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Monitoring of Ubiquitin-proteasome Activity in Living Cells Using a Degron (dgn)-destabilized Green Fluorescent Protein (GFP)-based Reporter Protein

Proteasome is the main intracellular organelle involved in the proteolytic degradation of abnormal, misfolded, damaged or oxidized proteins 1, 2. ...

Institute for Biomedical Aging Research

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA (mtDNA) &#x542B;&#x91CF;&#x3001; &#x8017;&#x6C27;&#x91CF;&#x3001; &#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE; ATP &#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5BB9;&#x91CF;&#x7ECF;&#x8FDB;&#x5165; Jurkat &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x5B75;&#x80B2;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F;&#x676F;/ml 25 &#x51E0;&#x5929;&#x51E0;&#x591C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5728;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684; mtDNA &#x542B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x547C;&#x5438;&#x94FE;&#x4E0E;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x663E;&#x8457;&#x8DCC;&#x5E45;&#x51CF;&#x5C11; 60%&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D8;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7F13;&#x51B2;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5BB9;&#x91CF;&#x7ECF;&#x8FDB;&#x5165;&#x9010;&#x6B65;&#x6291;&#x5236;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x9499;&#x7684;&#x8DCC;&#x5E45;&#x3002;4&#x3001; 7 &#x548C; 11 &#x7684;&#x5B75;&#x5316;&#x4E0E;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F;&#x7684;&#x65E5;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x6761;&#x76EE;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x7387;&#x5206;&#x522B;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; 33%&#x3001; 50%&#x548C; 50%&#x3002;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x77AC;&#x6001;&#x8DCC;&#x5E45; ATP &#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B75;&#x80B2; 15 &#x5206;&#x949F;&#x4E0E;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x3001; &#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#x3001; &#x548C;&#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5916;&#x6E90;&#x71C3;&#x6599;&#xFF0C;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F; ATP &#x542B;&#x91CF; 16%&#x548C; 35%&#x5929; 4 &#x548C; 7&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x5B75;&#x5316;&#x4E0E;&#x836F;&#x7269;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5B75;&#x5316;&#x4E0E;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F;&#x7684; 11 &#x5929;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x6062;&#x590D;&#x7EC6;&#x80DE; ATP &#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;Jurkat &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F;&#x7684; 25ml &#x676F;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x66B4;&#x9732;&#x4E25;&#x91CD;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x91CF;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x9499;&#x7A33;&#x6001;&#x3002;

&#x9499;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53D7;&#x73AF;&#x4E19;&#x6C99;&#x661F;&#x7531;&#x4E8E; Jurkat &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA &#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;

The effects of ciprofloxacin on mitochondrial DNA (mtDNA) content, oxygen consumption, mitochondrial membrane potential, cellular ATP formation, and capacitative Ca(2+) entry into Jurkat cells were investigated. In cells incubated for several days with 25 mug/ml ciprofloxacin, a 60% reduction of mtDNA content, inhibition of the respiratory chain, and a significant decrease in mitochondrial membrane potential were observed. These changes led to a decrease in the calcium buffering capacity of mitochondria which, in turn, resulted in a gradual inhibition of the capacitative Ca(2+) entry. On days 4, 7, and 11 of incubation with ciprofloxacin, the initial rates of Ca(2+) entry were reduced by 33%, 50%, and 50%, respectively. Ciprofloxacin caused a transient decrease in the cellular capability for ATP formation. In cells incubated for 15 min with glucose, pyruvate, and glutamine as exogenous fuel, ciprofloxacin reduced ATP content by 16% and 35% on days 4 and 7, respectively, of incubation with the drug. However, on day 11 of incubation with ciprofloxacin, a recovery of cellular ATP formation was observed. In conclusion, long-term exposure of Jurkat cells to ciprofloxacin at a concentration of 25 mug/ml seriously affects cellular energy metabolism and calcium homeostasis.

Calcium signals are affected by ciprofloxacin as a consequence of reduction of mitochondrial DNA content in Jurkat cells.

Les effets de la ciprofloxacine sur mitochondrial contenu en ADN (ADN mitochondrial), consommation d&#39;oxyg&egrave;ne, potentiel de membrane mitochondrial, formation d&#39;ATP cellulaire et capacitive Ca(2+) entr&eacute;e dans les cellules Jurkat ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s. Dans les cellules incub&eacute;es pendant plusieurs jours avec 25 mug/ml ciprofloxacin, une r&eacute;duction de 60 % de la teneur en ADN mitochondrial, inhibition de la cha&icirc;ne respiratoire et une diminution significative au potentiel de membrane mitochondrial ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s. Ces changements a conduit &agrave; une diminution du calcium pouvoir tampon des mitochondries qui, &agrave; son tour, a entra&icirc;n&eacute; une inhibition progressive de l&#39;&eacute;criture Ca(2+) capacitif. Aux jours 4, 7 et 11 de l&#39;incubation avec la ciprofloxacine, le taux initial d&#39;entr&eacute;e de Ca(2+) ont &eacute;t&eacute; r&eacute;duites de 33 %, 50 % et 50 %, respectivement. Ciprofloxacine provoqua une diminution transitoire de la capacit&eacute; cellulaire pour la formation de l&#39;ATP. Dans les cellules incub&eacute;es pendant 15 min avec le glucose, le pyruvate et glutamine comme combustible exog&egrave;ne, ciprofloxacine r&eacute;duit le contenu en ATP par 16 % et 35 % aux jours 4 et 7, respectivement, d&#39;incubation avec le m&eacute;dicament. Cependant, le jour 11 de l&#39;incubation avec la ciprofloxacine, une reprise de la formation d&#39;ATP cellulaire a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. En conclusion, une exposition &agrave; long terme des cellules Jurkat &agrave; la ciprofloxacine, &agrave; une concentration de 25 mug/ml affecte s&eacute;rieusement le m&eacute;tabolisme &eacute;nerg&eacute;tique cellulaire et l&#39;hom&eacute;ostasie du calcium.

Signaux calciques sont affect&eacute;s par la ciprofloxacine en raison de la diminution du contenu en ADN mitochondrial dans les cellules Jurkat.

Die Auswirkungen von Ciprofloxacin auf mitochondriale DNA (MtDNA)-Gehalt, Sauerstoffverbrauch, mitochondrischen Membrane Potential, zellul&auml;re ATP-Bildung und kapazitive Ca(2+) Eintrag in Jurkat-Zellen wurden untersucht. In Zellen, die f&uuml;r mehrere Tage mit 25 Becher/ml Ciprofloxacin inkubiert 60 % Erm&auml;&szlig;igung von MtDNA Inhalten, Hemmung der Atmungskette, und ein betr&auml;chtlicher R&uuml;ckgang der mitochondrialen Membran potenzielle wurden beobachtet. Diese &Auml;nderungen f&uuml;hrten zu einem R&uuml;ckgang des Kalziums Pufferkapazit&auml;t der Mitochondrien, die wiederum eine allm&auml;hliche Hemmung des kapazitiven Ca(2+) Eintrags gef&uuml;hrt. An Tagen, 4, 7 und 11 der Inkubation mit Ciprofloxacin wurden die ersten S&auml;tze der Ca(2+) Eintrag von 33 %, 50 % und 50 %, bzw. reduziert. Ciprofloxacin verursacht einen vor&uuml;bergehenden R&uuml;ckgang der zellul&auml;ren F&auml;higkeit zur ATP-Bildung. In den Zellen inkubiert 15 min mit Glukose, Pyruvat und Glutamin als exogene Brennstoff reduziert Ciprofloxacin ATP-Gehalt von 16 % und 35 % an den Tagen 4 und 7, bzw. der Inkubation mit der Droge. Am Tag 11 der Inkubation mit Ciprofloxacin, wurde jedoch eine Erholung der zellul&auml;ren ATP-Bildung beobachtet. Langfristiger Exposition gegen&uuml;ber Ciprofloxacin bei einer Konzentration von 25 Becher/ml Jurkat-Zellen beeinflusst abschlie&szlig;end Ernst zellul&auml;ren Energiestoffwechsel und Kalzium-Hom&ouml;ostase.

Calcium-Signale sind von Ciprofloxacin infolge Reduktion der mitochondrialen DNA-Gehalt in Jurkat Zellen betroffen.

Sono stati studiati gli effetti della ciprofloxacina su mitocondriale contenuto di DNA (mtDNA), consumo di ossigeno, potenziale di membrana mitocondriale, formazione di ATP cellulare e capacitivo Ca(2+) entrata in cellule Jurkat. In cellule incubate per diversi giorni con ciprofloxacina mug/ml 25, sono stati osservati una riduzione del 60% del contenuto di DNA mitocondriale, l&#39;inibizione della catena respiratoria e una diminuzione significativa nel potenziale di membrana mitocondriale. Questi cambiamenti portarono a una diminuzione del calcio nel buffer capacit&agrave; dei mitocondri che, a sua volta, ha provocato una progressiva inibizione della voce Ca(2+) capacitiva. Nei giorni 4, 7 e 11 dell&#39;incubazione con ciprofloxacina, i tassi iniziali dell&#39;entrata di Ca(2+) sono stati ridotti dal 33%, 50% e 50%, rispettivamente. Ciprofloxacina ha causato una diminuzione transitoria della capacit&agrave; cellulare per la formazione di ATP. In cellule incubate per 15 min con glucosio, piruvato e glutamina come combustibile esogeno, ciprofloxacina ridotto contenuto di ATP dal 16% e il 35% nei giorni 4 e 7, rispettivamente, di incubazione con la droga. Tuttavia, il giorno 11 di incubazione con ciprofloxacina, &egrave; stato osservato un recupero della formazione di ATP cellulare. In conclusione, l&#39;esposizione a lungo termine delle cellule Jurkat alla ciprofloxacina ad una concentrazione di 25 mug/ml seriamente influisce sul metabolismo energetico cellulare e l&#39;omeostasi del calcio.

Segnali di calcio sono influenzati dalla ciprofloxacina in conseguenza della riduzione del contenuto di DNA mitocondriale nelle cellule Jurkat.

&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; DNA (mtDNA) &#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x3001;&#x9178;&#x7D20;&#x6D88;&#x8CBB;&#x91CF;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; ATP &#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5BB9;&#x91CF;&#x6027;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA; Jurkat &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;25 &#x30DE;&#x30B0;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;/ml &#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3;&#x3067;&#x6570;&#x65E5;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;, mtDNA &#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x3001;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x3068;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E; 60 &#xFF05; &#x524A;&#x6E1B;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x3001;&#x5BB9;&#x91CF;&#x6027;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x6F38;&#x9032;&#x7684;&#x306A;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x305F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;4&#x3001;7&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 11 &#x306E;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x5B75;&#x5316;&#x306E;&#x65E5;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x7387; 33 &#xFF05;&#x3001;50 &#xFF05; &#x3068; 50 &#xFF05; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3; ATP &#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;, &#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;, &#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x71C3;&#x6599;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3068; 15 &#x5206;&#x9593;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;, &#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3; ATP &#x91CF;&#x304C; 16 &#xFF05;&#x3001;35 &#xFF05; 4 &#x3068; 7 &#x65E5;&#x306E;&#x65E5;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x85AC;&#x3068;&#x306E;&#x5B75;&#x5316;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x65E5; 11 &#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; ATP &#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;25 &#x30DE;&#x30B0;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;/ml &#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3; Jurkat &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x66DD;&#x9732;&#x304C;&#x771F;&#x5263;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30B7;&#x30F3; Jurkat &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; DNA &#x91CF;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; DNA (mtDNA) &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;, &#xC0B0;&#xC18C; &#xC18C;&#xBE44;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;, &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; ATP &#xD615;&#xC131;&#xACFC; Jurkat &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; capacitative Ca(2+) &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0; ciprofloxacin&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. 25 &#xB0AF; &#xC9DD;/ml ciprofloxacin &#xD568;&#xAED8; &#xBA70;&#xCE60; &#xB3D9;&#xC548; incubated &#xC140;&#xC5D0; mtDNA &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;, &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC778;&#xACFC; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC758; 60% &#xAC10;&#xC18C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC744; &#xBC84;&#xD37C;&#xB9C1; &#xC6A9;&#xB7C9; capacitative Ca(2+) &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xC800;&#xD574; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC758; &#xCE7C;&#xC298; &#xAC10;&#xC18C;&#xB85C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4; &#xB0C8;&#xB2E4;. 4, 7, &#xBC0F; ciprofloxacin &#xAC00;&#xC9C4; &#xC678;&#xD53C;&#xC758; 11 &#xC77C;&#xC5D0; Ca(2+) &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC01;&#xAC01; 33%, 50% &#xBC0F; 50% &#xAC10;&#xC18C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Ciprofloxacin ATP &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;, pyruvate, exogenous &#xC5F0;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC11C; &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC;&#xACFC; 15 &#xBD84; &#xB3D9;&#xC548; incubated &#xC140; ciprofloxacin &#xAC10;&#xC18C; 16%, 35%&#xB85C; ATP &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; 4-7 &#xC77C;&#xC5D0; &#xAC01;&#xAC01; &#xC57D;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD80;&#xC758;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; ciprofloxacin &#xAC00;&#xC9C4; &#xC678;&#xD53C;&#xC758; &#xB0A0; 11, &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; ATP &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xB300;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; 25 &#xB0AF; &#xC9DD;/ml&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; ciprofloxacin Jurkat &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xB178;&#xCD9C; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C; &#xC801;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCE7C;&#xC298; &#xC2E0;&#xD638; ciprofloxacin Jurkat &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; DNA &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Se investigaron los efectos de ciprofloxacina en contenido mitocondrial de la DNA (mtDNA), consumo de ox&iacute;geno, potencial de membrana mitocondrial, formaci&oacute;n de ATP celular y capacitativa entrada de CA en las c&eacute;lulas Jurkat. En las c&eacute;lulas se incubaron durante varios d&iacute;as con 25 taza/ml ciprofloxacina, se observaron una reducci&oacute;n del 60% de contenido de mtDNA, inhibici&oacute;n de la cadena respiratoria y una disminuci&oacute;n significativa en el potencial de membrana mitocondrial. Estos cambios condujeron a una disminuci&oacute;n en el b&uacute;fer capacidad de mitocondrias que, a su vez, dio lugar a una inhibici&oacute;n gradual de la entrada de CA capacitativa de calcio. En los d&iacute;as 4, 7 y 11 de incubaci&oacute;n con ciprofloxacina, se redujeron las tasas iniciales de entrada de CA en 33%, 50% y 50%, respectivamente. Ciprofloxacina caus&oacute; una disminuci&oacute;n transitoria en la capacidad celular para la formaci&oacute;n de ATP. En las c&eacute;lulas que se incubaron durante 15 min con glucosa, piruvato y glutamina como combustible ex&oacute;geno, ciprofloxacina reducido contenido de ATP en 16% y 35% en los d&iacute;as 4 y 7, respectivamente, de incubaci&oacute;n con la droga. Sin embargo, el d&iacute;a 11 de incubaci&oacute;n con ciprofloxacina, se observ&oacute; una recuperaci&oacute;n de la formaci&oacute;n de ATP celular. En conclusi&oacute;n, la exposici&oacute;n prolongada de c&eacute;lulas Jurkat ciprofloxacina a una concentraci&oacute;n de 25 taza/ml seriamente afecta el metabolismo energ&eacute;tico celular y la homeostasis del calcio.

Las se&ntilde;ales de calcio se ven afectadas por la ciprofloxacina como consecuencia de la reducci&oacute;n del contenido de ADN mitocondrial en c&eacute;lulas Jurkat.

Capacitative regulation of calcium entry is a major mechanism of Ca2+ influx into electrically non-excitable cells, but it also operates in some excitable ones. It participates in the refilling of intracellular calcium stores and in the generation of Ca2+ signals in excited cells. The mechanism which couples depletion of intracellular calcium stores located in the endoplasmic reticulum with opening of store-operated calcium channels in the plasma membrane is not clearly understood. Mitochondria located in close proximity to Ca2+ channels are exposed to high Ca2+ concentration, and therefore, they are able to accumulate this cation effectively. This decreases local Ca2+ concentration and thereby affects calcium-dependent processes, such as depletion and refilling of the intracellular calcium stores and opening of the store-operated channels. Finally, mitochondria modulate the intensity and the duration of calcium signals induced by extracellular stimuli. Ca2+ uptake by mitochondria requires these organelles to be in the energized state. On the other hand, Ca2+ flux into mitochondria stimulates energy metabolism. To sum up, mitochondria couple cellular metabolism with calcium homeostasis and signaling.

The regulatory role of mitochondria in capacitative calcium entry.

&#x5BB9;&#x91CF;&#x8C03;&#x8282;&#x9499;&#x6761;&#x76EE;&#x7684;&#x662F; Ca2 + &#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#x5230;&#x7535;&#x975E;&#x53EF;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x4E5F;&#x5728;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5BB9;&#x6613;&#x6FC0;&#x52A8;&#x7684;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x3002;&#x5B83;&#x53C2;&#x52A0;&#x52A0;&#x6C14;&#x9499;&#x5546;&#x5E97;&#xFF0C;&#x5728;&#x751F;&#x6210;&#x4E2D; Ca2 + &#x4FE1;&#x53F7;&#x5174;&#x594B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x60C5;&#x4FA3;&#x67AF;&#x7AED;&#x7684;&#x9499;&#x5546;&#x5E97;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x7684;&#x5E97;&#x9762;&#x5F0F;&#x7ECF;&#x8425;&#x7684;&#x9499;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x5F00;&#x653E;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x9760;&#x8FD1; Ca2 + &#x6E20;&#x9053;&#x9762;&#x4E34;&#x9AD8; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x79EF;&#x7D2F;&#x8FD9;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C40;&#x90E8; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x964D;&#x4F4E;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5F71;&#x54CD;&#x9499;&#x4F9D;&#x8D56;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x67AF;&#x7AED;&#x548C;&#x52A0;&#x6C14;&#x7684;&#x9499;&#x5E97;&#x548C;&#x5F00;&#x5E97;&#x7ECF;&#x8425;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8C03;&#x5236;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x548C;&#x80DE;&#x5916;&#x523A;&#x6FC0;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7684;&#x9499;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;Ca2 + &#x5438;&#x6536;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x9700;&#x8981;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x5904;&#x4E8E;&#x901A;&#x7535;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;Ca2 + &#x8FDB;&#x5165;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x901A;&#x91CF;&#x523A;&#x6FC0;&#x80FD;&#x91CF;&#x4EE3;&#x8C22;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x592B;&#x5987;&#x4E0E;&#x9499;&#x7A33;&#x6001;&#x548C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE3;&#x8C22;&#x3002;

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x5728;&#x5BB9;&#x91CF;&#x9499;&#x6761;&#x76EE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

R&egrave;glement capacitive de l&#39;entr&eacute;e de calcium est un m&eacute;canisme important d&#39;influx de Ca2 + dans les cellules non excitables &eacute;lectriquement, mais il fonctionne &eacute;galement de quelques-uns excitables. Il participe &agrave; la recharge des r&eacute;serves calciques intracellulaires et dans la g&eacute;n&eacute;ration de Ca2 + des signaux dans les cellules excit&eacute;s. Le m&eacute;canisme qui couple l&#39;appauvrissement de la couche de calcium intracellulaire succursales situ&eacute;es dans le r&eacute;ticulum endoplasmique avec l&#39;ouverture de canaux calcium magasin dans la membrane plasmique n&#39;est pas clairement compris. Mitochondries situ&eacute;es &agrave; proximit&eacute; de canaux Ca2 + sont expos&eacute;s &agrave; une concentration &eacute;lev&eacute;e de Ca2 +, et par cons&eacute;quent, ils sont capables d&#39;accumuler ce cation efficacement. Cela diminue la concentration de Ca2 + locale et ce qui affecte les processus d&eacute;pendants du calcium, tels que l&#39;appauvrissement de la couche et remplissage des magasins calcium intracellulaire et l&#39;ouverture des canaux fonctionnant sur magasin. Enfin, les mitochondries modulent l&#39;intensit&eacute; et la dur&eacute;e des signaux calciques induit par des stimuli extracellulaires. Capture de Ca2 + par les mitochondries requiert ces organites dans l&#39;&eacute;tat excit&eacute;. En revanche, le flux de Ca2 + dans les mitochondries stimule le m&eacute;tabolisme &eacute;nerg&eacute;tique. Pour r&eacute;sumer, les mitochondries couple m&eacute;tabolisme cellulaire avec l&#39;hom&eacute;ostasie du calcium et la signalisation.

Le r&ocirc;le r&eacute;gulateur des mitochondries dans l&#39;entr&eacute;e de calcium capacitive.

Kapazitive Regulierung der Kalzium-Eintrag ist ein Hauptmechanismus Ca2 + Zustrom in die Zellen elektrisch erregbar, aber es funktioniert auch in einigen erregbar werden. Es beteiligt sich an das Nachf&uuml;llen der intrazellul&auml;re Kalzium-L&auml;den und bei der Generierung von Ca2 +-Signale aufgeregt Zellen. Der Mechanismus, der Abbau der intrazellul&auml;ren Calcium-Shops befindet sich in der Endoplasmatisches Reticulum mit Er&ouml;ffnung des Shop-betrieben Kalzium-Kan&auml;le in der Plasmamembran Paare ist nicht eindeutig gekl&auml;rt. Mitochondrien befindet sich in unmittelbarer N&auml;he zum Ca2 +-Kan&auml;le hohe Ca2 + Konzentration ausgesetzt sind, und deshalb sind sie in der Lage, dieses kation effektiv zu sammeln. Dadurch sinkt lokalen Ca2 + Konzentration und dadurch beeinflusst Kalzium-abh&auml;ngige Prozesse wie Ersch&ouml;pfung und Nachf&uuml;llen der intrazellul&auml;re Kalzium L&auml;den und &Ouml;ffnen der Kan&auml;le Shop-betrieben. Schlie&szlig;lich modulieren Mitochondrien, die Intensit&auml;t und die Dauer der Calcium-Signale, die durch extrazellul&auml;re Stimuli induziert. Ca2 + Aufnahme durch Mitochondrien erfordert diese Organellen in der energetisiertes Zustand sein. Auf der anderen Seite stimuliert Ca2 + Flussmittel in Mitochondrien Energiestoffwechsel. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen, paar Mitochondrien Zellstoffwechsels mit Kalzium-Hom&ouml;ostase und Signalisierung.

Die Rolle der Mitochondrien im kapazitiven Kalzium-Eintrag.

Regolamento capacitivo dell&#39;entrata di calcio &egrave; un importante meccanismo di afflusso di Ca2 + in cellule non eccitabili elettricamente, ma opera anche in alcuni tra quelli eccitabili. Essa partecipa il reintegro dei depositi di calcio intracellulare e nella generazione di Ca2 + segnali nelle cellule eccitate. Non &egrave; chiaro il meccanismo che accoppia la deplezione dei depositi di calcio intracellulare che si trova nel reticolo endoplasmatico con apertura dei canali del calcio operati dal negozio nella membrana del plasma. I mitocondri che si trova in prossimit&agrave; di canali del Ca2 + sono esposti ad alta concentrazione di Ca2 +, e quindi sono in grado di accumulare in modo efficace questo catione. Questo diminuisce la concentrazione di Ca2 + locale e quindi colpisce i processi calcio-dipendente, come ad esempio deplezione e rifornimento dei negozi di calcio intracellulare e l&#39;apertura dei canali negozio gestito. Infine, i mitocondri modulano l&#39;intensit&agrave; e la durata dei segnali di calcio indotta da stimoli extracellulari. Assorbimento di Ca2 + dai mitocondri richiede questi organelli per essere nello stato eccitato. D&#39;altra parte, Ca2 + flusso in mitocondri stimola il metabolismo energetico. Per riassumere, i mitocondri coppia metabolismo cellulare con l&#39;omeostasi del calcio e di segnalazione.

Il ruolo normativo dei mitocondri nella voce calcio capacitivo.

&#x5BB9;&#x91CF;&#x6027;&#x898F;&#x5236;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E; ca 2 + &#x306E;&#x6D41;&#x5165;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x8CAF;&#x8535;&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x8208;&#x596E;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E; ca 2 + &#x751F;&#x6210;&#x3067;&#x3002;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x53E3;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x8CAF;&#x8535;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3092;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x9AD8; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x3092;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x67AF;&#x6E07;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x8CAF;&#x8535;&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x3068;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x4F5C;&#x52D5;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x8A2D;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;.&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306B;&#x3088;&#x308B; ca 2 + &#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30AA;&#x30EB;&#x30AC;&#x30CD;&#x30E9;&#x901A;&#x96FB;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;ca 2 + &#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3068;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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Capacitative &#xCE7C;&#xC298; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC740; &#xC804;&#xAE30; &#xBE44; &#xACE0;&#xB974;&#xAE30;&#xAC00; &#xC140;&#xC5D0; Ca2 + &#xC720;&#xC785;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xBA87;&#xBA87; &#xACE0;&#xB974;&#xAE30;&#xAC00; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xCE7C;&#xC298; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C;&#xB97C; &#xCC44;&#xC6B0;&#xB294; &#xCC38;&#xAC00; Ca2 +&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD765;&#xBD84;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE7C;&#xC298; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C; &#xC6B4;&#xC601; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC624;&#xD504;&#xB2DD; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xCE7C;&#xC298; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C;&#xC758; &#xC18C;&#xBAA8; &#xCEE4;&#xD50C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC774; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; Ca2 + &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC811;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB192;&#xC740; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;&#xC774; &#xC591;&#xC774;&#xC628;&#xC774;&#xB97C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD95;&#xC801; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB85C;&#xCEEC; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB85C; &#xC778;&#xD558;&#xC5EC; &#xACE0;&#xAC08; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xCE7C;&#xC298; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C;&#xB97C; &#xCC44;&#xC6B0;&#xB294; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C; &#xC6B4;&#xC601; &#xCC44;&#xB110; &#xAC1C;&#xC124; &#xB4F1; &#xCE7C;&#xC298; &#xC885;&#xC18D; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC640; &#xAE30;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xCE7C;&#xC298; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;. Ca2 + &#xAE00;&#xADC0; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; organelles &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0; &#xC790; &#xC18D; Ca2 + &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xB300;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9;. &#xC815;&#xB9AC;&#xD574; &#xBCF4;&#xBA74;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xB294; &#xCE7C;&#xC298; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xB97C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0;.

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Capacitativa regulaci&oacute;n de entrada de calcio es un importante mecanismo de Ca2 + afluencia en c&eacute;lulas no excitables el&eacute;ctricamente, pero tambi&eacute;n trabaja en algunos excitable. Participa en la recarga de tiendas de calcio intracelular y en la generaci&oacute;n de Ca2 + se&ntilde;ales en las c&eacute;lulas emocionadas. No est&aacute; claro el mecanismo que parejas agotamiento de calcio intracelular tiendas ubicadas en el ret&iacute;culo endoplasm&aacute;tico con apertura de canales de calcio de tienda que funciona en la membrana plasm&aacute;tica. Situado en las proximidades de canales de Ca2 + de las mitocondrias est&aacute;n expuestas a la alta concentraci&oacute;n de Ca2 +, y por lo tanto, son capaces de acumular este cati&oacute;n con eficacia. Esto disminuye la concentraci&oacute;n de Ca2 + local y afecta de tal modo procesos dependiente de calcio, tales como agotamiento y recarga de las tiendas de calcio intracelular y apertura de los canales de tienda que funciona. Finalmente, las mitocondrias modulan la intensidad y la duraci&oacute;n de las se&ntilde;ales de calcio inducida por est&iacute;mulos extracelulares. Absorci&oacute;n de Ca2 + por la mitocondria requiere estos organelos en el estado energizado. Por otra parte, flujo de Ca2 + en la mitocondria estimula el metabolismo energ&eacute;tico. Para resumir, las mitocondrias pareja metabolismo celular con la homeostasis del calcio y se&ntilde;alizaci&oacute;n.

La funci&oacute;n reguladora de la mitocondria en la entrada capacitativa de calcio.

&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x7406;&#x8BBA;&#x5EFA;&#x8BAE; ROS (&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;) &#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x9A71;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x8FD8;&#x8BA4;&#x771F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x66FE;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8FC7;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x94FE;&#xFF0C;ROS &#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6765;&#x6E90;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x3002;Noxs (NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#xFF09; &#x662F;&#x77E5;&#x540D;&#x6765;&#x6E90;&#x8D85;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x5178;&#x578B;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x79F0;&#x4E3A; Nox2 &#x8FDB;&#x7A0B;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6297;&#x83CC;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD1;&#x5E74;&#x6765;&#x975E;&#x541E;&#x566C;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684; Nox2 &#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x9632;&#x5FA1;&#x4EE5;&#x5916;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9176;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x8D85;&#x6C27;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x90FD;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x53D1;&#x6325;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; MAPKs (&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF09; &#x548C;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#xFF0C;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x6C27;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x3002;&#x5728;&#x8110; &#xFF08;&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09;&#xFF0C;Nox4 &#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x8110;&#x590D;&#x5236;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x6709;&#x5F85;&#x9610;&#x660E;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; shRNA (&#x5C0F;&#x53D1;&#x5939; RNA)-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F; Nox4&#xFF0C;&#x7275;&#x8FDE;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5904;&#x7406;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x7EC8;&#x8EAB;&#x67AF;&#x7AED; Nox4 &#x5728;&#x8110;&#x4E2D;&#x662F;&#x5426;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F; Nox4 &#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8110;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x5EF6;&#x957F;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5E73;&#x5747;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11; Nox4 &#x67AF;&#x7AED;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x3002;Nox4 &#x6D88;&#x8017;&#x4E86;&#x5BF9; MAPKs &#x548C;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x65E0;&#x660E;&#x663E;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x5C11; DNA &#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Nox4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x8110;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x662F;&#x90E8;&#x5206;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7AEF;&#x7C92;&#x81EA;&#x7136;&#x51CF;&#x5458;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;

NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176; Nox4 &#x9650;&#x5236;&#x590D;&#x5236;&#x4EBA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5BFF;&#x547D;&#x3002;

The free radical theory of aging proposes that ROS (reactive oxygen species) are major driving forces of aging, and are also critically involved in cellular senescence. Besides the mitochondrial respiratory chain, alternative sources of ROS have been described that might contribute to cellular senescence. Noxs (NADPH oxidases) are well-known sources of superoxide, which contribute to the antimicrobial capabilities of macrophages, a process involving the prototypical member of the family referred to as Nox2. However, in recent years non-phagocytic homologues of Nox2 have been identified that are involved in processes other than the host defence. Superoxide anions produced by these enzymes are believed to play a major role in signalling by MAPKs (mitogen-activated protein kinases) and stress-activated kinases, but could also contribute to cellular senescence, which is known to involve oxygen radicals. In HUVECs (human umbilical vein endothelial cells), Nox4 is predominantly expressed, but its role in replicative senescence of HUVECs remains to be elucidated. Using shRNA (small-hairpin RNA)-mediated knockdown of Nox4, implicating lentiviral vectors, we addressed the question of whether lifelong depletion of Nox4 in HUVECs would influence the senescent phenotype. We found a significant extension of the replicative lifespan of HUVECs upon knockdown of Nox4. Surprisingly, mean telomere length was significantly reduced in Nox4-depleted cells. Nox4 depletion had no discernable influence on the activity of MAPKs and stress-activated kinases, but reduced the degree of oxidative DNA damage. These results suggest that Nox4 activity increases oxidative damage in HUVECs, leading to loss of replicative potential, which is at least partly independent of telomere attrition.

The NADPH oxidase Nox4 restricts the replicative lifespan of human endothelial cells.

La th&eacute;orie radicalaire du vieillissement propose que ROS (reactive oxygen species) sont les principaux &eacute;l&eacute;ments moteurs du vieillissement et sont &eacute;galement gravement impliqu&eacute;s dans la s&eacute;nescence cellulaire. En outre, la cha&icirc;ne respiratoire mitochondriale, les sources alternatives de ROS ont &eacute;t&eacute; d&eacute;crits qui pourraient contribuer &agrave; la s&eacute;nescence cellulaire. Noxs (oxydases NADPH) sont des sources connues de superoxyde, qui contribuent aux capacit&eacute;s antimicrobiennes des macrophages, un processus impliquant le membre prototypique de la famille d&eacute;nomm&eacute; Nox2. Cependant, ces derni&egrave;res ann&eacute;es les homologues non phagocytaires de Nox2 ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s qui sont impliqu&eacute;s dans des processus autres que la d&eacute;fense de l&#39;h&ocirc;te. Anions superoxydes produites par ces enzymes sont cens&eacute;es jouer un r&ocirc;le majeur dans la signalisation MAPK (mitogen-prot&eacute;ines kinases activ&eacute;es) et kinases activ&eacute;s par le stress, mais pourraient aussi contribuer &agrave; la s&eacute;nescence cellulaire, dont on sait qu&#39;impliquent les radicaux d&#39;oxyg&egrave;ne. Dans les HUVECs (cellules endoth&eacute;liales de veine ombilicale humaine), Nox4 est principalement exprim&eacute;, mais son r&ocirc;le dans la s&eacute;nescence r&eacute;plicative des HUVECs reste &agrave; &eacute;lucider. &Agrave; l&#39;aide de shARN (petit-hairpin RNA)-m&eacute;di&eacute;e par la pr&eacute;cipitation de Nox4, impliquant des vecteurs LENTIVIRAUX, nous avons abord&eacute; la question de savoir si &eacute;puisement continu de Nox4 dans les HUVECs influencerait le ph&eacute;notype s&eacute;nescent. Nous avons trouv&eacute; une extension significative de la dur&eacute;e de vie r&eacute;plicative d&#39;HUVECs sur la pr&eacute;cipitation de Nox4. &Eacute;tonnamment, la longueur moyenne des t&eacute;lom&egrave;res a &eacute;t&eacute; significativement r&eacute;duite dans les cellules Nox4 appauvri. Appauvrissement de nox4 n&#39;avait aucune influence discernable sur l&#39;activit&eacute; des MAPK et kinases activ&eacute;s par le stress, mais r&eacute;duisit le degr&eacute; des dommages oxydatifs &agrave; l&#39;ADN. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que l&#39;activit&eacute; Nox4 augmente les dommages oxydatifs dans HUVECs, conduisant &agrave; la perte de potentiel r&eacute;plicatif, qui est au moins partiellement ind&eacute;pendant de l&#39;attrition des t&eacute;lom&egrave;res.

La NADPH oxydase Nox4 limite la dur&eacute;e de vie r&eacute;plicative de cellules endoth&eacute;liales humaines.

Die freie Radikale-Theorie des Alterns wird vorgeschlagen, dass ROS (reaktive Sauerstoffspezies) wichtige sind Triebkr&auml;fte des Alterns und engagieren sich auch kritisch in der zellul&auml;ren Seneszenz. Neben die Mitochondriale Atmungskette, alternative Energiequellen ROS wurden beschrieben k&ouml;nnte, die zur zellul&auml;ren Seneszenz beitragen. NOXS (NADPH Oxidases) sind bekannte Quellen von Superoxid, die auf die antimikrobiellen Funktionen der Makrophagen, ein Prozess, der das prototypische Mitglied der Familie genannt Nox2 beitragen. Jedoch wurden in den letzten Jahren nicht phagozytische Homologen des Nox2 identifiziert, die in Prozessen als Host Verteidigung beteiligt sind. Superoxid-Anionen, die durch diese Enzyme produziert werden geglaubt, um eine wichtige Rolle in der Signalisierung von MAPKs (Mitogen-aktivierte Proteinkinasen) und Spannung aktivierte Kinasen, sondern k&ouml;nnte auch dazu beitragen, zellul&auml;ren Seneszenz, die bekannt ist, Sauerstoff-Radikale zu beteiligen. In HUVECs (menschliche Nabelschnur Venen Endothelzellen) Nox4 wird &uuml;berwiegend ausgedr&uuml;ckt, aber seine Rolle bei der Zellalterung von HUVECs muss noch gekl&auml;rt werden. Mit ShRNA (klein-Haarnadel RNA)-vermittelte Niederschlag von Nox4, zielbewu&szlig;t Lentivirale Vektoren, wir behandelt die Frage, ob lebenslanges Ersch&ouml;pfung der Nox4 in HUVECs der alternde Ph&auml;notyp beeinflussen w&uuml;rde. Wir fanden eine erhebliche Ausweitung der replicative Lebensdauer von HUVECs nach Niederschlag von Nox4. &Uuml;berraschenderweise war mittlere Telomer-L&auml;nge in Nox4-abgereichertem Zellen deutlich reduziert. Nox4 Ersch&ouml;pfung hatte keinen erkennbaren Einfluss auf die Aktivit&auml;t von MAPKs und Druck aktivierte Kinasen, sondern reduziert den Grad der oxidativen DNA-Sch&auml;den. Diese Ergebnisse legen nahe, dass Nox4 Aktivit&auml;t oxidativen Sch&auml;den in HUVECs steigert, f&uuml;hrt zum Verlust des replicative Potentials, die zumindest teilweise unabh&auml;ngigen Telomer Zerm&uuml;rbungskrieg.

Die NADPH-Oxidase Nox4 schr&auml;nkt die replicative Lebensdauer der menschliche Endothelzellen.

La teoria del radicale libero di invecchiamento propone che i ROS (specie reattive dell&#39;ossigeno) sono importanti alla guida delle forze di invecchiamento e sono anche criticamente coinvolti nella senescenza cellulare. Oltre la catena respiratoria mitocondriale, fonti alternative di ROS sono state descritte che potrebbe contribuire alla senescenza cellulare. Noxs (ossidasi di NADPH) sono ben note fonti del superossido, che contribuiscono alla capacit&agrave; antimicrobica dei macrofagi, un processo che coinvolge il prototipo membro della famiglia indicato come Nox2. Tuttavia, negli ultimi anni non fagocitica omologhi di Nox2 sono stati identificati che sono coinvolti in processi diversi dalla difesa ospite. Gli anioni superossido prodotti da questi enzimi sono creduti di giocare un ruolo importante nella segnalazione di MAPKs (chinasi di proteina mitogene-attivata) e la chinasi attivata da stress, ma potrebbero anche contribuire a senescenza cellulare, che &egrave; noto a coinvolgere i radicali dell&#39;ossigeno. In HUVECs (cellule endoteliali di vena ombelicale umana), Nox4 &egrave; prevalentemente espressa, ma relativo ruolo in senescenza replicativa di HUVECs rimane per essere chiarita. Utilizzo di shRNA (piccolo-hairpin RNA)-mediata atterramento di Nox4, implicando vettori lentivirali, abbiamo affrontato la questione del se permanente deplezione del Nox4 in HUVECs avrebbe influenzato il fenotipo senescente. Abbiamo trovato una significativa estensione della durata replicativa di HUVECs su atterramento di Nox4. Sorprendentemente, lunghezza media telomero era significativamente ridotta nelle cellule Nox4 impoverito. Nox4 esaurimento non aveva alcuna influenza sull&#39;attivit&agrave; di MAPKs e chinasi attivata da stress percepibile, ma riduce il grado di danno ossidativo al DNA. Questi risultati suggeriscono che Nox4 attivit&agrave; aumenta il danno ossidativo in HUVECs, portando alla perdita di potenzialit&agrave; replicativa, che &egrave; almeno in parte indipendente di logoramento telomeri.

Il NADPH ossidasi Nox4 limita la durata della vita replicativa delle cellule endoteliali umane.

&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x7406;&#x8AD6; ROS (&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;) &#x304C;&#x4E3B;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x99C6;&#x52D5;&#x529B;&#x306E;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x3068;&#x3082;&#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x3001;ROS &#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6E90;&#x3092;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x307B;&#x304B;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;Noxs (NADPH &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;) Nox2 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x539F;&#x578B;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;&#x6297;&#x83CC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x8FD1;&#x5E74;&#x3067;&#x306F;&#x975E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0; Nox2 &#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x9632;&#x885B;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306F; map &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x9178;&#x7D20;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x3082;&#x8CA2;&#x732E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03; (&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3001;Nox4 &#x306F;&#x4E3B;&#x306B;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316; &#xFF08;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x9042;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ShRNA &#xFF08;&#x5C0F;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3; RNA&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;-&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;implicating Nox4 &#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3067; Nox4 &#x306E;&#x751F;&#x6DAF;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x8001;&#x9F62;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306E;&#x8CEA;&#x554F;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; Nox4 &#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x6642;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5EF6;&#x9577;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5E73;&#x5747;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306F; Nox4 &#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Nox4 &#x67AF;&#x6E07; discernable map &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x9178;&#x5316;&#x7684; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Nox4 &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x9577;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

NADPH &#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; Nox4 &#x306F;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; (&#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;)&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC790;&#xC720; &#xB77C; &#xB514; &#xCE7C; &#xB178;&#xD654; &#xC774;&#xB860; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC138;&#xB825;&#xC744; &#xC6B4;&#xC804; &#xD558; &#xACE0;&#xB3C4; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294;. &#xC678;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD638;&#xD761; &#xC0AC;&#xC2AC;, &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xC758; &#xB300;&#xCCB4; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Noxs (NADPH oxidases)&#xB294; Nox2 &#xB77C;&#xACE0; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xD0C0;&#xC785; &#xBA64;&#xBC84;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xD56D;&#xADE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; superoxide&#xC758; &#xC798; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; nox2&#xC758; &#xBE44; phagocytic homologues &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC774;&#xC678;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. Superoxide &#xC74C;&#xC774;&#xC628;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; MAPKs (&#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases) &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; kinases &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD94;&#xC815; &#xB41C;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xB798; &#xB514; &#xCE7C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. HUVECs (&#xC778;&#xAC04; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;), Nox4 &#xC8FC;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Huvecs&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xD574;&#xBA85; &#xB420; &#xC788;&#xB2E4;. ShRNA (&#xC791;&#xC740; &#xD5E4;&#xC5B4;&#xD540; RNA)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;-&#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC; Nox4, lentiviral &#xBCA1;&#xD130; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC; Nox4 Huvecs&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD3C9;&#xC0DD; &#xACE0;&#xAC08; &#xB178;&#xD654; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xAC83; &#xC5EC;&#xBD80;&#xC758; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; Nox4 &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC2DC; Huvecs&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xC218;&#xBA85;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xD3C9;&#xADE0; telomere &#xAE38;&#xC774; Nox4 &#xACE0;&#xAC08; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. Nox4 &#xACE0;&#xAC08; MAPKs &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; kinases &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC544;&#xB2C8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0B0;&#xD654; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; Nox4 &#xD65C;&#xB3D9; HUVECs, &#xC77C;&#xCC28; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC740; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; telomere &#xC778;&#xC6D0; &#xAC10;&#xC18C;&#xC728;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; Nox4 &#xC778;&#xAC04; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xC218;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La teor&iacute;a de los radicales libres del envejecimiento propone que los ROS (especies reactivas del ox&iacute;geno) son grandes dinamizadores del envejecimiento y participan tambi&eacute;n cr&iacute;ticamente en senescencia celular. Adem&aacute;s de la cadena respiratoria mitocondrial, fuentes alternativas de ROS se han descrito puede contribuir a la senescencia celular. Noxs (oxidasas NADPH) son fuentes conocidas de super&oacute;xido, que contribuyen a la capacidad antimicrobiana de los macr&oacute;fagos, un proceso que involucra al prototipo miembro de la familia denominada Nox2. Sin embargo, en los &uacute;ltimos a&ntilde;os no fagoc&iacute;ticas hom&oacute;logos de Nox2 se han identificado que participan en procesos que no sea la defensa del hu&eacute;sped. Aniones super&oacute;xido producidas por estas enzimas se creen que juega un papel importante en la se&ntilde;alizaci&oacute;n por MAPKs (quinasas activadas por mit&oacute;genos prote&iacute;na) y quinasas activada por estr&eacute;s, pero tambi&eacute;n podr&iacute;an contribuir a la senescencia celular, lo que se conoce para involucrar a los radicales de ox&iacute;geno. En HUVECs (c&eacute;lulas endoteliales de la vena umbilical humana), Nox4 predominante se expresa, pero su papel en la senescencia replicativa de HUVECs dilucidarse. Usando shRNA (RNA peque&ntilde;o-horquilla)-mediada por la ca&iacute;da de Nox4, implicando vectores lentivirales, abordamos la cuesti&oacute;n de si el agotamiento permanente de Nox4 en HUVECs influyen en el fenotipo senescente. Encontramos una extensi&oacute;n significativa de la vida replicativa de HUVECs sobre la ca&iacute;da de Nox4. Sorprendentemente, la longitud telom&eacute;rica media se redujo significativamente en las c&eacute;lulas Nox4-agotado. Nox4 agotamiento no ten&iacute;a ninguna influencia discernible sobre la actividad de las MAPKs y quinasas activada por estr&eacute;s, pero redujo el grado del da&ntilde;o oxidativo del ADN. Estos resultados sugieren que la actividad de la Nox4 aumenta el da&ntilde;o oxidativo en HUVECs, llevando a la p&eacute;rdida de potencial replicativa, que es al menos parcialmente independiente de desgaste del tel&oacute;mero.

La NADPH oxidasa Nox4 restringe la vida replicativa de las c&eacute;lulas endoteliales humanas.

&#x7AEF;&#x7C92;&#x7F29;&#x77ED;&#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x884C;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E; DNA &#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4E24;&#x79CD;&#x610F;&#x89C1;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x56E0;&#x679C;&#x8054;&#x7CFB;&#x6709;&#x4EBA;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x663E;&#x793A;&#x52A0;&#x901F;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7F29;&#x77ED;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x4ECE;&#x672A;&#x8FDB;&#x884C;&#x8FC7;&#x7814;&#x7A76;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x6709;&#x5206;&#x6790;&#x662F;&#x5426;&#x589E;&#x52A0;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4EA7;&#x751F;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x5220;&#x9664;&#x8D85;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x6B67;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x56DE;&#x5E94; &#xFF08;Sod2 (+ /-)&#xFF09; &#x5C06;&#x52A0;&#x5267;&#x8001;&#x5316;&#x8868;&#x578B;&#x4E2D;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03; (mTerc(-/-)) &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;Sod2 &#x7684;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x5220;&#x9664;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11; SOD2 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x5E76;&#x672A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x57FA;&#x5E95;&#x6838; DNA &#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x3001; &#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x6838; DNA &#x65AD;&#x88C2;&#xFF0C;&#x6216;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7F29;&#x77ED;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x6BD4;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Sod2 &#x7684;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x5220;&#x9664;&#x4E0D;&#x52A0;&#x901F;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5668;&#x5B98;&#x8001;&#x5316; mTerc(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x67AF;&#x7AED;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#xFF0C;&#x540C;&#x610F; Sod2 haploinsufficiency &#x5E76;&#x4E0D;&#x5BFC;&#x81F4; mTerc(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5BFF;&#x547D;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x51CF;&#x5C11;&#x4F9D;&#x8D56; SOD2 &#x7684;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x52A0;&#x91CD;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;

Sod2 haploinsufficiency &#x4E0D;&#x4F1A;&#x52A0;&#x901F;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;

Telomere shortening represents a causal factor of cellular senescence. At the same time, several lines of evidence indicate a pivotal role of oxidative DNA damage for the aging process in vivo. A causal connection between the two observations was suggested by experiments showing accelerated telomere shorting under conditions of oxidative stress in cultured cells, but has never been studied in vivo. We therefore have analysed whether an increase in mitochondrial derived oxidative stress in response to heterozygous deletion of superoxide dismutase (Sod2(+/-)) would exacerbate aging phenotypes in telomere dysfunctional (mTerc(-/-)) mice. Heterozygous deletion of Sod2 resulted in reduced SOD2 protein levels and increased oxidative stress in aging telomere dysfunctional mice, but this did not lead to an increase in basal levels of oxidative nuclear DNA damage, an accumulation of nuclear DNA breaks, or an increased rate of telomere shortening in the mice. Moreover, heterozygous deletion of Sod2 did not accelerate the depletion of stem cells and the impairment in organ maintenance in aging mTerc(-/-) mice. In agreement with these observations, Sod2 haploinsufficiency did not lead to a further reduction in lifespan of mTerc(-/-) mice. Together, these results indicate that a decrease in SOD2-dependent antioxidant defence does not exacerbate aging in the context of telomere dysfunction.

Sod2 haploinsufficiency does not accelerate aging of telomere dysfunctional mice.

Raccourcissement des t&eacute;lom&egrave;res repr&eacute;sente un facteur causal de la s&eacute;nescence cellulaire. Dans le m&ecirc;me temps, plusieurs &eacute;l&eacute;ments de preuve indiquent un r&ocirc;le central des dommages oxydatifs de l&#39;ADN pour le processus de vieillissement in vivo. Un lien de causalit&eacute; entre les deux observations a &eacute;t&eacute; sugg&eacute;r&eacute; par les exp&eacute;riences montrant des t&eacute;lom&egrave;res acc&eacute;l&eacute;r&eacute; un court-circuit dans des conditions de stress oxydatif dans les cellules cultiv&eacute;es, mais n&#39;a jamais &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute; in vivo. Nous avons donc analys&eacute; si une augmentation des mitochondries provenant de stress oxydatif en r&eacute;ponse &agrave; une d&eacute;l&eacute;tion h&eacute;t&eacute;rozygote de superoxyde dismutase (Sod2 (+/-)) ferait qu&#39;exacerber les ph&eacute;notypes de vieillissement dans les t&eacute;lom&egrave;res dysfonctionnels (mTerc(-/-)) souris. D&eacute;l&eacute;tion h&eacute;t&eacute;rozygote de Sod2 a donn&eacute; lieu &agrave; des niveaux de prot&eacute;ine SOD2 r&eacute;duits et augmente le stress oxydatif chez les souris dysfonctionnel de t&eacute;lom&egrave;res de vieillissement, mais cela n&#39;a pas conduit &agrave; une augmentation des taux de base des dommages oxydatifs &agrave; l&#39;ADN nucl&eacute;aire, une accumulation de cassures de l&#39;ADN nucl&eacute;aires ou une augmentation du taux des t&eacute;lom&egrave;res de raccourcir chez les souris. En outre, une d&eacute;l&eacute;tion h&eacute;t&eacute;rozygote de Sod2 ne pas acc&eacute;l&eacute;rer l&#39;appauvrissement de la couche de cellules souches et la d&eacute;ficience en entretien d&#39;organe chez les souris mTerc(-/-) vieillissement. En accord avec ces observations, Sim1 Sod2 ne m&egrave;ne pas &agrave; une nouvelle r&eacute;duction de la dur&eacute;e de vie des souris mTerc(-/-). Ensemble, ces r&eacute;sultats indiquent qu&#39;une diminution de d&eacute;fense antioxydant SOD2 d&eacute;pendant n&#39;exacerbe pas vieillissement dans le contexte du dysfonctionnement des t&eacute;lom&egrave;res.

Sod2 Sim1 n&#39;acc&eacute;l&egrave;re pas le vieillissement des souris dysfonctionnel t&eacute;lom&egrave;re.

Telomer-Verk&uuml;rzung darstellt urs&auml;chlichen Faktor der zellul&auml;ren Seneszenz. Zur gleichen Zeit zeigen mehrere Zeilen von Beweismitteln eine Schl&uuml;sselrolle der oxidative DNA-Sch&auml;den f&uuml;r den Alterungsprozess in-vivo. Ein kausaler Zusammenhang zwischen den zwei Beobachtungen wurde durch Experimente zeigen beschleunigte Telomer Leerverk&auml;ufe unter Bedingungen des oxidativen Stress in kultivierten Zellen vorgeschlagen, aber wurde nie in-vivo untersucht. Haben wir daher analysiert, ob ein Anstieg der mitochondrialen oxidativen Stress als Reaktion auf heterozygote L&ouml;schung der Superoxid-Dismutase abgeleitet (Sod2 (+/-)) w&uuml;rde versch&auml;rfen alternde Ph&auml;notypen in Telomer dysfunktionalen (mTerc(-/-)) M&auml;use. Heterozygote Streichung von Sod2 f&uuml;hrte zu reduzierten SOD2-Protein-Ebene und erh&ouml;hten oxidativen Stress in alternden Telomer dysfunktionalen M&auml;use, aber dies f&uuml;hrte nicht zu einer Zunahme der Basalebenen oxidativen nukleare DNA-Sch&auml;den, eine Ansammlung von nuklearen DNA-Br&uuml;che oder Zielvorgaben der Telomere Verk&uuml;rzung in den M&auml;usen. Dar&uuml;ber hinaus heterozygote Streichung von Sod2 beschleunigt nicht die Depletion von Stammzellen und die Wertminderung in Altern mTerc(-/-) M&auml;use-Orgel Pflege. Im Einvernehmen mit diesen Beobachtungen f&uuml;hrten Sod2 Haploinsuffizienz nicht zu einem weiteren R&uuml;ckgang der Lebensdauer von mTerc(-/-) M&auml;usen. Zusammen, zeigen diese Ergebnisse, dass eine Abnahme der SOD2-abh&auml;ngige Antioxidans Verteidigung nicht Altern im Rahmen der Telomer-Dysfunktion verst&auml;rken wird.

Sod2 Haploinsuffizienz beschleunigt Alterung der Telomer dysfunktionalen M&auml;use nicht.

Accorciamento dei telomeri rappresenta un fattore causale della senescenza cellulare. Allo stesso tempo, parecchie linee di prova indicano un ruolo cardine del danno ossidativo al DNA per il processo di invecchiamento in vivo. Un collegamento causale fra due osservazioni &egrave; stato suggerito da esperimenti che mostrano telomeri accelerato un corto circuito in condizioni di stress ossidativo nelle cellule in coltura, ma non &egrave; mai stato studiato in vivo. Pertanto abbiamo analizzato se un aumento dello stress ossidativo mitocondriale derivata in risposta alla delezione eterozigote di superossido dismutasi (Sod2 (+ /-)) aggraverebbe fenotipi di invecchiamento nei telomeri disfunzionali (topi mTerc(-/-)). Delezione eterozigote di Sod2 ha provocato livelli ridotti di proteine SOD2 e aumentato stress ossidativo nell&#39;invecchiamento topi disfunzionale telomeri, ma questo non ha condotto ad un aumento dei livelli basali di danno ossidativo al DNA nucleare, un accumulo di rotture del DNA nucleare o un tasso aumentato di telomeri accorciamento nei topi. Inoltre, delezione eterozigote di Sod2 ha fatto non accelera la deplezione delle cellule staminali e la svalutazione in manutenzione organo nei topi mTerc(-/-) invecchiamento. D&#39;accordo con queste osservazioni, Sod2 aploinsufficienza non ha condotto ad un&#39;ulteriore riduzione nella durata di vita dei topi mTerc(-/-). Insieme, questi risultati indicano che una diminuzione della difesa antiossidante SOD2-dipendente non esacerbare invecchiamento nel contesto della disfunzione telomeri.

Sod2 aploinsufficienza non accelerano invecchiamento dei topi disfunzionale telomeri.

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x306F;&#x56E0;&#x679C;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7DDA;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x9593;&#x306E;&#x56E0;&#x679C;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x52A0;&#x901F;&#x3055;&#x308C;&#x305F; telomere &#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x77ED;&#x7D61;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x6C7A;&#x3057;&#x3066; in vivo &#x3067;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168; &#xFF08;mTerc(-/-)) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3002; &#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30E0;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC; (sod 2 &#x767A;&#x73FE; (+/-)) &#x306E;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6D3E;&#x751F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x60AA;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x3063;&#x305F;Sod 2 &#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x524A;&#x9664; sod 2 &#x767A;&#x73FE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x6838; DNA &#x9178;&#x5316;&#x640D;&#x50B7;&#x3001;&#x6838;&#x306E; DNA &#x5207;&#x65AD;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x524A;&#x9664; sod 2 &#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316; mTerc(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x81D3;&#x5668;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x6E1B;&#x640D;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3068;&#x306E;&#x5408;&#x610F;&#x306F;&#x3001;sod 2 &#x767A;&#x73FE;&#x30CF;&#x30D7;&#x30ED; mTerc(-/-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x524A;&#x6E1B;&#x306B;&#x306F;&#x81F3;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;sod 2 &#x767A;&#x73FE;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x885B;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3092;&#x60AA;&#x5316;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Sod 2 &#x767A;&#x73FE;&#x30CF;&#x30D7;&#x30ED; &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

Telomere &#xB2E8;&#xCD95; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC19;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC904; &#xC99D;&#xAC70;&#xC758; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0B0;&#xD654; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAD00;&#xCE21; &#xC0AC;&#xC774; &#xC778;&#xACFC; &#xC5F0;&#xACB0; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xAC00;&#xC18D;&#xB41C; telomere&#xB294; &#xACBD;&#xC791;&#xB41C; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xB77D; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACB0;&#xCF54; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; superoxide dismutase heterozygous &#xC0AD;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; (+) (Sod2) telomere &#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; (mTerc(-/-)) &#xC950;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654; &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xC545;&#xD654; &#xAC83;&#xC774;. Heterozygous &#xC0AD;&#xC81C; sod2&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; SOD2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xACE0; telomere &#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xD575; DNA &#xC190;&#xC0C1;, &#xD575; DNA &#xB098;&#xB204;&#xAE30;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xB610;&#xB294; telomere &#xB2E8;&#xCD95; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, sod2&#xC758; heterozygous &#xC0AD;&#xC81C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB178;&#xD654; mTerc(-/-) &#xC950;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08;&#xC744; &#xAC00;&#xC18D; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xACC4;&#xC57D; Sod2 haploinsufficiency mTerc(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC218;&#xBA85; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; SOD2 &#xC885;&#xC18D; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; telomere &#xBD80;&#xC804;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xC545;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sod2 haploinsufficiency telomere &#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xAC00;&#xC18D; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Acortamiento telom&eacute;rico representa un factor causal de senescencia celular. Al mismo tiempo, varias l&iacute;neas de evidencia indican un papel fundamental del da&ntilde;o oxidativo del ADN para el proceso de envejecimiento en vivo. Una conexi&oacute;n causal entre las dos observaciones fue sugerida por experimentos mostrando tel&oacute;mero acelerado cortocircuito bajo condiciones de estr&eacute;s oxidativo en las c&eacute;lulas cultivadas, pero nunca ha sido estudiada in vivo. Por lo tanto hemos analizado si deriva de un aumento en mitocondrial estr&eacute;s oxidativo en respuesta a la canceladura heterozig&oacute;tica de la super&oacute;xido dismutasa (Sod2 (+/-)) exacerbar&iacute;an los fenotipos de envejecimiento en los tel&oacute;meros disfuncionales (mTerc(-/-)) ratones. Canceladura heterozig&oacute;tica de Sod2 dio lugar a la reducci&oacute;n de los niveles de prote&iacute;na de SOD2 y aumenta el estr&eacute;s oxidativo en el envejecimiento en ratones disfuncional del tel&oacute;mero, pero esto no condujo a un aumento en los niveles b&aacute;sicos de da&ntilde;o oxidativo de ADN nuclear, una acumulaci&oacute;n de roturas del ADN nucleares o una tasa mayor de acortamiento en los ratones del tel&oacute;mero. Por otra parte, la canceladura heterozig&oacute;tica de Sod2 no ha acelerado la depleci&oacute;n de las c&eacute;lulas madre y el deterioro en el mantenimiento del &oacute;rgano en ratones mTerc(-/-) de envejecimiento. De acuerdo con estas observaciones, Sod2 haploinsufficiency no condujeron a una nueva reducci&oacute;n en la vida de ratones mTerc(-/-). Juntos, estos resultados indican que una disminuci&oacute;n en la defensa antioxidante de SOD2 dependiente no exacerbe envejecimiento en el contexto de la disfunci&oacute;n del tel&oacute;mero.

Sod2 haploinsufficiency no aceleran el envejecimiento de ratones disfuncional del tel&oacute;mero.

&#xBB38;&#xD654; mitotic &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC81C;&#xD55C; &#xC77C;&#xCC28; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xBC0F; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC131;&#xC7A5; &#xAC80;&#xAC70; &#xB418; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654; &#xB098; &#xD655;&#xC7A5;&#xB41C; subculturing &#xC218;&#xC220; &#xD6C4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC;, &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; &#xBE44; &#xC694;&#xC778;&#xC758; upregulation &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC70; &#xB300; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD568;&#xAED8;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC; &#xB610;&#xD55C; apoptosis&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xD68D;&#xB4DD;. &#xBC18;&#xBA74;&#xC5D0;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xCC28; &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC720;&#xBC1C; &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654; &#xC99D;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;; &#xB3D9;&#xBC18; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; endonuclease G (EndoG), caspase &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD574;&#xACB0;. &#xBC1C;&#xACAC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, Endog&#xB294; &#xC80A;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD575;&#xC744; relocalizes. EndoG &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; lentiviral shRNA &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; downregulated &#xC77C; &#xB54C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC77C;&#xCC28; &#xC218;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD34; &#xC0AC; apoptosis&#xC5D0; &#xC140; &#xC8FD;&#xC74C; &#xD615;&#xC5D0; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; Endog&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; endonuclease G&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x663E;&#x793A;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x6F5C;&#x529B;&#x548C;&#x6269;&#x5C55;&#x4F20;&#x4EE3;&#x63A5;&#x53D7;&#x540E;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x589E;&#x957F;&#x902E;&#x6355;&#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x3002;&#x5F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5230;&#x8FBE;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x88AB;&#x4F34;&#x968F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x53D8;&#x5316;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E0A;&#x8C03;&#x5206;&#x6CCC;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x5DE8;&#x5927;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA6;&#x6709;&#x6297;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x590D;&#x5236;&#x548C;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x88AB;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1; &#xFF1B;&#x4E0D;&#x8FC7;&#x5DEE;&#x4F1A;&#x63A2;&#x7D22;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x4EA4;&#x6D41;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x76F8;&#x5173;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x6838;&#x9178;&#x5185;&#x5207;&#x9176; G &#xFF08;EndoG&#xFF09;&#xFF0C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8C03;&#x89E3;&#x4EBA;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5229;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;EndoG &#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x5E74;&#x8F7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5411;&#x540E;&#x8870;&#x8001;&#x6838; relocalizes&#x3002;&#x5F53; EndoG &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; shRNA &#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x65F6;&#x5019;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5927;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x7E41;&#x6B96;&#x5BFF;&#x547D;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x76F8;&#x5E94;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x8868;&#x578B;&#x4ECE;&#x8F6C;&#x5411;&#x574F;&#x6B7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E; EndoG &#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x6838;&#x9178;&#x5185;&#x5207;&#x9176; G &#x4E2D;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x76F8;&#x5173;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Mitotic cells in culture show a limited replicative potential and after extended subculturing undergo a terminal growth arrest termed cellular senescence. When cells reach the senescent phenotype, this is accompanied by a significant change in the cellular phenotype and massive changes in gene expression, including the upregulation of secreted factors. In human fibroblasts, senescent cells also acquire resistance to apoptosis. In contrary, in human endothelial cells, both replicative and stress-induced premature senescence is accompanied by increased cell death; however mechanisms of cell death are poorly explored. In this communication, we addressed the role of endonuclease G (EndoG), a mitochondrial mediator of caspase-independent cell death, in senescence-associated cell death of human endothelial cells. Using immunofluorescence microscopy, we found, that EndoG is localized in the mitochondria in young cells, but relocalizes to the nucleus upon senescence. When EndoG gene expression was downregulated by lentiviral shRNA vectors, we found a significant reduction in the replicative life span and a corresponding increase in cell death. We also observed a slight shift in the cell death phenotype from necrosis to apoptosis. Together these observations suggest an important role of EndoG in the senescence program of human endothelial cells.

Role of endonuclease G in senescence-associated cell death of human endothelial cells.

Cellules mitotiques en culture montrent un potentiel limit&eacute; r&eacute;plicatif et apr&egrave;s repiquage prolong&eacute; subissent un arr&ecirc;t de croissance terminale appel&eacute; s&eacute;nescence cellulaire. Lorsque les cellules atteignent le ph&eacute;notype s&eacute;nescent, cela s&#39;accompagne d&#39;un changement significatif dans le ph&eacute;notype cellulaire et des changements massifs dans l&#39;expression des g&egrave;nes, y compris l&#39;upregulation des facteurs s&eacute;cr&eacute;t&eacute;s. Dans les fibroblastes humains, cellules s&eacute;nescentes &eacute;galement acqui&egrave;rent une r&eacute;sistance &agrave; l&#39;apoptose. Au contraire, dans les cellules endoth&eacute;liales humaines, s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e r&eacute;plicative et induite par le stress s&#39;accompagne de mort cellulaire accrue ; Cependant, les m&eacute;canismes de mort cellulaire sont mal explor&eacute;s. Dans cette communication, nous avons abord&eacute; le r&ocirc;le de l&#39;endonucl&eacute;ase G (EndoG), un m&eacute;diateur mitochondrial de mort cellulaire caspase-ind&eacute;pendante, d&eacute;c&egrave;s li&eacute;s &agrave; la s&eacute;nescence cellulaire des cellules endoth&eacute;liales humaines. &Agrave; l&#39;aide de la microscopie en immunofluorescence, nous avons constat&eacute;, que EndoG est localis&eacute;e dans les mitochondries dans les cellules jeunes, mais relocalizes dans le noyau lors de la s&eacute;nescence. Quand EndoG l&#39;expression des g&egrave;nes a &eacute;t&eacute; diminu&eacute;e par des vecteurs LENTIVIRAUX shRNA, nous avons constat&eacute; une r&eacute;duction significative de la dur&eacute;e de vie r&eacute;plicative et une augmentation correspondante dans la mort cellulaire. Nous avons &eacute;galement observ&eacute; un l&eacute;ger changement dans le ph&eacute;notype de mort cellulaire de la n&eacute;crose, l&#39;apoptose. Ensemble, ces observations sugg&egrave;rent un r&ocirc;le important de EndoG dans le programme de la s&eacute;nescence des cellules endoth&eacute;liales humaines.

R&ocirc;le de l&#39;endonucl&eacute;ase G dans les d&eacute;c&egrave;s li&eacute;s &agrave; la s&eacute;nescence cellulaire des cellules endoth&eacute;liales humaines.

Mitotische Zellen in Kultur zeigen ein begrenzte replicative Potenzial und nach erweiterten Subculturing zu unterziehen ein terminal Wachstumanhalten genannt zellul&auml;ren Seneszenz. Wenn Zellen der alternde Ph&auml;notyp erreichen, wird dies durch eine wesentliche &Auml;nderung der zellul&auml;re Ph&auml;notyp und massive Ver&auml;nderungen in der Genexpression, einschlie&szlig;lich die Hochregulation sezernierte Faktoren begleitet. In menschlichen Fibroblasten erwerben alternde Zellen auch Widerstand zum Apoptosis. Im Gegenteil, in menschlichen Endothelzellen replicative und Stress-induced vorzeitiges Altern erh&ouml;hte Zelltod hervorgeht; Allerdings sind die Mechanismen des Zelltods schlecht untersucht. In dieser Mitteilung gerichtet wir die Rolle der Endonuklease G (EndoG), mitochondriale Vermittler des Caspase-unabh&auml;ngigen Zelltods, Altern-verbundene Zelle Tod des menschlichen Endothelzellen. Mit Immunfluoreszenz-Mikroskopie, fanden wir, EndoG ist in den Mitochondrien in jungen Zellen lokalisiert, aber relocalizes zum Kern auf Altern. Als EndoG Genexpression Downregulated durch ShRNA Lentivirale Vektoren war, fanden wir eine signifikante Reduktion in der replicative Lebensdauer und eine entsprechende Zunahme der Zelltod. Wir beobachten auch eine leichte Verschiebung in der Zelle Tod Ph&auml;notyp aus Nekrose zum Apoptosis. Zusammen schlagen diese Beobachtungen eine wichtige Rolle der EndoG im Altern Programm der menschlichen Endothelzellen.

Rolle der Endonuklease G Altern-verbundene Zelle Tod des menschlichen Endothelzellen.

Mitotica delle cellule in coltura mostrano una limitata potenzialit&agrave; replicativa e dopo subcoltura estesa subiscono un arresto di crescita terminale definito senescenza cellulare. Quando le cellule raggiungono il fenotipo senescente, questo &egrave; accompagnato da un significativo cambiamento nel fenotipo cellulare e massicci cambiamenti nell&#39;espressione genica, tra cui la sovraregolazione di fattori secrete. In fibroblasti umani, cellule senescenti anche acquisiscono resistenza all&#39;apoptosi. Al contrario, nelle cellule endoteliali umane, senescenza precoce replicativa e stress-indotta &egrave; accompagnata da morte cellulare aumentato; comunque meccanismi di morte cellulare sono scarsamente esplorati. In questa comunicazione, abbiamo affrontato il ruolo di endonucleasi G (EndoG), un mediatore mitocondriale di caspase-indipendente dalla morte delle cellule, nella morte delle cellule senescenza-associati delle cellule endoteliali umane. Utilizzando la microscopia di immunofluorescenza, abbiamo trovato, che EndoG &egrave; localizzato nei mitocondri nelle cellule giovani, ma relocalizes nel nucleo sulla senescenza. Quando l&#39;espressione di gene EndoG era downregolata di vettori lentivirali shRNA, abbiamo trovato una significativa riduzione della durata replicativa e un corrispondente aumento nella morte delle cellule. Abbiamo anche osservato un lieve spostamento nel fenotipo delle cellule morte da necrosi all&#39;apoptosi. Insieme queste osservazioni suggeriscono un importante ruolo di EndoG nel programma di senescenza delle cellule endoteliali umane.

Ruolo dell&#39;endonucleasi G nella morte delle cellule senescenza-associati delle cellule endoteliali umane.

&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9650;&#x5B9A;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x62E1;&#x5F35;&#x7D99;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x5F8C;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x6210;&#x9577;&#x902E;&#x6355;&#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;, &#x5206;&#x6CCC;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F34;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x3092;&#x7372;&#x5F97;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x53CD;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x5FDC;&#x529B;&#x8A98;&#x8D77;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9AD8;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x3067;&#x306F;, &#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x95A2;&#x9023;&#x6B7B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; G (EndoG)&#x3001;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; &#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Immunofluorescence &#x306E;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x691C;&#x67FB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3001;EndoG &#x306F;&#x82E5;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6838;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x6642;&#x306B; relocalizes&#x3002;EndoG &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; shRNA &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B; downregulated &#x306E;&#x9803;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x58CA;&#x6B7B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306A;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x304C;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C; EndoG &#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x533B;&#x5B66;: &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; G &#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x95A2;&#x9023;&#x6B7B;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

C&eacute;lulas mit&oacute;ticas en cultivo muestran un limitado potencial replicativo y despu&eacute;s extendido subcultivos se someten a una detenci&oacute;n de crecimiento terminal denominado senescencia celular. Cuando las c&eacute;lulas alcanzan el fenotipo senescente, esto es acompa&ntilde;ado de un cambio significativo en el fenotipo celular y grandes cambios en la expresi&oacute;n g&eacute;nica, incluyendo la regulaci&oacute;n al alza de factores secretadas. En fibroblastos humanos, c&eacute;lulas senescentes tambi&eacute;n adquieren resistencia a la apoptosis. Por el contrario, en c&eacute;lulas endoteliales humanas, senescencia prematura replicativa y stress-induced es acompa&ntilde;ada por la muerte de celdas; sin embargo, poco se exploran mecanismos de muerte celular. En esta comunicaci&oacute;n, abordamos el papel de endonucleasa G (EndoG), un mediador mitocondrial de muerte celular caspase-independiente, en la muerte de asociado de senescencia celular de c&eacute;lulas endoteliales humanas. Mediante microscop&iacute;a de inmunofluorescencia, se encontr&oacute;, que EndoG se localiza en las mitocondrias en las c&eacute;lulas j&oacute;venes, pero relocalizes al n&uacute;cleo a la senescencia. Cuando la expresi&oacute;n g&eacute;nica de EndoG fue regulada por vectores lentivirales shRNA, encontramos una reducci&oacute;n significativa en la vida replicativa y un aumento correspondiente en la muerte celular. Tambi&eacute;n observamos un leve cambio en el fenotipo de la muerte de la c&eacute;lula de la necrosis a la apoptosis. Todas estas observaciones sugieren un papel importante de EndoG en el programa de la senescencia de c&eacute;lulas endoteliales humanas.

Papel de endonucleasa G en muerte de asociado de senescencia celular de c&eacute;lulas endoteliales humanas.

Seg&uacute;n la teor&iacute;a mitocondrial de ox&iacute;geno reactivo, envejecimiento especies (ROS) derivadas principalmente de las mitocondrias causan el da&ntilde;o oxidativo acumulado varias mol&eacute;culas celulares y contribuyan al proceso de envejecimiento. Por otra parte, un papel fundamental del proteasoma, como un sistema proteol&iacute;tico principal implicado en la degradaci&oacute;n de prote&iacute;nas oxidadas durante el envejecimiento, se sugiere. En este estudio, analizamos la funci&oacute;n mitocondrial en fibroblastos d&eacute;rmicos derivado de biopsias obtenidas de donantes sanos de mediana edad, jovenes y viejos. Tambi&eacute;n determinamos actividad del proteasoma en estas c&eacute;lulas, utilizando una degron-desestabilizado prote&iacute;na verde fluorescente (GFP)-basada en prote&iacute;na de reportero. Encontramos una disminuci&oacute;n significativa en la membrana mitocondrial potenciales en las muestras de donantes envejecidos, acompa&ntilde;ados por un aumento significativo en los niveles ROS. Actividad respiratoria no se modific&oacute; significativamente con la edad del donante, probablemente reflejando la variaci&oacute;n gen&eacute;tica. Actividad del proteasoma disminuy&oacute; significativamente en los fibroblastos de mediana edad donantes en comparaci&oacute;n con los donantes j&oacute;venes; los fibroblastos derivados de los donantes m&aacute;s antiguos muestran una alta heterogeneidad en este ensayo. Tambi&eacute;n encontramos la corregulaci&oacute;n intraindividuales de mitocondrial y probaron proteasomal actividades en todas las cepas de fibroblastos humanos, sugiriendo que ambos sistemas son interdependientes. Por consiguiente, inhibici&oacute;n farmacol&oacute;gica del proteasoma condujo a la disminuci&oacute;n de la funci&oacute;n mitocondrial, mientras que la inhibici&oacute;n de la funci&oacute;n mitocondrial a su vez reduce la actividad del proteasoma.

Interacci&oacute;n funcional entre mitocondrial y actividad del proteasoma en envejecimiento de la piel.

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7406;&#x8BBA;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x3001; &#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD; (ROS) &#x4E3B;&#x8981;&#x6765;&#x81EA;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5B50;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x7D2F;&#x79EF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x8981;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x8001;&#x5316;&#xFF0C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7275;&#x6D89;&#x5230;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x4ECE;&#x5065;&#x5EB7;&#x5E74;&#x8F7B;&#x4E2D;&#x8001;&#x5E74;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x6D3B;&#x68C0;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x4F7F;&#x7528; degron &#x7A33;&#x5B9A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x8BB0;&#x8005;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x819C;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x6F5C;&#x5728;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x4ECE;&#x8001;&#x5E74;&#x7684;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#xFF0C;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x6C34;&#x5E73;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x547C;&#x5438;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0D;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x53D8;&#x4E86;&#x4E0E;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x5E74;&#x9F84;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x663E;&#x8457;&#x4E0B;&#x964D;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5E74;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5E74;&#x8F7B;&#x7684;&#x6350;&#x52A9;&#x8005; &#xFF1B;&#x4ECE;&#x6700;&#x65E9;&#x7684;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x663E;&#x793A;&#x9AD8;&#x7684;&#x5F02;&#x8D28;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; intraindividual coregulation &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x8FDB;&#x884C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0B;&#x964D;&#xFF0C;&#x800C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x51CF;&#x5C11;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x76AE;&#x80A4;&#x8001;&#x5316;&#x3002;

According to the mitochondrial theory of aging, reactive oxygen species (ROS) derived primarily from mitochondria cause cumulative oxidative damage to various cellular molecules and thereby contribute to the aging process. On the other hand, a pivotal role of the proteasome, as a main proteolytic system implicated in the degradation of oxidized proteins during aging, is suggested. In this study, we analyzed mitochondrial function in dermal fibroblasts derived from biopsies obtained from healthy young, middle-aged, and old donors. We also determined proteasome activity in these cells, using a degron-destabilized green fluorescent protein (GFP)-based reporter protein. We found a significant decrease in mitochondrial membrane potential in samples from aged donors, accompanied by a significant increase in ROS levels. Respiratory activity was not significantly altered with donor age, probably reflecting genetic variation. Proteasome activity was significantly decreased in fibroblasts from middle-aged donors compared with young donors; fibroblasts derived from the oldest donors displayed a high heterogeneity in this assay. We also found intraindividual coregulation of mitochondrial and proteasomal activities in all human fibroblast strains tested, suggesting that both systems are interdependent. Accordingly, pharmacological inhibition of the proteasome led to decreased mitochondrial function, whereas inhibition of mitochondrial function in turn reduced proteasome activity.

Functional interplay between mitochondrial and proteasome activity in skin aging.

Selon la th&eacute;orie mitochondriale du vieillissement, r&eacute;actif de l&#39;oxyg&egrave;ne (DRO) proviennent principalement de mitochondries cause des dommages oxydatifs cumulatif &agrave; diverses mol&eacute;cules cellulaires et contribue ainsi au processus du vieillissement. En revanche, un r&ocirc;le central du prot&eacute;asome, comme un syst&egrave;me prot&eacute;olytique principaux impliqu&eacute; dans la d&eacute;gradation des prot&eacute;ines oxyd&eacute;es au cours du vieillissement, est sugg&eacute;r&eacute;. Dans cette &eacute;tude, nous avons analys&eacute; la fonction mitochondriale dans des fibroblastes dermiques provenant de biopsies provenant de donneurs sains de jeunes, entre deux &acirc;ges et vieux. Nous avons &eacute;galement d&eacute;termin&eacute; l&#39;activit&eacute; du prot&eacute;asome dans ces cellules, en utilisant une degron-d&eacute;stabilis&eacute; prot&eacute;ine verte fluorescente (GFP)-base de prot&eacute;ine de journaliste. Nous avons constat&eacute; une baisse significative de la membrane mitochondriale potentiels dans les &eacute;chantillons provenant de donneurs &acirc;g&eacute;s, accompagn&eacute;es d&#39;une augmentation significative des niveaux ROS. Activit&eacute; respiratoire a &eacute;t&eacute; modifi&eacute;e pour la pas significativement avec l&#39;&acirc;ge du donneur, ce qui refl&egrave;te probablement la variation g&eacute;n&eacute;tique. L&#39;activit&eacute; du prot&eacute;asome a &eacute;t&eacute; significativement r&eacute;duite dans les fibroblastes des donateurs d&#39;&acirc;ge m&ucirc;r par rapport aux jeunes donateurs ; fibroblastes provenant de donateurs plus anciennes affichent une forte h&eacute;t&eacute;rog&eacute;n&eacute;it&eacute; dans ce test. Nous avons &eacute;galement constat&eacute; la co-r&eacute;gulation intra-individuel de mitochondries et activit&eacute;s de proteasome dans toutes les souches de fibroblastes humains test&eacute;s, ce qui sugg&egrave;re que les deux syst&egrave;mes sont interd&eacute;pendants. En cons&eacute;quence, l&#39;inhibition pharmacologique du prot&eacute;asome conduit &agrave; la diminution de la fonction mitochondriale, tandis que l&#39;inhibition de la fonction mitochondriale &agrave; son tour r&eacute;duit l&#39;activit&eacute; du prot&eacute;asome.

Interaction fonctionnelle entre mitochondrique et l&#39;activit&eacute; du prot&eacute;asome dans le vieillissement de la peau.

Nach der mitochondriale Theorie des alternden, reaktive Sauerstoff Spezies (ROS) in erster Linie von Mitochondrien abgeleitet kumulative oxidativen Schaden zu verschiedenen zellul&auml;ren Molek&uuml;len und damit zur den Alterungsprozess. Auf der anderen Seite wird eine entscheidende Rolle f&uuml;r das Proteasom, als wichtigste proteolytische System verwickelt beim Abbau von oxidierten Proteine w&auml;hrend der Alterung, vorgeschlagen. In dieser Studie analysierten wir mitochondriale Funktion in dermalen Fibroblasten abgeleitet von Biopsien aus gesunden jungen, mittleren Alters und alte Spender gewonnen. Wir auch bestimmt Proteasom-Aktivit&auml;t in diesen Zellen mit ein Degron-destabilisiert gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein (GFP)-basierte Reporter Protein. Wir fanden einen betr&auml;chtlicher R&uuml;ckgang der mitochondrialen Membran Alter Geber, begleitet von erheblichen Anstieg ROS Potenzial bei Proben. Atmungs-Aktivit&auml;t war nicht mit dem Spender Alter erheblich ver&auml;ndert wahrscheinlich aufgrund genetischen Variation. Proteasom-Aktivit&auml;t wurde in Fibroblasten von mittleren Alters Spendern gegen&uuml;ber jungen Spender erheblich zur&uuml;ckgegangen; Fibroblasten, abgeleitet von den &auml;ltesten Gebern eine hohe Heterogenit&auml;t in dieser Probe angezeigt. Wir fanden auch intraindividuellen Koregulierung des mitochondrialen und Proteasomal Aktivit&auml;ten in allen menschlichen Fibroblasten Belastungen getestet, was darauf hindeutet, dass beide Systeme miteinander verbunden sind. Dementsprechend f&uuml;hrte pharmakologische Hemmung der das Proteasom verminderte mitochondriale Funktion, w&auml;hrend Hemmung der mitochondrialen Funktion wiederum Proteasom-Aktivit&auml;t reduziert.

Funktionale Zusammenspiel zwischen Mitochondrien und Proteasom-Aktivit&auml;t in der Hautalterung.

Secondo la teoria mitocondriale dell&#39;invecchiamento, reattivo dell&#39;ossigeno specie (ROS) derivate principalmente da mitocondri causano danno ossidativo cumulativo a varie molecole cellulari e quindi contribuiscono al processo di invecchiamento. D&#39;altra parte, un ruolo fondamentale del proteasoma, come principale sistema proteolitico implicato nella degradazione delle proteine ossidate durante l&#39;invecchiamento, &egrave; suggerito. In questo studio, abbiamo analizzato la funzione mitocondriale in fibroblasti dermici derivato da biopsie ottenute da donatori sani di mezza et&agrave;, vecchi e giovani. Abbiamo determinato anche attivit&agrave; del proteasoma in queste cellule, utilizzando una degron destabilizzato proteina fluorescente verde (GFP)-basato su proteina reporter. Abbiamo trovato una diminuzione significativa nella membrana mitocondriale potenziale nei campioni da donatori anziani, accompagnati da un aumento significativo nei livelli di ROS. Attivit&agrave; respiratoria non era alterato significativamente con l&#39;et&agrave; del donatore, probabilmente riflettendo la variazione genetica. Attivit&agrave; del proteasoma era significativamente diminuita nei fibroblasti da donatori di mezza et&agrave; rispetto ai giovani donatori; fibroblasti derivati da donatori pi&ugrave; antiche visualizzata un&#39;elevata eterogeneit&agrave; in questo dosaggio. Abbiamo anche trovato coregolamentazione intraindividual di mitocondriale e testato proteosomale attivit&agrave; in tutti i ceppi di fibroblasti umani, suggerendo che entrambi i sistemi sono interdipendenti. Di conseguenza, l&#39;inibizione farmacologica del proteasoma port&ograve; alla diminuita funzione mitocondriale, considerando che l&#39;inibizione della funzione mitocondriale, a sua volta ridotta attivit&agrave; del proteasoma.

Interazione funzionale tra mitocondriale e l&#39;attivit&agrave; del proteasoma nell&#39;invecchiamento della pelle.

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&#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xD53C;&#xBD80; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xD65C;&#xB3D9;.

&#x5728;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x808C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x57FA;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#x662F;&#x826F;&#x6027;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x589E;&#x751F; (BPH) &#x548C;&#x5B9E;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C; (PCa) &#x7684;&#x6807;&#x5FD7;&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x672C;&#x5730;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; TGF&beta;1 &#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x8003;&#x8651;&#x5230;&#x57FA;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#x79EF;&#x6781;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x589E;&#x751F;/PCa &#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x6709;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x57FA;&#x8D28;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x82AF;&#x7247;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF; PCR &#x5206;&#x6790;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x95F4;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x63A5;&#x53D7;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x808C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E0E; TGF&beta;1 &#x900F;&#x9732;&#x4E0A;&#x8C03;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD; (ROS) &#x751F;&#x4EA7;&#x8005;&#x51CF;&#x5C11;&#x70DF;&#x9170;&#x80FA;&#x817A;&#x560C;&#x5464;&#x4E8C;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x9176; 4 (NOX4) &#x548C;&#x4E0B;&#x8C03;&#x542B;&#x6709;&#x7852;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x6E05;&#x9664;&#x9176;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269; 3&#x3001; &#x786B;&#x6C27;&#x8FD8;&#x86CB;&#x767D;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176; 1 (TXNRD1) &#x548C;&#x7852;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x7852;&#x86CB;&#x767D; P &#x8840;&#x6D46; 1&#x3002;&#x59CB;&#x7EC8;&#x5982;&#x4E00;&#xFF0C;&#x4E13;&#x95E8;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x808C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x76F8;&#x5173; NOX4 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x7852;&#x86CB;&#x767D; P 1 &#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; PCa &#x6D3B;&#x68C0;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2; NOX4 &#x77ED;&#x53D1;&#x5939; RNA &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x3001; &#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3001; &#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x3001; &#x7852;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; NOX4 &#x6D3E;&#x751F; ROS TGF&beta;1 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x662F;&#x9700;&#x8981; TGF&beta;1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; c-jun &#x6C28;&#x57FA;&#x672B;&#x7AEF;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x662F;&#x968F;&#x540E;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6784;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8865;&#x7852;&#x5BF9;&#x6291;&#x5236;&#x5206;&#x5316;&#x65E5;&#x76CA; ROS &#x6E05;&#x9664;&#x542B;&#x7852;&#x9176;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x9176; 3 &#x548C; TXNRD1 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C; TXNRD1 &#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x88AB;&#x8FD8;&#x539F;&#x3002;&#x59CB;&#x7EC8;&#x5982;&#x4E00;&#xFF0C;&#x7852;&#x8D2B;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0B;&#x6E38; NOX4 &#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6F14;&#x793A;&#x7531;&#x9AD8;&#x67B6; NOX4 &#x6D3E;&#x751F;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x53CA;&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x7A33;&#x6001;&#x57FA;&#x7840;&#x75C5;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x57FA;&#x8D28;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x808C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7852;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; NOX4 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5728;&#x9632;&#x6B62;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x751F;&#x548C; PCa &#x529F;&#x80FD;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4EF7;&#x503C;&#x3002;

&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7531; NOX4 &#x5728;&#x75C5;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x57FA;&#x8D28;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x808C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

Stromal remodeling, in particular fibroblast-to-myofibroblast differentiation, is a hallmark of benign prostatic hyperplasia (BPH) and solid tumors, including prostate cancer (PCa). Increased local production of TGFÎ²1 is considered the inducing stimulus. Given that stromal remodeling actively promotes BPH/PCa development, there is considerable interest in developing stromal-targeted therapies. Microarray and quantitative PCR analysis of primary human prostatic stromal cells induced to undergo fibroblast-to-myofibroblast differentiation with TGFÎ²1 revealed up-regulation of the reactive oxygen species (ROS) producer reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 (NOX4) and down-regulation of the selenium-containing ROS-scavenging enzymes glutathione peroxidase 3, thioredoxin reductase 1 (TXNRD1), and the selenium transporter selenoprotein P plasma 1. Consistently, NOX4 expression correlated specifically with the myofibroblast phenotype in vivo, and loss of selenoprotein P plasma 1 was observed in tumor-associated stroma of human PCa biopsies. Using lentiviral NOX4 short hairpin RNA-mediated knockdown, pharmacological inhibitors, antioxidants, and selenium, we demonstrate that TGFÎ²1 induction of NOX4-derived ROS is required for TGFÎ²1-mediated phosphorylation of c-jun N-terminal kinase, which in turn is essential for subsequent downstream cytoskeletal remodeling. Significantly, selenium supplementation inhibited differentiation by increasing ROS-scavenging selenoenzyme biosynthesis because glutathione peroxidase 3 and TXNRD1 expression and TXNRD1 enzyme activity were restored. Consistently, selenium depleted ROS levels downstream of NOX4 induction. Collectively, this work demonstrates that dysregulated redox homeostasis driven by elevated NOX4-derived ROS signaling underlies fibroblast-to-myofibroblast differentiation in the diseased prostatic stroma. Further, these data indicate the potential clinical value of selenium and/or NOX4 inhibitors in preventing the functional pathogenic changes of stromal cells in BPH and PCa.

ROS signaling by NOX4 drives fibroblast-to-myofibroblast differentiation in the diseased prostatic stroma.

Remodelage stromal, en particulier des fibroblastes-&agrave;-myofibroblastes diff&eacute;renciation, est une caract&eacute;ristique de l&#39;hyperplasie b&eacute;nigne de la prostate (HBP) et les tumeurs solides, y compris le cancer de la prostate (PCa). Augmentation de la production locale de TGF&beta;1 est consid&eacute;r&eacute; comme le stimulus induisant. &Eacute;tant donn&eacute; que le remodelage stromal promeut activement le d&eacute;veloppement de BPH/PCa, il y a un int&eacute;r&ecirc;t consid&eacute;rable dans le d&eacute;veloppement de th&eacute;rapies cibl&eacute;es du stroma. Microarray et analyse PCR quantitative des cellules humaines primaires de stroma prostatiques induite &agrave; subir des fibroblastes-&agrave;-myofibroblastes diff&eacute;renciation avec TGF&beta;1 a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une r&eacute;gulation de la r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne (DRO) producteur r&eacute;duit nicotinamide ad&eacute;nine dinucl&eacute;otide phosphate oxydase 4 (NOX4) et vers le bas-r&egrave;glement de la contenant du s&eacute;l&eacute;nium ROS-nettoyage enzymes glutathion peroxydase 3, Thior&eacute;doxine r&eacute;ductase 1 (TXNRD1) et le s&eacute;l&eacute;nium transporteur selenoprotein P plasma 1. Constamment, NOX4 expression corr&eacute;l&eacute;es sp&eacute;cifiquement avec le ph&eacute;notype de myofibroblastes in vivo, et perte de plasma selenoprotein P 1 a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e dans le stroma associ&eacute;es aux tumeurs des biopsies de PCa humaines. &Agrave; l&#39;aide de knockdown LENTIVIRAUX-mediated RNA d&#39;&eacute;pingle &agrave; cheveux courts NOX4, inhibiteurs pharmacologiques, antioxydants et s&eacute;l&eacute;nium, nous d&eacute;montrons que TGF&beta;1 induction de d&eacute;riv&eacute;s NOX4 ROS est requise pour phosphorylation m&eacute;di&eacute;e par le TGF&beta;1 de c-jun N-terminale kinase, qui, &agrave; son tour, est essentiel pour le remodelage du cytosquelette en aval ult&eacute;rieur. Suppl&eacute;mentation en s&eacute;l&eacute;nium inhib&eacute; significativement, diff&eacute;renciation par biosynth&egrave;se de s&eacute;l&eacute;noenzyme de ROS-nettoyage croissante parce que la glutathion peroxydase 3 et expression TXNRD1 et TXNRD1 l&#39;activit&eacute; enzymatique ont &eacute;t&eacute; restaur&eacute;s. Constamment, s&eacute;l&eacute;nium appauvri niveaux ROS en aval de l&#39;induction NOX4. Collectivement, ce travail montre que hom&eacute;ostasie redox de dysr&eacute;gulation pilot&eacute;e par &eacute;lev&eacute;es ROS NOX4 d&eacute;riv&eacute; de signalisation sous-tend fibroblaste-&agrave;-myofibroblastes diff&eacute;renciation dans le stroma prostatique malade. En outre, ces donn&eacute;es indiquent la valeur clinique potentielle de s&eacute;l&eacute;nium et/ou inhibiteurs NOX4 en emp&ecirc;chant les changements de pathog&egrave;nes fonctionnelles des cellules stromales en HBP et APC.

ROS signalisation par NOX4 disques fibroblaste-&agrave;-myofibroblastes diff&eacute;renciation dans le stroma prostatique malade.

Stromale Umbau, bei bestimmten Fibroblast-Myofibroblast-Differenzierung, ist ein Markenzeichen der benignen Prostatahyperplasie (BPH) und soliden Tumoren, einschlie&szlig;lich Prostatakrebs (PCa). Erh&ouml;hte lokale Produktion von TGF&beta;1 gilt die fehlertr&auml;chtige Impulse. Angesichts der Tatsache, dass BPH/PCa Entwicklung stromal Umbau aktiv f&ouml;rdert, gibt es gro&szlig;es Interesse an stromal gezielte Therapien zu entwickeln. Microarray und quantitative PCR-Analyse von prim&auml;ren humanen Prostata stromal Zellen induziert Fibroblast-zu-Myofibroblast unterziehen Differenzierung mit TGF&beta;1 bis-Regelung der reaktive Sauerstoff Spezies (ROS) Produzent reduziert Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat Oxydase 4 (NOX4) und Herunterregulation der Selen-haltigen ROS-Aufr&auml;umvorgang Enzyme Glutathion Peroxidase 3, Thioredoxin Reduktase 1 (TXNRD1) sowie das Selen-Transporter-Selenoprotein P-Plasma 1 offenbart. Konsequent, NOX4 Ausdruck korreliert, speziell mit der Myofibroblast Ph&auml;notyp in-vivo und Verlust von Selenoprotein P Plasma 1 in Tumor-assoziierte Stroma des menschlichen PCa-Biopsien festgestellt. Mit Lentivirale NOX4 kurze Haarnadel RNA-vermittelte Niederschlag, pharmakologische Inhibitoren, Antioxidantien und Selen, zeigen wir, dass TGF&beta;1 Induktion von NOX4 abgeleiteten ROS erforderlich f&uuml;r TGF&beta;1-vermittelte Phosphorylierung von c-jun N-Terminal Kinase ist, die wiederum f&uuml;r sp&auml;tere nachgelagerte Zytoskelett Umbau erforderlich ist. Selen-Supplementierung hat deutlich, Differenzierung durch zunehmende ROS-Aufr&auml;umvorgang Selenoenzyme Biosynthese gehemmt, weil Glutathion-Peroxydase 3 und TXNRD1 Ausdruck und TXNRD1 Enzymaktivit&auml;t wiederhergestellt wurden. Konsequent, ersch&ouml;pft Selen ROS Ebenen unterhalb der NOX4 Induktion. Zusammenfassend zeigt diese Arbeit dieser defekten Redox-Hom&ouml;ostase angetrieben von erh&ouml;hten NOX4 abgeleitete ROS Signalisierung Fibroblast-zu-Myofibroblast Unterscheidung in den erkrankten Prostata Stroma zugrunde liegt. Diese Daten zeigen dar&uuml;ber hinaus das klinische Nutzenpotenzial von Selen und/oder NOX4-Hemmer verhindern die pathogenen Funktions&auml;nderungen stromal Zellen in BPH und PKA.

ROS Signalisierung durch NOX4 f&auml;hrt Fibroblast-zu-Myofibroblast Unterscheidung in der Kranken Prostata Stroma.

Rimodellamento stromale, in particolare dei fibroblasti-myofibroblast differenziazione, &egrave; un segno distintivo dell&#39;iperplasia prostatica benigna (BPH) e i tumori solidi, compreso il cancro della prostata (PCa). Aumento della produzione locale di TGF&beta;1 &egrave; considerato lo stimolo di induzione. Dato che il rimodellamento stromale promuove attivamente lo sviluppo di BPH/PCa, c&#39;&egrave; notevole interesse nello sviluppo di terapie mirate stromale. Microarray e analisi di PCR quantitativa di cellule primarie umane prostatica stromale indotta a subire dei fibroblasti-myofibroblast differenziazione con TGF&beta;1 rivelato up-regulation di reattivi dell&#39;ossigeno (ROS) specie produttore ridotto nicotinammide adenina dinucleotide fosfato ossidasi 4 (NOX4) e down-regulation del contenente selenio ROS scavenging degli enzimi glutatione perossidasi 3, tioredossina riduttasi 1 (TXNRD1) e il selenio transporter selenoprotein P plasma 1. Coerentemente, espressione NOX4 correlate specificamente con il fenotipo myofibroblast in vivo e perdita del selenoprotein P plasma 1 &egrave; stata osservata nel tumore-associati stroma delle biopsie PCa umane. Utilizzando lentivirale atterramento NOX4 short hairpin RNA-mediata, inibitori farmacologici, antiossidanti e selenio, dimostreremo che TGF&beta;1 induzione di ROS NOX4-derivato &egrave; necessario per TGF&beta;1-mediata la fosforilazione della chinasi N-terminale di c-jun, che a sua volta &egrave; essenziale per la successiva valle rimodellamento del citoscheletro. Significativamente, supplementazione di selenio inibiti differenziazione dalla crescente lo scavenging ROS selenoenzyme biosintesi perch&eacute; sono stati ristabiliti glutatione perossidasi 3 e TXNRD1 espressione e l&#39;attivit&agrave; dell&#39;enzima TXNRD1. Coerentemente, selenio impoverito livelli di ROS a valle di induzione NOX4. Collettivamente, questo lavoro dimostra che l&#39;omeostasi redox guidato da elevato ROS derivato NOX4 segnalazione sottende differenziazione dei fibroblasti-myofibroblast nello stroma prostatico malato. Inoltre, questi dati indicano il potenziale valore clinico di selenio e/o inibitori NOX4 nel prevenire le modifiche funzionali patogene delle cellule stromale in BPH e PCa.

ROS segnalazione da NOX4 unit&agrave; differenziazione dei fibroblasti-myofibroblast nello stroma prostatico malato.

&#x9593;&#x8CEA;&#x306E;&#x6539;&#x9020;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E; myofibroblast &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x826F;&#x6027;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x80A5;&#x5927; &#xFF08;BPH&#xFF09; &#x3068;&#x56FA;&#x5F62;&#x816B;&#x760D;, &#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x304C;&#x3093; &#xFF08;PCa&#xFF09; &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3059;&#x3002;TGF&beta;1 &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x73FE;&#x5730;&#x751F;&#x7523;&#x306F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9593;&#x8CEA;&#x306E;&#x6539;&#x9020; BPH/PCa &#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x63A8;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x9593;&#x8CEA;&#x6A19;&#x7684;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3072;&#x3068;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684; PCR &#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE; myofibroblast &#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092; TGF&beta;1 &#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E; (ROS) &#x524A;&#x6E1B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC; &#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x30EA;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; 4 (NOX4) &#x3068;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x898F;&#x5236;&#x3001;&#x30BB;&#x30EC;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080; ROS &#x6E05;&#x6383;&#x9175;&#x7D20;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30C1;&#x30AA;&#x30EC;&#x30C9;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20; 1 3 (TXNRD1) &#x3068;&#x30BB;&#x30EC;&#x30F3; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30BB;&#x30EC;&#x30CE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; P &#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE; 1 &#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x8868;&#x73FE; myofibroblast &#x578B;&#x3068; in vivo &#x306E; NOX4 &#x5F0F;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3001;&#x30BB;&#x30EC;&#x30CE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; P &#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE; 1 &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; PCa &#x751F;&#x691C;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x9593;&#x8CEA;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; NOX4 &#x77ED;&#x9396;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3;&#x578B; RNA &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3001;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x6B62;&#x5264;&#x3001;&#x30BB;&#x30EC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; ROS NOX4 &#x7531;&#x6765;&#x306E; TGF&beta;1 &#x8A98;&#x5C0E;&#x306F;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x7D9A;&#x304F;&#x4E0B;&#x6D41;&#x9AA8;&#x683C;&#x6539;&#x9020;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059; c-jun N &#x672B;&#x7AEF;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; TGF&beta;1 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#x3068; TXNRD1 &#x5F0F;&#x3068; TXNRD1 &#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x305F;&#x3081;&#x30BB;&#x30EC;&#x30F3;&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x304C;&#x5897;&#x52A0; ROS &#x6E05;&#x6383; selenoenzyme &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BB;&#x30EC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;ROS &#x6C34;&#x6E96;&#x4E0B;&#x6D41; 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NOX4 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x4FA1;&#x5024;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

ROS &#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; NOX4 &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x75C5;&#x7684;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x9593;&#x8CEA; myofibroblast &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD2B9;&#xC815; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; myofibroblast &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; stromal &#xAC1C;&#xC7A5; &#xC591;&#xC131; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC99D;&#xC2DD; (BPH)&#xACFC; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC885;&#xC591;, &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554; (PCa) &#xB4F1;&#xC758; &#xAC01; &#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tgf&beta;1&#xC758; &#xD604;&#xC9C0; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC99D;&#xAC00; &#xC720;&#xB3C4; &#xC790;&#xADF9; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xC5EC;&#xACA8;&#xC9C4;&#xB2E4;. BPH/PCa &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCD94;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; stromal &#xAC1C;&#xC7A5;, &#xADF8; stromal &#xD0C0;&#xAC9F; &#xC694;&#xBC95; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. Microarray &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC2E4;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC591;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xC720;&#xB3C4; fibroblast myofibroblast&#xB97C; TGF&beta;1 &#xAC10; &#xBCC4; &#xBC95; &#xACF5;&#xAC1C; &#xCD5C;&#xB300;-&#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;) &#xD504;&#xB85C;&#xB4C0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB2C8;&#xCF54;&#xD2F4;&#xC544;&#xBBF8;&#xB4DC; &#xC544;&#xB370;&#xB2CC; &#xB514;&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC778;&#xC0B0; &#xD6A8;&#xC18C; 4 (NOX4) &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC140; &#xB80C; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xCCAD;&#xC18C; &#xD6A8;&#xC18C; glutathione &#xD6A8;&#xC18C; 3, thioredoxin reductase 1 (TXNRD1), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC140;&#xB808;&#xB284; &#xC804;&#xC1A1; selenoprotein P &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; 1. &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C;, NOX4 &#xC2DD; myofibroblast &#xD615; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xAD00; &#xBC0F; selenoprotein P &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; 1&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC774; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PCa biopsies&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Lentiviral NOX4 &#xC9E7;&#xC740; &#xD5E4;&#xC5B4;&#xD540; RNA &#xC911;&#xC7AC; &#xCD5C;&#xC800;, &#xC57D;&#xB9AC; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC140;&#xB808;&#xB284;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; NOX4 &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xC758; TGF&beta;1 &#xC720;&#xB3C4; c-6 &#xC6D4; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xD0A4;&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; TGF&beta;1 &#xC911;&#xC7AC; &#xD544;&#xC694;&#xB97C; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xD6C4;&#xC18D; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; cytoskeletal &#xAC1C;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD06C;&#xAC8C;, &#xC140;&#xB808;&#xB284; &#xBCF4;&#xCDA9; glutathione &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; 3&#xACFC; TXNRD1 &#xC2DD;&#xACFC; TXNRD1 &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD588;&#xB2E4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xCCAD;&#xC18C; selenoenzyme &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC800;&#xD574;. &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C;, &#xC140;&#xB808;&#xB284; &#xACE0;&#xAC08; NOX4 &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xD558;&#xB958; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC218;&#xC900;. &#xD1B5;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xB294; &#xB192;&#xC740; NOX4 &#xD30C;&#xC0DD; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; dysregulated redox &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xADF8; &#xBCD1;&#xC5D0; &#xAC78;&#xB9B0; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; fibroblast myofibroblast &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00; &#xB418; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC140;&#xB808;&#xB284; BPH&#xC640; PCa stromal &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC608;&#xBC29; NOX4 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC784;&#xC0C1; &#xAC12;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; NOX4 &#xC5EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCD1; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; fibroblast myofibroblast &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;.

Remodelaci&oacute;n stromal, en particular diferenciaci&oacute;n de fibroblastos a miofibroblastos, es una caracter&iacute;stica distintiva de la hiperplasia prost&aacute;tica benigna (HPB) y tumores s&oacute;lidos, incluyendo el c&aacute;ncer de pr&oacute;stata (PCa). Aumento de la producci&oacute;n local de TGF&beta;1 se considera el est&iacute;mulo inductor. Dado que la remodelaci&oacute;n stromal promueve activamente el desarrollo de BPH/PCa, hay un gran inter&eacute;s en el desarrollo de terapias stromal orientada. Microarrays y an&aacute;lisis por PCR cuantitativo de c&eacute;lulas del estroma prost&aacute;ticos humanos primarios inducido a fibroblastos-a-miofibroblastos diferenciaci&oacute;n con TGF&beta;1 revel&oacute; para arriba-regulaci&oacute;n de los reactivos del ox&iacute;geno especies (ROS) productor reducido nicotinamida adenina dinucle&oacute;tido fosfato oxidasa 4 (NOX4) y abajo-regulaci&oacute;n de la que contienen selenio ROS-compactaci&oacute;n enzimas glutati&oacute;n peroxidasa 3, tiorredoxina reductasa 1 (TXNRD1) y el selenio transportador Selenoprote&iacute;na P plasma 1. Constantemente, expresi&oacute;n NOX4 correlacionado espec&iacute;ficamente con el fenotipo de miofibroblastos en vivo, y p&eacute;rdida de plasma Selenoprote&iacute;na P 1 se observ&oacute; en asociada a tumor estroma de biopsias humanas de la PCa. Utilizando lentivirales NOX4 ca&iacute;da de mediada por RNA de horquilla corta, inhibidores farmacol&oacute;gicos, antioxidantes y selenio, demostramos que TGF&beta;1 inducci&oacute;n de ROS derivados NOX4 es necesaria para la fosforilaci&oacute;n mediada por TGF&beta;1 de cinasa de c-jun N-terminal, que a su vez es esencial para la remodelaci&oacute;n citoesqueleto descendente posterior. La suplementaci&oacute;n de selenio hab&iacute;a inhibida perceptiblemente, diferenciaci&oacute;n por bios&iacute;ntesis de selenoenzyme ROS-compactaci&oacute;n creciente porque glutati&oacute;n peroxidasa 3 y expresi&oacute;n de txnrd1 y actividad de la enzima TXNRD1 fueron restaurados. Constantemente, selenio agotados los niveles ROS aguas abajo de la inducci&oacute;n NOX4. Colectivamente, este trabajo demuestra esa homeostasis redox de dysregulated impulsada por elevado ROS derivados NOX4 se&ntilde;alizaci&oacute;n subyace la diferenciaci&oacute;n de fibroblastos a miofibroblastos en el estroma prost&aacute;tico enfermo. Adem&aacute;s, estos datos indican el valor potencial cl&iacute;nico de selenio o inhibidores de la NOX4 en la prevenci&oacute;n de los cambios funcionales de pat&oacute;genos de las c&eacute;lulas estromales de HPB y PCa.

ROS por NOX4 unidades diferenciaci&oacute;n de fibroblastos a miofibroblastos en el estroma prost&aacute;tico enfermo.

&#x86CB;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x662F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x8C03;&#x5236;&#x7387;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x6700;&#x597D;&#x5728;&#x8001;&#x5316;&#x65E5;&#x7CAE;&#x86CB;&#x6C28;&#x9178;&#x9650;&#x5236;&#x5EF6;&#x957F;&#x4EBA;&#x7684;&#x5BFF;&#x547D;&#x7684;&#x556E;&#x9F7F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x6240;&#x793A;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5E95;&#x5C42;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x90FD;&#x6CA1;&#x6709;&#x5B8C;&#x5168;&#x641E;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x86CB;&#x6C28;&#x9178;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x901A;&#x8FC7;&#x53CD;&#x5411; transsulfuration &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x86CB;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x548C;&#x679C;&#x8747;&#x6240;&#x53D6;&#x5F97;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x53CD;&#x5411; transsulfuration &#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x8C03;&#x8282;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x800C;&#x5B83;&#x4E0D;&#x662F;&#x77E5;&#x9053;&#x662F;&#x5426;&#x6B64;&#x51FD;&#x6570;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x6F14;&#x53D8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x6D88;&#x8017;&#x80F1;&#x786B;&#x919A; &beta; &#x5408;&#x6210;&#x9176; &#xFF08;CBS&#xFF09; &#x7684;&#x901F;&#x7387;&#x9650;&#x5236;&#x9176;&#x5728;&#x53CD;&#x5411; transsulfuration &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; CBS &#x8017;&#x7AED;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6E29;&#x548C;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x548C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x540C;&#x578B;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x548C;&#x65E2;&#x5B9A;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x5371;&#x9669;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;CBS &#x865A;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; senescencein &#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x548C;&#x5BF9;&#x540C;&#x578B;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x5C06; CBS &#x865A;&#x4E0E;&#x8840;&#x7BA1;&#x8001;&#x5316;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x8054;&#x7CFB;&#x8D77;&#x6765;&#x3002;

&#x80F1;&#x786B;&#x919A; &beta; &#x5408;&#x9176;&#x8C03;&#x8282;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x3002;

Availability of methionine is known to modulate the rate of aging in model organisms, best illustrated by the observation that dietary methionine restriction extends the lifespan of rodents. However, the underlying mechanisms are incompletely understood. In eukaryotic cells, methionine can be converted to cysteine through the reverse transsulfuration pathway thereby modulating intracellular methionine availability. Whereas previous results obtained in yeast and fruit flies suggest that alterations in the reverse transsulfuration pathway modulate the rate of aging, it is not known whether this function is conserved in evolution. Here we show that depletion of cystathionine beta synthase (CBS), a rate limiting enzyme in the reverse transsulfuration pathway, induces premature senescence in human endothelial cells. We found that CBS depletion induces mild mitochondrial dysfunction and increases the sensitivity of endothelial cells to homocysteine, a known inducer of endothelial cell senescence and an established risk factor for vascular disease. Our finding that CBS deficiency induces endothelial cell senescencein vitro, involving both mitochondrial dysfunction and increased susceptibility of the cells to homocysteine, suggests a new mechanism linking CBS deficiency to vascular aging and disease.

Cystathionine beta synthase modulates senescence of human endothelial cells.

Disponibilidad de metionina se conoce para modular la tasa de envejecimiento en organismos modelo, mejores ilustrado por la observaci&oacute;n que la restricci&oacute;n diet&eacute;tica de la metionina extiende la vida &uacute;til de los roedores. Sin embargo, se entienden los mecanismos subyacentes. En las c&eacute;lulas eucariotas, metionina puede ser convertido a ciste&iacute;na con el camino inverso transsulfuration modulaci&oacute;n de tal modo la disponibilidad de metionina intracelular. Considerando que los resultados previos obtenidos en levadura y moscas de la fruta sugieren que las alteraciones en la v&iacute;a inversa transsulfuration modulan la tasa de envejecimiento, no se sabe si esta funci&oacute;n se conserva en evoluci&oacute;n. Aqu&iacute; mostramos que el agotamiento de la cistationina beta sintasa (CBS), una enzima en el camino de transsulfuration inversa, de limitaci&oacute;n de la velocidad induce senescencia prematura en c&eacute;lulas endoteliales humanas. Encontramos que el agotamiento de la CBS induce disfunci&oacute;n mitocondrial suave y aumenta la sensibilidad de las c&eacute;lulas endoteliales a la homociste&iacute;na, un conocido inductor de la senectud de la c&eacute;lula endotelial y un factor de riesgo establecido para la enfermedad vascular. Nuestro hallazgo de que CBS deficiencia induce c&eacute;lulas endoteliales senescencein vitro, que implicaba la disfunci&oacute;n mitocondrial y aumento de la susceptibilidad de las c&eacute;lulas a la homociste&iacute;na, sugiere un nuevo mecanismo que enlazan a la deficiencia de la CBS a las enfermedades y el envejecimiento vascular.

Cistationina beta sintasa modula la senescencia de c&eacute;lulas endoteliales humanas.

Disponibilit&eacute; de la m&eacute;thionine est connue pour moduler le taux de vieillissement chez les organismes mod&egrave;les, mieux illustr&eacute;e par l&#39;observation que la restriction di&eacute;t&eacute;tique m&eacute;thionine &eacute;tend la dur&eacute;e de vie des rongeurs. Cependant, les m&eacute;canismes sous-jacents sont encore partiellement comprises. Dans les cellules eucaryotes, m&eacute;thionine peut &ecirc;tre converti en cyst&eacute;ine par la voie de transsulfuration inverse ainsi moduler la disponibilit&eacute; intracellulaire de m&eacute;thionine. Consid&eacute;rant que les r&eacute;sultats ant&eacute;rieurs obtenus chez les levures et les mouches des fruits donnent &agrave; penser que les alt&eacute;rations dans la voie inverse transsulfuration modulent le taux de vieillissement, on ne sait pas si cette fonction est conserv&eacute;e en &eacute;volution. Ici, nous montrons que l&#39;appauvrissement de la cystathionine b&ecirc;ta synthase (CBS), un taux limitant l&#39;enzyme dans la voie de transsulfuration inverse, induit la s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e dans les cellules endoth&eacute;liales humaines. Nous avons trouv&eacute; que l&#39;appauvrissement de CBS induit un dysfonctionnement mitochondrial doux et augmente la sensibilit&eacute; des cellules endoth&eacute;liales de l&#39;homocyst&eacute;ine, un inducteur connu de la s&eacute;nescence des cellules endoth&eacute;liales et un facteur de risque &eacute;tabli pour les maladies vasculaires. Nous avons conclu que d&eacute;ficit en CBS induit des cellules endoth&eacute;liales senescencein vitro, impliquant des dysfonctionnement mitochondrial et une susceptibilit&eacute; accrue des cellules &agrave; l&#39;homocyst&eacute;ine, sugg&egrave;re un nouveau m&eacute;canisme reliant le d&eacute;ficit en CBS &agrave; la maladie et le vieillissement vasculaire.

Cystathionine b&ecirc;ta synthase module s&eacute;nescence des cellules endoth&eacute;liales humaines.

Verf&uuml;gbarkeit von Methionin ist bekannt, dass modulieren die Rate des Alterns in Modellorganismen, beste illustriert durch die Beobachtung, dass di&auml;tetische Methionin Beschr&auml;nkung die Lebensdauer von Nagetieren erstreckt. Allerdings sind die zugrunde liegenden Mechanismen unvollst&auml;ndig verstanden. In eukaryotischen Zellen kann Methionin zu Cystein durch die umgekehrte Transsulfuration-Pathway modulieren damit intrazellul&auml;re Methionin Verf&uuml;gbarkeit konvertiert werden. W&auml;hrend die fr&uuml;here Ergebnissen Hefe und Fruchtfliegen vorschlagen, dass Ver&auml;nderungen in der umgekehrten Transsulfuration Weg die Rate des Alterns modulieren, ist nicht bekannt, ob diese Funktion in der Evolution konserviert wird. Hier zeigen wir die Ersch&ouml;pfung der Cystathionin-Beta-Synthase (CBS), eine Rate, die Beschr&auml;nkung Enzym die umgekehrte Transsulfuration, induziert vorzeitiges Altern in menschlichen Endothelzellen. Wir fanden, dass CBS Ersch&ouml;pfung milde mitochondriale Dysfunktion induziert und die Empfindlichkeit der Endothelzellen und Homocystein, einem bekannten Induktor von endothelial Zellen Altern und ein etablierter Risikofaktor f&uuml;r Gef&auml;&szlig;erkrankungen erh&ouml;ht. Unsere Feststellung, dass CBS-Mangel endothelial Zellen Senescencein Vitro induziert, mitochondriale Dysfunktion und erh&ouml;hter Anf&auml;lligkeit der Zellen f&uuml;r Homocystein, schl&auml;gt einen neuen Mechanismus, die Anbindung von CBS-Mangel an vaskul&auml;re Altern und Krankheit.

Cystathionin-Beta-Synthase moduliert Alterung des menschlichen Endothelzellen.

Disponibilit&agrave; di metionina &egrave; noto per modulare il tasso di invecchiamento in organismi modello, meglio illustrata dall&#39;osservazione che la restrizione dietetica metionina si estende la durata della vita dei roditori. Tuttavia, i meccanismi sottostanti in modo incompleto sono capiti. Nelle cellule eucariotiche, metionina pu&ograve; essere convertito in cisteina attraverso il pathway transulfurazione inversa quindi modulante disponibilit&agrave; intracellulare di metionina. Considerando che i precedenti risultati ottenuti nel lievito e moscerini della frutta suggeriscono che alterazioni nel percorso inverso transulfurazione modulano il tasso di invecchiamento, non &egrave; noto se questa funzione &egrave; conservata in evoluzione. Qui vi mostriamo quello svuotamento della cistationina beta sintetasi (CBS), un rate limiting enzima nella via della transulfurazione inversa, induce precoce senescenza in cellule endoteliali umane. Abbiamo trovato che la deplezione di CBS induce lieve disfunzione mitocondriale e aumenta la sensibilit&agrave; delle cellule endoteliali di omocisteina, un noto induttore della senescenza delle cellule endoteliali e un consolidato fattore di rischio per malattia vascolare. La nostra ricerca che deficit di CBS induce la cellula endoteliale senescencein vitro, coinvolgendo sia la disfunzione mitocondriale e maggiore suscettibilit&agrave; delle cellule di omocisteina, suggerisce un nuovo meccanismo di collegamento deficit di CBS a malattie e invecchiamento vascolare.

Cistationina beta sintetasi modula senescenza delle cellule endoteliali umane.

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Rafal Koziel

Molecular and Cell Biology

Institute for Biomedical Aging Research

Monitoring of Ubiquitin-proteasome Activity in Living Cells Using a Degron (dgn)-destabilized Green Fluorescent Protein (GFP)-based Reporter Protein