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Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as a model for studying the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

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Microstructured Devices for Optimized Microinjection and Imaging of Zebrafish Larvae

Zebrafish have emerged as a powerful model of various human diseases and a useful tool for an increasing range of experimental studies, spanning ...

Monash University

Massachusetts General Hospital–Harvard Medical School–Shriners Burns Hospital

Erg, un membro della famiglia di fattori di trascrizione ETS &egrave; stata coinvolta da precedenti studi in endoteliale e sviluppo ematopoietica. Deregolamentazione del locus ERG umano &egrave; associato con la leucemia mieloide acuta, il cancro alla prostata e sarcoma di Ewing. Per comprendere meglio il ruolo di Erg durante lo sviluppo iniziale, abbiamo utilizzate il zebrafish come modello assoggettabile a studi descrittivi e funzionali in vivo. Zebrafish hanno un gene unico erg che si esprime nel mesoderma e suoi derivati vascolari durante la migrazione angioblast, vasculogenesi e angiogenesi precoce. Analisi di espressione mutante e morphant collocati erg in un percorso genetico a valle della cloche, tal1/scl ed etsrp durante la migrazione di angioblast precoce. Inoltre, una combinazione di studi guadagno di funzione e di perdita della funzione ha suggerito un ruolo specifico ancora ridondante per erg angioblast specifica/proliferazione sia l&#39;angiogenesi precoce e un&#39;interazione sinergica con l&#39;ETS critico fattore etsrp.

Il ruolo dell&#39;erg fattore ETS in zebrafish vasculogenesi.

Erg&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684; ETS &#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x9020;&#x8840;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x653E;&#x677E;&#x7BA1;&#x5236;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; ERG &#x8F68;&#x8FF9;&#x662F;&#x4E0E;&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3001; &#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x548C;&#x5C24;&#x6587;&#x6C0F;&#x8089;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3; Erg &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x63CF;&#x8FF0;&#x6027;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x6709;&#x5355;&#x4E2A; erg &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x793A;&#x5728; angioblast &#x8FC1;&#x79FB;&#x3001; &#x8840;&#x7BA1;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x65E9;&#x671F;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x5176;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x884D;&#x751F;&#x54C1;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x548C; morphant &#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x653E; erg &#x5728;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684; cloche&#x3001; tal1/scl &#x548C; etsrp &#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x65E9;&#x671F; angioblast &#x8FC1;&#x79FB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x589E;&#x76CA;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7EC4;&#x5408;&#x5EFA;&#x8BAE; erg angioblast &#x89C4;&#x683C;/&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x65E9;&#x671F;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x5197;&#x4F59;&#x53C8;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5173;&#x952E;&#x7535;&#x5B50;&#x6295;&#x6807;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x534F;&#x540C;&#x4E92;&#x52A8;&#x56E0;&#x7D20; etsrp&#x3002;

&#x7535;&#x5B50;&#x6295;&#x6807;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x56E0;&#x5B50; erg &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8840;&#x7BA1;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Erg, a member of the ETS family of transcription factors, has been implicated by previous studies in endothelial and haematopoietic development. Deregulation of the human ERG locus is associated with acute myeloid leukaemia, prostate cancer and Ewing's sarcoma. To better understand the role of Erg during early development, we utilised the zebrafish as a model amenable to descriptive and functional studies in vivo. Zebrafish have a single erg gene that is expressed in mesoderm and its vascular derivatives during angioblast migration, vasculogenesis and early angiogenesis. Mutant and morphant expression analyses placed erg in a genetic pathway downstream of cloche, tal1/scl and etsrp during early angioblast migration. Furthermore, a combination of gain-of-function and loss-of-function studies suggested a redundant yet specific role for erg in both angioblast specification/proliferation and early angiogenesis, and a synergistic interaction with the critical ETS factor etsrp.

The role of the ETS factor erg in zebrafish vasculogenesis.

ERG, un membre de la famille ETS de facteurs de transcription, a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;e par des &eacute;tudes ant&eacute;rieures dans l&#39;endoth&eacute;lium et d&eacute;veloppement h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tique. D&eacute;r&eacute;glementation du locus ERG humaine est associ&eacute;e &agrave; la leuc&eacute;mie my&eacute;lo&iuml;de aigu&euml;, cancer de la prostate et du sarcome d&#39;Ewing. Pour mieux comprendre le r&ocirc;le de l&#39;Erg au d&eacute;but du d&eacute;veloppement, nous avons utilis&eacute; le poisson-z&egrave;bre comme un mod&egrave;le qui se pr&ecirc;tent &agrave; des &eacute;tudes descriptives et fonctionnelles in vivo. Poisson z&egrave;bre ont un g&egrave;ne unique erg qui s&#39;exprime dans le m&eacute;soderme et ses d&eacute;riv&eacute;s vasculaires au cours de la migration angioblast, vasculog&eacute;n&egrave;se et angiogen&egrave;se pr&eacute;coce. Analyses d&#39;expression mutant et morphant plac&eacute; erg dans une voie g&eacute;n&eacute;tique en aval de la cloche, tal1/scl et etsrp au cours de la migration angioblast pr&eacute;coce. De plus, une combinaison de gain de fonction et de la perte de fonction des &eacute;tudes sugg&egrave;re un r&ocirc;le redondant mais sp&eacute;cifique pour l&#39;erg angioblast sp&eacute;cification/prolif&eacute;ration et angiogen&egrave;se pr&eacute;coce et une interaction synergique avec l&#39;ETS critique facteur etsrp.

Le r&ocirc;le de l&#39;erg de facteur d&#39;ETS dans le poisson-z&egrave;bre vasculog&eacute;n&egrave;se.

ERG, ein Mitglied der ETS-Produktfamilie von Transkriptionsfaktoren, hat verwickelt worden, von fr&uuml;heren Studien in endothelialen und blutbildenden Entwicklung. Deregulierung der menschlichen ERG-Locus ist akute myeloische Leuk&auml;mie, Prostatakrebs und Ewing Sarkom zugeordnet. Zum besseren Verst&auml;ndnis die Rolle der Erg w&auml;hrend der fr&uuml;hen Entwicklungsphase genutzt wir die Zebrafish als geneigt sein, beschreibende und funktionelle Studien in-vivo Modell. Zebrafish haben ein einzelnes Erg-gen, das Mesoderm und seine vaskul&auml;ren Ableitungen w&auml;hrend der Angioblast Migration, Vaskulogenese und fr&uuml;hen Angiogenese ausgedr&uuml;ckt wird. Mutant und Morphant Ausdruck Analysen platziert Erg in einen genetischen Weg flussabw&auml;rts Cloche, tal1/Scl und Etsrp w&auml;hrend der fr&uuml;hen Angioblast Migration. Dar&uuml;ber hinaus eine Kombination von Gain of Function und Verlust der Funktion Studien vorgeschlagen eine redundante noch spezifische Rolle f&uuml;r Erg Angioblast Spezifikation/Verbreitung sowohl in fr&uuml;hen Angiogenese und eine synergistische Interaktion mit den kritischen ETS Faktor Etsrp.

Die Rolle der ETS Faktor Erg im Zebrafisch Vaskulogenese.

Erg &#x306E; ETS &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x5185;&#x76AE;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x9020;&#x8840;&#x958B;&#x767A;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; ERG &#x8ECC;&#x8DE1;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x7DE9;&#x548C;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3001;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x3001;Ewing &#x8089;&#x816B;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B; Erg &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x8AAC;&#x660E;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B; in vivo &#x5F93;&#x9806;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E; angioblast &#x79FB;&#x884C;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x3001;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5358;&#x4E00; erg &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068; morphant &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x89E3;&#x6790; erg &#x907A;&#x4F1D;&#x7D4C;&#x8DEF; cloche&#x3001;tal1/scl &#x304A;&#x3088;&#x3073; etsrp &#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x79FB;&#x884C;&#x521D;&#x671F; angioblast &#x306B;&#x914D;&#x7F6E;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5197;&#x9577;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F79;&#x5272; angioblast &#x4ED5;&#x69D8;/&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; erg &#x3092;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x30B2;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x640D;&#x5931;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; ETS &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E57;&#x4F5C;&#x7528;&#x56E0;&#x5B50; etsrp&#x3002;

ETS &#x56E0;&#x5B50; erg &#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x8840;&#x7BA1;&#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#xB974; &#xADF8;, &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; ETS &#xC81C;&#xD488;&#xAD70; &#xB0B4; &#xD53C;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; haematopoietic &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB974; &#xADF8; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC644;&#xD654;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; &#xAE09;&#xC131; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;, &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554;, Ewing&#xC758; &#xC721; &#xC885;. &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB974; &#xADF8;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB354; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC758;&#xBB34;&#xAC00; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; zebrafish &#xD65C;&#xC6A9;. Zebrafish&#xB294; angioblast &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, vasculogenesis &#xBC0F; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2E0;&#xC0DD; mesoderm &#xBC0F; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB974; &#xADF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC0F; morphant &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xCD08;&#xAE30; angioblast &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC911; &#xC811;&#xC18D;&#xC774;, tal1/scl &#xBC0F; etsrp&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD558;&#xB958;&#xC5D0; &#xB974; &#xADF8;&#xB97C; &#xBC30;&#xCE58;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD568;&#xC218; &#xC774;&#xB4DD; &#xBC0F; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xD569; angioblast &#xC0AC;&#xC591;/&#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xB974; &#xADF8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xBCF5; &#xC544;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; ETS&#xC640; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xC791;&#xC6A9; &#xC694;&#xC18C; etsrp.

Zebrafish vasculogenesis&#xC5D0; ETS &#xC694;&#xC18C; &#xB974; &#xADF8; &#xC5ED;&#xD560;.

ERGIO, miembro de la familia de la ETS de factores de transcripci&oacute;n, se ha implicado por estudios anteriores en endotelial y desarrollo hematopoy&eacute;tico. La desregulaci&oacute;n del lugar geom&eacute;trico del ERG humana est&aacute; asociada con la leucemia mieloide aguda, el c&aacute;ncer de pr&oacute;stata y el sarcoma de Ewing. Para entender mejor el papel de Erg durante el desarrollo temprano, nos utilizan el pez cebra como modelo susceptible de estudios descriptivos y funcionales in vivo. Pez cebra tienen un gen &uacute;nico erg que se expresa en el mesodermo y sus derivados vasculares durante la migraci&oacute;n angioblast, vasculog&eacute;nesis y angiog&eacute;nesis temprana. Mutante y morphant an&aacute;lisis de expresi&oacute;n colocan erg en un camino gen&eacute;tico aguas abajo de la cloche, tal1/scl y etsrp durante la migraci&oacute;n de angioblast temprano. Adem&aacute;s, una combinaci&oacute;n de estudios de ganancia de funci&oacute;n y de la p&eacute;rdida-de-funci&oacute;n sugiere un papel redundante pero espec&iacute;fico para erg angioblast especificaci&oacute;n/proliferaci&oacute;n tanto temprana angiog&eacute;nesis y una interacci&oacute;n sin&eacute;rgica con la ETS cr&iacute;tico factor etsrp.

El papel del erg de factor ETS en pez cebra vasculog&eacute;nesis.

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; (&#x8868;&#x8FBE;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x7B7E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF09; &#x662F;&#x751F;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x9886;&#x57DF;&#x4F5C;&#x51FA;&#x6709;&#x76CA;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#x7279;&#x522B;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x900F;&#x660E;&#x5EA6;&#x548C;&#x524D;&#x4F53;&#x5185;&#x53D1;&#x5C55;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8F7B;&#x677E;&#x5730;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#xFF0C;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5B66;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x7528;&#x8868;&#x793A;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x54C1;&#x7CFB;&#x3002;&#x9AD8;&#x7E41;&#x6B96;&#x529B;&#x548C;&#x8010;&#x53D7;&#x6027;&#x81F4;&#x5BC6;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5DF2;&#x8F6C;&#x53D1;&#x9057;&#x4F20;&#x7B5B;&#x9009;&#x548C;&#x521B;&#x9020;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x6062;&#x590D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684; mutagenized &#x56FE;&#x4E66;&#x9986;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x77AC;&#x6001;&#x9057;&#x4F20;&#x64CD;&#x7EB5;&#x663E;&#x5FAE;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6CD5; mRNA (&#x8868;&#x8FBE;) &#x6216;&#x53CD;&#x4E49; morpholino &#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; (&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;) &#x63D0;&#x4F9B;&#x529F;&#x80FD;&#x8BC4;&#x4F30;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x65E0;&#x9700;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x80B2;&#x79CD;&#x7B56;&#x7565;&#x7684;&#x4FBF;&#x6377;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8131;&#x9896;&#x800C;&#x51FA;&#x7684;&#x4F8B;&#x5B50;&#x4E00;&#x76F4;&#x662F;&#x9020;&#x8840;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6700;&#x65E9;&#x9636;&#x6BB5;&#x5EFA;&#x6A21;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x53D1;&#x80B2;&#x9020;&#x8840;&#x529F;&#x80FD;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x9020;&#x8840;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x5C55;&#x5BC6;&#x5207;&#x7684;&#x5BF9;&#x5E94;&#x5173;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D7;&#x4FDD;&#x5B88;&#x5206;&#x5B50;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7A81;&#x51FA;&#x4E86;&#x5173;&#x952E;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7528;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x6765;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E3A;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x9020;&#x8840;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

The zebrafish (Danio rerio) is a model organism making useful contributions in many areas of biological research. Zebrafish have proven particularly suitable for studying early development. The transparency and ex vivo development of zebrafish embryos means that early embryology can be easily visualized, especially using transgenic strains expressing fluorophores marking tissues of interest. High fecundity and tolerance of dense mutagenesis have made it a practical model for forward genetic screening and creation of mutagenized libraries from which stable mutant alleles can be recovered. Transient genetic manipulation by microinjection of mRNA (overexpression) or antisense morpholino oligonucleotides (knockdown) provide convenient methods for functionally assessing genetic regulatory pathways without the need for extended breeding strategies. A standout example of the utility of this model has been its application to modeling of the earliest stages of hematopoiesis. Zebrafish developmental hematopoiesis shows close correspondence to the development of the mammalian hematopoietic system and is regulated by conserved molecular pathways. This review highlights key recent studies that have used this model to provide insights into vertebrate hematopoietic development and innate immunity.

Zebrafish as a model for vertebrate hematopoiesis.

Le poisson z&egrave;bre (Danio rerio) est un organisme mod&egrave;le contribue de fa&ccedil;on utile dans de nombreux domaines de la recherche biologique. Poisson z&egrave;bre se sont av&eacute;r&eacute;es particuli&egrave;rement adapt&eacute; pour l&#39;&eacute;tude du d&eacute;veloppement. Le d&eacute;veloppement de transparence et ex vivo des embryons de poisson-z&egrave;bre signifie qu&#39;embryologie pr&eacute;coce peut &ecirc;tre visualis&eacute;e facilement, surtout &agrave; l&#39;aide de souches transg&eacute;niques exprimant des fluorophores marquage tissus d&#39;int&eacute;r&ecirc;t. Forte f&eacute;condit&eacute; et la tol&eacute;rance de la mutag&eacute;n&egrave;se dense ont fait un mod&egrave;le pratique pour le d&eacute;pistage g&eacute;n&eacute;tique avant et cr&eacute;ation de biblioth&egrave;ques mutag&eacute;nis&eacute;s d&#39;o&ugrave; les all&egrave;les mutants stables peuvent &ecirc;tre r&eacute;cup&eacute;r&eacute;s. La manipulation g&eacute;n&eacute;tique transitoire par microinjection d&#39;ARNm (surexpression) ou d&#39;oligonucl&eacute;otides antisens morpholino (pr&eacute;cipitation) fournissent des m&eacute;thodes pratiques pour &eacute;valuer sur le plan fonctionnel les voies r&eacute;glementaires g&eacute;n&eacute;tiques sans la n&eacute;cessit&eacute; pour les strat&eacute;gies de s&eacute;lection &eacute;tendue. Un exemple exceptionnel de l&#39;utilit&eacute; de ce mod&egrave;le a &eacute;t&eacute; son application &agrave; la mod&eacute;lisation des premiers stades de l&#39;h&eacute;matopo&iuml;&egrave;se. Zebrafish h&eacute;matopo&iuml;&egrave;se d&eacute;veloppement montre une correspondance &eacute;troite au d&eacute;veloppement du syst&egrave;me h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tique chez les mammif&egrave;res et est r&eacute;glement&eacute;e par conserv&eacute; les voies mol&eacute;culaires. Cet examen met en &eacute;vidence les principales &eacute;tudes r&eacute;centes qui ont utilis&eacute; ce mod&egrave;le pour donner un aper&ccedil;u du d&eacute;veloppement des vert&eacute;br&eacute;s h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tique et de l&#39;immunit&eacute; inn&eacute;e.

Poisson z&egrave;bre comme mod&egrave;le pour les vert&eacute;br&eacute;s h&eacute;matopo&iuml;&egrave;se.

Der Zebrab&auml;rbling (Danio Rerio) ist ein Modellorganismus, einen n&uuml;tzlichen Beitrag in vielen Bereichen der biologischen Forschung. Zebrab&auml;rbling erwiesen sich besonders geeignet f&uuml;r die fr&uuml;he Entwicklung zu studieren. Die Transparenz und Ex-Vivo-Entwicklung von Zebrafish Embryos bedeutet, dass diese fr&uuml;he Embryologie kann problemlos visualisiert werden, vor allem mit transgenen St&auml;mme Fluorophore Kennzeichnung Gewebe von Interesse zum Ausdruck zu bringen. Hohe Fruchtbarkeit und Toleranz von dichten Mutagenese machte es ein praktisches Modell f&uuml;r forward genetisches Screening und Erstellung von mutagenized Bibliotheken aus denen stabilen mutierten Allele wiederhergestellt werden k&ouml;nnen. Transiente genetische Manipulation durch Mikroinjektion von mRNA (&Uuml;berexpression) oder Morpholino antisense Oligonukleotide (Niederschlag) bieten praktische Methoden zur Beurteilung der funktional genetischer Regulationsmechanismen ohne die Notwendigkeit f&uuml;r erweiterte Zucht-Strategien. Ein herausragenden Beispiel f&uuml;r die N&uuml;tzlichkeit dieses Modell wurde f&uuml;r den Einsatz zur Modellierung der den fr&uuml;hesten Stadien der Blutbildung. Zebrab&auml;rbling Entwicklungsst&ouml;rungen Blutbildung zeigt enge Korrespondenz an die Entwicklung der S&auml;ugetier-h&auml;matopoetischen Systems und wird durch geregelt konserviert Molekulare Bahnen. Diesen Bericht hebt wichtige neuere Studien, die dieses Modell verwendet haben, um Einblicke in vertebrate h&auml;matopoetischen Entwicklung und Angeborene Immunit&auml;t.

Zebrafisch als Modell f&uuml;r Wirbeltiere Blutbildung.

Il Danio zebrato (Danio rerio) &egrave; un organismo modello contributi utili in molti settori della ricerca biologica. Zebrafish si sono dimostrati particolarmente adatti per studiare lo sviluppo precoce. La trasparenza ed ex vivo sviluppo di embrioni di zebrafish significa che presto embriologia pu&ograve; essere facilmente visualizzato, soprattutto utilizzando ceppi transgenici che esprimono fluorofori marcatura tessuti di interesse. Alta fecondit&agrave; e tolleranza di mutagenesi densa hanno reso un modello pratico per screening genetico avanti e la creazione di librerie mutagenized da cui stabili alleli mutanti possono essere recuperati. Manipolazione genetica transitoria dal microinjection di mRNA (iperespressione) o oligonucleotidi antisense oligonucleotides (atterramento) forniscono metodi convenienti per la valutazione funzionale genetiche vie regolarici senza la necessit&agrave; di strategie di allevamento estesa. Un esempio di standout dell&#39;utilit&agrave; di questo modello &egrave; stata l&#39;applicazione di modellazione delle prime fasi dell&#39;emopoiesi. Zebrafish ematopoiesi developmental Mostra stretta corrispondenza con lo sviluppo dei mammiferi, del sistema ematopoietico e viene regolata da conservato pathways molecolari. Questa recensione mette in evidenza chiavi recenti studi che hanno utilizzato questo modello per fornire intuizioni vertebrato sviluppo ematopoietico e l&#39;immunit&agrave; innata.

Zebrafish come modello per vertebrati ematopoiesi.

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x3067;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x8CA2;&#x732E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x521D;&#x671F;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x306E;&#x900F;&#x660E;&#x6027;&#x3068; ex vivo &#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x95A2;&#x5FC3;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0; fluorophores &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x5B66;&#x3092;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x8996;&#x899A;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x591A;&#x7523;&#x3068;&#x5BC6;&#x306A;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x524D;&#x65B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30EA;&#x30AB;&#x30D0;&#x30EA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x4EBA;&#x70BA;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306E;&#x4F5C;&#x6210;&#x306E;&#x5B9F;&#x8DF5;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;MRNA &#xFF08;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#xFF09; &#x307E;&#x305F;&#x306F; morpholino &#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9; &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; (&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;) &#x306E;&#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x904E;&#x6E21;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x64CD;&#x4F5C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x62E1;&#x5F35;&#x80B2;&#x7A2E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x305B;&#x305A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x898F;&#x5236;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x5091;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x4F8B;&#x306F;&#x9020;&#x8840;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x9054;&#x9020;&#x8840;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x9020;&#x8840;&#x7CFB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3078;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5206;&#x5B50;&#x7D30;&#x9053;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9020;&#x8840;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9020;&#x8840;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3002;

Zebrafish (Danio rerio)&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAE30; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;. Zebrafish&#xB294; &#xD2B9;&#xD788; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC785;&#xC99D; &#xD588;&#xB2E4;. Zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xD22C;&#xBA85;&#xB3C4; ex vivo &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD559; &#xADF8; &#xC2DC;&#xAC01; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC27D;&#xAC8C;, &#xD2B9;&#xD788; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; fluorophores&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC885;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC758;&#xBBF8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; fecundity &#xACE0; &#xBC00;&#xB3C4; mutagenesis &#xAD00;&#xC6A9;&#xC740; &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300;&#xB9BD; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; mutagenized &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. MRNA (overexpression) &#xB610;&#xB294; &#xC13C;&#xC2A4; morpholino oligonucleotides (&#xCD5C;&#xC800;)&#xC758; microinjection&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD655;&#xC7A5;&#xB41C; &#xBC88; &#xC2DD; &#xC804;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xC5C6;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xADDC;&#xC815; &#xACBD;&#xB85C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD3B8;&#xB9AC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xC758; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xC608; &#xC870; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Zebrafish &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC870; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC870; &#xD608; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xB300;&#xC751;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; &#xCC99;&#xCD94; hematopoietic &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD0A4; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish&#xB294; &#xCC99;&#xCD94; &#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El pez cebra (Danio rerio) es un organismo modelo hacer contribuciones &uacute;tiles en muchas &aacute;reas de investigaci&oacute;n biol&oacute;gica. Pez cebra han demostrado ser particularmente apropiada para estudiar el desarrollo temprano. Transparencia y ex vivo desarrollo de embriones de pez cebra significa que eso embriolog&iacute;a temprano puede ser f&aacute;cilmente visualizado, especialmente utilizando cepas transg&eacute;nicas expresando fluor&oacute;foros tejidos de inter&eacute;s de la marca. Tolerancia de mutag&eacute;nesis densa y alta fecundidad han hecho un modelo pr&aacute;ctico para screening gen&eacute;tico hacia adelante y la creaci&oacute;n de bibliotecas mutagenized de que alelos mutantes estables pueden ser recuperados. Manipulaci&oacute;n gen&eacute;tica transitoria por microinyecci&oacute;n de mRNA (sobreexpresi&oacute;n) u oligonucle&oacute;tidos antisentido Morfolino (ca&iacute;da) proporcionan m&eacute;todos convenientes para evaluar funcionalmente v&iacute;as reguladoras gen&eacute;ticas sin necesidad de estrategias de mejoramiento extendido. Un ejemplo destacado de la utilidad de este modelo ha sido su aplicaci&oacute;n al modelado de las etapas m&aacute;s tempranas de la hematopoyesis. Pez cebra hematopoyesis desarrollo muestra estrecha correspondencia con el desarrollo del sistema hematopoy&eacute;tico mam&iacute;fero y est&aacute; reglamentada por conserva v&iacute;as moleculares. Esta revisi&oacute;n destaca la claves estudios recientes que han utilizado este modelo para proporcionar penetraciones en vertebrados desarrollo hematopoy&eacute;tico y de la inmunidad innata.

Pez cebra como modelo para vertebrados hematopoyesis.

&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3001; phagocytosing &#x5165;&#x4FB5;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x6297;&#x83CC;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5BF9;&#x635F;&#x4F24;&#x90E8;&#x4F4D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x611F;&#x67D3;/&#x708E;&#x75C7;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x5DF2;&#x88AB;&#x8D44;&#x52A9;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x682A;&#x4E0E;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x76F4;&#x63A5;&#x7814;&#x7A76;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884C;&#x4E3A;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;/&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4E00;&#x76F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x53EA;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x4E00;&#x884C;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x5220;&#x9664;&#x6B64;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x8DEF;&#x969C;&#xFF0C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A;&#x6807;&#x8BB0;&#x662F;&#x786E;&#x5B9A; (mpeg1) &#x548C;&#x7528;&#x4E8E;&#x9A71;&#x52A8; mpeg1 &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x53CA;&#x5176;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;mpeg1 &#x9A71;&#x52A8;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBF;&#x88AD;&#x4E0D;&#x8868;&#x793A;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EBF;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;&#x4F24;&#x4EBA;&#x88AB;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x884C;&#x4E3A;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5728;&#x590D;&#x5408;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5E76;&#x6392;&#x3002;&#x5B9E;&#x65F6;&#x968F;&#x65F6;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;/&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5982;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#xFF0C;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x708E;&#x75C7;&#x3001; &#x611F;&#x67D3;&#x3001; &#x548C;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;

mpeg1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x76F4;&#x63A5;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBF;&#x88AD;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Macrophages and neutrophils play important roles during the innate immune response, phagocytosing invading microbes and delivering antimicrobial compounds to the site of injury. Functional analyses of the cellular innate immune response in zebrafish infection/inflammation models have been aided by transgenic lines with fluorophore-marked neutrophils. However, it has not been possible to study macrophage behaviors and neutrophil/macrophage interactions in vivo directly because there has been no macrophage-only reporter line. To remove this roadblock, a macrophage-specific marker was identified (mpeg1) and its promoter used in mpeg1-driven transgenes. mpeg1-driven transgenes are expressed in macrophage-lineage cells that do not express neutrophil-marking transgenes. Using these lines, the different dynamic behaviors of neutrophils and macrophages after wounding were compared side-by-side in compound transgenics. Macrophage/neutrophil interactions, such as phagocytosis of senescent neutrophils, were readily observed in real time. These zebrafish transgenes provide a new resource that will contribute to the fields of inflammation, infection, and leukocyte biology.

mpeg1 promoter transgenes direct macrophage-lineage expression in zebrafish.

Les macrophages et les neutrophiles jouent un r&ocirc;le important au cours de la r&eacute;ponse immunitaire inn&eacute;e, phagocytantes envahir microbes et livrant des compos&eacute;s antimicrobiens &agrave; l&#39;endroit de la blessure. Analyse fonctionnelle de la r&eacute;ponse immunitaire inn&eacute;e cellulaire mod&egrave;les infection/inflammation de poisson-z&egrave;bre ont &eacute;t&eacute; favoris&eacute; par les lign&eacute;es transg&eacute;niques avec marqu&eacute; fluorophore neutrophiles. Toutefois, il n&#39;a pas &eacute;t&eacute; possible &eacute;tudier les comportements de macrophages et les neutrophiles/macrophage interactions in vivo directement parce qu&#39;il y n&#39;a eu aucune ligne de macrophage seule journaliste. Pour supprimer ce barrage, un marqueur sp&eacute;cifique &agrave; macrophage a &eacute;t&eacute; identifi&eacute;e (mpeg1) et son promoteur utilis&eacute; en mpeg1-driven transg&egrave;nes. pilot&eacute;e par MPEG1 transg&egrave;nes sont exprim&eacute;s dans les cellules macrophages-lign&eacute;e qui n&#39;expriment pas de transg&egrave;nes neutrophile-marquage. &Agrave; l&#39;aide de ces lignes, les diff&eacute;rents comportements dynamiques des neutrophiles et les macrophages apr&egrave;s blessure ont &eacute;t&eacute; comparativement by-side en compos&eacute;s transg&eacute;niques. Les interactions macrophage/neutrophile, tels que la phagocytose des neutrophiles s&eacute;nescentes, ont &eacute;t&eacute; facilement observ&eacute;es en temps r&eacute;el. Ces transg&egrave;nes zebrafish fournissent une nouvelle ressource qui contribuera aux domaines de l&#39;inflammation, infection et la biologie de leucocytes.

MPEG1 promoteur transg&egrave;nes directement l&#39;expression macrophage-lign&eacute;e chez le poisson z&egrave;bre.

Makrophagen und Neutrophilen spielen wichtige Rollen bei der angeborenen Immunantwort, phagocytosing eindringenden Mikroben und Bereitstellung von antimikrobielle Substanzen auf der Website von Verletzungen. Funktionsanalysen der zellul&auml;ren angeborenen Immunantwort im Zebrafisch-Infektion/Entz&uuml;ndung-Modelle haben mit Neutrophilen Fluorophor-gekennzeichnet durch transgene Linien unterst&uuml;tzt wurde. Jedoch war es nicht m&ouml;glich, die Verhaltensweisen der Makrophagen und Neutrophilen/Makrophagen Interaktionen in-vivo direkt zu studieren, da gab es keine nur-Makrophagen-Reporter-Linie. Um dieses Hindernis zu entfernen, wurde ein Makrophage-spezifische Marker identifiziert (mpeg1) und seine F&ouml;rderer in mpeg1-gesteuerte transgene verwendet. MPEG1-gesteuerte transgene werden in Makrophagen-&Uuml;bertragungslinie Zellen ausgedr&uuml;ckt, die Neutrophilen-Kennzeichnung f&uuml;hren nicht zum Ausdruck bringen. Verwenden diese Zeilen, verglichen die verschiedenen dynamischen Verhalten von Neutrophilen und Makrophagen nach Verwundung waren nebeneinander in zusammengesetzten Transgenics. Makrophagen/Neutrophilen-Interaktionen, z. B. Phagozytose der alternde Neutrophilen, wurden bereitwillig in Echtzeit beobachtet. Diese Zebrafisch-transgenen bieten eine neue Ressource, die auf die Felder der Entz&uuml;ndung, Infektion und Leukozyten Biologie beitragen werden.

MPEG1 Projekttr&auml;ger transgene direkte Makrophage-&Uuml;bertragungslinie Ausdruck im Zebrafisch.

Macrofagi e neutrofili svolgono un ruolo importante durante la risposta immunitaria innata, invadendo i microbi phagocytosing e consegna composti antimicrobici per il sito di lesione. Analisi funzionale della risposta immunitaria innata cellulare in modelli di infezione/infiammazione di zebrafish sono state aiutate da linee transgeniche con neutrofili fluorophore-contrassegnato. Tuttavia, non &egrave; possibile studiare comportamenti dei macrofagi e neutrofili/macrofagi interazioni in vivo direttamente perch&eacute; non c&#39; non &egrave; stata nessuna linea reporter solo macrofago. Per rimuovere questo ostacolo, un marcatore specifico del macrofago &egrave; stato identificato (mpeg1) e relativo promotore utilizzato in mpeg1-driven transgeni. MPEG1-driven transgeni sono espressi nelle cellule di macrofago-lignaggio che non esprimono transgeni neutrofili-marcatura. Usando queste linee, i diversi comportamenti dinamici di neutrofili e macrofagi dopo ferendo erano rispetto side-by-side in composti transgenica. Interazioni di neutrofili/macrofagi, come la fagocitosi dei neutrofili senescenti, prontamente sono state osservate in tempo reale. Questi transgeni zebrafish forniscono una nuova risorsa che contribuir&agrave; ai campi dell&#39;infiammazione, infezione e biologia dei leucociti.

MPEG1 promotore transgeni diretta espressione dei macrofagi-lineage in zebrafish.

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3084;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x751F;&#x5F97;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3001;phagocytosing &#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6297;&#x83CC;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x50B7;&#x5BB3;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x4E2D;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x611F;&#x67D3;/&#x708E;&#x75C7;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5F97;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x7DDA; fluorophore &#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x305F;&#x3081;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3060;&#x3051;&#x8A18;&#x8005;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x52D5;&#x4F5C;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x30FB; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x76F4;&#x63A5;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x56FA;&#x6709;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F; (mpeg1&#xFF09; &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; mpeg1 &#x99C6;&#x52D5; transgenes &#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;mpeg1 &#x99C6;&#x52D5; transgenes &#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0; transgenes &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7CFB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x884C;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x3084;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304C;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x52D5;&#x7684;&#x6319;&#x52D5;&#x4E26;&#x3079;&#x3066;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x3067;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3002;&#x8001;&#x9F62;&#x306E;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;/&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; transgenes &#x708E;&#x75C7;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

mpeg1 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; transgenes &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E5;&#x5F0F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x76F4;&#x63A5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;, phagocytosing &#xCE68;&#xC785; &#xD558;&#xB294; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xD56D;&#xADE0; &#xC131; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xD574;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC81C;&#xACF5; &#xC911; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Zebrafish &#xAC10;&#xC5FC;/&#xC5FC;&#xC99D; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778; fluorophore &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC911; &#xC131;&#xAD6C;&#xC640; &#xC8FC; &#xC5C8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC544;&#xBB34; macrophage &#xC804;&#xC6A9; &#xAE30;&#xC790; &#xC120; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; macrophage &#xD589;&#xB3D9;&#xACFC; neutrophil/macrophage &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC14;&#xB9AC; &#xCF00;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; macrophage &#xD2B9;&#xC815; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB294; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; (mpeg1) &#xBC0F; &#xADF8; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; mpeg1 &#xAE30;&#xBC18; transgenes&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294;. mpeg1 &#xAD6C;&#xB3D9; transgenes neutrophil &#xB9C8;&#xD0B9; transgenes&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; macrophage &#xD608;&#xD1B5; &#xC140;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC911; &#xC131;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBD80;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xB2E4;&#xB978; &#xB3D9;&#xC801; &#xB3D9;&#xC791; &#xBCF5;&#xD569; &#xC81C; &#xB2C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xB780;&#xD788; &#xBE44;&#xAD50;. &#xB178;&#xD654; neutrophils&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xB4F1;&#xC758; macrophage/neutrophil &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Zebrafish transgenes &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC99D;, &#xAC10;&#xC5FC;, &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

mpeg1 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; transgenes zebrafish macrophage &#xB9AC;&#xB2C8;&#xC9C0; &#xC2DD; &#xC9C1;&#xC811;.

Macr&oacute;fagos y neutr&oacute;filos juegan papeles importantes durante la respuesta inmune innata, invadiendo microbios phagocytosing y entrega de compuestos antimicrobianos para el sitio de la lesi&oacute;n. An&aacute;lisis funcionales de la respuesta inmunitaria innata celular en modelos de inflamaci&oacute;n/infecci&oacute;n de pez cebra han sido ayudados por l&iacute;neas transg&eacute;nicas con neutr&oacute;filos fluor&oacute;foro marcados. Sin embargo, no ha sido posible estudiar comportamientos de macr&oacute;fagos y neutr&oacute;filos, macr&oacute;fago interacciones in vivo directamente porque no ha habido ninguna l&iacute;nea de reportero s&oacute;lo macr&oacute;fago. Para eliminar este obst&aacute;culo, un marcador espec&iacute;fico de macr&oacute;fagos fue identificada (mpeg1) y su promotor utilizado en los transgenes basadas en mpeg1. los transgenes basadas en MPEG1 se expresan en c&eacute;lulas macr&oacute;fagos-linaje que no expresan transgenes de marcaje del neutr&oacute;filo. Con estas l&iacute;neas, los diferentes comportamientos din&aacute;micos de neutr&oacute;filos y macr&oacute;fagos despu&eacute;s de herir en comparaci&oacute;n con side-by-side en transg&eacute;nicos compuesto. F&aacute;cilmente se observaron interacciones de macr&oacute;fago/neutr&oacute;filo, tales como la fagocitosis de los neutr&oacute;filos senescentes, en tiempo real. Estos transgenes de pez cebra proporcionan un nuevo recurso que contribuya a los campos de la inflamaci&oacute;n, infecci&oacute;n y Biolog&iacute;a del leucocito.

MPEG1 promotor transgenes directa expresi&oacute;n de macr&oacute;fago-linaje en pez cebra.

&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x4FEE;&#x9970;&#x662F;&#x52A8;&#x8109;&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x75C5;&#x7406;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x5982;&#x4E19;&#x4E8C;&#x919B; (MDA) &#x5F62;&#x6210;&#x6C27;&#x5316;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;MDA &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6297;&#x4F53;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x52A8;&#x8109;&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x9020;&#x51FA;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E0E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x5355;&#x94FE;&#x4EBA;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;IK17&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; MDA &#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7528;&#x4E8E;&#x6210;&#x50CF;&#x7814;&#x7A76;&#x5149;&#x5B66;&#x900F;&#x660E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5E7C;&#x866B;&#x3002;&#x9972;&#x5582;&#x9AD8;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x996E;&#x98DF; (HCD)&#xFF0C;&#x8F85;&#x4EE5;&#x7EA2;&#x8272;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x8102;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8840;&#x7BA1;&#x8102;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#xFF0C;&#x91CF;&#x5316;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x6D3B;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x540E;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x8BF1;&#x5BFC; IK17 &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x8840;&#x7BA1;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684; IK17 &#x7279;&#x5B9A; MDA &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x6216;&#x56DE;&#x5F52;&#x996E;&#x98DF;&#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11; IK17 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8840;&#x7BA1;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;IK17 &#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5E7C;&#x866B;&#x5300;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; MDA &#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; MDA &#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6301;&#x7EED;&#x7684; IK17 &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x963B;&#x6B62; HCD &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x5806;&#x79EF;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x58C1;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x6297;&#x4F53;&#x672C;&#x8EAB;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7597;&#x6548;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA; HCD &#x9988;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5E7C;&#x866B;&#x4E0E;&#x6761;&#x4EF6;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x6C27;&#x5316;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x8D77;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6700;&#x7EC8;&#x53EF;&#x80FD;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x996E;&#x98DF;&#x548C;/&#x6216;&#x5176;&#x4ED6;&#x6CBB;&#x7597;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x6218;&#x7565;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x6709;&#x6548;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x548C;&#x6C27;&#x5316;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#x9AD8;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x8840;&#x75C7;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x8870;&#x51CF;&#x3002;

Oxidative modification of LDL is an early pathological event in the development of atherosclerosis. Oxidation events such as malondialdehyde (MDA) formation may produce specific, immunogenic epitopes. Indeed, antibodies to MDA-derived epitopes are widely used in atherosclerosis research and have been demonstrated to enable cardiovascular imaging. In this study, we engineered a transgenic zebrafish with temperature-inducible expression of an EGFP-labeled single-chain human monoclonal antibody, IK17, which binds to MDA-LDL, and used optically transparent zebrafish larvae for imaging studies. Feeding a high-cholesterol diet (HCD) supplemented with a red fluorescent lipid marker to the transgenic zebrafish resulted in vascular lipid accumulation, quantified in live animals using confocal microscopy. After heat shock-induced expression of IK17-EGFP, we measured the time course of vascular accumulation of IK17-specific MDA epitopes. Treatment with either an antioxidant or a regression diet resulted in reduced IK17 binding to vascular lesions. Interestingly, homogenates of IK17-EGFP-expressing larvae bound to MDA-LDL and inhibited MDA-LDL binding to macrophages. Moreover, sustained expression of IK17-EGFP effectively prevented HCD-induced lipid accumulation in the vascular wall, suggesting that the antibody itself may have therapeutic effects. Thus, we conclude that HCD-fed zebrafish larvae with conditional expression of EGFP-labeled oxidation-specific antibodies afford an efficient method of testing dietary and/or other therapeutic antioxidant strategies that may ultimately be applied to humans.

In vivo visualization and attenuation of oxidized lipid accumulation in hypercholesterolemic zebrafish.

Modification oxydative des LDL est un &eacute;v&eacute;nement pathologique pr&eacute;coce dans le d&eacute;veloppement de l&#39;ath&eacute;roscl&eacute;rose. Des &eacute;v&eacute;nements tels que la formation de malondiald&eacute;hyde (MDA) oxydation peuvent produire des &eacute;pitopes sp&eacute;cifiques, immunog&egrave;nes. En effet, les anticorps dirig&eacute;s contre les &eacute;pitopes d&eacute;riv&eacute;s MDA est largement utilis&eacute;s dans la recherche de l&#39;ath&eacute;roscl&eacute;rose et ont &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;s pour permettre l&#39;imagerie cardiovasculaire. Dans cette &eacute;tude, nous avons con&ccedil;u un zebrafish transg&eacute;nique avec expression inductible par la temp&eacute;rature d&#39;un marqu&eacute; EGFP cha&icirc;ne unique anticorps monoclonal humain, IK17, qui se lie &agrave; la MDA-LDL et utilis&eacute; des larves de poisson z&egrave;bre optiquement transparent pour les &eacute;tudes d&#39;imagerie. Un r&eacute;gime riche en cholest&eacute;rol (HCD) additionn&eacute; d&#39;un rouge marqueur fluorescent de lipides pour le poisson-z&egrave;bre transg&eacute;nique a abouti &agrave; l&#39;accumulation de lipides vasculaire de l&#39;alimentation, quantifi&eacute; dans les animaux vivants &agrave; l&#39;aide de la microscopie confocale. Apr&egrave;s expression induite par le choc thermique de IK17-EGFP, nous avons mesur&eacute; l&#39;&eacute;volution temporelle de l&#39;accumulation des &eacute;pitopes sp&eacute;cifiques IK17 MDA vasculaire. Traitement avec un antioxydant ou un r&eacute;gime de r&eacute;gression a liaison IK17 r&eacute;duite &agrave; des l&eacute;sions vasculaires. Fait int&eacute;ressant, les homog&eacute;nats de larves exprimant EGFP-IK17 li&eacute; &agrave; la MDA-LDL et inhibent la liaison du MDA-LDL aux macrophages. En outre, l&#39;expression durable de IK17-EGFP a effectivement emp&ecirc;ch&eacute; accumulation de lipides induite par HCD dans la paroi vasculaire, ce qui sugg&egrave;re que l&#39;anticorps lui-m&ecirc;me peut avoir des effets th&eacute;rapeutiques. Ainsi, nous concluons que les larves de poisson z&egrave;bre HCD-nourris avec une expression conditionnelle des anticorps sp&eacute;cifiques &agrave; oxydation marqu&eacute;s EGFP moyens une m&eacute;thode efficace de tester des strat&eacute;gies alimentaires et/ou d&#39;autres antioxydants th&eacute;rapeutique qui peuvent &ecirc;tre appliqu&eacute;es en d&eacute;finitive aux humains.

Visualisation in vivo et l&#39;att&eacute;nuation de l&#39;accumulation de lipides oxyd&eacute;s dans zebrafish hypercholest&eacute;rol&eacute;mique.

Oxidative Modifikation des LDL ist eine fr&uuml;he pathologische Ereignis in der Entwicklung von Arteriosklerose. Oxydation Veranstaltungen wie Malondialdehyde (MDA) Bildung k&ouml;nnen spezifische, immunogen Epitopes produzieren. Tats&auml;chlich Antik&ouml;rper gegen Epitope MDA-abgeleitet sind weit verbreitet in der Arteriosklerose Forschung und sind erprobt, um kardiovaskul&auml;re Bildgebung zu erm&ouml;glichen. In dieser Studie entwickelt wir eine transgene Zebrafish mit Temperatur-inducible Ausdruck einer EGFP-beschrifteten Einzel-Kette menschlichen monoklonalen Antik&ouml;rpers, IK17, bindet an MDA-LDL und optisch transparente Zebrafisch-Larven f&uuml;r Untersuchungen eingesetzt. F&uuml;tterung eine hoch-Cholesterin-Di&auml;t (HCD) erg&auml;nzt mit einem roten, die fluoreszierende Lipid-Marker an der transgenen Zebrafisch vaskul&auml;re Lipid Anh&auml;ufung gef&uuml;hrt, quantifiziert, lebenden Tieren, die mit Hilfe der konfokalen Mikroskopie. Nach Hitze-Schock-induzierte-Ausdruck des IK17-EGFP messen wir den zeitlichen Verlauf vaskul&auml;rer Akkumulation von IK17-spezifische MDA Epitopes. Behandlung mit Antioxidantien oder ein R&uuml;ckschritt-Di&auml;t f&uuml;hrte zu reduzierten IK17 Bindung an vaskul&auml;re L&auml;sionen. Interessanterweise Homogenates der Larven IK17-EGFP-Ausdruck an MDA-LDL gebunden und MDA-LDL-Bindung an Makrophagen gehemmt. Dar&uuml;ber hinaus verhindert nachhaltig Ausdruck der IK17-EGFP effektiv HCD-induzierten Lipid-Akkumulation in der Gef&auml;&szlig;wand, was darauf hindeutet, dass der Antik&ouml;rper selbst therapeutische Wirkungen haben kann. Daher schlie&szlig;en wir, dass HCD gef&uuml;ttert Zebrafisch-Larven mit Bedingungsausdruck EGFP-beschrifteten Oxydation-spezifische Antik&ouml;rper leisten eine sehr effiziente Methode der Pr&uuml;fung/di&auml;tetische oder andere therapeutische antioxidative Strategien, die letztlich auf den Menschen angewendet werden k&ouml;nnen.

In-vivo-Visualisierung und D&auml;mpfung von oxidierten Lipid-Akkumulation in hypercholesterolemic Zebrafisch.

Modifica ossidativa di LDL &egrave; un evento patologico precoce nello sviluppo dell&#39;aterosclerosi. Gli eventi di ossidazione come formazione di malondialdeide (MDA) possono produrre gli epitopi specifici, immunogenici. Infatti, anticorpi anti-epitopi MDA-derivati sono ampiamente utilizzati nella ricerca di aterosclerosi e hanno dimostrato di consentire imaging cardiovascolare. In questo studio, abbiamo progettato un zebrafish transgenici con temperatura-inducible espressione di un marcato EGFP catena singola umano anticorpo monoclonale, IK17, che si lega a MDA-LDL e utilizzate le larve di zebrafish otticamente trasparente per studi di imaging. Alimentazione una dieta ad alto colesterolo (HCD) integrata con un rosso marcatore fluorescente dei lipidi per il Danio transgenico ha portato nell&#39;accumulo di lipidi vascolari, quantificati in animali vivi mediante microscopia confocale. Dopo heat shock-indotta espressione IK17-EGFP, abbiamo misurato il corso tempo di accumulo vascolare di epitopi specifici IK17 MDA. Trattamento con una dieta di regressione o un antiossidante ha provocato riduzione IK17 associazione a lesioni vascolari. &Egrave; interessante notare, omogeneati del IK17-EGFP-esprimendo le larve associato a MDA-LDL e inibiscono associazione MDA-LDL ai macrofagi. Inoltre, sostenuta espressione di IK17-EGFP efficacemente prevenute accumulo di lipidi HCD-indotta della parete vascolare, suggerendo che l&#39;anticorpo stesso pu&ograve; avere effetti terapeutici. Pertanto, possiamo concludere che le larve di zebrafish HCD-alimentato con espressione condizionale di anticorpi specifici per ossidazione con etichetta EGFP permettersi un efficiente metodo di test strategie dietetiche e/o altri antiossidanti terapeutiche che in ultima analisi possono essere applicati agli esseri umani.

Visualizzazione in vivo e l&#39;attenuazione dell&#39;accumulo di lipidi ossidati in zebrafish normocolesterolemici.

LDL &#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x4FEE;&#x98FE;&#x958B;&#x767A;&#x30A2;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;&#x6027;&#x52D5;&#x8108;&#x786C;&#x5316;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30ED;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9; (MDA) &#x5F62;&#x6210;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3001;MDA &#x6D3E;&#x751F;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x30A2;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;&#x6027;&#x52D5;&#x8108;&#x786C;&#x5316;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x8840;&#x7BA1;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306F; EGFP &#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4ED8;&#x3044;&#x305F;&#x5358;&#x4E00;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3; &#x30D2;&#x30C8;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x306F; MDA LDL &#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5149;&#x5B66;&#x7684;&#x900F;&#x660E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528; IK17 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30EA;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;&#x8D64;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x8102;&#x8CEA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x305F;&#x88DC;&#x5B8C;&#x9AD8;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x98DF; (HCD) &#x7D66;&#x990C;&#x3001;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3002;&#x5F8C;&#x71B1;&#x885D;&#x6483;&#x8A98;&#x8D77;&#x306E;&#x5F0F; IK17 EGFP &#x306E; IK17 &#x7279;&#x5B9A;&#x306E; MDA &#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x6B62;&#x5264;&#x3084;&#x56DE;&#x5E30;&#x98DF;&#x6CBB;&#x7642;&#x8840;&#x7BA1;&#x75C5;&#x5909;&#x3078;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E; IK17 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30DB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8; IK17 EGFP &#x767A;&#x73FE;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E; MDA-LDL &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;MDA LDL &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3078;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;IK17 EGFP &#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B; HCD &#x8A98;&#x767A;&#x8102;&#x8CEA;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x58C1;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HCD &#x7D66;&#x96FB;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5E7C;&#x866B; EGFP &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x9178;&#x5316;&#x7279;&#x7570;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x5F0F;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x98DF;&#x4E8B;&#x3084;&#x4ED6;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F59;&#x88D5;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

In vivo &#x3067;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3068;&#x9AD8;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x8840;&#x75C7;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x8102;&#x8CEA;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x3002;

LDL&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xC218;&#xC815; &#xC544; &#xD14C; &#xB86C;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC774;&#xB978; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Malondialdehyde (MDA) &#xD615;&#xC131; &#xB4F1;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xD2B9;&#xC815;, immunogenic epitopes&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC2E4;, MDA &#xD30C;&#xC0DD; epitopes &#xD56D; &#xCCB4; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACBD;&#xD654; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418; &#xACE0; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xD608;&#xAD00; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC785;&#xC99D; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; EGFP &#xB77C;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xCCB4;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4;, MDA LDL&#xC744; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xAD11;&#xD559; &#xD22C;&#xBA85; zebrafish &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; ik17&#xC758; &#xC628;&#xB3C4; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD45C;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; zebrafish &#xC124;&#xACC4;. &#xB192;&#xC740; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4;&#xD2B8; (HCD) &#xD608;&#xAD00; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; &#xD615;&#xAD11; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; zebrafish &#xBE68;&#xAC04;&#xC0C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xCDA9; &#xC218; &#xC720;, confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACC4;&#xB7C9;. IK17 EGFP&#xC758; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC720;&#xBC1C; &#xC2DD;, &#xD6C4; IK17 &#xD2B9;&#xC815; MDA epitopes &#xD608;&#xAD00; &#xCD95;&#xC801; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B0;&#xD654; &#xBC29;&#xC9C0; &#xC81C; &#xB610;&#xB294; &#xD68C;&#xADC0; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4;&#xD2B8; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD608;&#xAD00; &#xC7A5;&#xC560;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; IK17 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, homogenates IK17 EGFP &#xD45C;&#xD604; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xC758; MDA LDL&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xBA70; MDA LDL &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC800;&#xD574;. &#xB610;&#xD55C;, IK17 EGFP&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC790;&#xCCB4; &#xD56D; &#xCCB4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD608;&#xAD00; &#xBCBD;&#xC5D0;&#xC11C; HCD &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; EGFP &#xB77C;&#xB294; &#xC0B0;&#xD654; &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC870;&#xAC74;&#xC2DD;&#xC744; HCD &#xBA39;&#xC774; zebrafish &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xAC10;&#xB2F9;&#xD560; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC801;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD;&#xC774; &#xC694;&#xBC95; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;.

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xC131;&#xC774; zebrafish&#xC5D0; &#xB204;&#xC801; &#xB41C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xAC10;&#xC1C4;.

La modificaci&oacute;n oxidativa de las LDL es un acontecimiento patol&oacute;gico temprano en el desarrollo de la aterosclerosis. Eventos de la oxidaci&oacute;n como la formaci&oacute;n de malondialdehido (MDA) pueden producir ep&iacute;topos espec&iacute;ficos, inmunog&eacute;nicas. De hecho, anticuerpos derivados MDA epitopes son ampliamente utilizados en la investigaci&oacute;n de la aterosclerosis y se han demostrado para permitir la proyecci&oacute;n de imagen cardiovascular. En este estudio, hemos dise&ntilde;ado un pez cebra transg&eacute;nico con expresi&oacute;n inducible por la temperatura de un marcado con EGFP sola cadena humano anticuerpo monoclonal, IK17, que se une al MDA-LDL y utiliza larvas de pez cebra &oacute;pticamente transparente para estudios por im&aacute;genes. Una dieta alta en colesterol (HCD) complementada con un rojo marcador de l&iacute;pidos fluorescentes para el pez cebra transg&eacute;nico dio lugar a la acumulaci&oacute;n de l&iacute;pidos vascular de la alimentaci&oacute;n, cuantificado en animales vivos usando microscopia confocal. Despu&eacute;s de la expresi&oacute;n inducida por el choque del calor de IK17-EGFP, medimos el curso temporal de acumulaci&oacute;n vascular de ep&iacute;topos espec&iacute;ficos IK17 MDA. Tratamiento con una dieta de regresi&oacute;n o un antioxidante dio lugar a atar IK17 reducido a las lesiones vasculares. Curiosamente, homogenados de larvas IK17-EGFP-expresando a MDA-LDL e inhibici&oacute;n la Uni&oacute;n de MDA-LDL a los macr&oacute;fagos. Por otra parte, expresi&oacute;n sostenida de IK17-EGFP prevenir con eficacia la acumulaci&oacute;n de l&iacute;pidos inducida por el HCD en la pared vascular, lo que sugiere que el anticuerpo puede tener efectos terap&eacute;uticos. Por lo tanto, concluimos que las larvas de pez cebra HCD-aliment&oacute; con expresi&oacute;n condicional de anticuerpos espec&iacute;ficos para oxidaci&oacute;n marcado con EGFP permitirse un m&eacute;todo eficiente de antioxidante terap&eacute;utica diet&eacute;tica y/o otras estrategias que pueden aplicarse en &uacute;ltima instancia a los seres humanos de prueba.

Visualizaci&oacute;n en vivo y atenuaci&oacute;n de la acumulaci&oacute;n de l&iacute;pidos oxidados en el pez cebra hipercolesterol&eacute;mico.

&#x4F4D;&#x4E8E;&#x4E2D;&#x8111;&#x540E;&#x8111;&#x8FB9;&#x754C; (MHB) &#x7684;&#x5CE1;&#x90E8;&#x4E3B;&#x529E;&#x673A;&#x6784;&#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x9635;&#x5217;&#x4E2D;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C; metencephalic &#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x5927;&#x8111;&#x5173;&#x952E;&#x53D1;&#x5C55;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3002;&#x5C42;&#x6B21;&#x5F0F;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x53D1;&#x8D77;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; 8 &#xFF08;Fgf8&#xFF09;&#xFF0C;&#x52A0;&#x4E0A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x6700;&#x7EC8;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x9876;&#x76D6;&#x5CE1;&#x5C0F;&#x8111;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x7684; MHB&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E00;&#x4E2A; orthologue &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x6709;&#x7EB9;&#x8DEF;&#x5934;&#x6837; 2 (Grhl2)&#x3001; &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; grhl2b MHB &#x7EF4;&#x4FEE;&#x548C;&#x6298;&#x53E0;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x3001; &#x975E;&#x7EBF;&#x5F62;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x4E2D;&#x592E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x635F;&#x5931;&#x7684; grhl2b &#x8868;&#x8FBE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x706D;&#x7EDD;&#x7684; MHB &#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7531;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x952F;&#x9F7F; 2a &#x6551;&#x51FA; (eng2a)&#xFF0C;Grhl &#x5BB6;&#x65CF;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;Grhl2b &#x548C; eng2a morpholinos sub-phenotypic &#x5242;&#x91CF;&#x5145;&#x586B;&#x8F6C;&#x8F7D;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C; MHB &#x6807;&#x8BB0;&#x4E22;&#x5931;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x5927;&#x5927;&#x7834;&#x574F;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5CE1;&#x90E8;&#x7F29;&#x7A84;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x76F4;&#x63A5; grhl2b &#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;spec1&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x786E;&#x8BA4;&#x7684;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A; grhl2b &#x8BF1;&#x4F7F; MHB &#x5F62;&#x6001;&#x4E0E;&#x5408;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x6CA1;&#x6709;&#x4F5C;&#x7528;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6216; MHB &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; MHB &#x7EF4;&#x4FEE;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x6E38;&#x79BB;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x53D7; grhl2b &#x901A;&#x8FC7;&#x591A;&#x6837;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x4E2D;&#x8111;&#x540E;&#x8111;&#x8FB9;&#x754C;&#x9635;&#x5217;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x53D7;&#x5404;&#x79CD;&#x7C92;&#x72B6;&#x5934;&#x6837; 2 &#x4F9D;&#x8D56;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

The isthmic organiser located at the midbrain-hindbrain boundary (MHB) is the crucial developmental signalling centre responsible for patterning mesencephalic and metencephalic regions of the vertebrate brain. Formation and maintenance of the MHB is characterised by a hierarchical program of gene expression initiated by fibroblast growth factor 8 (Fgf8), coupled with cellular morphogenesis, culminating in the formation of the tectal-isthmo-cerebellar structures. Here, we show in zebrafish that one orthologue of the transcription factor grainy head-like 2 (Grhl2), zebrafish grhl2b plays a central role in both MHB maintenance and folding by regulating two distinct, non-linear pathways. Loss of grhl2b expression induces neural apoptosis and extinction of MHB markers, which are rescued by re-expression of engrailed 2a (eng2a), an evolutionarily conserved target of the Grhl family. Co-injection of sub-phenotypic doses of grhl2b and eng2a morpholinos reproduces the apoptosis and MHB marker loss, but fails to substantially disrupt formation of the isthmic constriction. By contrast, a novel direct grhl2b target, spec1, identified by phylogenetic analysis and confirmed by ChIP, functionally cooperates with grhl2b to induce MHB morphogenesis, but plays no role in apoptosis or maintenance of MHB markers. Collectively, these data show that MHB maintenance and morphogenesis are dissociable events regulated by grhl2b through diverse transcriptional targets.

Midbrain-hindbrain boundary patterning and morphogenesis are regulated by diverse grainy head-like 2-dependent pathways.

L&#39;organisateur Isthmiques, situ&eacute; &agrave; la limite du m&eacute;senc&eacute;phale-cerveau post&eacute;rieur (MHB) est le centre signalisation d&eacute;veloppement crucial responsable structuration m&eacute;senc&eacute;phaliques et metencephalic des r&eacute;gions du cerveau des vert&eacute;br&eacute;s. Formation et le maintien de la M&eacute;th&eacute;moglobin&eacute;mie est caract&eacute;ris&eacute; par un programme hi&eacute;rarchique de l&#39;expression g&eacute;nique, initi&eacute;e par le facteur de croissance fibroblastique 8 (Fgf8), coupl&eacute; avec la morphog&eacute;n&egrave;se cellulaire, aboutissant &agrave; la formation des structures tectal-isthmo-c&eacute;r&eacute;belleuses. Nous montrons ici, chez le poisson z&egrave;bre qu&#39;un orthologue de la transcription factor granuleuse capitule 2 (Grhl2), poisson z&egrave;bre grhl2b joue un r&ocirc;le central en entretien MHB et pliage en r&eacute;glementant les deux voies distinctes, non lin&eacute;aires. Perte de grhl2b expression induit l&#39;apoptose neuronale et extinction des marqueurs MHB, qui sont sauv&eacute;s par la r&eacute;expression d&#39;engr&ecirc;l&eacute; 2 a (eng2a), un objectif &eacute;volutif conserv&eacute; de la famille Grhl. Coinjection de doses sub-phenotypic de grhl2b et eng2a morpholinos reproduit l&#39;apoptose et la perte de marqueur MHB, mais ne parvient pas &agrave; perturber consid&eacute;rablement la formation de la constriction Isthmiques. En revanche, une cible de roman grhl2b direct, spec1, identifi&eacute; par analyse phylog&eacute;n&eacute;tique et confirm&eacute; par puce, fonctionnellement collabore avec grhl2b pour induire la morphog&eacute;n&egrave;se MHB, mais ne joue aucun r&ocirc;le dans l&#39;apoptose ou entretien des marqueurs MHB. Collectivement, ces donn&eacute;es montrent que la morphog&eacute;n&egrave;se et la maintenance MHB sont dissociables &eacute;v&eacute;nements relevant de la grhl2b par le biais de diverses cibles transcriptionnelles.

Morphogen&egrave;se et structuration limite m&eacute;senc&eacute;phale rhombenc&eacute;phale sont r&eacute;gis par diverses voies de 2-d&eacute;pendantes capitule granuleuses.

Isthmische Veranstalter befindet sich an der Grenze Mittelhirn-Hinterhirn (MHB) ist das entscheidende Entwicklungsst&ouml;rungen Signalgebung f&uuml;r Musterung Aquaeductus und metencephalic Gehirnregionen Wirbeltiere verantwortlich. Bildung und Pflege von der MHB zeichnet sich durch eine hierarchische Programm der Genexpression von Fibroblasten-Wachstumsfaktor 8 (Fgf8), gepaart mit zellul&auml;ren Morphogenese, die ihren H&ouml;hepunkt in der Bildung der tectal-Isthmo-zerebell&auml;ren Strukturen initiiert. Hier zeigen wir im Zebrafisch, dass eine Orthologue der Transkription Faktor k&ouml;rnig Kopf-wie 2 (Grhl2), Zebrafish grhl2b spielt eine zentrale Rolle in MHB Wartung und Falten durch die Regelung von zwei unterschiedlichen, nichtlineare Wege. Verlust des grhl2b Ausdrucks induziert neuronales Apoptosis und Aussterben der MHB Markierungen, die von Re-expression Gezackter 2a gerettet werden (eng2a), ein evolution&auml;r konservierte Ziel der Grhl-Familie. Injektionsverfahren sub-phenotypic Dosen von grhl2b und eng2a Morpholinos reproduziert die Apoptose und MHB Markierung Verlust, aber scheitert, Bildung von Isthmische Verengung wesentlich zu st&ouml;ren. Im Gegensatz dazu ein neuartige direkte grhl2b Ziel, spec1, phylogenetische Analyse festgestellten und von ChIP, best&auml;tigt funktional kooperiert mit grhl2b MHB Morphogenese veranlassen, aber spielt keine Rolle bei der Apoptose oder Wartung von MHB-Markern. Gemeinsam zeigen diese Daten, dass MHB Wartung und Morphogenese Binom Ereignisse durch grhl2b durch diverse transkriptionelle Ziele geregelt sind.

Mittelhirn-Hinterhirn Grenze Musterbildung und Morphogenese sind diverse k&ouml;rnig Kopf-wie 2-abh&auml;ngige Wege geregelt.

L&#39;Organizzatore istmica che si trova presso il confine del mesencefalo-hindbrain (MHB) &egrave; il centro segnalazione cruciale dello sviluppo responsabile per la creazione di serie di regioni mesencefaliche e metencephalic del cervello vertebrato. Formazione e manutenzione il MHB &egrave; caratterizzata da un programma gerarchico dell&#39;espressione genica iniziata dal fattore di crescita dei fibroblasti 8 (Fgf8), accoppiato con morfogenesi cellulare, che si conclude con la formazione delle strutture tectal-isthmo-cerebellare. Qui, vi mostriamo in zebrafish che uno orthologue della trascrizione fattore sgranate testa-come 2 (Grhl2), grhl2b di zebrafish svolge un ruolo centrale nella manutenzione MHB sia pieghevole regolando due percorsi distinti, non-lineare. Perdita di espressione grhl2b induce apoptosi neuronale e l&#39;estinzione dei marcatori MHB, che vengono salvati dal riespressione della 2a engrailed (eng2a), un bersaglio evolutivamente conservato della famiglia Grhl. Co-iniezione di dosi sub-phenotypic di grhl2b ed eng2a morpholinos riproduce l&#39;apoptosi e la perdita di marcatore MHB, ma non riesce a disturbare sostanzialmente la formazione della costrizione istmica. Al contrario, un romanzo diretto grhl2b target, spec1, identificato dall&#39;analisi filogenetica e confermato dal ChIP, funzionalmente collabora con grhl2b per indurre la morfogenesi MHB, ma non svolge alcun ruolo nell&#39;apoptosi o manutenzione dei marcatori MHB. Collettivamente, questi dati mostrano che la morfogenesi e manutenzione MHB sono dissociabili eventi regolati da grhl2b attraverso diversi obiettivi di transcriptional.

Morfogenesi e patterning contorno mesencefalo-hindbrain sono regolati da diversi percorsi di 2-dipendente testa-come granulose.

&#x4E2D;&#x8133;&#x83F1;&#x8133;&#x306E;&#x5883;&#x754C; (MHB) &#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x5CE1;&#x90E8;&#x4E3B;&#x50AC;&#x8005;&#x306F;&#xFF0C; &#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4E2D;&#x8133;&#x3068; metencephalic &#x5730;&#x57DF;&#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x7DAD;&#x6301;&#x3001;MHB &#x306E;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50; 8 (Fgf8) &#x8996;&#x84CB;&#x5411;&#x5C0F;&#x8133;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x6700;&#x9AD8;&#x6F6E;&#x306B;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x76F8;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x968E;&#x5C64;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x793A;&#x3059; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x7C97;&#x3044;&#x982D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; 2 (Grhl2)&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; grhl2b MHB &#x4FDD;&#x5B88;&#x3068; 2 &#x3064;&#x306E;&#x660E;&#x77AD;&#x306A;&#x975E;&#x76F4;&#x7DDA;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x5F0F;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Grhl2b &#x5F0F;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x795E;&#x7D4C;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EC;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C9; 2 a &#x306E;&#x9006;&#x8EE2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6551;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066; MHB &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x7D76;&#x6EC5; &#xFF08;eng2a&#xFF09;&#x3001;Grhl &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3002;Grhl2b &#x3068; eng2a morpholinos &#x306E; sub-phenotypic &#x6295;&#x4E0E;&#x306E;&#x5171;&#x5C04;&#x51FA;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068; MHB &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x518D;&#x73FE;&#x304C;&#x7622;&#x75D5;&#x72ED;&#x7A84;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5; grhl2b &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x7CFB;&#x7D71;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F; spec1 &#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684; MHB &#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B; grhl2b &#x3068;&#x5354;&#x529B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9; MHB &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;MHB &#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210; grhl2b &#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3078;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E2D;&#x8133;&#x83F1;&#x8133;&#x5883;&#x754C;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x591A;&#x69D8;&#x306E;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x7C97;&#x3044;&#x982D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; 2 &#x4F9D;&#x5B58;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Midbrain hindbrain &#xACBD;&#xACC4; (MHB)&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; isthmic &#xB2E8;&#xCCB4;&#xC640; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xC13C;&#xD130; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xCC99;&#xCD94; &#xB1CC;&#xC758; mesencephalic &#xBC0F; metencephalic &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xC720;&#xC9C0;&#xB294; MHB&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (Fgf8), 8 &#xC18C; tectal-isthmo-&#xB1CC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; culminating &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; morphogenesis&#xC640; &#xACB0;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xC791; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xACC4;&#xCE35;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC1FC; zebrafish&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD55C; orthologue &#xC694;&#xC18C; &#xB09F; &#xC54C; &#xBA38;&#xB9AC; &#xAC19;&#xC740; 2 (Grhl2), zebrafish grhl2b MHB &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xBC0F; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0;, &#xBE44; &#xC120;&#xD615; &#xACBD;&#xB85C; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xC811;&#xB294;&#xC5D0; &#xC911;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;. Grhl2b &#xC2DD;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xACBD; apoptosis&#xC640; &#xBA78;&#xC885;&#xC758; engrailed 2a&#xC758; &#xD45C;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCD9C; MHB &#xB9C8;&#xCEE4; (eng2a), Grhl &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB300;&#xC0C1;. Co-injection&#xC758; grhl2b &#xBC0F; eng2a morpholinos sub-phenotypic &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; apoptosis&#xC640; MHB &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC190;&#xC2E4; &#xC7AC;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; isthmic &#xC218;&#xCD95;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC18C;&#xC124; &#xC9C1;&#xC811; grhl2b &#xB300;&#xC0C1;, spec1, phylogenetic &#xBD84;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xCE69;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5; MHB morphogenesis &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; grhl2b&#xC640; &#xD611;&#xB825; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; apoptosis &#xB610;&#xB294; MHB &#xD45C;&#xC2DC;&#xC790;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC0E8; &#xB2E4;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xC2DC; MHB &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xBC0F; morphogenesis &#xC0AC;&#xB78C;&#xC774; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; transcriptional &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; grhl2b&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Midbrain hindbrain &#xACBD;&#xACC4; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xBC0F; morphogenesis &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB09F; &#xC54C; &#xBA38;&#xB9AC; &#xAC19;&#xC740; 2 &#xC885;&#xC18D; &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El organizador &iacute;stmico situado en el l&iacute;mite del midbrain-cerebelo (MHB) es el centro de se&ntilde;alizaci&oacute;n del desarrollo crucial responsable de patrones mesencef&aacute;licas y metencephalic regiones del cerebro vertebrado. Formaci&oacute;n y mantenimiento de la MHB se caracteriza por un programa jer&aacute;rquico de la expresi&oacute;n g&eacute;nica iniciada por el factor de crecimiento fibrobl&aacute;stico 8 (Fgf8), junto con la morfog&eacute;nesis celular, culminando en la formaci&oacute;n de las estructuras tectal-isthmo-cerebelosas. Aqu&iacute;, mostramos en el pez cebra que una orthologue de la transcripci&oacute;n factor 2 de cabeza-como granulada (Grhl2), pez cebra grhl2b desempe&ntilde;a un papel central en mantenimiento MHB tanto plegable regulando dos caminos distintos, no lineales. P&eacute;rdida de grhl2b expresi&oacute;n induce apoptosis neuronal y extinci&oacute;n de los marcadores MHB, que son rescatados por reexpresi&oacute;n de angrelado 2a (eng2a), un objetivo evolutivamente conservado de la familia Grhl. Coinyecci&oacute;n de dosis sub-phenotypic de grhl2b y eng2a morfolinos reproduce la apoptosis y la p&eacute;rdida de marcador MHB, pero no alterar sustancialmente la formaci&oacute;n de la constricci&oacute;n &iacute;stmica. Por el contrario, un objetivo de la novela grhl2b directo, spec1, identificado por el an&aacute;lisis filogen&eacute;tico y confirmado por ChIP, funcionalmente colabora con grhl2b para inducir la morfog&eacute;nesis MHB, pero no desempe&ntilde;a ning&uacute;n papel en apoptosis o mantenimiento de marcadores MHB. Colectivamente, estos datos demuestran que la morfog&eacute;nesis y mantenimiento MHB son disociables eventos regulados por grhl2b a trav&eacute;s de diversos objetivos transcripcionales.

Morfog&eacute;nesis y patrones de l&iacute;mite del midbrain-cerebelo son reguladas por diversas granuladas cabeza-como dependiente de 2 v&iacute;as.

&#x86CD;&#x5149; transgenes &#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x5236;&#x9650;&#x5F0F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x3068;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x6570;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x5168;&#x4F53;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x80DA;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x5E73;&#x9762;&#x86CD;&#x5149;&#x30C7;&#x30B8;&#x30BF;&#x30EB;&#x753B;&#x50CF;&#x304B;&#x3089;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x5909;&#x6570;&#x3092;&#x6D3E;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x5B9F;&#x969B;&#x306E;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x6570;&#x5024;&#x7BC4;&#x56F2; 50-400 &#x767D;&#x8840;&#x7403;/&#x80DA;&#x306B;&#x76F4;&#x7DDA;&#x7684;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x300C;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x5358;&#x4F4D;&#x300D;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x9AD8;&#x3044;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x7DDA;&#x5F62;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x5909;&#x66F4;&#x6B21;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x4ED5;&#x69D8;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x6570;&#x5B57;&#x3067;&#x5F97;&#x70B9;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x86CD;&#x5149;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x6570;&#x5024;&#x8A08;&#x7B97;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3002;

&#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC81C;&#xD55C; &#xC2DD; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD615;&#xAD11; transgenes &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC758; zebrafish &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xD615;&#xAD11; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC218;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD3C9;&#xBA74; &#xD615;&#xAD11; &#xB514;&#xC9C0;&#xD138; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xAD11; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840;&#xD558;&#xC5EC; &#xC591;&#xC801; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xC124;&#xBA85;. &quot;&#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xB2E8;&#xC704;&quot; &#xB77C;&#xB294; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAC12; &#xBC94;&#xC704; 50-400 &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C;/&#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xC81C; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xC120;&#xD615;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xB840; &#xD558;&#xBA70; &#xB192;&#xC740; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; &#xC120;&#xD615; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC6A9;&#xC131; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xC591; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC12D; &#xB3D9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC22B;&#xC790;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xC810;&#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D;&#xBA85; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD615;&#xAD11; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC22B;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0B0; &#xBD80; &#xB7C9;.

Transgeni fluorescenti con espressione ristretta dei leucociti sono stati essenziali per gli studi recenti, utilizzando modelli di zebrafish dell&#39;infiammazione e della risposta immunitaria innata. Molti degli esperimenti eseguiti utilizzando questi modelli coinvolgono quantificare i cambiamenti del numero di leucociti fluorescenti. Qui, descriviamo un tool per la derivazione di una variabile quantitativa e proporzionale ai numeri del leucocita fluorescente da singolo-aereo fluorescente immagini digitali di embrioni tutto dal vivo. Il parametro, chiamato &quot;Unit&agrave; del leucocita,&quot; fornisce valori affidabili linearmente proporzionali ai numeri effettivi dei leucociti nell&#39;intervallo 50-400 leucociti/embrione, e le sue prestazioni a pi&ugrave; alta densit&agrave; di leucocita rimane lineare. La sua utilit&agrave; &egrave; dimostrato segnando cambiamenti nei numeri del leucocita seguendo la perturbazione di una via specifica dei leucociti caratterizzato.

Computational quantificazione dei numeri del leucocita fluorescente in embrioni di zebrafish.

&#x4E0E;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9650;&#x5236;&#x8868;&#x8FBE;&#x8367;&#x5149;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DF2;&#x57FA;&#x672C;&#x4F7F;&#x7528;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x708E;&#x75C7;&#x548C;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x3002;&#x5F88;&#x591A;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6A21;&#x578B;&#x8FDB;&#x884C;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6D89;&#x53CA;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5DE5;&#x5177;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D3E;&#x751F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x53D8;&#x91CF;&#x4ECE;&#x5355;&#x5E73;&#x9762;&#x8367;&#x5149;&#x6570;&#x5B57;&#x56FE;&#x50CF;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x6D3B;&#x80DA;&#x80CE;&#x8367;&#x5149;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x76EE;&#x6210;&#x6B63;&#x6BD4;&#x3002;&#x53C2;&#x6570;&#xFF0C;&#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A;&quot;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5355;&#x4F4D;&#xFF0C;&quot;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x53EF;&#x9760;&#x503C;&#x7EBF;&#x6027;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x8303;&#x56F4; 50-400 &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x5728;&#x5B9E;&#x9645;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x76EE;&#x548C;&#x5176;&#x5728;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684;&#x6027;&#x80FD;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x540E;&#x9762;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x89C4;&#x8303;&#x901A;&#x8DEF;&#x6444;&#x52A8;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x5B57;&#x8BC4;&#x5206;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x8BC1;&#x660E;&#x5176;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x91CF;&#x5316;&#x3002;

Fluorescent transgenes with leukocyte-restricted expression have been essential to recent studies using zebrafish models of inflammation and the innate immune response. Many of the experiments performed using these models involve quantifying changes in the number of fluorescent leukocytes. Here, we describe a tool for deriving a quantitative variable proportional to fluorescent leukocyte numbers from single-plane fluorescent digital images of whole live embryos. The parameter, called "Leukocyte units," provides reliable values linearly proportional to actual leukocyte numbers in the range 50-400 leukocytes/embryo, and its performance at higher leukocyte densities remains linear. Its usefulness is demonstrated by scoring changes in leukocyte numbers following perturbation of a characterized leukocyte specification pathway.

Computational quantification of fluorescent leukocyte numbers in zebrafish embryos.

Transg&egrave;nes fluorescents avec expression restreinte leucocytes ont &eacute;t&eacute; essentiels aux r&eacute;centes &eacute;tudes utilisant des mod&egrave;les de poisson-z&egrave;bre de l&#39;inflammation et la r&eacute;ponse immunitaire inn&eacute;e. Bon nombre des exp&eacute;riences effectu&eacute;es &agrave; l&#39;aide de ces mod&egrave;les impliquent de quantifier les variations du nombre de leucocytes fluorescents. Nous d&eacute;crivons ici un outil pour d&eacute;river une variable quantitative proportionnelle au nombre de leucocytes fluorescent de seul plan des images num&eacute;riques fluorescents d&#39;embryons vivants ensemble. Le param&egrave;tre, appel&eacute; &laquo; Unit&eacute;s de leucocyte &raquo;, fournit des valeurs s&ucirc;res lin&eacute;airement proportionnelles aux nombres r&eacute;els leucocytes dans la gamme 50-400 leucocytes/embryon, et son efficacit&eacute; &agrave; des densit&eacute;s plus &eacute;lev&eacute;es de leucocytes reste lin&eacute;aire. Son utilit&eacute; est d&eacute;montr&eacute;e en marquant des changements en nombre de leucocytes apr&egrave;s la perturbation d&#39;une voie de sp&eacute;cification de leucocytes caract&eacute;ris&eacute;e.

Computational quantification du nombre de leucocytes fluorescent dans des embryons de poisson-z&egrave;bre.

Fluoreszierende transgene mit Leukozyten-eingeschr&auml;nkte Ausdruck wurden f&uuml;r neuere Studien mit Zebrafisch-Modelle der Entz&uuml;ndung und der angeborenen Immunantwort. Viele der Experimente mit diesen Modellen durchgef&uuml;hrt umfassen die Quantifizierung von Ver&auml;nderungen bei der Zahl der Leuchtstofflampen Leukocyten. Hier beschreiben wir ein Werkzeug f&uuml;r das Ableiten einer quantitativen Variablen proportional zu fluoreszierenden Leukozyten Zahlen vom Einzel-Flugzeug fluoreszierende Digitalbilder ganze Leben Embryonen. Der Parameter, genannt &quot;Leukozyten-Einheiten,&quot; liefert zuverl&auml;ssige Werte linear proportional zur tats&auml;chlichen Leukozyten Zahlen im Bereich 50-400 Leukozyten/Embryo und seine Leistung bei h&ouml;heren Leukozyten dichten bleibt linear. Seine N&uuml;tzlichkeit zeigt &Auml;nderungen in Leukozyten-Zahl nach St&ouml;rung der gekennzeichnete Leukozyten Spezifikation Weg erzielte.

Computational Quantifizierung der fluoreszierenden Leukozyten-Nummern in den Zebrafish Embryos.

Los transgenes fluorescentes con expresi&oacute;n restringida del leucocito han sido esenciales para estudios recientes utilizando modelos de pez cebra de la inflamaci&oacute;n y la respuesta inmunitaria innata. Muchos de los experimentos llevados a cabo usando estos modelos implican cuantificar los cambios en el n&uacute;mero de leucocitos fluorescentes. Aqu&iacute;, describimos una herramienta para derivar una variable cuantitativa proporcional a n&uacute;meros del leucocito fluorescente de solo-plano fluorescentes im&aacute;genes digitales de embriones todo vivos. El par&aacute;metro, denominado &quot;Unidades del leucocito,&quot; proporciona valores fiables linealmente proporcionales a n&uacute;meros reales del leucocito en el rango 50-400 leucocitos/embri&oacute;n, y su rendimiento con densidades superiores de leucocito sigue siendo lineal. Su utilidad se demuestra al anotar cambios en n&uacute;meros de leucocito despu&eacute;s de perturbaci&oacute;n de un camino de especificaci&oacute;n del leucocito caracterizado.

Cuantificaci&oacute;n computacional de n&uacute;meros del leucocito fluorescente en embriones de pez cebra.

Inflammation is an indispensable component of the immune response, and leukocytes provide the first line of defense against infection. Although the major stereotypic leukocyte behaviors in response to infection are well known, the complexities and idiosyncrasies of these phenotypes in conditions of disease are still emerging. Novel tools are indispensable for gaining insights into leukocyte behavior, and in the past decade, microfluidic technologies have emerged as an exciting development in the field. Microfluidic devices are readily customizable, provide tight control of experimental conditions, enable high precision of ex vivo measurements of individual as well as integrated leukocyte functions, and have facilitated the discovery of novel leukocyte phenotypes. Here, we review some of the most interesting insights resulting from the application of microfluidic approaches to the study of the inflammatory response. The aim is to encourage leukocyte biologists to integrate these new tools into increasingly more sophisticated experimental designs for probing complex leukocyte functions.

Felix Ellett

Australian Regenerative Medicine Institute

Monash University

Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens

Microstructured Devices for Optimized Microinjection and Imaging of Zebrafish Larvae