oacute;n neointimal con stent autoexpandible de nitinol marcados con 188Re, en un modelo de ovejas.

Tras la identificaci&oacute;n inicial de c&eacute;lulas madre hematopoy&eacute;ticas tumorales, tales c&eacute;lulas tambi&eacute;n fueron encontrados en varios tipos de tumores s&oacute;lidos. En urolog&iacute;a, c&eacute;lulas madre del c&aacute;ncer han encontrado solamente en tumores de pr&oacute;stata hasta ahora. El concepto y la detecci&oacute;n de c&eacute;lulas madre tumorales dependen en gran medida los resultados derivados de la investigaci&oacute;n con c&eacute;lulas madre. Por lo tanto, adem&aacute;s de la identificaci&oacute;n y caracterizaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre tumorales urol&oacute;gicos, investigaci&oacute;n en Uro-oncolog&iacute;a tambi&eacute;n deber&iacute;a apuntar a entender mejor la biolog&iacute;a de c&eacute;lulas madre de &oacute;rganos urol&oacute;gicos. Penetraciones en las similitudes y diferencias de estos estudios podr&iacute;an utilizarse para desarrollar estrategias espec&iacute;ficas destrucci&oacute;n de c&eacute;lulas madre tumorales mientras que ahorra las c&eacute;lulas fisiol&oacute;gicas. El principal objetivo de futuras terapias curativas en Uro-oncolog&iacute;a debe estar la cabeza central, inmortal de la Hidra, las c&eacute;lulas del tumor.

&quot;Las c&eacute;lulas madre de c&aacute;ncer&quot;-lecciones de H&eacute;rcules lucha contra la Hidra.

&#xC870; &#xD608; &#xC885;&#xC591; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB610;&#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC885;&#xC591; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB1E8;&#xAE30;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC554; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB9CC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0;. &#xAC1C;&#xB150; &#xBC0F; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xC885;&#xC591; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC758;&#xC874;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xBE44;&#xB1E8; &#xAE30;&#xACC4; &#xC885;&#xC591; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;, uro &#xC885;&#xC591;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBE44;&#xB1E8; &#xAE30;&#xACC4; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB85C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC0AC;&#xC810;&#xACFC; &#xCC28;&#xC774;&#xC810; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825; &#xC0B4;&#xB824;&#xC8FC;&#xB294; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC885;&#xC591; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xD30C;&#xAD34;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC694;&#xBC95; uro &#xC885;&#xC591;&#xD559;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB300;&#xC0C1; &#xD788;&#xB4DC;&#xB77C;, &#xC885;&#xC591; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC911;&#xC559;, &#xBD88;&#xBA78;&#xC758; &#xBA38;&#xB9AC; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&quot;&#xC554; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&quot;-&#xC218;&#xC5C5; &#xD5E4;&#xB77C;&#xD074;&#xB808;&#xC2A4;&#xB294; &#xD788;&#xB4DC;&#xB77C;&#xB97C; &#xC2F8;&#xC6C0;&#xC5D0;&#xC11C;.

&#x540E;&#x9020;&#x8840;&#x80BF;&#x7624;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x521D;&#x6B65;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x51E0;&#x79CD;&#x56FA;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x5728;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5916;&#x79D1;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x53EA;&#x81F3;&#x4ECA;&#x5C1A;&#x672A;&#x53D1;&#x73B0;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x6982;&#x5FF5;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E25;&#x91CD;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x8868;&#x5F81;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5916;&#x79D1;&#x80BF;&#x7624;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x80BF;&#x7624;&#x79D1;&#x7814;&#x7A76;&#x5E94;&#x8FD8;&#x65E8;&#x5728;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x5F97;&#x5230;&#x7684;&#x5F02;&#x540C;&#x7684;&#x89C1;&#x89E3;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x5236;&#x8BA2;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7834;&#x574F;&#x80BF;&#x7624;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x867D;&#x7136;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x80BF;&#x7624;&#x79D1;&#x672A;&#x6765;&#x6CBB;&#x7597;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x5FC5;&#x987B;&#x4E2D;&#x592E;&#x3001; &#x795E;&#x4ED9;&#x5934;&#x7684;&#x6C34;&#x8785;&#xFF0C;&#x80BF;&#x7624;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&quot;&#x764C;&#x75C7;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&quot;-&#x8D6B;&#x5C14;&#x514B;&#x91CC;&#x58EB;&#x5BF9;&#x4ED8;&#x4E5D;&#x5934;&#x86C7;&#x7684;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x6559;&#x8BAD;&#x3002;

Following the initial identification of hematopoietic tumor stem cells, such cells were also found in several solid tumor types. In urology, cancer stem cells have only been found in prostate tumors so far. The concept and detection of tumor stem cells rely heavily on findings derived from stem cell research. Therefore, in addition to identifying and characterizing urologic tumor stem cells, research in uro-oncology should also aim at better understanding the stem-cell biology of urologic organs. Insights in similarities and differences gleaned from these studies could be used to develop strategies for targeted destruction of tumor stem cells while sparing the physiological stem cells. The main target of future curative therapies in uro-oncology must therefore be the central, immortal head of the Hydra, the tumor stem cell.

"Cancer stem cells"-lessons from Hercules to fight the Hydra.

Apr&egrave;s l&#39;identification initiale de cellules souches h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques tumorales, ces cellules se retrouvent &eacute;galement dans plusieurs types de tumeurs solides. En urologie, cellules souches canc&eacute;reuses ont seulement &eacute;t&eacute; trouv&eacute;s dans les tumeurs de la prostate jusqu&#39;&agrave; pr&eacute;sent. Le concept et la d&eacute;tection de cellules souches tumorales s&#39;appuient fortement sur les conclusions tir&eacute;es de la recherche sur les cellules souches. Par cons&eacute;quent, en plus d&#39;identifier et caract&eacute;riser les cellules souches tumorales urologique, recherche en uro-oncologie visent &eacute;galement &agrave; mieux comprendre la biologie des cellules souches des organes urologiques. Aper&ccedil;us dans les similitudes et les diff&eacute;rences tir&eacute;es de ces &eacute;tudes pourraient servir &agrave; &eacute;laborer des strat&eacute;gies pour la destruction de cellules souches tumorales cibl&eacute;e tout en &eacute;pargnant les cellules souches physiologiques. La cible principale des futures th&eacute;rapies curatives en uro-oncologie doit donc &ecirc;tre la t&ecirc;te centrale, immortelle de l&#39;Hydre, les cellules souches tumorales.

&laquo; Les cellules souches canc&eacute;reuses &raquo;-le&ccedil;ons d&#39;Hercules pour combattre l&#39;Hydre.

Nach der anf&auml;nglichen Identifizierung des h&auml;matopoetischen Tumor-Stammzellen wurden solche Zellen auch in mehreren solider Tumor-Arten gefunden. In Urologie Krebsstammzellen nur in Prostatatumoren bisher gefunden. Das Konzept und die Erkennung von Tumor-Stammzellen setzen verst&auml;rkt auf Feststellungen von Stammzellenforschung abgeleitet. Daher sollte neben der Identifizierung und Charakterisierung urologische Tumor-Stammzellen, Forschung in der Uro-Onkologie auch darauf die Stammzellbiologie urologische Organe besser zu verstehen. Einblicke in die &Auml;hnlichkeiten und Unterschiede entnommen aus diesen Studien k&ouml;nnte verwendet werden, entwickeln Strategien f&uuml;r die gezielte Zerst&ouml;rung von Tumor-Stammzellen w&auml;hrend der physiologischen Stammzellen zu schonen. Deshalb muss das Hauptziel der zuk&uuml;nftige heilenden Therapien in der Uro-Onkologie der zentrale, unsterbliche Kopf von der Hydra, die Tumor-Stammzellen.

&quot;Krebs-Stammzellen&quot;-Lektionen von Hercules, die Hydra zu k&auml;mpfen.

In seguito l&#39;identificazione iniziale di cellule staminali ematopoietiche tumore, tali cellule sono stati trovati anche in diversi tipi di tumore solido. In urologia, cellule staminali tumorali sono solo state trovate nei tumori della prostata finora. Il concetto e la rilevazione delle cellule staminali tumorali si basano pesantemente sui risultati ottenuti dalla ricerca sulle cellule staminali. Pertanto, oltre ad identificare e caratterizzare le cellule staminali tumorali urologiche, ricerca in uro-oncologia anche dovrebbe mirare a comprendere meglio la biologia delle cellule staminali di organi urologici. Intuizioni in somiglianze e le differenze ricavate da questi studi potrebbero essere utilizzati per sviluppare strategie per distruzione mirata delle cellule staminali tumorali mentre risparmiando le cellule staminali fisiologiche. L&#39;obiettivo principale di future terapie curative in uro-oncologia deve pertanto essere la testa centrale, immortale della Idra, le cellule staminali tumorali.

&quot;Le cellule staminali tumorali&quot;-lezioni da Ercole per la lotta contro l&#39;Idra.

&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x5F8C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3082;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x56FA;&#x4F53;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5668;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x307F;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6982;&#x5FF5;&#x3068;&#x691C;&#x51FA;&#x816B;&#x760D;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x6240;&#x898B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5668;&#x816B;&#x760D;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5668;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3082;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5668;&#x79D1;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x6DF1;&#x3081;&#x308B;&#x76EE;&#x6307;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x3002;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3068;&#x76F8;&#x9055;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x96C6;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x306F;&#x751F;&#x7406;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6E29;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x816B;&#x760D;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672A;&#x6765;&#x306E;&#x6839;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x5668;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x306E;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x4E2D;&#x592E;&#x3001;&#x4E0D;&#x6EC5;&#x306E;&#x982D;&#x306E;&#x30D2;&#x30C9;&#x30E9;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x300C;&#x304C;&#x3093;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x300D;-&#x3001;&#x30D2;&#x30C9;&#x30E9;&#x3068;&#x6226;&#x3046;&#x30D8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EC;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6559;&#x8A13;&#x3002;

&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x7684; Microrna &#xFF08;Mirna&#xFF09; &#x548C;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; Rna (siRNAs) &#x7684;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F; [1&#x3001; 2]&#x3002;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; Mirna &#x548C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; siRNAs (&#x8FDC;&#x85E4; siRNAs&#xFF09; [3&#xFF0C;4]&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x5728;&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#x6316;&#x7A7A;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x6210;&#x719F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x662F;&#x6B21;&#x8981;&#x7684;&#x8FDC;&#x85E4; siRNAs &#x548C;/&#x6216; Mirna &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x5220;&#x9664; Dgcr8&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x7C73;&#x5C14;&#x5904;&#x7406;&#x5177;&#x4F53;&#x6240;&#x9700;&#x7684; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x9C9C;&#x660E;&#x7684;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5230;&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#xFF0C;Dgcr8 &#x7F3A;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x901A;&#x5E38;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x5F53;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D7;&#x7CBE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5065;&#x5EB7;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x540E;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x7C73;&#x5C14;&#x6C34;&#x5E73;&#x5230;&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#x7F3A;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x5987;&#x548C;&#x5408;&#x5B50; Dgcr8 &#x57FA;&#x56E0;&#x5220;&#x9664;&#x4E0D;&#x635F;&#x5BB3;&#x80DA;&#x80CE;&#x690D;&#x5165;&#x524D;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5185;&#x90E8;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x548C; trophectoderm&#x3002;&#x6700;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x5403;&#x60CA;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; Dgcr8 &#x7A7A;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x56FE;&#x8C31;&#x662F;&#x672C;&#x8D28;&#x4E0A;&#x662F;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x800C;&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#x7A7A;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x6570;&#x767E;&#x4E2A; misregulated &#x8A8A;&#x672C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x7C73;&#x5C14;&#x529F;&#x80FD;&#x5168;&#x7403;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x88AB;&#x538B;&#x5236;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x690D;&#x5165;&#x524D;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x8FD9;&#x8FDC;&#x85E4;-siRNAs&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0D;&#x662F; Mirna&#xFF0C;&#x57FA;&#x7840;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#x6316;&#x7A7A;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

MicroRNA &#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x5168;&#x7403;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x6291;&#x5236;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x3002;

Dicer, which is required for the processing of both microRNAs (miRNAs) and small interfering RNAs (siRNAs), is essential for oocyte maturation [1, 2]. Oocytes express both miRNAs and endogenous siRNAs (endo-siRNAs) [3, 4]. To determine whether the abnormalities in Dicer knockout oocytes during meiotic maturation are secondary to the loss of endo-siRNAs and/or miRNAs, we deleted Dgcr8, which encodes an RNA-binding protein specifically required for miRNA processing. In striking contrast to Dicer, Dgcr8-deficient oocytes matured normally and, when fertilized with wild-type sperm, produced healthy-appearing offspring, even though miRNA levels were reduced to similar levels as Dicer-deficient oocytes. Furthermore, the deletion of both maternal and zygotic Dgcr8 alleles did not impair preimplantation development, including the determination of the inner cell mass and trophectoderm. Most surprisingly, the mRNA profiles of wild-type and Dgcr8 null oocytes were essentially identical, whereas Dicer null oocytes showed hundreds of misregulated transcripts. These findings show that miRNA function is globally suppressed during oocyte maturation and preimplantation development and that endo-siRNAs, rather than miRNAs, underlie the Dicer knockout phenotype in oocytes.

MicroRNA function is globally suppressed in mouse oocytes and early embryos.

Dicer, qui est requis pour le traitement des deux microARN (miARN) et les petits ARN interf&#xE9;rents (siRNA), est essentiel pour la maturation des ovocytes [1, 2]. Les ovocytes exprimer les deux miARN et siARN endog&#xE8;nes (endo-siRNA) [3, 4]. Pour d&#xE9;terminer si les anomalies dans les ovocytes knock-out au cours de la maturation m&#xE9;iotique Dicer sont secondaires &#xE0; la perte de l&#x26;#39;endo-siRNA et / ou miARN, nous avons supprim&#xE9; Dgcr8, qui code pour une prot&#xE9;ine ARN-lier sp&#xE9;cifiquement requis pour le traitement des miARN. En contraste frappant avec Dicer, Dgcr8 d&#xE9;ficientes ovocytes m&#xFB;ri normalement et, quand f&#xE9;cond&#xE9;s avec le sperme de type sauvage, produite apparence saine descendance, m&#xEA;me si les niveaux miARN ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duites &#xE0; des niveaux similaires &#xE0; ceux Dicer-d&#xE9;ficientes ovocytes. En outre, la suppression des deux Dgcr8 maternelle et zygotique all&#xE8;les n&#x26;#39;a pas entraver le d&#xE9;veloppement pr&#xE9;implantatoire, y compris la d&#xE9;termination de la masse cellulaire interne et trophectoderme. Le plus surprenant, les profils d&#x26;#39;ARNm de type sauvage et Dgcr8 ovocytes nuls &#xE9;taient essentiellement identiques, alors que Dicer ovocytes nuls ont montr&#xE9; des centaines de transcriptions misregulated. Ces r&#xE9;sultats montrent que la fonction miRNA est globalement supprim&#xE9; pendant la maturation des ovocytes et le d&#xE9;veloppement pr&#xE9;-implantatoire et que l&#x26;#39;endo-siRNA, plut&#xF4;t que de miARN, sous-tendent le ph&#xE9;notype KO Dicer dans les ovocytes.

Fonction MicroRNA est globalement Supprim&#xE9;e en ovocytes de souris et les embryons pr&#xE9;coces

Dicer, die f&uuml;r die Verarbeitung von MicroRNAs (MiRNAs) und kleine interferierender RNAs (SiRNAs) erforderlich ist, ist notwendig f&uuml;r die Reifung der Eizelle [1, 2]. Eizellen schnelles MiRNAs und endogene SiRNAs (Endo-SiRNAs) [3, 4]. Um festzustellen, ob die Anomalien in Dicer k.o. Eizellen w&auml;hrend meiotischen Reifung sekund&auml;r zu Verlust von Endo-SiRNAs und/oder MiRNAs, gel&ouml;scht wir Dgcr8, das eine RNS-bindene Protein speziell f&uuml;r MiRNA Verarbeitung erforderlichen codiert. Im krassen Gegensatz zu Dicer, Dgcr8-defizienten Eizellen normalerweise gereift, und wenn mit Wildtyp Sperma befruchtet produziert gesund erscheinende nachkommen, obwohl MiRNA auf ein &auml;hnliches Niveau wie Dicer-defizienten Eizellen reduziert wurden. Dar&uuml;ber hinaus die Streichung von sowohl die m&uuml;tterliche als auch die zygotic Dgcr8 Allele nicht beeintr&auml;chtigen, Pr&auml;implantationsdiagnostik-Entwicklung, einschlie&szlig;lich der Bestimmung der inneren Zelle Masse und Trophectoderm. Am meisten &uuml;berrascht waren die mRNA-Profile der Wildtyp und Dgcr8 null Eizellen im Wesentlichen identisch, w&auml;hrend Dicer null Eizellen Hunderte von misreguliert Abschriften zeigte. Diese Ergebnisse zeigen, dass MiRNA-Funktion Global, w&auml;hrend der Reifung der Eizelle unterdr&uuml;ckt wird und Pr&auml;implantationsdiagnostik Entwicklung und die Endo-SiRNAs, anstatt MiRNAs, der Dicer k.o. Ph&auml;notyp in Eizellen unterliegen.

MicroRNA Funktion wird Global Maus Eizellen und fr&uuml;hen Embryonen unterdr&uuml;ckt.

Dicer, che &egrave; necessaria per l&#39;elaborazione di microRNA (miRNAs) e piccoli RNA interferenti (siRNA), &egrave; essenziale per la maturazione degli ovociti [1, 2]. Gli ovociti express miRNAs sia endogeni siRNA (endo-siRNA) [3, 4]. Per determinare se le anomalie in ovociti knockout Dicer durante la maturazione meiotica sono secondarie alla perdita di endo-siRNA e/o miRNAs, abbiamo eliminato Dgcr8, che codifica per un RNA-binding protein specificamente richiesto per l&#39;elaborazione di miRNA. In sorprendente contrasto con Dicer, Dgcr8-carenti ovociti maturati normalmente e, quando fecondato con lo sperma di wild-type, prodotto prole sana-appare, anche se i livelli di miRNA sono stati ridotti a livelli simili come gli ovociti Dicer-carenti. Inoltre, l&#39;eliminazione degli alleli Dgcr8 materni e zygotic non ha alterato sviluppo preimpianto, compresa la determinazione dell&#39;inner cell mass e trophectoderm. Pi&ugrave; sorprendentemente, i profili di mRNA di wild-type e Dgcr8 null ovociti erano essenzialmente identici, mentre gli ovociti null Dicer hanno mostrato centinaia di trascrizioni misregulated. Questi risultati mostrano che miRNA funzione globalmente &egrave; soppressa durante la maturazione degli ovociti e sviluppo preimpianto e che endo-siRNA, anzich&eacute; miRNAs, sottendono il fenotipo knockout Dicer in ovociti.

Funzione di MicroRNA &egrave; globalmente soppressa nel mouse ovociti ed embrioni in anticipo.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#xFF08;miRNA&#xFF09;&#x3068;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#xFF08;siRNA&#xFF09;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x5375;&#x6210;&#x719F;[1]&#x3001;[2]&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;miRNA&#x3068;&#x5185;&#x5728;&#x6027;siRNA&#xFF08;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;-siRNA&#xFF09;&#x3092;[3]&#x3001;[4]&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x6210;&#x719F;&#x6642;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30B5;&#x30FC;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x304C;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;-siRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;miRNA&#x306E;&#x30ED;&#x30B9;&#x306B;&#x4E8C;&#x6B21;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;miRNA&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;RNA&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3001;Dgcr8&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;Dgcr8&#x6B20;&#x640D;&#x5375;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;miRNA&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x30C0;&#x30A4;&#x30B5;&#x30FC;&#x6B20;&#x640D;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x307E;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5065;&#x5EB7;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x5B50;&#x5B6B;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6BCD;&#x4F53;&#x3068;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;Dgcr8&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x90E8;&#x7D30;&#x80DE;&#x584A;&#x3068;&#x6804;&#x990A;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x3001;&#x7740;&#x5E8A;&#x524D;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30B5;&#x30FC;&#x30CC;&#x30EB;&#x5375;&#x306F;misregulated&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x6570;&#x767E;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Dgcr8&#x30CC;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x4E00;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;miRNA&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306B;&#x5375;&#x6210;&#x719F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7740;&#x5E8A;&#x524D;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;-siRNA&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;miRNA&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Dicer&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

microRNA&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;

MicroRNAs (miRNAs)&#xC640; &#xC791;&#xC740; &#xBC29;&#xD574; RNAs (siRNAs)&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; dicer oocyte &#xC131;&#xC219; [1, 2]&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Oocytes &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; Mirnas&#xC640; &#xC0DD; siRNAs (&#xC5D4;&#xB3C4; siRNAs &#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;) [3, 4]. Dicer &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; oocytes meiotic &#xC131;&#xC219; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xBCF4;&#xC870; &#xC5D4;&#xB3C4; siRNAs Mirnas&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778;, &#xD2B9;&#xD788; &#xBBF8;&#xB974; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; Dgcr8 &#xC0AD;&#xC81C;. Dicer&#xC5D0; &#xB300;&#xBE44;, &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294;&#xC5D0;&#xC11C; Dgcr8 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; oocytes &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC219; &#xD558; &#xACE0; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC815;&#xC790;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC218;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xB294; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC790;&#xC190;, miRNA &#xC218;&#xC900;&#xC740; Dicer &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; oocytes&#xB85C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xB354;&#xB77C;&#xB3C4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBAA8;&#xC131; &#xBC0F; zygotic Dgcr8 &#xB300;&#xB9BD; &#xC0AD;&#xC81C; preimplantation &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xB0B4;&#xBD80; &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xC190;&#xC0C1; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBC0F; trophectoderm. &#xC758;&#xC678;&#xB85C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; Dgcr8 null oocytes mRNA &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C; Dicer null oocytes &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC218;&#xBC31; misregulated &#xC131;&#xC801;&#xD45C; &#xBC18;&#xBA74; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; miRNA &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xC138;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; oocyte &#xC131;&#xC219; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; preimplantation &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC5D4;&#xB3C4; siRNAs &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; miRNAs, &#xAE30;&#xCD08; Dicer &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xD615; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MicroRNA &#xD568;&#xC218; &#xC804;&#xC5ED;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; oocytes &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC774;&#xB978; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B5;&#xC81C;.

Dicer, que se requiere para la tramitaci&#xF3;n de ambas microARN (miRNA) y peque&#xF1;os ARN de interferencia (siRNAs), es esencial para la maduraci&#xF3;n de ovocitos [1, 2]. Los ovocitos expresar ambos miRNAs y siRNAs end&#xF3;genos (endo-siRNAs) [3, 4]. Para determinar si las anomal&#xED;as en los ovocitos de eliminatorias Dicer durante la maduraci&#xF3;n mei&#xF3;tica son secundarias a la p&#xE9;rdida de endo-siRNAs y / o miRNAs, hemos suprimido DGCR8, que codifica una prote&#xED;na de uni&#xF3;n al ARN espec&#xED;ficamente requerido para el procesamiento de miRNA. En contraste con Dicer, DGCR8 con deficiencia de los ovocitos madurados con normalidad y, cuando se fertiliza con el esperma de tipo salvaje, de aspecto saludable produce descendencia, a pesar de que los niveles de miRNA se redujo a niveles similares a los Dicer deficientes ovocitos. Por otra parte, la eliminaci&#xF3;n de ambos madre y el cig&#xF3;ticos DGCR8 alelos no perjudicar el desarrollo preimplantacional, incluyendo la determinaci&#xF3;n de la masa celular interna y trophectoderm. Lo m&#xE1;s sorprendente, los perfiles de mRNA de los ovocitos nulos de tipo salvaje y DGCR8 son esencialmente id&#xE9;nticas, mientras que Dicer ovocitos mostraron nulos cientos de transcripciones mal regulados. Estos hallazgos muestran que los genes miARN funci&#xF3;n es globalmente suprimida durante la maduraci&#xF3;n de ovocitos y el desarrollo preimplantacional y endo-siRNAs, miRNAs en lugar de, subyacen en el fenotipo de octavos de final Dicer en los ovocitos.

Funci&#xF3;n microARN suprimidos en el mundo se los ovocitos de rat&#xF3;n y principios de los embriones

Recenti prove di screening basati su antigene prostata-specifico indicano un urgente bisogno di romanzo e strategie di identificazione di biomarker non invasiva per migliorare la previsione del comportamento di cancro alla prostata. Non codificante microRNA (miRNA) nel siero e plasma hanno dimostrato di avere potenzialit&agrave; come marcatori non invasivi per condizioni fisiologiche e patologiche. Per identificare i miRNAs siero che diagnosticare e correlano con la prognosi del cancro della prostata, abbiamo sviluppato un metodo PCR multiplex quantitativa trascrizione d&#39;inversione che coinvolge la purificazione dei prodotti PCR multiplex seguita da uniplex analisi su un chip microfluidici per valutare 384 miRNAs umana. Utilizzando cellule di topo ES ko (piccolo RNA-carente) Dgcr8 e cubettatrice come punto di riferimento, ci ha confermato la validit&agrave; della nostra tecnica e scoperto una notevole mancanza di precisione nei metodi precedentemente pubblicati. Profilatura 48 sieri da uomini sani e pazienti affetti da cancro alla prostata non trattati con differenti punteggi di CAPRA, abbiamo individuato le firme di miRNA che ci consentono di diagnosticare i pazienti oncologici e correlano con una prognosi. Queste firme di siero comprendono miRNAs oncogenica e tumore-soppressiva, suggerendo ruoli funzionali nella progressione del cancro alla prostata.

Basata su microfluidica qRT-PCR multiplex identifica le firme di microRNA diagnostico e prognostico nei sieri di pazienti affetti da cancro alla prostata.

&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x7279;&#x7570;&#x6297;&#x539F;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x306E;&#x6319;&#x52D5;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x304B;&#x3064;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7DCA;&#x6025;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x6E05;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#xFF08;miRNA&#x306F;&#xFF09;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3068;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x306E;&#x4E88;&#x5F8C;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x8840;&#x6E05;miRNA&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;384&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;miRNA&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x4E0A;&#x306E;uniplex&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;PCR&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;PCR&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C1;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Dgcr8&#x3068;&#x30C0;&#x30A4;&#x30B5;&#x30FC;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#xFF08;small RNA&#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x767A;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306F;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x7537;&#x6027;&#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;48&#x8840;&#x6E05;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3068;&#x4E88;&#x5F8C;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;miRNA&#x306E;&#x7F72;&#x540D;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x7F72;&#x540D;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x767A;&#x764C;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;miRNA&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x591A;&#x91CD;QRT-PCR&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E88;&#x5F8C;microRNA&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CB;&#x30C1;&#x30E3;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xC6D0; &#xAE30;&#xBC18; &#xC120;&#xBCC4; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xC608;&#xCE21;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC18C;&#xC124; &#xBC0F; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; biomarker &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE34;&#xAE09; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD608; &#xCCAD; &#xBC0F; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; noncoding microRNAs (&#xBBF8;&#xB974;) &#xC0DD;&#xB9AC; &#xBC0F; pathologic &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB85C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD608; &#xCCAD; Mirnas&#xB294; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554;&#xC758; &#xC608; &#xD6C4;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBA40;&#xD2F0;&#xD50C;&#xB809;&#xC2A4; PCR &#xC81C;&#xD488; &#xD3C9;&#xAC00; 384 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; miRNAs microfluidics &#xCE69;&#xC744; uniplex &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBA40;&#xD2F0;&#xD50C;&#xB809;&#xC2A4; &#xC591;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC18;&#xC804; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; PCR &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;. Dgcr8 &#xBC0F; Dicer &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (&#xC791;&#xC740; RNA &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84;) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAE30;&#xBC95;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xCD9C;&#xD310;&#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xB3C4;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC554; &#xD658;&#xC790;&#xB97C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xC608; &#xD6C4;&#xB97C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBBF8;&#xB974; &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xB0A8;&#xC790;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; CAPRA &#xC810;&#xC218; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; 48 &#xC138;&#xB77C; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD608; &#xCCAD; &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xACE0; &#xC885;&#xC591; &#xC9C4;&#xC555; miRNAs, &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554; &#xC9C4;&#xD589; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBBF8;&#xC138; &#xAE30;&#xBC18; &#xB2E4;&#xC911; qRT PCR &#xC138;&#xB77C;&#xC758; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xC870; microRNA &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x7B5B;&#x9009;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C;&#x65E0;&#x521B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x8BC6;&#x522B;&#x6218;&#x7565;&#x8FEB;&#x5207;&#x9700;&#x8981;&#x63D0;&#x9AD8;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x884C;&#x4E3A;&#x9884;&#x6D4B;&#x3002;&#x8840;&#x6E05;&#x548C;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x7684;&#x975E;&#x7F16;&#x7801; Microrna (&#x7C73;&#x5C14;) &#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x5177;&#x6709;&#x6F5C;&#x529B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x65E0;&#x521B;&#x6027;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x751F;&#x7406;&#x53CA;&#x75C5;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x8840;&#x6E05; Mirna &#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x548C;&#x9884;&#x540E;&#x7684;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x6D89;&#x53CA;&#x8DDF; uniplex &#x5206;&#x6790;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30; 384 &#x4EBA; Mirna &#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x82AF;&#x7247;&#x4E0A;&#x7684;&#x591A;&#x91CD; PCR &#x4EA7;&#x7269;&#x7684;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x591A;&#x91CD;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; Dgcr8 &#x548C;&#x5207;&#x5757;&#x673A;&#x6316;&#x7A7A; &#xFF08;&#x7F3A;&#x5C0F; RNA) &#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x51C6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x8BA4;&#x6211;&#x4EEC;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x6027;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#x4EE5;&#x524D;&#x53D1;&#x5E03;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x6027;&#x76F8;&#x5F53;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C; CAPRA &#x5F97;&#x5206;&#x672A;&#x7ECF;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x548C;&#x5065;&#x5EB7;&#x7537;&#x6027; 48 &#x8840;&#x6E05;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7C73;&#x5C14;&#x7B7E;&#x540D;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x8BCA;&#x65AD;&#x764C;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x548C;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x9884;&#x540E;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8840;&#x6E05;&#x7B7E;&#x540D;&#x5305;&#x62EC;&#x7624;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236; Mirna&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x8FDB;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7; qRT-PCR &#x6807;&#x8BC6;&#x7684;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x53CA;&#x9884;&#x540E;&#x5224;&#x65AD;&#x7684; microRNA &#x7B7E;&#x540D;&#x3002;

Recent prostate-specific antigen-based screening trials indicate an urgent need for novel and noninvasive biomarker identification strategies to improve the prediction of prostate cancer behavior. Noncoding microRNAs (miRNA) in the serum and plasma have been shown to have potential as noninvasive markers for physiologic and pathologic conditions. To identify serum miRNAs that diagnose and correlate with the prognosis of prostate cancer, we developed a multiplex quantitative reverse transcription PCR method involving the purification of multiplex PCR products followed by uniplex analysis on a microfluidics chip to evaluate 384 human miRNAs. Using Dgcr8 and Dicer knockout (small RNA-deficient) mouse ES cells as the benchmark, we confirmed the validity of our technique and uncovered a considerable lack of accuracy in previously published methods. Profiling 48 sera from healthy men and untreated prostate cancer patients with differing CAPRA scores, we identified miRNA signatures that allow us to diagnose cancer patients and correlate with a prognosis. These serum signatures include oncogenic and tumor-suppressive miRNAs, suggesting functional roles in prostate cancer progression.

Microfluidic-based multiplex qRT-PCR identifies diagnostic and prognostic microRNA signatures in the sera of prostate cancer patients.

Derni&#xE8;res prostatique sp&#xE9;cifique essais de d&#xE9;pistage antig&#xE8;ne &#xE0; base indiquent un besoin urgent pour de nouveaux et non invasive des strat&#xE9;gies d&#x26;#39;identification de biomarqueurs pour am&#xE9;liorer la pr&#xE9;diction du comportement du cancer de la prostate. MicroARN (miARN non codantes) dans le s&#xE9;rum et le plasma ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour avoir un potentiel comme marqueurs non invasifs pour les conditions physiologiques et pathologiques. Pour identifier le miARN s&#xE9;rum qui diagnostiquent et en corr&#xE9;lation avec le pronostic du cancer de la prostate, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un multiplex de transcription inverse quantitative PCR m&#xE9;thode impliquant la purification des produits de PCR multiplex suivie d&#x26;#39;une analyse Uniplex sur une puce microfluidique pour &#xE9;valuer 384 miARN humains. Utilisation Dgcr8 et knock-out Dicer (petit ARN-d&#xE9;ficiente) des cellules ES de souris, comme l&#x26;#39;indice de r&#xE9;f&#xE9;rence, nous avons confirm&#xE9; la validit&#xE9; de notre technique et d&#xE9;couvert un manque consid&#xE9;rable de pr&#xE9;cision dans les m&#xE9;thodes pr&#xE9;c&#xE9;demment publi&#xE9;es. Profilage 48 s&#xE9;rums d&#x26;#39;hommes sains et patients non trait&#xE9;s avec des scores cancer de la prostate CAPRA diff&#xE9;rentes, nous avons identifi&#xE9; les signatures miRNA qui nous permettent de diagnostiquer les patients atteints de cancer et en corr&#xE9;lation avec un pronostic. Ces signatures s&#xE9;riques comprennent miARN oncog&#xE8;nes et suppressive de tumeur, ce qui sugg&#xE8;re des r&#xF4;les fonctionnels dans la progression du cancer de la prostate.

Microfluidique &#xE0; base de Multiplex QRT-PCR d&#x26;#39;identifier les signatures microARN diagnostique et pronostique dans le s&#xE9;rum de patients atteints de cancer de la prostate

Den letzten Prostata-spezifisches Antigen-basierten Screening-Studien zeigen dringend f&uuml;r Roman und nicht-invasive Biomarker Identifikation Strategien zur Verbesserung der Prognose von Prostatakrebs Verhalten. Nichtkodierende MicroRNAs (MiRNA) in Serum und Plasma wurden als nicht-invasive Marker f&uuml;r physiologischen und pathologischen Bedingungen nachgewiese-gezeigt. Um Serum MiRNAs identifizieren, die diagnose und korrelieren mit der Prognose von Prostatakrebs, entwickelten wir eine multiplex quantitative R&uuml;ck&uuml;bertragung PCR-Methode, die Reinigung von multiplex PCR-Produkte, gefolgt von Uniplex Analyse auf einem Mikrofluidik-Chip 384 menschlichen MiRNAs auswerten. Mit Dgcr8 und Dicer k.o. (kleine RNA-defizienten) Maus ES Zellen als Ma&szlig;stab, wir best&auml;tigt die G&uuml;ltigkeit unserer Technik und einen erheblichen Mangel an Genauigkeit in zuvor ver&ouml;ffentlichten Methoden entdeckte. Profilerstellung 48 Seren von gesunden M&auml;nnern und unbehandelter Prostatakrebspatienten mit unterschiedlichen CAPRA Scores, identifizierten wir MiRNA-Signaturen, die uns zur diagnose von Krebs-Patienten und korrelieren mit einer Prognose erm&ouml;glichen. Diese Serum-Signaturen geh&ouml;ren Onkogene und Tumor-unterdr&uuml;ckende MiRNAs, schl&auml;gt Funktionsrollen im Fortschreiten von Prostatakrebs.

Auf der Grundlage der Microfluidic multiplex qRT-PCR bezeichnet diagnostische und prognostische MicroRNA-Signaturen in den Seren von Prostatakrebs-Patienten.

Recientes espec&#xED;fico de la pr&#xF3;stata a base de ensayos de detecci&#xF3;n de ant&#xED;geno indican una necesidad urgente de estrategias de identificaci&#xF3;n de nuevos biomarcadores y no invasiva para mejorar la predicci&#xF3;n del comportamiento del c&#xE1;ncer de pr&#xF3;stata. MicroARN no codificante (miRNA) en el suero y el plasma se ha demostrado que tiene potencial como marcadores no invasivos para las condiciones fisiol&#xF3;gicas y patol&#xF3;gicas. Para identificar miRNAs suero que diagnostican y se correlacionan con el pron&#xF3;stico del c&#xE1;ncer de pr&#xF3;stata, se desarroll&#xF3; un multiplex PCR de transcripci&#xF3;n inversa cuantitativa m&#xE9;todo que implica la purificaci&#xF3;n de los productos de PCR multiplex seguida de un an&#xE1;lisis uniplex en un chip de microfluidos para evaluar 384 miRNAs humanos. Usando DGCR8 y knock-out Dicer (peque&#xF1;o ARN-deficiente) las c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n como punto de referencia, que confirm&#xF3; la validez de nuestra t&#xE9;cnica y descubri&#xF3; una considerable falta de precisi&#xF3;n en los m&#xE9;todos publicados anteriormente. Perfiles de los sueros de 48 hombres sanos y los pacientes no tratados con c&#xE1;ncer de pr&#xF3;stata con diferentes puntuaciones de CAPRA, se identificaron las firmas de miARN que nos permiten diagnosticar a los pacientes de c&#xE1;ncer y se correlacionan con un pron&#xF3;stico. Estas firmas incluyen suero miRNAs oncog&#xE9;nicos y el tumor supresor-, lo que sugiere funciones en la progresi&#xF3;n del c&#xE1;ncer de pr&#xF3;stata.

Microfluidos basada en QRT-PCR Multiplex Identifica firmas microARN diagn&#xF3;stico y pron&#xF3;stico en el suero de pacientes con c&#xE1;ncer de pr&#xF3;stata

Felix Moltzahn

The Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research,
Center for Reproductive Sciences,
Department of Urology

University of California San Francisco

High Throughput MicroRNA Profiling: Optimized Multiplex qRT-PCR at Nanoliter Scale on the Fluidigm Dynamic ArrayTM IFCs

Felix Moltzahn

The Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research,Center for Reproductive Sciences,Department of Urology

University of California San Francisco

High Throughput MicroRNA Profiling: Optimized Multiplex qRT-PCR at Nanoliter Scale on the Fluidigm Dynamic ArrayTM IFCs

The Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research,
Center for Reproductive Sciences,
Department of Urology