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Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

Several microscopy techniques are available today that can detect a specific protein within the cell. During the last decade live cell imaging using ...

University of Uppsala

Swedish University of Agricultural Sciences

&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x6784;&#x9020;&#x9AD8;&#x6548;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x6297;&#x65E5;&#x672C;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x75C5;&#x7684;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x5BFC; T &#x548C; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x66FC;&#x6C0F; 28 kDa &#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;-S-&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; (Sm28GST) &#x6297;&#x539F; (a.a 24 43 &#x548C; 191-212) &#x4ECE;&#x70E4;&#x74F7;&#x970D;&#x4E71;&#x6BD2;&#x7D20; B &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D; &#xFF08;&#x57CE;&#x5DF4;&#xFF09; &#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x6DF7;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x75AB;&#x82D7;&#x3002;S.&#x66FC;&#x6C0F;&#x611F;&#x67D3;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6742;&#x4EA4;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x672C;&#x673A;&#x57CE;&#x88AB;&#x7EC4;&#x88C5;&#x6210;&#x53D7;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A; pentamers&#xFF0C;&#x6EF4;&#x9F3B;&#x6CBB;&#x7597;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x603B;&#x7684;&#x8815;&#x866B;&#x8D1F;&#x62C5;&#x548C;&#x809D;&#x9E21;&#x86CB;&#x8BA1;&#x6570;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A; Sm28GST &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x6291;&#x5236;&#x4E86;&#x809D;&#x810F;&#x5185;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x8089;&#x82BD;&#x80BF;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x8D85;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x5411;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; Sm28GST &#x548C;&#x603B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x866B;&#x5375;&#x6297;&#x539F;&#x5728;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x5236;&#x6B62;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x7528;&#x4F5C;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x6297;&#x514D;&#x75AB;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x548C;&#x6297;&#x611F;&#x67D3;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x75C5;&#x75AB;&#x82D7;&#x3002;

Mucosally &#x7BA1;&#x7406;&#x91CD;&#x7EC4;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x75AB;&#x82D7;&#x9488;&#x5BF9;&#x75C5;&#x56E0;&#x53CA;&#x611F;&#x67D3;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x75C5;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;

We have constructed and efficiently produced and purified a candidate vaccine against schistosomiasis consisting of a novel hybrid protein in which two dominant T- and B-cell epitopes from Schistosoma mansoni 28 kDa glutathione-S-transferase (Sm28GST) antigen (a.a 24-43 and 191-212) are fused to cholera toxin B subunit (CTB). Intranasal treatment of S. mansoni-infected mice with the hybrid protein, which similar to native CTB was assembled into receptor binding pentamers, significantly reduced total worm burden and liver egg counts due to the induction of Sm28GST-specific antibodies. Immunopathologic granuloma formation in the liver was also significantly suppressed and there was an almost complete suppression of delayed-type hypersensitivity reactions to both Sm28GST and to total soluble egg antigen in infected animals. The results suggest that this type of hybrid protein could be used as a combined anti-immunopathology and anti-infection vaccine against schistosomiasis.

A mucosally administered recombinant fusion protein vaccine against schistosomiasis protecting against immunopathology and infection.

Nous avons construit et efficacement produit et purifi&eacute; un vaccin candidat contre la schistosomiase consistant en une prot&eacute;ine hybride roman dans lequel deux &eacute;pitopes de lymphocytes T et B dominantes de Schistosoma mansoni 28 kDa glutathion-S-transf&eacute;rase (Sm28GST) antig&egrave;ne (a.a 24-43 et 191-212) sont soud&eacute;es &agrave; la sous-unit&eacute; de chol&eacute;ra toxine B (CTB). Traitement intranasale de souris de S. mansoni infect&eacute;s avec la prot&eacute;ine hybride, qui semblable &agrave; la CTB natif a &eacute;t&eacute; la r&eacute;alisation r&eacute;cepteur liaison pentam&egrave;res, r&eacute;duit significativement la charge parasitaire total et oeufs foie compte en raison de l&#39;induction d&#39;anticorps sp&eacute;cifiques Sm28GST. Immunopathologiques formation de granulomes dans le foie &eacute;tait &eacute;galement significativement supprim&eacute;e et il y avait une suppression presque compl&egrave;te des r&eacute;actions d&#39;hypersensibilit&eacute; retard&eacute;e pour les deux Sm28GST et antig&egrave;ne soluble totale d&#39;oeufs chez les animaux infect&eacute;s. Les r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que ce type de prot&eacute;ine hybride pourrait servir comme un combin&eacute; anti-immunopathologie et vaccins anti-infectieux contre la schistosomiase.

Un vaccin de prot&eacute;ine de fusion recombinantes muqueuse administr&eacute;e contre la schistosomiase prot&eacute;geant contre immunopathologie et infection.

Eine auf die Schleimhaut verabreicht rekombinantes Fusionsprotein Impfstoffs gegen Bilharziose Schutz vor Infektion und Immunpathologie.

Abbiamo costruito e in modo efficiente prodotto e purificato un vaccino candidato contro la schistosomiasi, costituito da una proteina ibrida romanzo in cui due epitopi T - e B-cellula dominanti da Schistosoma mansoni 28 kDa glutatione-S-transferasi (Sm28GST) antigene (Andrea 24-43 e 191-212) sono fuse alla subunit&agrave; di colera tossina B (CTB). Trattamento intranasale di topi S. di mansoni-infettati con la proteina ibrida, che simili a CTB nativo &egrave; stato assemblato nel recettore associazione pentamers, significativamente ridotto onere totale worm e fegato uovo conta a causa dell&#39;induzione di anticorpi specifici per Sm28GST. Formazione di granuloma Immunopathologic nel fegato anche significativamente fu soppressa e c&#39;era una quasi completa soppressione delle reazioni di ipersensibilit&agrave; di tipo ritardato per entrambi Sm28GST e l&#39;antigene totale uovo solubile negli animali infetti. I risultati suggeriscono che questo tipo di proteina ibrida potrebbe essere utilizzato come un combinato anti-immunopatologia ed antiinfettive vaccino contro la schistosomiasi.

Un vaccino di proteina di fusione ricombinante mucosally amministrato contro la schistosomiasi protegge contro l&#39;infezione e Immunopatologia.

&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x3001;&#x65E5;&#x672C;&#x4F4F;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 28 kDa &#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;-S-&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (Sm28GST) &#x6297;&#x539F; &#xFF08;aa 24 43 &#x3068; 191 212) &#x304B;&#x3089;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A; T &#x304A;&#x3088;&#x3073; B &#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; &#x30B3;&#x30EC;&#x30E9;&#x6BD2;&#x7D20; B &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; (CTB) &#x878D;&#x5408;&#x65B0;&#x898F;&#x8907;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x4F4F;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x75C7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5019;&#x88DC;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;S. &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x611F;&#x67D3;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; CTB &#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9;&#x30B2;&#x30EB;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9F3B;&#x8154;&#x5185;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7DCF;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x8CA0;&#x62C5;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;Sm28GST &#x7279;&#x7570;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x809D;&#x5375;&#x3092;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x809D;&#x81D3;&#x306E; Immunopathologic &#x8089;&#x82BD;&#x816B;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9; Sm28GST &#x3068;&#x611F;&#x67D3;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7DCF;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x5375;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x578B;&#x904E;&#x654F;&#x53CD;&#x5FDC;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x53CD;&#x514D;&#x75AB;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x3068;&#x4F4F;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x75C7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x5BFE;&#x7B56;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x4F4F;&#x8840;&#x5438;&#x866B;&#x75C7;&#x514D;&#x75AB;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; mucosally &#x6295;&#x4E0E;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC74;&#xC124; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xACFC; schistosomiasis Schistosoma mansoni 28 kDa glutathione-S-&#xC804;&#xC774; (Sm28GST) &#xC6D0; (&#xAE08;&#xC8FC; &#xBAA8;&#xC784; 24-43&#xACFC; 191-212)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; T &#xBC0F; B &#xC138;&#xD3EC; epitopes &#xCF5C;&#xB808;&#xB77C; &#xB3C5; &#xC18C; B &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; (CTB)&#xC5D0; &#xC735;&#xD569; &#xB418;&#xC5B4; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xC815;&#xD654;. Intranasal &#xCE58;&#xB8CC;&#xB294; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; CTB &#xC720;&#xC0AC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; pentamers&#xB85C; &#xC870;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S. mansoni&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC950;&#xC758; &#xD06C;&#xAC8C; &#xCD1D; &#xC6DC; &#xBD80;&#xB2F4; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xAC04; &#xB2EC;&#xAC40; Sm28GST &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC778;&#xD574; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; Immunopathologic &#xC721;&#xC544; &#xC885; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xD615; &#xACFC;&#xBBFC; &#xC99D; &#xBC18;&#xC751; &#xB450; Sm28GST &#xACE0; &#xCD1D; &#xB179;&#xB294; &#xACC4;&#xB780; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC548;&#xD2F0;-immunopathology &#xBC0F; schistosomiasis &#xC0C1;&#xB300;&#xB85C; anti-infection &#xBC31;&#xC2E0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mucosally &#xAD00;&#xB9AC; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC758; schistosomiasis immunopathology &#xBC0F; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

Hemos construido y eficientemente producido y purificado una vacuna candidata contra la esquistosomiasis, que consiste en una prote&iacute;na de nuevo h&iacute;brido en el que se fusionan dos ep&iacute;topos de c&eacute;lulas T y B dominantes de Schistosoma mansoni 28 kDa glutati&oacute;n-S-transferasa (Sm28GST) ant&iacute;geno (a.a 24-43 y 191-212) a la subunidad de B de la toxina de c&oacute;lera (CTB). Tratamiento intranasal de ratones de S. mansoni infectados con la prote&iacute;na h&iacute;brida, que similar a CTB nativa fue montado en el receptor enlace pent&aacute;meros, reduce considerablemente la carga total del gusano y huevo h&iacute;gado cuenta debido a la inducci&oacute;n de anticuerpos Sm28GST espec&iacute;ficos. Immunopathologic formaci&oacute;n de granulomas en el h&iacute;gado tambi&eacute;n significativamente fue suprimida y hab&iacute;a una casi completa supresi&oacute;n de reacciones de hipersensibilidad de tipo retardado para ambos Sm28GST y ant&iacute;geno de huevo soluble total en animales infectados. Los resultados sugieren que este tipo de h&iacute;brido prote&iacute;na podr&iacute;a utilizarse como un anti-inmunopatolog&iacute;a combinado y antiinfeccioso vacuna contra la esquistosomiasis.

Una vacuna de prote&iacute;na de fusi&oacute;n recombinante mucosally administrado contra esquistosomiasis protecci&oacute;n contra inmunopatolog&iacute;a e infecci&oacute;n.

&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x662F;&#x5377;&#x5165; RNA &#x52A0;&#x5DE5;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x5212;&#x5206;&#x3001; &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x3001; &#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x548C; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x3002;&#x5728;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E0A;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x6838;&#x4FE1;&#x5C01;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; Rmt2&#xFF0C;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x793A;&#xFF0C;methylate &#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D; L12 &#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x95F4;&#x63A5;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x6CD5;&#x548C;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x998F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x8868;&#x660E; Rmt2 &#x6709;&#x6838;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4F9B;&#x9500;&#x3002;&#x6D53;&#x7F29;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x5C0F;&#x90E8;&#x5206;&#x751F;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x6838; Rmt2 &#x53EF;&#x8010;&#x76D0;&#x52A0;&#x6D17;&#x6DA4;&#x5242;&#xFF0C;&#x63D0;&#x53D6;&#x6307;&#x793A;&#x4E0E;&#x7ED3;&#x6784;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FD9;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C; Rmt2 &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;co-purify &#x4E0E; nucleoporins Nup49&#x3001; Nup57 &#x548C; Nup100&#xFF0C;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x548C;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6838;&#x5B54;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002; &#x6C34;&#x9F99;&#x5934;&#x6807;&#x8BB0; Rmt2&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;rmt2Delta &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x663E;&#x8457;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684; MYO1&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x7C7B;&#x578B; II &#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE;&#x7684;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7814;&#x7A76;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x5206;&#x88C2;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;

&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; Rmt2 &#x6838;&#x6D53;&#x7F29;&#x548C; co-purifies &#x4E0E; Nup49&#x3001; Nup57 &#x548C; Nup100 &#x7684;&#x6838;&#x5B54;&#x3002;

Arginine methylation is a post-translational modification of proteins implicated in RNA processing, protein compartmentalization, signal transduction, transcriptional regulation and DNA repair. In a screen for proteins associated with the nuclear envelope in the yeast Saccharomyces cerevisiae, we have identified the arginine methyltransferase Rmt2, previously shown to methylate the ribosomal protein L12. By indirect immunofluorescence and subcellular fractionations we demonstrate here that Rmt2 has nuclear and cytoplasmic localizations. Biochemical analysis of a fraction enriched in nuclei reveals that nuclear Rmt2 is resistant to extractions with salt and detergent, indicating an association with structural components. This was supported by affinity purification experiments with TAP-tagged Rmt2. Rmt2 was found to co-purify with the nucleoporins Nup49, Nup57 and Nup100, revealing a novel link between arginine methyltransferases and the nuclear pore complex. In addition, a genome-wide transcription study of the rmt2Delta mutant shows significant downregulation of the transcription of MYO1, encoding the Type II myosin heavy chain required for cytokinesis and cell separation.

The arginine methyltransferase Rmt2 is enriched in the nucleus and co-purifies with the nuclear porins Nup49, Nup57 and Nup100.

M&eacute;thylation de l&#39;arginine est une modification post-traductionnelle des prot&eacute;ines impliqu&eacute;es dans l&#39;ARN, cloisonnement de prot&eacute;ine, transduction du signal, r&eacute;gulation transcriptionnelle et r&eacute;paration de l&#39;ADN. Dans un &eacute;cran de prot&eacute;ines associ&eacute;es &agrave; l&#39;enveloppe nucl&eacute;aire dans la levure Saccharomyces cerevisiae, nous avons identifi&eacute; l&#39;arginine m&eacute;thyltransf&eacute;rase Rmt2, d&eacute;j&agrave; montr&eacute; &agrave; la m&eacute;thylation de la prot&eacute;ine ribosomique L12. Par immunofluorescence indirecte et fractionnement subcellulaire, nous d&eacute;montrons ici que Rmt2 a des localisations nucl&eacute;aires et cytoplasmiques. Analyse biochimique d&#39;une fraction enrichie en noyaux r&eacute;v&egrave;le que Rmt2 nucl&eacute;aire r&eacute;siste aux extractions avec sel et d&eacute;tergent, indiquant une association avec des &eacute;l&eacute;ments structuraux. Cela a &eacute;t&eacute; pris en charge par des exp&eacute;riences de purification d&#39;affinit&eacute; avec robinet-tag Rmt2. Rmt2 a &eacute;t&eacute; trouv&eacute; &agrave; co-purifier avec le lien de nucl&eacute;oporines Nup49, Nup57 et Nup100, r&eacute;v&eacute;lant un roman entre m&eacute;thyltransf&eacute;rases de l&#39;arginine et le complexe de pores nucl&eacute;aires. En outre, une &eacute;tude G&eacute;nome-large transcription de la rmt2Delta mutant spectacles importants downregulation de la transcription de MYO1, codant la cha&icirc;ne lourde de myosine de Type II requis pour s&eacute;paration cytocin&egrave;se et cellulaire.

L&#39;arginine m&eacute;thyltransf&eacute;rase Rmt2 est enrichi dans le noyau et co-purifies avec les porines nucl&eacute;aires, Nup49, Nup57 et Nup100.

Arginin-Methylierung ist eine post-translationale Modifikation von Proteinen, RNA, die Verarbeitung, Protein Untergliederung, Signaltransduktion, Transkriptionsregulation und DNA-Reparatur in Verbindung gebracht. In einem Bildschirm f&uuml;r Proteine, die die Kernh&uuml;lle in der Hefe Saccharomyces Cerevisiae zugeordnet haben wir die Arginin Methyltransferase Rmt2, zuvor gezeigt, um das ribosomale Protein L12 methyliere identifiziert. Durch indirekte Immunfluoreszenz und subzellulare Fractionations zeigen wir hier, dass Rmt2 Kern- und zytoplasmatische Lokalisierungen hat. Biochemische Analyse der Dezimalbruch angereichertes Kerne zeigt, dass nukleare Rmt2 resistent gegen Extraktionen mit Salz und Sp&uuml;lmittel, Angabe einer Assoziation mit strukturellen Komponenten. Unterst&uuml;tzt wurde dies durch Affinit&auml;t Reinigung Experimente mit TAP-Tag-Rmt2. Rmt2 wurde festgestellt, dass mit dem Nucleoporins Nup49, Nup57 und Nup100, offenbart einen Roman-Link zwischen Arginin Methyltransferasen und der nuklearen Pore, die komplexe co-purify. Dar&uuml;ber hinaus eine genomweiten Transkription-Studie &uuml;ber die rmt2Delta mutant zeigt erhebliche Heraufregulation der Transkription von MYO1, die Typ II Myosin heavy Chain-Codierung f&uuml;r die Zellteilung und Zelle Trennung erforderlich.

Die Arginin-Methyltransferase Rmt2 ist im Kern angereichert und co-purifies mit der nuklearen Porins, Nup49, Nup57 und Nup100.

Metilazione di arginina &egrave; una modifica alberino-di traduzione delle proteine implicate nel RNA processing, compartimentazione della proteina, trasduzione del segnale, regolazione trascrizionale e riparazione del DNA. In uno schermo per proteine associate con la membrana nucleare nel lievito Saccharomyces cerevisiae, abbiamo identificato il methyltransferase arginina Rmt2, precedentemente indicato per metilare la proteina ribosomiale L12. Di immunofluorescenza indiretta e sottocellulari fractionations dimostriamo qui che Rmt2 ha localizzazioni nucleari e citoplasmatici. L&#39;analisi biochimica di una frazione arricchita nei nuclei rivela che Rmt2 nucleare &egrave; resistente alle estrazioni con sale e detersivo, che indica un&#39;associazione con componenti strutturali. Questo &egrave; stato supportato da esperimenti di purificazione di affinit&agrave; con rubinetto-Tag Rmt2. Rmt2 &egrave; stato trovato a co-purify con il link nucleoporins Nup49, Nup57 e Nup100, rivelando un romanzo tra i methyltransferases di arginina e il poro nucleare complesso. Inoltre, uno studio genome-wide trascrizione il rmt2Delta mutante spettacoli significativi downregulation della trascrizione di MYO1, la catena pesante della miosina II tipo di codifica necessaria per la separazione delle cellule e Citocinesi in.

Il methyltransferase arginina Rmt2 &egrave; arricchito nel nucleo e co-purifies con il nucleare porins Nup49, Nup57 e Nup100.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x51E6;&#x7406;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x3001;DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x68F2;&#x307F;&#x5206;&#x3051; RNA &#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6838;&#x819C;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; L12 &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; Rmt2 &#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9593;&#x63A5;&#x86CD;&#x5149;&#x6297;&#x4F53;&#x6CD5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x4E0B;&#x306E;&#x5206;&#x5225;&#x306F;&#x3053;&#x3053; Rmt2 &#x6838;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6838;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x5206;&#x6570;&#x306E;&#x6838; Rmt2 &#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x8010;&#x5869;&#x3001;&#x6D17;&#x5264;&#x3001;&#x62BD;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x7CBE;&#x88FD;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30BF;&#x30C3;&#x30D7; Rmt2&#x3002; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F; Rmt2 &#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x6838;&#x819C;&#x5B54;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x9593;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3092;&#x660E;&#x304B;&#x3059;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3; Nup49&#x3001;Nup57&#x3001;Nup100&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092; co-purify &#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x7814;&#x7A76; II &#x578B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x91CD;&#x9396;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;rmt2Delta &#x5909;&#x7570;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x6709;&#x610F;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E; MYO1&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5206;&#x88C2;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; Rmt2 &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6838;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3057;&#x3001;&#x6838;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; Nup49&#x3001;Nup57&#x3001;Nup100 co-purifies&#x3002;

&#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; RNA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xD5D8;&#xD68C;&#xC0AC;, &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;, transcriptional &#xADDC;&#xC81C; &#xBC0F; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xC758; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815;. &#xD6A8; &#xBAA8; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; &#xD575; &#xBD09;&#xD22C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; methyltransferase Rmt2, methylate L12 ribosomal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xC811; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; subcellular fractionations &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Rmt2 &#xD575; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAD6D;&#xBD80;&#xB294; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC124;&#xBA85;. &#xD575; &#xB18D;&#xCD95; &#xBD84;&#xC218;&#xC758; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D; &#xD575; rmt2&#xC740; &#xC18C;&#xAE08;, &#xC138;&#xC81C;, &#xAE30;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xC5EC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAF2D;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; Rmt2. &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC815;&#xD654; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; Rmt2 co-purify &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; methyltransferases&#xC640; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD575; &#xAE30; &#xACF5; &#xC0AC;&#xC774; nucleoporins Nup49, Nup57 &#xBC0F; Nup100, &#xC18C;&#xC124;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xB9C1;&#xD06C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4; &#xC804;&#xC0AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; rmt2Delta &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; downregulation MYO1, &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD0C0;&#xC785; II myosin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; cytokinesis&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; methyltransferase Rmt2 &#xD575; &#xB18D;&#xCD95;&#xACFC; &#xD575; porins Nup49, Nup57 &#xBC0F; nup100&#xC640; &#xD568;&#xAED8; co-purifies.

La metilaci&oacute;n de la arginina es una modificaci&oacute;n post-translacional de las prote&iacute;nas implicadas en el procesamiento, la compartimentaci&oacute;n de la prote&iacute;na, transducci&oacute;n de se&ntilde;ales, regulaci&oacute;n transcripcional y reparaci&oacute;n del ADN del ARN. En una pantalla para las prote&iacute;nas asociadas con la envoltura nuclear en la levadura Saccharomyces cerevisiae, hemos identificado la metiltransferasa de arginina Rmt2, demostrado previamente para metilato de la prote&iacute;na ribosomal L12. Por inmunofluorescencia indirecta y fractionations subcelulares demostramos aqu&iacute; que Rmt2 tiene localizaciones citoplasm&aacute;ticas y nucleares. El an&aacute;lisis bioqu&iacute;mico de una fracci&oacute;n enriquecida en n&uacute;cleos revela que nuclear Rmt2 es resistente a extracciones con sal y detergente, lo que indica una asociaci&oacute;n con componentes estructurales. Esto fue apoyado por experimentos de purificaci&oacute;n de afinidad con TAP-etiquetado Rmt2. Rmt2 encontraron para co-purify con la nucleoporins Nup49, Nup57 y Nup100, revelando una novela vinculaci&oacute;n metiltransferasas de arginina y el complejo de poro nuclear. Adem&aacute;s, un estudio de la transcripci&oacute;n del genoma de la rmt2Delta mutante muestra significativa downregulation de la transcripci&oacute;n de MYO1, codificaci&oacute;n de la cadena pesada de la miosina tipo II necesaria para la separaci&oacute;n de la c&eacute;lula y citocinesis.

La arginina metiltransferasa Rmt2 se enriquece en el n&uacute;cleo y co-purifies con las Porinas nuclear Nup49, Nup57 y Nup100.

&#x819C;&#x4EA4;&#x901A;&#x7BA1;&#x5236;&#x5341;&#x5206;&#x4E25;&#x683C;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; Rab &#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x5728;&#x672C;&#x89C4;&#x4F8B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x6838;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6210;&#x5458;&#x662F;&#x917F;&#x9152;&#x95F4;&#x6B47;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; Ypt6&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x641C;&#x7D22;&#x4E0E; Ypt6 &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x65B0;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E3A;&#x6267;&#x884C; ypt6Delta &#x5728; 35 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x9AD8;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x6291;&#x5236;&#x5668;&#x9664;&#x6291;&#x5236;&#x5668;&#xFF0C;MYR1 &#x4E5F;&#x80FD;&#x591F;&#x5236;&#x6B62;&#x7F3A;&#x4E4F; Ric1&#xFF0C;Ypt6 &#x9E1F;&#x560C;&#x5464;&#x4EA4;&#x6362;&#x7684;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7A81;&#x53D8;&#x56E0;&#x5B50;&#x590D;&#x6742; Ric1 / Rgp1.Myr1 &#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x87BA;&#x65CB;&#x7684;&#x7EBF;&#x5708;&#x533A;&#x57DF;&#x548C; GYF &#x57DF;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x6A21;&#x5757;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;Myr1 &#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x819C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x662F;&#x4E0E;&#x7279;&#x91CC;&#x987F; X-100 &#x4E2D;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#x8F83;&#x5927;&#x7ED3;&#x6784;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;Myr1 &#x663E;&#x793A;&#x4E86;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5F0F;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5C0F;&#x75AB;&#x6E90;&#x5730;&#x3002;Myr1 &#x7684;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x6838;&#x4FE1;&#x5C01;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x6709;&#x81F4;&#x547D;&#x5371;&#x9669;&#x3002;&#x8FD9;&#x6740;&#x4F24;&#x529B;&#x662F;&#x6551;&#x51FA;&#x65F6; N &#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B; GYF &#x57DF;&#xFF0C;&#x5C06;&#x88AB;&#x5220;&#x9664;&#x3002;Myr1Delta &#x4E00;&#x682A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x663E;&#x793A;&#x5BF9;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x6838;&#x8FC1;&#x79FB;&#xFF0C;Ras &#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Myr1 &#x65B0;&#x578B;&#x56E0;&#x5B50;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x5236;&#x6302;&#x94A9;&#x3002;

MYR1&#x3001; YPT6 &#x548C; RIC1 &#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x6291;&#x764C;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Membrane traffic is tightly regulated and the Rab protein family of small GTPases plays a central role in this regulation. One member of this family is the Saccharomyces cerevisae protein Ypt6. To search for new genes interacting with Ypt6-related pathways, we performed a genetic screen for high copy suppressors of ypt6Delta temperature sensitivity at 35 degrees C. Among the suppressors, MYR1 was also able to suppress the temperature sensitive mutant lacking Ric1, a subunit of the Ypt6 guanine exchanging factor complex Ric1/Rgp1. Myr1 is characterized by a coiled coil region and a GYF domain, a protein module binding proline-rich sequences. Myr1 is able to bind membranes but is also associated with larger structures insoluble in Triton X-100. By immunofluorescence, Myr1 shows a network-like pattern as well as small foci. Overexpression of Myr1 influences nuclear envelope morphology and high levels are lethal. This lethality is rescued when the N-terminal region, containing the GYF domain, is deleted. The transcription profile of a myr1Delta strain shows effects on genes involved in nuclear migration, Ras signalling and transcription. Taken together, these results suggest that Myr1 is a novel factor linked to the secretory pathway and important cellular regulatory mechanisms.

Characterization of MYR1, a dosage suppressor of YPT6 and RIC1 deficient mutants.

Trafic membranaire est &eacute;troitement contr&ocirc;l&eacute;e et de la famille des prot&eacute;ines Rab des petites GTPases joue un r&ocirc;le central dans le pr&eacute;sent r&egrave;glement. Un membre de cette famille est la prot&eacute;ine de cerevisae Saccharomyces Ypt6. Vous recherchez de nouveaux g&egrave;nes interagissant avec voies li&eacute;es &agrave; Ypt6, nous avons effectu&eacute; un d&eacute;pistage g&eacute;n&eacute;tique pour suppresseurs de copie &eacute;lev&eacute;e de sensibilit&eacute; &agrave; la temp&eacute;rature ypt6Delta &agrave; 35 degr&eacute;s C. Parmi les suppresseurs, MYR1 &eacute;tait aussi capable de supprimer le mutant sensible de temp&eacute;rature manque Ric1, une sous-unit&eacute; de l&#39;&eacute;change de guanine Ypt6 facteur complexe Ric1 / Rgp1. Myr1 est caract&eacute;ris&eacute; par une r&eacute;gion de bobine d&#39;enroulement et un domaine GYF, un module de prot&eacute;ine liant les s&eacute;quences riches en proline. Myr1 est capable de lier des membranes, mais est &eacute;galement associ&eacute;e &agrave; des structures plus insolubles dans le Triton X-100. Par immunofluorescence, Myr1 montre un r&eacute;seau de type, mais aussi des petits foyers. La surexpression de Myr1 influe sur la morphologie de l&#39;enveloppe nucl&eacute;aire et des niveaux &eacute;lev&eacute;s sont mortels. Cette d&eacute;termination de la l&eacute;talit&eacute; est sauv&eacute;e quand la r&eacute;gion N-terminale, contenant le domaine GYF, est supprim&eacute;e. Le profil de la transcription d&#39;une souche myr1Delta montre les effets sur les g&egrave;nes impliqu&eacute;s dans la migration nucl&eacute;aire, Ras de signalisation et transcription. Pris ensemble, ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les Myr1 est un facteur nouveau, li&eacute; &agrave; la voie de s&eacute;cr&eacute;tion et les m&eacute;canismes de r&eacute;gulation cellulaires importants.

Caract&eacute;risation de MYR1, un suppresseur de dosage des mutants d&eacute;ficients en YPT6 et RIC1.

Membranen-Verkehrs ist streng geregelt und die Rab-Protein-Familie der kleinen GTPasen spielt eine zentrale Rolle in dieser Verordnung. Ein Mitglied dieser Familie ist das Saccharomyces Cerevisae Protein Ypt6. Um neue Gene, die Interaktion mit Ypt6-bezogene Wege suchen, f&uuml;hrten wir einen genetischen Schirm f&uuml;r hohe Kopie D&auml;mpfer der ypt6Delta Temperaturempfindlichkeit bei 35 Grad C. Unter der Unterdr&uuml;cker, MYR1 konnte auch die Temperatur empfindlichen Mutant fehlt Ric1, eine Untereinheit des Ypt6 Guanin Austausch von unterdr&uuml;cken Faktor komplexe Ric1 / Rgp1. Myr1 zeichnet sich durch eine coiled Coil-Region und einer GYF Dom&auml;ne, ein Protein-Modul binden Prolin-reichen Sequenzen. Myr1 ist in der Lage, Membranen zu binden aber auch unl&ouml;slich in Triton X-100 gr&ouml;&szlig;eren Strukturen zugeordnet ist. Durch Immunfluoreszenz zeigt Myr1 eine Netzwerk-Muster sowie kleine Herde. Eine &Uuml;berexpression von Myr1 beeinflusst Kernh&uuml;lle Morphologie und hohe t&ouml;dlich sind. Diese T&ouml;dlichkeit wird gerettet, wenn die N-terminalen Region, mit der Dom&auml;ne GYF gel&ouml;scht wird. Das Transkription-Profil der eine myr1Delta Belastung zeigt Auswirkungen auf Gene nuklearen Migration, Ras, Signalisierung und Transkription beteiligt. Zusammengenommen lassen diese Ergebnisse Myr1 Zusammenhang mit der sekretorischen Weg und wichtige zellul&auml;re Regulationsmechanismen Roman Faktor.

Charakterisierung von MYR1, einem Schalld&auml;mpfer Dosierung von YPT6 und RIC1 mangelhaft Mutanten.

Traffico di membrana &egrave; strettamente regolato e la famiglia di proteine Rab di piccolo GTPases un ruolo centrale in questo regolamento. Un membro di questa famiglia &egrave; proteina Saccharomyces cerevisiae Ypt6. Per la ricerca di nuovi geni interagendo con percorsi di Ypt6, abbiamo eseguito una schermata genetica per soppressori alta copia di sensibilit&agrave; alla temperatura ypt6Delta a 35 gradi C. Tra i soppressori, MYR1 era anche in grado di sopprimere il mutante sensibile temperatura privo di Ric1, una subunit&agrave; della guanina Ypt6 lo scambio fattore complesso Ric1 / Rgp1. Myr1 &egrave; caratterizzata da una regione di bobina arrotolata e un dominio GYF, un modulo di proteina ricca di prolina sequenze di associazione. Myr1 &egrave; in grado di associare le membrane, ma &egrave; anche associato con strutture pi&ugrave; grandi insolubile nel Triton X-100. Mediante immunofluorescenza, Myr1 viene illustrato un modello di rete-come cos&igrave; come piccoli fuochi. Sovraespressione di Myr1 influenze morfologia nucleare busta e livelli elevati sono letali. Questo letalit&agrave; viene salvato quando la regione N-terminale, contenente il dominio GYF, viene eliminata. Il profilo di trascrizione di un ceppo di myr1Delta Mostra effetti sui geni coinvolti nella migrazione nucleare, trascrizione e segnalazione Ras. Presi insieme, questi risultati suggeriscono che Myr1 &egrave; un romanzo fattore legato alla via secretiva e importanti meccanismi regolatori cellulari.

Caratterizzazione di MYR1, un soppressore di dosaggio dei mutanti carenti, YPT6 e RIC1.

&#x30E1;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EC;&#x30F3; &#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x304C;&#x5805;&#x304F;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x3001;Rab &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC; Gtpase &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x308A;&#x306F;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD; cerevisae &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; Ypt6 &#x3067;&#x3059;&#x3002;Ypt6 &#x95A2;&#x9023;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x691C;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x753B;&#x9762; ypt6Delta 35 &#x2103; &#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x5B9F;&#x884C;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x3001;MYR1 &#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;Ric1&#x3001;Ypt6 &#x306E;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; Ric1/Rgp1 Myr1 &#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C9; &#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x9818;&#x57DF;&#x3068; GYF &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Myr1 &#x819C;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C8;&#x30F3; X 100 &#x3067;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x87A2;&#x5149;&#x6297;&#x4F53;&#x6CD5; Myr1 &#x5C0F;&#x5DE3;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Myr1 &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6838;&#x819C;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3001;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3002;GYF &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;N &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3053;&#x306E;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6027;&#x304C;&#x6551;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Myr1Delta &#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059; Ras &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x6838;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;Myr1&#x3001;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x56E0;&#x5B50;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

MYR1&#x3001;YPT6 &#x3068; RIC1 &#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xB9C9; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC791;&#xC740; Gtpases&#xC758; &#xB7A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC871;&#xC774; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD575;&#xC2EC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;. &#xC774; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; Saccharomyces cerevisae &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Ypt6 &#xC774;&#xB2E4;. Ypt6 &#xAD00;&#xB828; &#xACBD;&#xB85C;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC6B0;&#xB9AC; 35&#xB3C4; c ypt6Delta &#xC628;&#xB3C4; &#xAC10;&#xB3C4; &#xB192;&#xC740; &#xC0AC;&#xBCF8; &#xC9C4;&#xC555;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xC9C4;&#xC555;, &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; myr1&#xB294; &#xB610;&#xD55C; Ric1, Ypt6 guanine &#xAD50;&#xD658; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xBD80;&#xC871; &#xC628;&#xB3C4; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC5B5;&#xC81C;&#xD560; &#xC218; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; Ric1 / Rgp1. Myr1 &#xCF54;&#xC77C;&#xB41C; &#xCF54;&#xC77C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xACFC; GYF &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;, &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Myr1 &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD1A4; X-100&#xC5D0; &#xBD88;&#xC6A9; &#xC131; &#xD070; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;, Myr1 &#xC791;&#xC740; foci &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xAC19;&#xC740; &#xD328;&#xD134;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Overexpression myr1&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD575; &#xBD09;&#xD22C; &#xD615;&#xD0DC; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xBD80;&#xB294; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;. &#xC774; &#xCE58; &#xC0AC;&#xC774; &#xC728; GYF &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; N-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB420; &#xB54C; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Myr1Delta &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; Ras &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xBC0F; &#xC804;&#xC0AC; &#xD575; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; Myr1 &#xBD84; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MYR1, YPT6 &#xBC0F; RIC1 &#xACB0;&#xD54D; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC5B5;&#xC555;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

Tr&aacute;fico de membrana es estrictamente regulado y la familia de prote&iacute;nas Rab de GTPasas peque&ntilde;as juega un papel central en el presente Reglamento. Uno de los miembros de esta familia es la prote&iacute;na de cerevisae Saccharomyces Ypt6. Para buscar nuevos genes interact&uacute;an con v&iacute;as relacionadas con el Ypt6, realizamos una pantalla gen&eacute;tica para supresores de alta copia de sensibilidad ypt6Delta temperatura de 35 grados cent&iacute;grados. Entre los supresores, MYR1 tambi&eacute;n fue capaz de suprimir el mutante de temperatura sensible que carecen de Ric1, una subunidad de la intercambio de guanina Ypt6 factor complejo Ric1 / Rgp1. Myr1 se caracteriza por una regi&oacute;n de bobina en espiral y un dominio GYF, un m&oacute;dulo de prote&iacute;na vinculante secuencias ricos en prolina. Myr1 es capaz de enlazar las membranas, pero tambi&eacute;n se asocia con estructuras grandes insolubles en Trit&oacute;n X-100. Por inmunofluorescencia, Myr1 muestra un patr&oacute;n de red, as&iacute; como peque&ntilde;os focos. Sobreexpresi&oacute;n de Myr1 influye en la morfolog&iacute;a de la envoltura nuclear y altos niveles son letales. Esta mortalidad es rescatada cuando la regi&oacute;n N-terminal, que contiene el dominio GYF, se borra. El perfil de la transcripci&oacute;n de una cepa de myr1Delta muestra efectos en genes implicados en la migraci&oacute;n nuclear, Ras se&ntilde;alizaci&oacute;n y transcripci&oacute;n. Tomados juntos, estos resultados sugieren que Myr1 es un factor novedoso vinculado a la v&iacute;a secretora y mecanismos celulares importantes.

Caracterizaci&oacute;n de MYR1, un supresor de la dosificaci&oacute;n de los mutantes deficientes YPT6 y RIC1.

&#x5728;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x548C;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x4FEE;&#x9970;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x66F4;&#x6539;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5927;&#x591A;&#x662F;&#x5355;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0A;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5DF2;&#x4F5C;&#x51FA;&#x7684;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x8C03;&#x67E5;&#x7A33;&#x6001;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x5728;&#x840C;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x4E09;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x9A71;&#x9010;&#x5728;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x7F16;&#x7801;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x5C0F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x6C2E;&#x9965;&#x997F;&#x7684;&#x88C2;&#x53D8;&#x9175;&#x6BCD;&#x7C9F;&#x9152;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x77ED;&#x671F;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6C2E;&#x67AF;&#x7AED;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E00;&#x5927;&#x6279; S.&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x5FEB;&#x901F;&#x611F;&#x5E94;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x9002;&#x5408;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x52A8;&#x6001;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;118 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x8131;&#x6C2E;&#x7684; 20 &#x5206;&#x949F;&#x540E;, &#x88AB;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5206;&#x5E03;&#x4E0D;&#x662F;&#x968F;&#x673A;&#x7684; &#xFF1B;&#x867D;&#x7136;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x90FD;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0A;&#x8C03;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x7FA4;&#x96C6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0A;&#x8C03;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x672C;&#x6761;&#x5411;&#x4E0A;&#x662F;&#x4E0E;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x9A71;&#x9010;&#x5728;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x548C;&#x7F16;&#x7801;&#x5730;&#x533A;&#x540C;&#x7B49;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x635F;&#x5931;&#x4E0D;&#x662F;&#x9650;&#x4E8E;&#x7531;&#x6C2E;&#x6D88;&#x8017;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4F46;&#x9549;&#x6CBB;&#x7597;&#x671F;&#x95F4;&#x4E5F;&#x53D1;&#x751F;&#x4E86;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x611F;&#x5E94;&#x540E;&#x6301;&#x7EED;&#x81F3;&#x5C11; 60 &#x5206;&#x949F;&#x3002;Urg1(+) &#x548C; urg2(+)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x663E;&#x793A;&#x4E3A;&#x5927;&#x91CF;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x635F;&#x5931;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709; 20%&#x7684;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x7559;&#x5728;&#x7F16;&#x7801;&#x533A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x5728;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x671F;&#x95F4;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x635F;&#x5931;&#x4E0D;&#x4E00;&#x5B9A;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;

&#x6C2E;&#x8017;&#x5C3D;&#x88C2;&#x53D8;&#x9175;&#x6BCD;&#x7C9F;&#x9152;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E2D;&#x63D0;&#x5021;&#x8005;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x533A;&#x57DF;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x4E22;&#x5931;&#x3002;

Gene transcription is associated with local changes in chromatin, both in nucleosome positions and in chemical modifications of the histones. Chromatin dynamics has mostly been studied on a single-gene basis. Those genome-wide studies that have been made primarily investigated steady-state transcription. However, three studies of genome-wide changes in chromatin during the transcriptional response to heat shock in the budding yeast Saccharomyces cerevisiae revealed nucleosome eviction in promoter regions but only minor effects in coding regions. Here, we describe the short-term response to nitrogen starvation in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe. Nitrogen depletion leads to a fast induction of a large number of genes in S. pombe and is thus suitable for genome-wide studies of chromatin dynamics during gene regulation. After 20 min of nitrogen removal, 118 transcripts were up-regulated. The distribution of regulated genes throughout the genome was not random; many up-regulated genes were found in clusters, while large parts of the genome were devoid of up-regulated genes. Surprisingly, this up-regulation was associated with nucleosome eviction of equal magnitudes in the promoters and in the coding regions. The nucleosome loss was not limited to induction by nitrogen depletion but also occurred during cadmium treatment. Furthermore, the lower nucleosome density persisted for at least 60 min after induction. Two highly induced genes, urg1(+) and urg2(+), displayed a substantial nucleosome loss, with only 20% of the nucleosomes being left in the coding region. We conclude that nucleosome loss during transcriptional activation is not necessarily limited to promoter regions.

Nitrogen depletion in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe causes nucleosome loss in both promoters and coding regions of activated genes.

Transcription du g&egrave;ne est associ&eacute;e &agrave; des variations locales de la chromatine, les deux postes du nucl&eacute;osome et &agrave; des modifications chimiques des histones. Dynamique de la chromatine a surtout &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e sur une base monog&eacute;niques. Ces &eacute;tudes du g&eacute;nome qui ont &eacute;t&eacute; faites principalement &eacute;tudi&eacute; transcription stationnaire. Cependant, trois &eacute;tudes du g&eacute;nome des changements dans la chromatine au cours de la r&eacute;ponse transcriptionnelle au choc thermique chez la levure Saccharomyces cerevisiae a r&eacute;v&eacute;l&eacute; expulsion de nucl&eacute;osome dans r&eacute;gions promotrices, mais seulement des effets mineurs dans les r&eacute;gions codantes. Nous d&eacute;crivons ici la r&eacute;ponse &agrave; court terme &agrave; la famine d&#39;azote dans la levure scissipare Schizosaccharomyces pombe. &Eacute;puisement de l&#39;azote entra&icirc;ne une induction rapide d&#39;un grand nombre de g&egrave;nes chez S. pombe et est donc adapt&eacute; aux &eacute;tudes du g&eacute;nome de dynamique de la chromatine au cours de la r&eacute;gulation des g&egrave;nes. Apr&egrave;s 20 min de l&#39;&eacute;limination de l&#39;azote, 118 transcriptions ont &eacute;t&eacute; r&eacute;gul&eacute;e. La distribution des g&egrave;nes r&eacute;glement&eacute;s dans tout le g&eacute;nome n&#39;est pas al&eacute;atoire ; plusieurs g&egrave;nes de r&eacute;gulation ont &eacute;t&eacute; trouv&eacute;s dans les clusters, tandis que les grandes parties du g&eacute;nome sont d&eacute;pourvues de g&egrave;nes r&eacute;gul&eacute;s par le haut. &Eacute;tonnamment, cette r&eacute;gulation a &eacute;t&eacute; associ&eacute;e avec l&#39;expulsion de nucl&eacute;osome de magnitudes &eacute;gales dans les promoteurs et dans les r&eacute;gions codantes. La perte du nucl&eacute;osome &eacute;tait pas limit&eacute;e &agrave; l&#39;induction par &eacute;puisement de l&#39;azote mais aussi s&#39;est produite pendant le traitement du cadmium. En outre, la faible densit&eacute; du nucl&eacute;osome ont persist&eacute; pendant au moins 60 min apr&egrave;s l&#39;induction. Deux g&egrave;nes fortement induites, urg1(+) et urg2(+), affichent une perte substantielle de nucl&eacute;osomes, avec seulement 20 % des nucl&eacute;osomes &eacute;tant laiss&eacute;s dans la r&eacute;gion codante. Nous concluons que la perte de nucl&eacute;osomes au cours de l&#39;activation de la transcription n&#39;est pas n&eacute;cessairement limit&eacute;e aux r&eacute;gions promotrices.

&Eacute;puisement de l&#39;azote dans la levure scissipare Schizosaccharomyces pombe provoque perte de nucl&eacute;osomes dans les promoteurs et les r&eacute;gions codantes des g&egrave;nes activ&eacute;s.

Gen-Transkription ist mit lokalen &Auml;nderungen in Chromatin, beide in Nukleosom Positionen und chemische Modifikationen des die Histone verbunden. Chromatin Dynamik wurde &uuml;berwiegend auf Basis von Einzel-gen untersucht. Diese genomweiten-Studien, die in erster Linie vorgenommen wurden untersucht station&auml;ren Transkription. Drei Studien der genomweiten &Auml;nderungen in Chromatin w&auml;hrend der transcriptional Antwort auf Hitzeschock in der Backhefe ergab jedoch Nukleosom R&auml;umung in Projekttr&auml;ger Regionen aber nur geringf&uuml;gige Auswirkungen in proteinkodierenden Regionen. Hier beschreiben wir die kurzfristige Reaktion auf Stickstoff verhungern in der Kernspaltung Hefe Schizosaccharomyces Pombe. Stickstoff Ersch&ouml;pfung f&uuml;hrt zu eine schnelle Induktion einer gro&szlig;en Anzahl von Genen in S. Pombe und eignet sich somit f&uuml;r genomweiten Studien der Chromatin-Dynamik w&auml;hrend der Genregulation. Nach 20 min von Stickstoff-Entfernung wurden 118 Transkripte oben-geregelt. Die Verteilung der regulierte Gene in das Genom wurde nicht zuf&auml;llig; viele oben-geregelt-Gene wurden in Clustern, gefunden, w&auml;hrend gro&szlig;e Teile des Genoms frei von Genen oben-geregelt waren. &Uuml;berraschenderweise wurde dieser bis-Verordnung Nukleosom R&auml;umung gleicher Gr&ouml;&szlig;enordnung in den Projekttr&auml;gern und proteinkodierenden Regionen zugeordnet. Der Nukleosom-Verlust war nicht beschr&auml;nkt auf Induktion von Stickstoff Ersch&ouml;pfung aber auch Kadmium Behandlung aufgetreten. Dar&uuml;ber hinaus beibehalten die geringere Dichte Nukleosom f&uuml;r mindestens 60 Minuten nach Induktion. Zwei hoch induzierte Genen, urg1(+) und urg2(+), angezeigt einen erheblichen Nukleosom-Verlust, mit nur 20 % der Nucleosomes in der Kodierungregion &uuml;berlassen. Wir schlie&szlig;en, dass Nukleosom Verlust w&auml;hrend der transcriptional Aktivierung nicht unbedingt Projekttr&auml;ger Regionen beschr&auml;nkt.

Stickstoff-Abbau in der Kernspaltung Hefe Schizosaccharomyces Pombe verursacht Nukleosom Verlust Promotoren sowohl kodierende Regionen der aktivierten Gene.

Trascrizione del gene &egrave; associato con cambiamenti locali nella cromatina, entrambi in posizioni nucleosome e modificazioni chimiche di istoni. Dinamica della cromatina &egrave; stato studiato principalmente sulla base del singolo-gene. Tali studi genome-wide che sono state fatte principalmente studiato trascrizione dello stato stazionario. Tuttavia, tre studi di genome-wide cambiamenti nella cromatina durante la risposta trascrizionale di scossa di calore nel lievito gemmante Saccharomyces cerevisiae ha rivelato lo sfratto nucleosoma nelle regioni promoter ma solo lievi effetti nelle regioni codificanti. Qui, descriviamo la risposta a breve termine alla fame di azoto nella fissione lievito Schizosaccharomyces pombe. Carenza di azoto porta ad una rapida induzione di un gran numero di geni in S. pombe ed &egrave; quindi adatto per studi genome-wide della dinamica della cromatina durante la regolazione dei geni. Dopo 20 min di rimozione dell&#39;azoto, 118 trascrizioni sono state up-regolato. La distribuzione dei geni in tutto il genoma non &egrave; stata casuale; molti geni up-regolati sono stati trovati in grappoli, mentre le grandi parti del genoma erano privi di geni up-regolati. Sorprendentemente, questo up-regulation &egrave; stato associato con lo sfratto nucleosome di uguale grandezza i promotori e le regioni codificanti. La perdita di nucleosome non era limitata ad induzione da carenza di azoto, ma anche si &egrave; verificata durante il trattamento di cadmio. Inoltre, la bassa densit&agrave; di nucleosome persistenti per almeno 60 minuti dopo l&#39;induzione. Due geni altamente indotte, urg1(+) e urg2(+), visualizzate una perdita sostanziale nucleosoma, con solo il 20% dei nucleosomi sono lasciati nella regione codificante. Possiamo concludere che la perdita di nucleosome durante l&#39;attivazione trascrizionale non &egrave; necessariamente limitata a regioni promoter.

Carenza di azoto nella fissione lievito Schizosaccharomyces pombe provoca perdita di nucleosome sia promotori e codifica delle regioni di geni attivati.

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3 &#x3064;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7ACB;&#x3061;&#x9000;&#x304D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x304C;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9818;&#x57DF;&#x3060;&#x3051;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x306E;&#x7A92;&#x7D20;&#x98E2;&#x9913;&#x3078;&#x306E;&#x77ED;&#x671F;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7A92;&#x7D20;&#x67AF;&#x6E07; s.pombe &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x6570;&#x306E;&#x9AD8;&#x901F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x4E2D;&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x52D5;&#x614B;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7A92;&#x7D20;&#x9664;&#x53BB;&#x306E; 20 &#x5206;&#x5F8C;&#x3001;118 &#x6210;&#x7E3E;&#x304C;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x306F;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;;&#x5927;&#x578B;&#x90E8;&#x54C1;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x9593;&#x591A;&#x304F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x898F;&#x5236;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7ACB;&#x3061;&#x9000;&#x304D;&#x306E;&#x7B49;&#x3057;&#x3044;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x7A92;&#x7D20;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x30AB;&#x30C9;&#x30DF;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E2D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 60 &#x5206;&#x306E;&#x9593;&#x8A98;&#x5C0E;&#x5F8C;&#x6C38;&#x7D9A;&#x5316;&#x3002;Urg1(+) &#x3068; urg2(+)&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9818;&#x57DF;&#x304C;&#x6B8B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; 20 &#xFF05; &#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306E;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x640D;&#x5931;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x4E2D;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x640D;&#x5931;&#x304C;&#x5FC5;&#x305A;&#x3057;&#x3082;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7A92;&#x7D20;&#x67AF;&#x6E07;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; nucleosome &#xC704;&#xCE58;&#xC640;&#xB294; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4;&#xC758; &#xD654;&#xD559; &#xC218;&#xC815; chromatin, &#xB85C;&#xCEEC; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; chromatin &#xC5ED;&#xD559; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xB85C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xAC8C;&#xB188; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xADF8; &#xC548;&#xC815; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xB179;&#xC74C; &#xC870;&#xC0AC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAC8C;&#xB188; &#xB113;&#xC740; &#xBCC0;&#xD654; chromatin transcriptional &#xC751;&#xB2F5; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC9C0;&#xAD6C;&#xC5D0; nucleosome &#xD1F4;&#xAC70; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC18C;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xB9CC; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8; Schizosaccharomyces pombe&#xC5D0; &#xC9C8;&#xC18C; &#xAE30;&#xC544;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xAE30; &#xB300;&#xC751;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C8;&#xC18C; &#xACE0;&#xAC08; S. pombe&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC218;&#xC758; &#xBE60;&#xB978; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xB418;&#xBA70; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; chromatin &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xC9C8;&#xC18C; &#xC81C;&#xAC70;&#xC758; 20 &#xBD84; &#xD6C4; 118 &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C; &#xC704;&#xB85C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC804;&#xCCB4; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB294; &#xC784;&#xC758;&#xC758;; &#xB9CE;&#xC740; &#xC704;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xD070; &#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xC704;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xACB0;&#xC5EC; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;,&#xC774; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC0F; &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xD55C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; nucleosome &#xD1F4;&#xAC70;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Nucleosome &#xC190;&#xC2E4; &#xC9C8;&#xC18C; &#xACE0;&#xAC08;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xCE74;&#xB4DC;&#xBBB4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB0AE;&#xC740; nucleosome &#xBC00;&#xB3C4; &#xC720;&#xB3C4; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 60 &#xBD84; &#xC720;&#xC9C0;. Urg1(+) &#xBC0F; urg2(+), &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC720;&#xBC1C;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC67C;&#xCABD; &#xB418; &#xACE0; nucleosomes&#xC758; 20%&#xC640; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; nucleosome &#xC190;&#xC2E4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; nucleosome &#xC190;&#xC2E4; transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC18;&#xB4DC;&#xC2DC; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC9C0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACB0;&#xB860;.

&#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8; Schizosaccharomyces pombe&#xC5D0; &#xC9C8;&#xC18C; &#xACE0;&#xAC08; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED; nucleosome &#xC190;&#xC2E4;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Transcripci&oacute;n gen&eacute;tica se asocia a cambios locales en la cromatina, ambos en posiciones de nucleosoma y modificaciones qu&iacute;micas de las histonas. Din&aacute;mica de la cromatina se ha estudiado sobre todo sobre una base de gen &uacute;nico. Esos estudios del genoma que se han hecho sobre todo investigan transcripci&oacute;n de estado estacionario. Sin embargo, tres estudios del genoma de cambios en la cromatina durante la respuesta transcripcional a golpes de calor en la levadura Saccharomyces cerevisiae del florecimiento revelaron desalojo nucleosoma en regiones promotoras pero s&oacute;lo efectos menores en las regiones de codificaci&oacute;n. Aqu&iacute;, describimos la respuesta a corto plazo al hambre de nitr&oacute;geno en la levadura de fisi&oacute;n Schizosaccharomyces pombe. Agotamiento de nitr&oacute;geno conduce a una inducci&oacute;n r&aacute;pida de un gran n&uacute;mero de genes en S. pombe y es as&iacute; conveniente para estudios del genoma de la din&aacute;mica de la cromatina durante la regulaci&oacute;n g&eacute;nica. Despu&eacute;s de 20 minutos de eliminaci&oacute;n de nitr&oacute;geno, 118 transcripciones fueron regulados por arriba. La distribuci&oacute;n de genes regulados por todo el genoma no fue al azar; muchos genes regulados por arriba se encontraron en racimos, mientras que las partes grandes del genoma eran carente de genes regulados por arriba. Sorprendentemente, este para arriba-regulaci&oacute;n se asoci&oacute; con desalojo de nucleosoma de igual magnitud en los promotores y en las regiones de codificaci&oacute;n. La p&eacute;rdida del nucleosoma era limitarse a inducci&oacute;n por el agotamiento de nitr&oacute;geno pero tambi&eacute;n ocurri&oacute; durante el tratamiento de cadmio. Adem&aacute;s, la baja densidad del nucleosoma persisti&oacute; durante al menos 60 minutos despu&eacute;s de la inducci&oacute;n. Dos genes altamente inducidos, urg1(+) y urg2(+), aparecen una p&eacute;rdida substancial nucleosoma, con s&oacute;lo el 20% de los nucleosomas se han dejado en la regi&oacute;n de la codificaci&oacute;n. Concluimos que la p&eacute;rdida del nucleosoma durante la activaci&oacute;n transcripcional no es necesariamente limitada a regiones promotoras.

Agotamiento de nitr&oacute;geno en la levadura de fisi&oacute;n Schizosaccharomyces pombe causa p&eacute;rdida de nucleosoma en tanto promotores como regiones de codificaci&oacute;n de genes activados.

&#x5728;&#x7406;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x65B9;&#x9762;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x91CD;&#x5927;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x4ECD;&#x6709;&#x8BB8;&#x591A;&#x95EE;&#x9898;&#x5C1A;&#x5F85;&#x89E3;&#x7B54;&#x6709;&#x5173;&#x6838;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x529F;&#x80FD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x5F88;&#x96BE;&#x5C06;&#x5BF9;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x516C;&#x5E03;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x5408;&#x5E76;&#x5230;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E0A;&#x8D77;&#x4F0F;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B57;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x6709;&#x5F88;&#x591A;&#x51B2;&#x7A81;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x7C9F;&#x9152;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x8FC7;&#x53BB;&#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x4E2D;&#x5B9D;&#x8D35;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x548C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6838;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x88C2;&#x53D8;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F8;&#x4FE1;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x826F;&#x597D;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x4E9B;&#x89E3;&#x51B3;&#x7684;&#x77DB;&#x76FE;&#x548C;&#x60AC;&#x800C;&#x672A;&#x51B3;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x5173;&#x4E8E;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x6838;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;S.&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x81EA;&#x4ECE;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3002;S.&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E5F;&#x6709;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8F7B;&#x677E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x901A;&#x8FC7;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x80FD;&#x591F;&#x6574;&#x5408;&#x8BE5;&#x5DE5;&#x5177;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x4F7F;&#x7528;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x3002;&#x7ECF;&#x5178;&#x9057;&#x4F20;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x9610;&#x660E;&#x67D0;&#x4E9B;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x54EA;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FC7;&#x53BB;&#x51E0;&#x5E74;&#x671F;&#x95F4;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x6307;&#x793A;&#x5728;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5C06;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x7528;&#x4E8E;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6838;&#x529F;&#x80FD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

&#x63A8;&#x8FDB;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

Significant progress has been made in understanding the functional organisation of the cell nucleus. Still many questions remain to be answered about the relationship between the spatial organisation of the nucleus and the regulation of the genome function. There are many conflicting data in the field making it very difficult to merge published results on mammalian cells into one model on subnuclear chromatin organisation. The fission yeast, Schizosaccharomyces pombe, over the last decades has emerged as a valuable model organism in understanding basic biological mechanisms, especially the cell cycle and chromosome biology. In this review we describe and compare the nuclear organisation in mammalian and fission yeast cells. We believe that fission yeast is a good tool to resolve at least some of the contradictions and unanswered questions concerning functional nuclear architecture, since S. pombe has chromosomes structurally similar to that of human. S. pombe also has the advantage over higher eukaryotes in that the genome can easily be manipulated via homologous recombination making it possible to integrate the tools needed for visualisation of chromosomes using live-cell microscopy. Classical genetic experiments can be used to elucidate what factors are involved in a certain mechanism. The knowledge we have gained during the last few years indicates similarities between the genome organisation in fission yeast and mammalian cells. We therefore propose the use of fission yeast for further advancement of our understanding of functional nuclear organisation.

Advancing our understanding of functional genome organisation through studies in the fission yeast.

Des progr&egrave;s importants r&eacute;alis&eacute;s dans la compr&eacute;hension de l&#39;organisation fonctionnelle du noyau cellulaire. Il reste encore beaucoup de questions &agrave; trancher sur la relation entre l&#39;organisation spatiale du noyau et la r&eacute;gulation de la fonction du g&eacute;nome. Il y a beaucoup de donn&eacute;es contradictoires sur le terrain, rendant tr&egrave;s difficile de fusionner les r&eacute;sultats publi&eacute;s sur cellules de mammif&egrave;res dans un mod&egrave;le portant organisation de la chromatine intranucl&eacute;aires. La levure de fission, Schizosaccharomyces pombe, durant les derni&egrave;res d&eacute;cennies a &eacute;merg&eacute; comme un organisme mod&egrave;le pr&eacute;cieux dans la compr&eacute;hension des m&eacute;canismes biologiques fondamentaux, notamment le cycle cellulaire et la biologie du chromosome. Dans cette revue, nous d&eacute;crire et comparer l&#39;organisation nucl&eacute;aire dans les mammif&egrave;res et les cellules de levure de fission. Nous croyons que la levure est un bon outil pour r&eacute;soudre au moins une partie des contradictions et des questions sans r&eacute;ponse concernant l&#39;architecture nucl&eacute;aire fonctionnelle, depuis S. pombe a chromosomes structurellement similaires &agrave; celle de l&#39;homme. S. pombe a &eacute;galement l&#39;avantage sur les eucaryotes sup&eacute;rieurs que le g&eacute;nome peut facilement &ecirc;tre manipul&eacute; par recombinaison homologue, ce qui permet d&#39;int&eacute;grer les outils n&eacute;cessaires pour la visualisation des chromosomes en microscopie des cellules vivantes. Des exp&eacute;riences de g&eacute;n&eacute;tiques classiques peuvent servir &agrave; &eacute;lucider quels facteurs sont impliqu&eacute;s dans un certain m&eacute;canisme. La connaissance que nous avons acquise au cours des derni&egrave;res ann&eacute;es indique les similitudes entre l&#39;organisation du g&eacute;nome chez la levure et des cellules de mammif&egrave;res. Nous proposons donc l&#39;utilisation de levure de fission pour davantage d&#39;avancement de notre compr&eacute;hension de l&#39;organisation nucl&eacute;aire fonctionnelle.

Faire progresser notre compr&eacute;hension de l&#39;organisation g&eacute;nomique fonctionnelle au moyen d&#39;&eacute;tudes dans la levure de fission.

Zum Verst&auml;ndnis der funktionellen Organisation des Zellkerns wurden erhebliche Fortschritte erzielt. Noch viele Fragen bleiben um &uuml;ber die Beziehung zwischen der r&auml;umlichen Organisation des Zellkerns und der Regelung der Genom-Funktion beantwortet werden. Es gibt viele widerspr&uuml;chliche Daten im Feld, so dass es sehr schwierig, ein Modell auf Elementarpartikel Chromatin Organisation ver&ouml;ffentlichten Ergebnisse auf S&auml;ugetier-Zellen zusammenf&uuml;hren. Die Kernspaltung-Hefe Schizosaccharomyces Pombe, als eine wertvolle Modellorganismus in der grundlegenden biologischen Mechanismen Verst&auml;ndnis, vor allem den Zellzyklus und Chromosom Biologie in den letzten Jahrzehnten entstanden ist. In diesem Bericht wir beschreiben und vergleichen die nukleare Organisation in S&auml;ugetier- und Kernspaltung Hefezellen. Wir glauben, dass die Kernspaltung Hefe ist ein gutes Werkzeug, um zumindest einige Aufl&ouml;sen der Widerspr&uuml;che und unbeantwortete Fragen zur funktionalen nukleare Architektur, seit S. Pombe hat strukturell &auml;hnlich der menschlichen Chromosomen. S. Pombe hat auch den Vorteil gegen&uuml;ber h&ouml;heren Eukaryotes, da das Genom durch homologe Rekombination macht es m&ouml;glich, die zur Visualisierung der Chromosomen mit Leben-Zelle Mikroskopie erforderlichen Tools integrieren leicht manipuliert werden kann. Klassische genetische Experimente k&ouml;nnen verwendet werden, um herauszustellen, welche Faktoren in einem bestimmten Mechanismus beteiligt sind. Das wissen, das wir in den letzten Jahren gewonnen haben zeigt &Auml;hnlichkeiten zwischen der Genom-Organisation in der Kernspaltung Hefe und S&auml;ugetier-Zellen. Wir schlagen deshalb vor, die Nutzung der Kernspaltung Hefe f&uuml;r das weitere Fortkommen unseres Verst&auml;ndnisses von funktionellen nukleare Organisation.

Unser Verst&auml;ndnis von funktionalen Genom-Organisation durch Studien in der Kernspaltung Hefe voran.

Ha compiuto progressi significativi nella comprensione dell&#39;organizzazione funzionale del nucleo della cellula. Ancora molte domande rimangono per essere risposto circa il rapporto tra l&#39;organizzazione spaziale del nucleo e la regolazione della funzione del genoma. Ci sono molti dati contrastanti nel campo che rende molto difficile unire i risultati pubblicati su cellule di mammifero in un modello sull&#39;organizzazione della cromatina subnucleari. Il lievito di fissione Schizosaccharomyces pombe, negli ultimi decenni &egrave; emerso come un organismo modello prezioso nella comprensione biologica meccanismi di base, soprattutto il ciclo cellulare e biologia del cromosoma. In questa recensione abbiamo descrivere e confrontare l&#39;organizzazione nei mammiferi e le cellule di lievito di fissione nucleare. Noi crediamo che il lievito di fissione &egrave; un buon strumento per risolvere almeno alcuni delle contraddizioni e le domande senza risposta riguardo ad architettura nucleare funzionale, fin S. pombe ha cromosomi strutturalmente simile a quello dell&#39;uomo. S. pombe ha anche il vantaggio negli eucarioti superiori, in quanto il genoma pu&ograve; essere facilmente manipolato tramite ricombinazione omologa, rendendo possibile integrare gli strumenti necessari per la visualizzazione dei cromosomi mediante microscopia live-cella. Gli esperimenti di genetici classici possono essere usati per delucidare quali fattori sono coinvolti in un certo meccanismo. La conoscenza che abbiamo acquisito nel corso degli ultimi anni indica le somiglianze tra l&#39;organizzazione del genoma nel lievito di fissione e le cellule di mammiferi. Proponiamo pertanto l&#39;uso del lievito di fissione per l&#39;ulteriore avanzamento della nostra comprensione dell&#39;organizzazione funzionale nucleare.

Avanzare la nostra comprensione dell&#39;organizzazione funzionale del genoma attraverso studi nel lievito di fissione.

&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9032;&#x6B69;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x3060;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x7B54;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x6B8B;&#x308B;&#x3002;&#x516C;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x5185;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x30DE;&#x30FC;&#x30B8;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x56F0;&#x96E3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7AF6;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3002;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;&#x6700;&#x5F8C;&#x306E;&#x5341;&#x5E74;&#x9593;&#x7406;&#x89E3;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3068;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3068;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6838;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x306F;&#x826F;&#x3044;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4FE1;&#x3058;&#x308B;&#x77DB;&#x76FE;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x6838;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x672A;&#x56DE;&#x7B54;&#x306E;&#x8CEA;&#x554F;&#x306E; S. &#x4EE5;&#x6765;&#x9175;&#x6BCD;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4EBA;&#x9593;&#x306B;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S.pombe &#x307E;&#x305F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7D4C;&#x7531;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x8996;&#x899A;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x7D71;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x9AD8;&#x7B49;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x512A;&#x4F4D;&#x3082;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x53E4;&#x5178;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6700;&#x5F8C;&#x306E;&#x6570;&#x5E74;&#x4E2D;&#x306B;&#x5F97;&#x305F;&#x77E5;&#x8B58;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x7DE8;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6838;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7DE8;&#x6210;&#x306E;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x9032;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC138;&#xD3EC; &#xD575;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC870;&#xC9C1; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC9C4;&#xD589;&#xC774; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C8;&#xBB38; &#xC544;&#xC9C1;&#xB3C4; &#xD575;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xAE30;&#xB2A5; &#xADDC;&#xC81C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2F5;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD544;&#xB4DC; &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xBCD1;&#xD569; &#xAC8C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; subnuclear chromatin &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5B4;&#xB835;&#xAC8C; &#xB9CE;&#xC740; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8;, Schizosaccharomyces pombe, &#xC9C0;&#xB09C; &#xC218; &#xC2ED;&#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xB4F1;&#xC7A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;, &#xD2B9;&#xD788; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC640; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC640; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD575; &#xC870;&#xC9C1; &#xBE44;&#xAD50;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xC88B;&#xC740; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xBBFF;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xC21C;&#xACFC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD575; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xB300;&#xB2F5; &#xC5C6;&#xB294; &#xC9C8;&#xBB38; S. &#xC774;&#xD6C4; pombe &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. S. pombe &#xAC8C;&#xB188; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC870;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xB294; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB610;&#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB97C; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xD2B9;&#xC815; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0;&#xC804; &#xC720;&#xC804; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC9C0;&#xB09C; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xC774;&#xB8E9;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC2DD; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xAC8C;&#xB188; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xCD94;&#xAC00; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD575; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD84;&#xC5F4; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC8C;&#xB188; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC804;.

Ha realizado progresos significativos en la comprensi&oacute;n de la organizaci&oacute;n funcional del n&uacute;cleo celular. Quedan todav&iacute;a muchos interrogantes para responder sobre la relaci&oacute;n entre la organizaci&oacute;n espacial del n&uacute;cleo y la regulaci&oacute;n de la funci&oacute;n del genoma. Hay muchos datos contradictorios en cuanto a lo que es muy dif&iacute;cil combinar resultados publicados en c&eacute;lulas de mam&iacute;fero en un modelo de organizaci&oacute;n de la cromatina subnuclear. La levadura de fisi&oacute;n, Schizosaccharomyces pombe, en las &uacute;ltimas d&eacute;cadas se ha convertido en un organismo modelo valioso en mecanismos biol&oacute;gicos b&aacute;sicos del entendimiento, especialmente el ciclo celular y Biolog&iacute;a del cromosoma. En este informe describimos y comparar la organizaci&oacute;n nuclear en mam&iacute;feros y c&eacute;lulas de la levadura de fisi&oacute;n. Creemos que la levadura de fisi&oacute;n es una buena herramienta para resolver al menos algunas de las contradicciones y preguntas sin respuesta sobre la arquitectura nuclear funcional, desde S. pombe tiene cromosomas estructuralmente similares a la de los humanos. S. pombe tambi&eacute;n tiene la ventaja sobre eucariotas superiores que el genoma puede ser manipulado f&aacute;cilmente mediante recombinaci&oacute;n hom&oacute;loga que permitan integrar las herramientas necesarias para la visualizaci&oacute;n de los cromosomas mediante microscop&iacute;a de c&eacute;lulas vivas. Cl&aacute;sicos experimentos gen&eacute;ticos pueden utilizarse para aclarar qu&eacute; factores est&aacute;n involucrados en un cierto mecanismo. El conocimiento que hemos ganado durante los &uacute;ltimos a&ntilde;os indica que las similitudes entre la organizaci&oacute;n del genoma en la levadura de fisi&oacute;n y c&eacute;lulas de mam&iacute;fero. Por lo tanto, proponemos el uso de la levadura de fisi&oacute;n para un mayor avance de nuestra comprensi&oacute;n de la organizaci&oacute;n nuclear funcional.

Ida Olsson

Science for Life Laboratory,
Department of Medical Biochemistry and Microbiology,
Science for Life Laboratory, Department of Medical Biochemistry and Microbiology

University of Uppsala

Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

Ida Olsson

Science for Life Laboratory,Department of Medical Biochemistry and Microbiology,Science for Life Laboratory, Department of Medical Biochemistry and Microbiology

University of Uppsala

Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

Science for Life Laboratory,
Department of Medical Biochemistry and Microbiology,
Science for Life Laboratory, Department of Medical Biochemistry and Microbiology