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Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry

Many investigations in neuroscience, as well as other disciplines, involve studying small, yet macroscopic pieces or sections of tissue that have been ...

Yonsei University College of Medicine, Severance Hospital

Harvard Medical School

&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D; (&#x51C0;&#x989D;)&#xFF0C;&#x5230;&#x7A81;&#x89E6;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x518D;&#x6444;&#x53D6;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x88AB;&#x9650;&#x5236;&#x4E3A; (NA) &#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x8868;&#x660E; 9.0 kb &#x4E0A;&#x6E38;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x5C45;&#x4F4F;&#x5728; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5185;&#x542B;&#x5B50;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x548C; NA &#x7279;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x77AC;&#x65F6;&#x8F6C;&#x67D3;&#x5316;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; 4.0 kb &#x7684; 5&#39; &#x4E0A;&#x6E38;&#x5E8F;&#x5217;&#x5305;&#x542B; NA &#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7684;&#x8DB3;&#x591F;&#x5411;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x4E09;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4EBA;&#x529B;&#x7F51; (hNET) &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#xFF1A; &#x5728;-4.0 &#x5230;-3.1 kb&#xFF0C;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x57DF;&#x7684;-133-75 &#x5230;&#x4E0A;&#x6E38;&#x589E;&#x5F3A;&#x533A;&#x57DF; bp &#x548C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57DF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4;&#x6D88;&#x58F0;&#x5668;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x6211;&#x7684;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x7684;&#x8DB3;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5728;-128 &#x5230;-80 &#x5B50;&#x57DF; bp &#x53D7;&#x4FDD;&#x62A4;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x591A;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x56E0;&#x5B50;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E0E;&#x8FD1;&#x4FA7;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x4E25;&#x683C;&#x89C4;&#x7BA1; hNET &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x5B50;&#x57DF;&#x4E2D;&#x9A7B;&#x7559;&#x7684; homeodomain (&#x9AD8;&#x6E05;)-&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6838;&#x5FC3;&#x4E3B;&#x9898;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x6E05;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; Phox2a &#x548C; HoxA5&#xFF0C;&#x5728; NA &#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;Cotransfection &#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x8BAE; HoxA5 &#x548C; Phox2a &#x53EF;&#x80FD;&#x6FC0;&#x6D3B; hNET &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x76F4;&#x63A5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA; &beta; &#x7F9F;&#x5316;&#x9176;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684; Phox2a/2b&#xFF0C;&#x672C;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x6A21;&#x578B; Phox2 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x80FD;&#x534F;&#x8C03;&#x901A;&#x8FC7;&#x6FC0;&#x6D3B; NA &#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x518D;&#x6444;&#x53D6;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x8282; NA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x578B;&#x89C4;&#x8303;&#x7684;&#x89C4;&#x5B9A;&#x3002;

&#x5305;&#x542B;&#x7A81;&#x53D8;&#x6838;&#x5FC3;&#x6BCD;&#x9898;&#x7684;&#x8FD1;&#x4FA7;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x4E0E;&#x591A;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; HoxA5 &#x548C; Phox2 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x65B9;&#x5F0F;&#x548C;&#x4E25;&#x683C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;

Expression of the norepinephrine transporter (NET), which mediates the reuptake of norepinephrine into presynaptic nerve terminals, is restricted to noradrenergic (NA) neurons. We have demonstrated previously that the 9.0 kb upstream sequences and the first intron residing in the 5' untranslated area are critical for high-level and NA cell-specific transcription. Here, using transient transfection assays, we show that 4.0 kb of the 5' upstream sequences contains sufficient genetic information to drive reporter gene expression in an NA cell type-specific manner. Three functional domains appear to be potentially important for the regulation of human NET (hNET) gene transcription: an upstream enhancer region at -4.0 to -3.1 kb, a proximal domain at -133 to -75 bp, and a middle silencer region between these two domains. DNase I footprinting analysis of the proximal promoter region shows that a subdomain at -128 to -80 bp is protected in a cell-specific manner. We provide evidence that multiple protein factors interact with the proximal promoter domain to critically regulate the transcriptional activity of the hNET gene. In the middle of this proximal subdomain resides a homeodomain (HD)-binding core motif, which interacts with HD factors, including Phox2a and HoxA5, in an NA-specific manner. Cotransfection analyses suggest that HoxA5 and Phox2a may transactivate the hNET gene promoter. Together with previous studies indicating direct activation of dopamine beta-hydroxylase transcription by Phox2a/2b, the present results support a model whereby Phox2 proteins may coordinately regulate the phenotypic specification of NA neurons by activating both NA biosynthetic and reuptake genes.

A proximal promoter domain containing a homeodomain-binding core motif interacts with multiple transcription factors, including HoxA5 and Phox2 proteins, and critically regulates cell type-specific transcription of the human norepinephrine transporter gene.

L&#39;expression du transporteur de la noradr&eacute;naline (NET), qui intervient dans la recapture de la noradr&eacute;naline dans les terminaisons nerveuses pr&eacute;synaptiques, est limit&eacute;e aux neurones noradr&eacute;nergiques (NA). Nous avons d&eacute;montr&eacute; pr&eacute;c&eacute;demment que les s&eacute;quences en amont de 9,0 Ko et le premier intron r&eacute;sidant dans la r&eacute;gion non traduite en 5&#39; sont critiques de haut niveau et transcription sp&eacute;cifique des cellules NA. Ici, des s&eacute;quences en amont &agrave; l&#39;aide d&#39;essais de transfection transitoire, nous montrons que Ko 4.0 de 5&#39; contient suffisamment d&#39;informations g&eacute;n&eacute;tique &agrave; l&#39;expression du g&egrave;ne rapporteur en voiture d&#39;une mani&egrave;re sp&eacute;cifique au type de NA cellulaire. Trois domaines fonctionnels semblent &ecirc;tre potentiellement importants pour la r&eacute;gulation de la transcription du g&egrave;ne humaine NET (hNET): une r&eacute;gion en amont enhancer &agrave; -4,0-3,1 Ko, un domaine proximal &agrave; -133 &agrave; -75 bp et une r&eacute;gion de silencieux interm&eacute;diaire entre ces deux domaines. DNase I analyse d&#39;empreinte de la r&eacute;gion promotrice proximale montre qu&#39;un sous-domaine de -128 &agrave; -80 bp est prot&eacute;g&eacute; de fa&ccedil;on sp&eacute;cifique des cellules. Nous d&eacute;montrons que plusieurs facteurs prot&eacute;iques interagissent avec le domaine promoteur proximal de critique de r&eacute;glementer l&#39;activit&eacute; transcriptionnelle du g&egrave;ne hNET. Au milieu de ce sous-domaine proximal r&eacute;side un hom&eacute;odomaine (HD)-motif de base obligatoire, qui interagit avec les facteurs de la HD, y compris Phox2a et HoxA5, de mani&egrave;re sp&eacute;cifique &agrave; la NA. Cotransfection analyses sugg&egrave;rent que les HoxA5 et Phox2a peuvent transactiver le promoteur du g&egrave;ne hNET. Ainsi que des &eacute;tudes ant&eacute;rieures indiquant l&#39;activation directe de la transcription de beta-hydroxylase de dopamine par Phox2a/2 b, les pr&eacute;sents r&eacute;sultats supportent un mod&egrave;le par lequel Phox2 prot&eacute;ines peuvent r&eacute;glementer coordonn&eacute;e de la sp&eacute;cification ph&eacute;notypique des neurones NA en activant la biosynth&egrave;se de NA et de g&egrave;nes du recaptage de la.

Un domaine de promoteur proximal contenant un motif de liaison hom&eacute;odomaine core interagit avec plusieurs facteurs de transcription, y compris les prot&eacute;ines HoxA5 et Phox2 et critique r&eacute;gule la transcription de sp&eacute;cifique au type de cellule du g&egrave;ne transporteur humain de la nor&eacute;pin&eacute;phrine.

Ein proximaler Promotor-Dom&#xE4;ne enth&#xE4;lt eine Homeodomain-bindenden Kernmotiv interagiert mit vielen Transkriptionsfaktoren, einschlie&#xDF;lich HoxA5 und Phox2 Proteine &#x200B;&#x200B;und kritisch reguliert Zelltyp-spezifische Transkription des menschlichen Noradrenalin-Transporter-Gens.

Espressione del trasportatore noradrenalina (NET), che media il reuptake della noradrenalina in terminali nervose presinaptiche, &egrave; limitato a noradrenergico neuroni (NA). Abbiamo dimostrato in precedenza che le sequenze di 9,0 kb a monte e il primo introne che risiedono nella zona 5&#39; non tradotta sono critici ad alto livello e NA cella specifica trascrizione. Qui, utilizzando dosaggi di trasfezione transiente, mostriamo che 4,0 kb di 5&#39; sequenze a Monte contiene sufficienti informazioni genetiche di espressione del gene reporter in auto in maniera specifica del tipo di cellula NA. Tre domini funzionali sembrano essere potenzialmente importanti per la regolazione della trascrizione del gene umano NET (hNET): una regione enhancer a monte a -4,0-3,1 KB, un dominio prossimale al-133 a -75 bp e una regione di silenziatore centrale tra questi due domini. Dnasi I analisi dell&#39;impronta della regione del promotore prossimale dimostra che un sottodominio a da -128 a -80 bp &egrave; protetto in un modo specifico delle cellule. Forniamo prove che pi&ugrave; proteine fattori interagiscono con il dominio promotore prossimale criticamente regolamentare l&#39;attivit&agrave; trascrizionale del gene hNET. Nel mezzo di questo sottodominio prossimale risiede un omeodominio (HD)-motif core binding, che interagisce con fattori HD, tra cui Phox2a e HoxA5, in un modo specifico del NA. Analisi Cotransfection suggeriscono che la HoxA5 e Phox2a possono transactivate il promotore del gene hNET. Insieme con gli studi precedenti che indicano l&#39;attivazione diretta della trascrizione di dopamina beta-idrossilasi da Phox2a/2b, i risultati attuali supportano un modello per cui le proteine Phox2 coordinately possono disciplinare la specifica fenotipica dei neuroni NA attivando sia NA biosintetico e geni del reuptake.

Un promotore prossimale dominio contenente un motivo homeodomain-associazione core interagisce con pi&ugrave; fattori di trascrizione, comprese le proteine HoxA5 e Phox2 e criticamente regola la trascrizione specifico tipo cellulare del gene trasportatore della noradrenalina umana.

&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7D42;&#x672B;&#x306B;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;, &#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;&#x7D14;&#x984D;&#xFF09; &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; &#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3; (NA) &#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x4EE5;&#x524D; 9.0 kb &#x4E0A;&#x6D41;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068; NA &#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x8EE2;&#x5199;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 4.0 kb &#x306E; 5&#39; &#x8868;&#x793A;&#x904E;&#x6E21;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4E0A;&#x6D41;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6; &#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x60C5;&#x5831;&#x306F; NA &#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3002;3 &#x3064;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8; (hNET) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;:-4.0-3.1 kb&#x3001;-133-75 &#x3078;&#x306E;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3001;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x5730;&#x57DF; bp&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x30DF;&#x30C9;&#x30EB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x5730;&#x57DF;&#x3002;DNase &#x79C1;&#x306F;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30D5;&#x30C3;&#x30C8; &#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;-80 &#x306B;-128 &#x3067;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; bp &#x304C;&#x30BB;&#x30EB;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x56E0;&#x5B50; hNET &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3053;&#x3068;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF; (HD) &#x3053;&#x306E;&#x771F;&#x3093;&#x4E2D;&#x306B;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;-Phox2a HoxA5 &#x306A;&#x3069;&#x3001;NA &#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3001;HD &#x8981;&#x56E0;&#x304C;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x7D50;&#x5408;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x3081;&#x308B;&#x306E;&#x89E3;&#x6790; HoxA5 &#x3068; Phox2a hNET &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C; transactivate &#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Phox2a/2b &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3; &beta;-&#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5148;&#x884C;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3089; whereby Phox2 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x30EA;&#x30BA;&#x30DF;&#x30AB;&#x30EB; NA &#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x518D;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; NA &#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x7D50;&#x5408;&#x30B3;&#x30A2; &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F; HoxA5 &#x3068; Phox2 &#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x8F38;&#x9001;&#x4F53;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Presynaptic &#xC2E0;&#xACBD; &#xB2E8;&#xB9D0;&#xAE30;&#xB85C; norepinephrine&#xC758; &#xC7AC;&#xD761;&#xC218;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xB178;&#xB974; &#xC804;&#xC1A1; (&#xC778;&#xD130;&#xB137;)&#xC758; &#xC2DD; noradrenergic (NA) &#xB274;&#xB7F0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; 9.0 kb &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; intron 5&#39; untranslated &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC8FC; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xACE0; NA &#xC140; &#xAD00;&#xB828; &#xC804;&#xC0AC;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; NA &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC720;&#xC804; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC1FC;&#xC758; 5&#39;&#xB294; 4.0 kb &#xACFC;&#xB3C4; transfection &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xADF8;&#xBB3C; (hNET) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;:-3.1 kb,-133-75&#xC5D0;&#xC5D0; &#xADFC; &#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744;-4.0&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC99D;&#xAC15; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xD608;&#xC555;, &#xBC0F; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAC04;&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xC18C;&#xC74C; &#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED;. DNase &#xB098; &#xADFC; &#xC704; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xD504;&#xB9B0;&#xD305; &#xBD84;&#xC11D;-80-128&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; bp &#xC140; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xD638; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC694;&#xC778; &#xBE44;&#xD310;&#xC801; transcriptional hNET &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xADFC; &#xC704; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xADFC; &#xC704; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC911;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; homeodomain (HD)-&#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD575;&#xC2EC; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504; &#xB098; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; phox2a&#xC640; HoxA5&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; HD &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294;. Cotransfection &#xBD84;&#xC11D; HoxA5 &#xBC0F; Phox2a hNET &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xB97C; transactivate &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Phox2a/2b&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xBCA0;&#xD0C0; hydroxylase &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Phox2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; NA&#xC640; &#xC7AC;&#xD761;&#xC218; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; NA &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; phenotypic &#xC0AC;&#xC591;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; coordinately &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Homeodomain &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD575;&#xC2EC; &#xC8FC;&#xC81C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xADFC; &#xC704; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; Hoxa5&#xC640; Phox2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; norepinephrine &#xC6B4;&#xC1A1;&#xC5C5; &#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Expresi&oacute;n del transportador de norepinefrina (NET), que media la recaptaci&oacute;n de norepinefrina en las terminales nerviosas presin&aacute;pticas, est&aacute; restringida a las neuronas noradren&eacute;rgicas del (NA). Hemos demostrado previamente que las secuencias de aguas arriba de 9.0 kb y el primer intr&oacute;n que residen en la zona no traducidas 5&#39; son cr&iacute;ticos de alto nivel y transcripci&oacute;n de c&eacute;lulas espec&iacute;ficas de NA. Aqu&iacute;, mediante ensayos de transfecci&oacute;n transitoria, mostramos 4.0 kb del 5&#39; secuencias aguas arriba contiene suficiente informaci&oacute;n gen&eacute;tica para la expresi&oacute;n de genes de reportero de unidad de manera NA celular tipo-espec&iacute;ficas. Tres dominios funcionales parecen ser potencialmente importante para la regulaci&oacute;n de la transcripci&oacute;n de genes de humano NET (hNET): una regi&oacute;n de aguas arriba potenciador en-4.0 a-3,1 kb, un dominio proximal en -133 a -75 bp y una regi&oacute;n de silenciador medio entre estos dos dominios. ADNasa I an&aacute;lisis de la huella de la regi&oacute;n promotora proximal muestra que un subdominio en -128 a -80 bp est&aacute; protegido de una manera espec&iacute;fica de la c&eacute;lula. Proporcionamos evidencia que m&uacute;ltiples factores proteicos interactuar&aacute;n con el dominio del promotor proximal cr&iacute;ticamente regular la actividad transcripcional del gen hNET. En medio de este subdominio proximal reside un homeodominio (HD)-motivo de n&uacute;cleo de enlace, que interact&uacute;a con factores de HD, incluyendo Phox2a y HoxA5, de una manera espec&iacute;fica NA. Cotransfection an&aacute;lisis sugieren que HoxA5 y Phox2a pueden transactivate el promotor del gen hNET. Junto con estudios anteriores indicando la activaci&oacute;n directa de transcripci&oacute;n de dopamina beta-hidroxilasa por Phox2a/2b, estos resultados apoyan un modelo por el que Phox2 prote&iacute;nas coordinadamente pueden regular la especificaci&oacute;n fenot&iacute;pica de las neuronas NA activando tanto NA biosint&eacute;tica y genes de recaptaci&oacute;n.

Un dominio de promotora proximal que contiene un motivo base vinculante homeodomain interact&uacute;a con m&uacute;ltiples factores de transcripci&oacute;n, incluyendo prote&iacute;nas HoxA5 y Phox2 y cr&iacute;ticamente regula la transcripci&oacute;n espec&iacute;ficos del tipo de c&eacute;lula del gene del transportador de norepinefrina humana.

&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x662F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x5BF9;&#x4E2D;&#x8111;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA; (DA) &#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4FEE;&#x6539;&#x9F20;&#x6807; (ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F38;&#x957F;&#x56E0;&#x7D20; 1alpha &#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#x6839;&#x636E;&#x4E00;&#x8868;&#x793A;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1&#x3002;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0A;&#x8C03;&#x6240;&#x6709; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6807;&#x8BB0;&#x8FDB;&#x884C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5BF9; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x5728; 4 &#x5230; 5 &#x500D;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4ED6;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x5747;&#x65E0;&#x663E;&#x8457;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x8868;&#x8FBE;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E5F;&#x6709;&#x4EBA;&#x662F;&#x5E74;&#x5229;&#x589E;&#x52A0; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x8868;&#x8FBE;&#x514B;&#x9686;&#x540E; Shh FGF8&#x3001; &#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x4EBA;&#x6570;&#x3002;&#x51E0;&#x4E2A;&#x884C;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x8111; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x578B; &#xFF1B;&#x9996;&#x5148;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC; coexpress &#x8111; DA &#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x5982;&#x82B3;&#x9999; L &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x9178;&#x8131;&#x7FA7;&#x9176;&#x3001; &#x9499;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6B64;&#x5916;&#x5230;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7F9F;&#x5316;&#x9176;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x505A; coexpress &#x5176;&#x4ED6;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28; GABA &#x6216;&#x8840;&#x6E05;&#x7D20;&#x7B49;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x8F6C;&#x5BFC;&#x589E;&#x5F3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E76;&#x91CA;&#x653E; DA &#x819C;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x9AD8;&#x6548;&#x57FA;&#x56E0;&#x64CD;&#x7EB5;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5411;&#x8111; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6846;&#x67B6;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5176;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x3002;

&#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x4E3A;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;

Nurr1 is a transcription factor critical for the development of midbrain dopaminergic (DA) neurons. This study modified mouse embryonic stem (ES) cells to constitutively express Nurr1 under the elongation factor-1alpha promoter. The Nurr1-expression in ES cells lead to up-regulation of all DA neuronal markers tested, resulting in about a 4- to 5-fold increase in the proportion of DA neurons. In contrast, other neuronal and glial markers were not significantly changed by Nurr1 expression. It was also observed that there was an additional 4-fold increase in the number of DA neurons in Nurr1-expressing clones following treatment with Shh, FGF8 and ascorbic acid. Several lines of evidence suggest that these neurons may represent midbrain DA neuronal phenotypes; firstly, they coexpress midbrain DA markers such as aromatic L-amino acid decarboxylase, calretinin, and dopamine transporter, in addition to tyrosine hydroxylase and secondly, they do not coexpress other neurotransmitters such as GABA or serotonin. Finally, consistent with an increased number of DA neurons, the Nurr1 transduction enhanced the ability of these neurons to produce and release DA in response to membrane depolarization. This study demonstrates an efficient genetic manipulation of ES cells that facilitates differentiation to midbrain DA neurons, and it will serve as a framework of genetic engineering of ES cells by key transcription factor to regulate their cell fate.

Genetic engineering of mouse embryonic stem cells by Nurr1 enhances differentiation and maturation into dopaminergic neurons.

Nurr1 est un facteur de transcription essentiel pour le d&#xE9;veloppement de m&#xE9;senc&#xE9;phale dopaminergiques (DA) des neurones. Cette &#xE9;tude de souris modifi&#xE9;es souches embryonnaires (ES) cellules expriment constitutivement Nurr1 sous le facteur d &#x26;#39;&#xE9;longation-1alpha promoteur. Le Nurr1-expression dans des cellules ES conduire &#xE0; une r&#xE9;gulation positive de tous les marqueurs DA neuronales test&#xE9;es, ce qui entra&#xEE;ne au bout d&#x26;#39;un 4 - &#xE0; 5 fois augmentation de la proportion des neurones dopaminergiques. En revanche, d&#x26;#39;autres marqueurs neuronales et gliales n&#x26;#39;&#xE9;taient pas significativement modifi&#xE9;s par Nurr1 expression. Il a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9; qu&#x26;#39;il y avait un suppl&#xE9;ment de 4 fois l&#x26;#39;augmentation du nombre de neurones dopaminergiques dans Nurr1 exprimant clones apr&#xE8;s un traitement avec Shh, FGF8 et l&#x26;#39;acide ascorbique. Plusieurs &#xE9;l&#xE9;ments de preuve donnent &#xE0; penser que ces neurones peuvent repr&#xE9;senter m&#xE9;senc&#xE9;phale ph&#xE9;notypes neuronaux DA: premi&#xE8;rement, ils coexpress m&#xE9;senc&#xE9;phale marqueurs DA tels que l&#x26;#39;acide d&#xE9;carboxylase amin&#xE9; L aromatique, calr&#xE9;tinine, et transporteur de la dopamine, en plus de la tyrosine hydroxylase et d&#x26;#39;autre part, ils n&#x26;#39;ont pas d&#x26;#39;autres coexpress neurotransmetteurs comme la s&#xE9;rotonine ou GABA. Enfin, conform&#xE9;ment &#xE0; une augmentation du nombre des neurones dopaminergiques, la transduction Nurr1 am&#xE9;lior&#xE9; la capacit&#xE9; de ces neurones &#xE0; produire et &#xE0; lib&#xE9;rer DA en r&#xE9;ponse &#xE0; une d&#xE9;polarisation membranaire. Cette &#xE9;tude d&#xE9;montre une manipulation efficace g&#xE9;n&#xE9;tique des cellules ES qui facilite la diff&#xE9;renciation de neurones dopaminergiques du m&#xE9;senc&#xE9;phale, et il servira de cadre de l&#x26;#39;ing&#xE9;nierie g&#xE9;n&#xE9;tique des cellules ES par le facteur de transcription cl&#xE9; pour r&#xE9;guler leur destin cellulaire.

Le g&#xE9;nie g&#xE9;n&#xE9;tique des cellules souches embryonnaires de souris par Nurr1 am&#xE9;liore la diff&#xE9;renciation et la maturation en neurones dopaminergiques

Gentechnische Ver&#xE4;nderung von embryonalen Stammzellen der Maus durch Nurr1 verbessert die Differenzierung und Reifung in dopaminergen Neuronen.

&#x4EE5;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E3A;&#x76EE;&#x7684;&#x5230;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x9700;&#x8981;&#x7ED3;&#x5408;&#x57FA;&#x56E0;&#x64CD;&#x7EB5;&#x548C;&#x9002;&#x5F53;&#x5206;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA; (DA) &#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8D85;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x548C;&#x9526;&#x7EB6; 6 &#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x540C;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE; (N2 &#x548C; N5) &#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; &#xFF08;&#x7EA6;&#x4E24;&#x500D;&#xFF09; &#x7684;&#x6570;&#x5B57;&#x6BD4;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (D3) &#x5929;&#x771F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;N2 N5 &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5305;&#x542B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x660E;&#x663E;&#x8F83;&#x9AD8; &#xFF08;&gt; 50%) &#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7F9F;&#x5316;&#x9176; (TH) + D3 &#x6BD4;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; (&lt; 30%) &#x548C;&#x751A;&#x81F3;&#x66F4;&#x5927;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7684; TH + &#x795E;&#x7ECF;&#x5143; (&#x7EA6; 90%) &#x65F6;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x97F3;&#x901F;&#x523A;&#x732C;&#x3001; &#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; 8&#x3001;&#x3001; &#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;N2 N5 &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x793A;&#x66F4;&#x9AD8;&#x5C42;&#x6B21;&#x7684; DA &#x6807;&#x8BB0; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;TH&#x3001; &#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x4F53;&#x3001; &#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x8131;&#x7FA7;&#x9176;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x7684;&#x5185;&#x5411;&#x6574;&#x6D41; K + &#x901A;&#x9053; 2 G) &#x4EA7;&#x751F;&#x548C;&#x91CA;&#x653E;&#x8F83;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4; D3 &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x751F;&#x6210;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5C55;&#x793A;&#x7279;&#x8272;&#x7684;&#x8111; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x79FB;&#x690D;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x663E;&#x793A;&#x6709;&#x6548;&#x4F53;&#x5185;&#x96C6;&#x6210;/&#x4EE3; TH + &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x540E;&#x690D;&#x5165;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x57FA;&#x56E0; manipulation(s) &#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53EF;&#x9760;&#x548C;&#x6709;&#x6548;&#x7684; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x53EF;&#x80FD;&#x94FA;&#x5E73;&#x672A;&#x6765;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x3002;

&#x95F4;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3001; &#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x5B50; 1&#xFF0C;&#x5E76;&#x534F;&#x540C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;

To induce differentiation of embryonic stem cells (ESCs) into specialized cell types for therapeutic purposes, it may be desirable to combine genetic manipulation and appropriate differentiation signals. We studied the induction of dopaminergic (DA) neurons from mouse ESCs by overexpressing the transcription factor Nurr1 and coculturing with PA6 stromal cells. Nurr1-expressing ESCs (N2 and N5) differentiated into a higher number of neurons (approximately twofold) than the naÃ¯ve ESCs (D3). In addition, N2/N5-derived cells contained a significantly higher proportion (>50%) of tyrosine hydroxylase (TH)+ neurons than D3 (<30%) and an even greater proportion of TH+ neurons (approximately 90%) when treated with the signaling molecules sonic hedgehog, fibroblast growth factor 8, and ascorbic acid. N2/N5-derived cells express much higher levels of DA markers (e.g., TH, dopamine transporter, aromatic amino acid decarboxylase, and G protein-regulated inwardly rectifying K+ channel 2) and produce and release a higher level of dopamine, compared with D3-derived cells. Furthermore, the majority of generated neurons exhibited electrophysiological properties characteristic of midbrain DA neurons. Finally, transplantation experiments showed efficient in vivo integration/generation of TH+ neurons after implantation into mouse striatum. Taken together, our results show that the combination of genetic manipulation(s) and in vitro cell differentiation conditions offers a reliable and effective induction of DA neurons from ESCs and may pave the way for future cell transplantation therapy in Parkinson's disease.

Stromal cell-derived inducing activity, Nurr1, and signaling molecules synergistically induce dopaminergic neurons from mouse embryonic stem cells.

Pour induire la diff&eacute;renciation de cellules souches embryonnaires (CSE) dans les types de cellules sp&eacute;cialis&eacute;es &agrave; des fins th&eacute;rapeutiques, il peut &ecirc;tre souhaitable de combiner des manipulations g&eacute;n&eacute;tiques et des signaux de diff&eacute;renciation appropri&eacute;e. Nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;induction des neurones dopaminergiques (DA) de souris ESCs en surexprimant le facteur de transcription Nurr1 et coculturing avec les cellules stromales PA6. Nurr1 exprimant les ces (N2 et N5) se diff&eacute;rencient en un nombre plus &eacute;lev&eacute; de neurones (environ deux fois) que les na&iuml;fs ESCs (D3). Cellules d&eacute;riv&eacute;es N2/N5 contenaient en outre une proportion significativement plus &eacute;lev&eacute;e (&gt; 50 %) de la tyrosine hydroxylase (TH) + neurones que D3 (&lt; 30 %) et une proportion encore plus grande des neurones TH + (environ 90 %) avec la signalisation h&eacute;risson sonique de mol&eacute;cules, facteur de croissance fibroblastique 8 et acide ascorbique. N2/N5-d&eacute;riv&eacute;s des cellules expriment des niveaux beaucoup plus &eacute;lev&eacute;s de marqueurs de la DA (p. ex., TH, transporteur de la dopamine, d&eacute;carboxylase d&#39;acide amin&eacute; aromatique et G prot&eacute;ine r&eacute;gul&eacute;e vers l&#39;int&eacute;rieur le canal K + 2) et produisent et lib&eacute;rer un niveau plus &eacute;lev&eacute; de la dopamine, compar&eacute;e aux cellules d&eacute;riv&eacute;es de D3. En outre, la majorit&eacute; des neurones g&eacute;n&eacute;r&eacute;s expose les propri&eacute;t&eacute;s &eacute;lectrophysiologiques caract&eacute;ristiques des neurones dopaminergiques m&eacute;senc&eacute;phale. Enfin, des exp&eacute;riences de transplantation a montr&eacute; efficace in vivo int&eacute;gration/g&eacute;n&eacute;ration de neurones TH + apr&egrave;s l&#39;implantation striatum de souris. Pris ensemble, nos r&eacute;sultats montrent que la combinaison de la g&eacute;n&eacute;tique manipulation(s) et conditions de la diff&eacute;renciation cellulaire in vitro offre une induction fiable et efficace des neurones dopaminergiques de ESCs et peut ouvrir la voie &agrave; la th&eacute;rapie transplantation cellulaire future dans la maladie de Parkinson.

L&#39;activit&eacute; induisant DERIVES de cellules stromale, Nurr1 et mol&eacute;cules de signalisation en synergie induisent des neurones dopaminergiques de cellules souches embryonnaires de souris.

Stromal cell-derived induzierende Aktivit&#xE4;t, Nurr1, und Signalmolek&#xFC;len synergistisch zu induzieren dopaminergen Neuronen aus embryonalen Stammzellen.

Per indurre la differenziazione delle cellule staminali embrionali (CES) in tipi di cellule specializzate per scopi terapeutici, pu&ograve; essere desiderabile per combinare la manipolazione genetica e differenziazione appropriati segnali. Abbiamo studiato l&#39;induzione di Neuroni dopaminergici (DA) dal mouse CES con sovraesprimono relativa del fattore di trascrizione Nurr1 e coculturing con cellule stromali PA6. CES esprimendo Nurr1 (N2 e N5) differenziato in un numero maggiore di neuroni (circa il doppio) rispetto l&#39;ingenuo CES (D3). Inoltre, N2/N5-derivate le cellule contenevano una percentuale significativamente pi&ugrave; elevata (&amp;gt; 50%) di tirosina idrossilasi (TH) + i neuroni di D3 (&lt; 30%) e una percentuale ancora maggiore di TH + neuroni (circa 90%) quando trattati con la segnalazione sonic hedgehog di molecole, fattore di crescita dei fibroblasti 8 e acido ascorbico. N2/N5-derivate le cellule esprimono livelli molto pi&ugrave; elevati di DA marcatori (ad es., TH, trasportatore della dopamina, decarbossilasi degli aminoacidi aromatici e G proteina-regolato interiormente che rettifica il canale K + 2) e producono e rilasciare un alto livello di dopamina, confrontato con le cellule derivate da D3. Inoltre, la maggior parte dei neuroni generati esposte propriet&agrave; elettrofisiologiche caratteristico dei neuroni DA mesencefalo. Infine, gli esperimenti di trapianto ha mostrato efficiente integrazione di in vivo a generazione di TH + neuroni dopo l&#39;impianto in striatum del mouse. Presi insieme, i nostri risultati mostrano che la combinazione di manipulation(s) genetica e le condizioni di differenziazione delle cellule in vitro offre un&#39;affidabile ed efficacia induzione DA neuroni dalla CES e pu&ograve; spianare la strada per la terapia di trapianto cellulare futuro nella malattia di Parkinson.

Stromale attivit&agrave; indurre cellule derivate, Nurr1 e molecole di segnalazione sinergicamente indurre dopaminergico neuroni da cellule staminali embrionali di topo.

&#x6CBB;&#x7642;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5C02;&#x9580;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;Esc&#xFF09; &#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3068;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x306F;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x3044;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; Nurr1 &#x3092;&#x904E;&#x5270;&#x3068; PA6 &#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Es &#x304B;&#x3089;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3; (DA) &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Nurr1 &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; Esc (N2 &#x3068; N5) &#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6; Esc (D3) &#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x756A;&#x53F7;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; (&#x7D04; 2 &#x500D;&#xFF09; &#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;N2/N5 &#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x5272;&#x5408;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B; &#xFF08;&#x76EE; 50%) &#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; (TH) + D3 &#x3088;&#x308A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E; (&lt; 30%) &#x3068; TH + &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; &#xFF08;&#x7D04; 90 &#xFF05;&#xFF09; &#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x304C;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5206;&#x5B50;&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;, &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 8 &#x3068;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x3067;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3002;N2/N5 &#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE; DA &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; (&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;TH&#x3001;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;, &#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x8131;&#x70AD;&#x9178;&#x9175;&#x7D20;&#x3068; G &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316; K + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; 2 &#x5185;&#x5411;&#x304D;&#x6574;&#x6D41;&#x6027;&#xFF09; &#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x88FD;&#x4F5C;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3; D3 &#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x306F;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x4E2D;&#x8133; DA &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7DDA;&#x6761;&#x4F53;&#x6CE8;&#x5165;&#x5F8C;&#x756A;&#x76EE; + &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x7D71;&#x5408;/&#x751F;&#x6210;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684; manipulation(s) &#x3068; in vitro &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x304C; DA &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x3068;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E; Esc &#x304B;&#x3089;&#x3054;&#x5229;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3060;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x7642;&#x6CD5;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x306E;&#x9053;&#x3092;&#x958B;&#x304F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;Nurr1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x76F8;&#x4E57;&#x7684;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5206;&#x5B50;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xCE58;&#xB8CC; &#xBAA9;&#xC801;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD2B9;&#xC218; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (ESCs)&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; &#xBC0F; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBD84;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1;&#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Nurr1 overexpressing &#xBC0F; PA6 stromal &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; coculturing&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Escs&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; dopaminergic (&#xB2E4;) &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. ESCs Nurr1 &#xD45C;&#xD604; (n 2&#xC640; N5) &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; ESCs (D3) &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xAC00; &#xB274;&#xB7F0; (&#xC57D; 2 &#xC911;)&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xBD84;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. N2/N5 &#xD30C;&#xC0DD; &#xC140; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB610;&#xD55C;, (&amp;gt; 50%) &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; hydroxylase (TH) + D3 &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xACBD; (&lt; 30%)&#xACFC; &#xC77C; + &#xB274;&#xB7F0; (&#xC57D; 90%)&#xC758; &#xB354; &#xD070; &#xBE44;&#xC728; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790; &#xC18C;&#xB2C9; &#xD5E4; &#xC9C0; &#xD638; &#xADF8;, &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 8, ascorbic &#xC0B0; &#xC131; &#xCE58;&#xB8CC;. N2/N5 &#xD30C;&#xC0DD; &#xC140; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB2E4; &#xB9C8;&#xCEE4; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, TH, &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xC218;&#xC1A1;, &#xBC29;&#xD5A5;&#xC871; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; decarboxylase &#xBC0F; G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADDC;&#xC81C; &#xC18D;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xB958; K + &#xCC44;&#xB110; 2) &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; D3 &#xC720;&#xB798; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; electrophysiological &#xC18D;&#xC131; midbrain DA &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xC2DD; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; &#xC77C; + &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD1B5;&#xD569;/&#xC138;&#xB300;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; manipulation(s) &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC870;&#xAC74; &#xC870;&#xD569; Escs&#xC5D0;&#xC11C; DA &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xB3C4; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC2DD; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Stromal &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xB3D9;, Nurr1, &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790; synergistically &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;.

Para inducir la diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre embrionarias (CES) en tipos de c&eacute;lulas especializadas con fines terap&eacute;uticos, puede ser deseable combinar se&ntilde;ales de diferenciaci&oacute;n apropiada y manipulaci&oacute;n gen&eacute;tica. Estudiamos la inducci&oacute;n de las neuronas dopamin&eacute;rgicas (DA) de rat&oacute;n ESCs overexpressing el factor de transcripci&oacute;n Nurr1 y cocultivo con c&eacute;lulas estromales PA6. CES Nurr1-expresar (N2 y N5) diferenciado en un mayor n&uacute;mero de neuronas (aproximadamente el doble) que la ingenua CES (D3). Adem&aacute;s, N2/N5-producidas por c&eacute;lulas conten&iacute;an una proporci&oacute;n significativamente mayor (&gt; 50%) de la tirosina hidroxilasa (TH) + neuronas que D3 (&lt; 30%) y una proporci&oacute;n a&uacute;n mayor de TH + neuronas (aproximadamente 90%) cuando se tratan con la se&ntilde;alizaci&oacute;n sonic hedgehog de mol&eacute;culas, factor de crecimiento fibrobl&aacute;stico 8 y &aacute;cido asc&oacute;rbico. N2/N5-producidas por c&eacute;lulas expresan mucho mayores niveles de marcadores de DA (por ejemplo, TH, transportador de dopamina, amino&aacute;cido arom&aacute;tico descarboxilasa y G prote&iacute;na-regulado internamente rectifica el canal K + 2) y producen y liberan un mayor nivel de dopamina, en comparaci&oacute;n con las c&eacute;lulas derivadas de D3. Adem&aacute;s, la mayor&iacute;a de las neuronas generadas exhibe propiedades electrofisiol&oacute;gicas caracter&iacute;sticos de las neuronas DA de mesenc&eacute;falo. Finalmente, experimentos de trasplante mostraron eficiente integraci&oacute;n en vivo/generaci&oacute;n de TH + neuronas despu&eacute;s de la implantaci&oacute;n en rat&oacute;n estriado. Tomados en conjunto, nuestros resultados muestran que la combinaci&oacute;n de manipulation(s) gen&eacute;tica y las condiciones de diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas in vitro ofrece una inducci&oacute;n confiable y eficaz de las neuronas DA de CES y puede allanar el camino para la terapia de trasplante celular futuro en la enfermedad de Parkinson.

Actividad inductora derivados de c&eacute;lulas estromal, Nurr1 y mol&eacute;culas se&ntilde;alizadoras sin&eacute;rgicamente inducen las neuronas dopamin&eacute;rgicas de c&eacute;lulas madre embrionarias de rat&oacute;n.

&#x7845;&#x662F;&#x5730;&#x7403;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6700;&#x4E30;&#x5BCC;&#x5143;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5DF2;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5B83;&#x5728;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x6297;&#x75C5;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x81F3;&#x4E8E;&#x7845;&#x636E;&#x8BF4;&#x52A0;&#x5F3A;&#x53CD;&#x6E17;&#x900F;&#x548C;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;&#x6C34;&#x7A3B;&#x53F6;&#x7247;&#x7684;&#x7845;&#x6CBB;&#x7597;&#x690D;&#x7269;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x516B;&#x548C;&#x5341;&#x4E8C;&#x53F6;&#x751F;&#x957F;&#x9636;&#x6BB5; 29Si &#x56FA;&#x6001;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5149;&#x8C31;&#x5B9A;&#x6027;&#x7845;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6CD5;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x8425;&#x517B;&#x5F3A;&#x5316;&#x5927;&#x7C73;&#x7684;&#x53F6;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x51FA;&#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x5BF9;&#x4ED8;&#x75C5;&#x83CC;&#x653B;&#x51FB;&#x3002;

&#x56FA;&#x6001;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5149;&#x8C31;&#x5B66;&#x7845;&#x6CBB;&#x7597;&#x7A3B;&#x761F;&#x75C5;&#x62B5;&#x6297;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x3002;

Silicon is the second-most abundant element on the surface of the earth, and has been considered important for plant growth and development. As for its role in enhanced plant disease resistance, silicon has been reported to reinforce the physical barrier against the penetration and colonization of pathogens. Rice leaves of silicon-treated plants and control plants at the eight- and twelve-leaf growth stages were analyzed by 29Si solid-state nuclear magnetic resonance spectroscopy to characterize the silicon-induced, cell wall fortification of rice leaves, which demonstrated an ability to counter a pathogen attack.

Solid-state NMR spectroscopy of silicon-treated rice with enhanced host resistance against blast.

Le silicium est l&#39;&eacute;l&eacute;ment le plus abondant sur la surface de la terre et a &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute; comme important pour la croissance et le d&eacute;veloppement. En ce qui concerne son r&ocirc;le dans la r&eacute;sistance aux maladies v&eacute;g&eacute;tales am&eacute;lior&eacute;es, silicium a &eacute;t&eacute; signal&eacute; &agrave; renforcer la barri&egrave;re physique contre la p&eacute;n&eacute;tration et la colonisation des agents pathog&egrave;nes. Riz feuilles de plantes silicon&eacute; et plantes t&eacute;moins aux stades de la croissance de huit - et douze feuilles ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es par spectroscopie RMN &agrave; l&#39;&eacute;tat solide 29Si pour caract&eacute;riser le silicium induite, feuilles de fortification de la paroi cellulaire de riz, qui a d&eacute;montr&eacute; une capacit&eacute; &agrave; contrer une attaque de l&#39;agent pathog&egrave;ne.

Spectroscopie RMN semi-conductrice de riz silicon&eacute; avec r&eacute;sistance de l&#39;h&ocirc;te am&eacute;lior&eacute; contre l&#39;explosion.

Silizium ist die Sekunde-am meisten vorkommende Element auf der Oberfl&auml;che der Erde und wurde als wichtig f&uuml;r Wachstum und Entwicklung. F&uuml;r seine Rolle in erweiterte Anlage Krankheitsresistenz hat Silizium berichtet, die physische Barriere gegen das Eindringen und die Kolonisation von Krankheitserregern zu verst&auml;rken. Reis verl&auml;sst der Silizium-behandelten Pflanzen und Kontrolle Pflanzen zu den acht zw&ouml;lf-Blatt-Entwicklungsstadien von 29Si Solid-State KERNRESONANZSPEKTROSKOPIE charakterisieren die Silizium-induzierte analysiert wurden, Zellwand Anreicherung von Reis l&auml;sst, demonstrierte die ihre um einen Pathogen-Angriff zu begegnen.

Festk&ouml;rper-NMR-Spektroskopie von Silizium-behandelten Reis mit erweiterten Host Widerstand gegen Explosion.

Il silicio &egrave; il secondo elemento abbondante sulla superficie della terra ed &egrave; stato considerato importante per la crescita delle piante e lo sviluppo. Per quanto riguarda il suo ruolo nella resistenza di malattia avanzata pianta, silicio &egrave; stato segnalato per rafforzare la barriera fisica contro la penetrazione e colonizzazione di agenti patogeni. Riso foglie delle piante trattate con silicone e piante di controllo nelle fasi di crescita di otto e dodici foglie sono stati analizzati mediante spettroscopia a stato solido risonanza magnetica nucleare 29Si per caratterizzare il silicio-indotta, fortificazione della parete cellulare di riso foglie, che hanno dimostrato la capacit&agrave; di contrastare un attacco patogeno.

Spettroscopia NMR allo stato solido di riso trattato al silicone con resistenza enhanced host contro blast.

&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306F;&#x5730;&#x7403;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306E; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x5BB3;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x88DC;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7C73;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x51E6;&#x7406;&#x500B;&#x4F53;&#x306E;&#x8449;&#x3001;8 &#x3068; 12 &#x306E;&#x8449;&#x306E;&#x751F;&#x80B2;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x690D;&#x7269;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x8A98;&#x8D77;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B; 29 si-nmr &#x56FA;&#x4F53;&#x6838;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x8981;&#x585E;&#x6C34;&#x7A32;&#x306E;&#x8449;, &#x304C;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x653B;&#x6483;&#x306B;&#x5BFE;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x56FA;&#x4F53; NMR &#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x51E6;&#x7406;&#x7A32;&#x3044;&#x3082;&#x3061;&#x75C5;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62E1;&#x5F35;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x62B5;&#x6297;&#x3068;&#x306E;&#x3002;

&#xC2E4;&#xB9AC;&#xCF58;, &#xC9C0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8;&#xB85C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC6D0;&#xC18C; &#xC774;&#xBA70;, &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xC2E4;&#xB9AC;&#xCF58; &#xCE68;&#xD22C;&#xC640; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xBC29; &#xBCBD;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC300; &#xC2E4;&#xB9AC;&#xCF58; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC78E; 8 &#xBC0F; 12 &#xC78E; &#xC131;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2DD;&#xBB3C; 29Si &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xD575; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; &#xC2E4;&#xB9AC;&#xCF58; &#xC720;&#xB3C4; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;, &#xC300;&#xC758; &#xC140; &#xBCBD; &#xC694;&#xC0C8; &#xB098;&#xBB47;&#xC78E;, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xACF5;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xD3ED;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC800;&#xD56D; &#xC2E4;&#xB9AC;&#xCF58; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC300;&#xC758; &#xACE0;&#xCCB4; NMR &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;

Silicio es el elemento de segundo m&aacute;s abundante en la superficie de la tierra y se ha considerado importante para el desarrollo y crecimiento de las plantas. En cuanto a su papel en la resistencia de la enfermedad de planta mejorada, silicio se ha divulgado para reforzar la barrera f&iacute;sica contra la penetraci&oacute;n y colonizaci&oacute;n de pat&oacute;genos. Hojas de arroz de las plantas tratadas con silicio y plantas de control en las etapas de crecimiento de ocho y doce hojas fueron analizadas por espectroscopia de estado s&oacute;lido resonancia magn&eacute;tica 29Si para caracterizar el silicio-inducida, hojas de fortificaci&oacute;n de la pared celular de arroz, que ha demostrado una capacidad para contrarrestar un ataque de pat&oacute;genos.

Estado s&oacute;lida espectroscopia RMN de arroz tratado con silicona con resistencia mejorada anfitri&oacute;n contra explosi&oacute;n.

This study was conducted to evaluate prognostic factors and cancer-specific survival (CSS) in a cohort of 41 patients with urachal carcinoma by use of a Bayesian model-averaging approach.

Prognostic factors for urachal cancer: a bayesian model-averaging approach.

Most intraoperative provocative tests previously reported were performed after mesh adjustment to confirm the absence of urine leakage. Instead, our test was performed before adjustment of the mesh to control the tape tension after observing the pattern of the urine leakage. We studied whether this method had an effect on the success rate of transobturator tape (TOT) procedures. A total of 96 patients were included: 47 patients underwent TOT procedures without intraoperative testing (Group I) and 49 patients underwent TOT procedures with testing (Group II). Bladder filling was performed with at least 300 ml of normal saline during the test. After observing the pattern of the urine leakage before adjustment of the mesh by coughing or manual pressure on the suprapubic area, we controlled the mesh tension. In Group I, which did not undergo the intraoperative test, the Valsalva leak-point pressure, cough leak-point pressure, preoperative and postoperative peak flow velocity (Qmax), and postvoiding residual urine (PVR) were 86.46 cmH2O, 101.91 cmH2O, 20.82 ml/s, 22.74 ml/s, 19.77 ml, and 45.98 ml, respectively. Changes in the postoperative and preoperative Qmax and PVR were 1.92 ml/s and 26.21 ml, respectively. In Group II, in which the test was applied, the corresponding results were 85.50 cmH2O, 100.45 cmH2O, 25.60 ml/s, 26.90 ml/s, 17.16 ml, and 29.67 ml, respectively. Changes in the postoperative and preoperative Qmax and PVR were 1.3 ml/s and 12.51 ml, respectively. The two groups showed no significant differences in any of the variables. In Group I, the cure and improvement rates were 70.2% and 27.7%, respectively. In Group II, the rates were 91.8% and 8.2%, respectively. Group II had a significantly higher success rate than Group I (p value= 0.011). In the univariable logistic regression analysis, Group II exhibited a higher odds ratio (4.771) than Group I in terms of cure rate, and Group II had a higher success rate than Group I (p value=0.011). In the multivariable logistic regression analysis, Group II exhibited a higher odds ratio (4.700) than Group I in terms of cure rate under calculation of the variables (namely, age, hypertension, preoperative Qmax, and PVR), and the cure rate of Group II was verified to be significantly higher than that of Group I (p value=0.019). We suggest that our test is an effective method to confirm whether adequate tension is being applied to the tape. Our method presents some advantages in that surgeons can control and adjust the tension of the mesh after observing the degree and pattern of the urine leakage.

Jae-Joon Park

Department of Medicine

Yonsei University College of Medicine, Severance Hospital

Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry