JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

ويشمل هذا البروتوكول التصاميم والبرمجيات اللازمة لرفع مستوى أداة التجسيمي موجود إلى الروبوتية (الرقمية الكمبيوتر التي تسيطر عليها؛ CNC) أداة التجسيمي لحوالي 1،000 دولار (باستثناء الحفر).

Abstract

ويشمل هذا البروتوكول التصاميم والبرمجيات اللازمة لرفع مستوى أداة التجسيمي موجود إلى الروبوتية (CNC) أداة التجسيمي لحوالي 1،000 دولار (باستثناء الحفر)، وذلك باستخدام صناعة المحركات السائر القياسية وCNC البرمجيات السيطرة. كل محور لديها سيطرة على سرعة متغير، ويمكن تشغيلها في وقت واحد أو بشكل مستقل. المرونة الروبوت ونظام الترميز المفتوحة (ز رمز) جعلها قادرة على أداء المهام المخصصة التي غير معتمدة من قبل الأنظمة التجارية. وتشمل تطبيقاتها، ولكن ليس على سبيل الحصر، حفر ثقوب، والحافة الحادة craniotomies، والجمجمة رقيق، وخفض أقطاب أو قنية. من أجل الإسراع في كتابة ز الترميز لعملية جراحية بسيطة، وضعنا البرامج النصية المخصصة التي تسمح للأفراد لتصميم عملية جراحية بدون معرفة البرمجة. ومع ذلك، بالنسبة للمستخدمين للحصول على أقصى استفادة من stereotax الآلية، أنه سيكون من المفيد أن يكون على دراية في البرمجة الرياضية وG-الترميز (بروغ بسيطةصدمت لالتصنيع باستخدام الحاسب الآلي).

سرعة الحفر الموصى بها هي أكبر من 40،000 دورة في الدقيقة. القرار السائر المحركات 1.8 ° / الخطوة، تهدف إلى 0.346 ° / الخطوة. A stereotax القياسية لديها قرار من 2.88 ميكرون / الخطوة. الحد الأقصى الموصى به سرعة القطع هو 500 ميكرون / ثانية. الحد الأقصى الموصى به هو سرعة الركض 3،500 ميكرون / ثانية. الحد الأقصى الموصى به هو حجم مثقاب HP 2.

Introduction

يتم استخدام الجراحة القوارض المجسم في مجموعة متنوعة واسعة من التطبيقات علم الأعصاب، بما في ذلك lesioning 1، 2 الرحلان الشاردي، ميكروسلك زرع 3، 4 التحفيز، ورقيقة الجمجمة التصوير 5. ومع ذلك، هناك عقبات الرئيسية التي تواجه أولئك الذين يرغبون في تطبيق هذه التقنيات، بما في ذلك منحنى التعلم حاد لأداء جراحة المجسم دقيقة واحتمال كبير الخطأ البشري. وتشمل الأخطاء البشرية القياس والفشل الحساب، فضلا عن دقة منخفضة وتكرار الحركات الإنسان. في محاولة للحد من هذه الأخطاء التباس، فإن الجراحين المجسم الاستفادة من النظام الذي يضمن أن يتم تنفيذ كافة العمليات الجراحية مماثل عبر المواضيع. الحد من الأخطاء هو أيضا أسلوب واحد التي يمكن أن المحققين تقليل استخدام المواد الحيوانية، وهو الهدف الأساسي من المعاهد الوطنية للصحة للالتجارب على الحيوانات 6. في عالم مثالي، كل لياليأن تكون قابلة للتكرار العمليات الجراحية tereotactic تماما ضمن التجارب، وبين المختبرات. لمعالجة هذه المسألة، وقد وضعت الشركات stereotaxics فائقة الدقة الجديدة، وأجهزة العرض الرقمية لقراءة القياسات. لإزالة الأخطاء حركة الإنسان، وأنتجت المتلاعبين وstereotaxics الصغيرة بمحركات تجاريا، ولكن تكلفتها العالية يمكن أن تكون باهظة إلى مختبر بميزانية محدودة. أيضا، البرامج الخاصة بهم هو الملكية بالكامل، والتي لا يمكن تعديلها من قبل الباحث لاستيعاب نوع جديد من الجراحة.

حلا ميسورا لمشكلة الخطأ البشري هو بناء stereotax الروبوتية من النموذج القائم على المختبر، وذلك باستخدام صناعة معدات التصنيع باستخدام الحاسب الآلي القياسية. بسبب CNC المجتمع الهاوي المزدهرة، والمواد هي أقل تكلفة من المعدات العلمية. هذا يسمح احد لبناء أداة التجسيمي CNC دقيقة، والتي هي أيضا درجة عالية من المرونة وغير مكلفة. مع المعرفة الأساسية من التصنيع باستخدام الحاسب الآلي وG-المدونة، األفراديمكن برمجة أي عملية جراحية المرض المجسم أنها تتخيل، من دون قيود من البرمجيات الاحتكارية. و، من أجل الإسراع في إنتاج ز رمز لعملية جراحية بسيطة، وهذا البروتوكول تتضمن البرامج التي تسمح للمستخدم لتصميم العمليات الجراحية (حافة حادة حج القحف، رقيقة الجمجمة النوافذ، حفر حفرة وزرع خفض) في نقطة وانقر فوق القوائم. هذه البرامج إخراج الانتهاء ز رمز التي يمكن تشغيلها مباشرة من البرنامج باستخدام الحاسب الآلي.

في كل شيء، والترقية الآلية التجسيمي يعتبر مثاليا لأولئك الذين لديهم مصلحة في زيادة دقة والتكرار من العمليات الجراحية، مع الحفاظ على المرونة والتكلفة المنخفضة من منصة مفتوحة المصدر.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

  1. سلك السائر المحركات القطبين بواسطة الشد الأسلاك في موصلات المرفقة مع مجلس سائق. ألوان الأسلاك على المحركات السائر القطبين موحدة (الشكل 1).
    ملاحظة: المحركات السائر وصف لها قرار من 1.8 درجة / الخطوة، تهدف إلى 0.346 ° / الخطوة. A stereotax القياسية لديه 3 mm/360 ° السفر. القرار النهائي هو 2.88 ميكرون / الخطوة. المحركات هي أيضا قادرة على التنقل كسور.
    1. بتوصيل سلك الأخضر إلى A +، قم بتوصيل السلك الأسود إلى A-، قم بتوصيل السلك الأحمر إلى B + وربط السلك الأزرق إلى B-.
  2. حرك المقرنات على المحركات السائر، والحرص على محاذاة الثقوب المتزايدة، وتأمين لهم باستخدام 12X M3 المقبس رئيس مسامير (20 مم) (الشكل 2).
    1. ضمان أن يتم إرفاق المقرنات بحزم المحركات.
      ملاحظة: لا تشمل نماذج 3D المواضيع. وصفت الأجزاء مع حجم الموضوع، ولكن لا بد من استغلالها بعد همالمصنعة.
  3. إزالة مسامير مجموعة من قبضة الإبهام على جميع المحاور 3 من الصك التجسيمي باستخدام مفتاح عرافة الصغيرة. هي الخيوط قبضة الإبهام، لذلك تحويلها عكس اتجاه عقارب الساعة لإزالة. الحفاظ على غسالات السليكوون في مكان على الذراع (الشكل 3).
  4. المسمار نهاية الخيوط من الياقات على قضبان مترابطة من الأسلحة الصك التجسيمي في (الشكل 3).
    1. ضمان عدم وجود فجوة بين الياقات والسليكوون O-الخواتم. هذا يضمن أن يتم الاحتفاظ الإحداثيات عندما يتغير الروبوت الاتجاهات.
    2. تأمين الياقات على المواضيع من الأسلحة التجسيمي باستخدام 3X NF10-32 (1/4 بوصة) مجموعة نقطة كوب مسامير.
    3. حرك كل السيارات ومقرنة على الياقات والأسلحة التجسيمي. تأكد من أن المحركات الجلوس مع تدفق الأسلحة، والثقوب مجموعة المسمار على الياقات يصطف مع الجزء المسطح من مهاوي السيارات (الشكل 4).
    4. تأمين المشتركuplers إلى stereotax باستخدام فتحات تركيب و6X NF10-32 (1/2 بوصة) مجموعة نقطة كوب مسامير (الشكل 4).
    5. تأمين الياقات إلى مهاوي السيارات باستخدام 3X NF10-32 (1/4 بوصة) مجموعة مسامير (الشكل 4).
  5. إعداد مجلس سائق CNC عن طريق تعيين كل من المسامير تحكم لنصف خطوة.
    ملاحظة: يأتي هذا السائق السائر المحركات باعتبارها لوحات الدارات الكهربائية المكشوفة. قد تكون بنيت الحالة، على الرغم من أنها ليست ضرورية. أيضا، يمكن استخدام عدد من مختلف السائقين السائر المحركات ثنائي القطب. إذا كان الأمر كذلك، وضمان أن يتم اتباع تعليمات الإعداد لمجلس محددة شراؤها.
    1. محاذاة جميع دبابيس 6 في السيارات السائر في نفس الطريق. نصف خطوة تسمح لضعف القرار خطوة في الدرجات / خطوة (الشكل 5).
    2. الوجه دبوس 1 إلى موقف، دبوس 2 إلى موقف قبالة، دبوس 3 إلى يوم POSI ونشوئها، دبوس 4 إلى موقف قبالة، دبوس 5 إلى على موقف، ودبوس 6 إلى موقف قبالة (الشكل 5).
  6. توصيل المحركات (X - Y - Z) إلى سائق السيارات السائر، جنبا إلى جنب مع 12 امدادات الطاقة الخامس. تم وضع علامة على موضع الصحيح على السائق. أيضا، ونعلق السائق السائر إلى المنفذ التسلسلي للكمبيوتر باستخدام DB25cable (الشكل 6).
  7. تثبيت البرامج الطحن CNC على جهاز كمبيوتر شخصي (وهذا سوف تحتاج إلى أن يكون موجودا في منطقة العمليات الجراحية) باتباع الإرشادات الافتراضية. تثبيت مرة واحدة، افتح البرنامج للبدء التكوين.
    1. تكوين البرنامج على التواصل مع محركات السائر.
      ملاحظة: يقصد الإرشادات التالية للاستخدام فقط مع سائق السيارات السائر TB6560.
    2. من خلال النقر القوائم البرنامج على النحو التالي. → → مفتوحة التكوين الموانئ ودبابيس→ إشارات الإخراج. ملء موجه لتتناسب مع الشكل 7 وضرب تطبيق.
    3. من خلال النقر القوائم البرنامج على النحو التالي. → → مفتوحة التكوين الموانئ ودبابيس → إشارات الإدخال. ملء موجه لتتناسب مع الشكل 8 وضرب تطبيق.
    4. من خلال النقر القوائم البرنامج على النحو التالي. فتح → → تكوين الموانئ ودبابيس → المخرجات موتور. ملء موجه لتتناسب مع الشكل 9 وضرب تطبيق.
    5. من خلال النقر القوائم البرنامج على النحو التالي. فتح → → ضبط التكوين للسيارات. ملء موجه لتتناسب مع الشكل 10 وانقر فوق حفظ الإعدادات المحور. كرر الخطوة السابقة لجميع المحاور 3 باستخدام نفس القيم.
  8. معايرة stereotax لحجم البرنامج باستخدام الحاسب الآلي.
    ملاحظة: تم تصميم البرنامج لآلات الطحن القياسية، وبالتالي فإن وحدتها القياس لا يكون متناسبا مع السفر صك التجسيمي.
    1. ضبط سرعة المحركات إلى 1 بوصة في الدقيقة الواحدة، و "هرول" Z-محور الصك التجسيمي مع صفحة الى الأعلى / صفحة الى الأسفل إلى أقرب ملليمتر.
      ملاحظة: الحد الأقصى لسرعة الركض هو أوصت 3،500 ميكرون / ثانية وسرعة القطع القصوى الموصى بها هي 500 ميكرون / ثانية.
    2. الصفر Z-المحور، وهرول للالتجسيمي الصك 1 مم. سافر مسافة على Z-axis في MACH3 هو "تحجيم ثابت". يتم تحديد الإحداثيات آلة بضرب الإحداثيات الجمجمة (ملم) من قبل "تحجيم ثابت".
    3. إجراء اختبارات عشوائية من جميع المحاور 3 عن طريق برمجة لهم بالسفر بعض المسافات المعروفة، وضمان حركات دقيقة. إذا كان السفر stereotax بعيدة جدا أو قصيرة، تعديل ثابت التحجيم وفقا لذلك.
      ملاحظة: بمجرد اكتمال التوسع، يمكن استخدام البرامج النصية المخصصة المضمنة لتوليد ز رمز لعملية جراحية. ومع ذلك، فمن المستحسن جدا أن تصبح مألوفة مع المستخدمين ز رمز قبل محاولة لصناعة السيارات في توليدعملية جراحية. هذا أمر حتمي لاستكشاف وتعديل العمليات الجراحية الآلي.
  9. إرفاق الحفر السيارات الصغيرة في الصك التجسيمي باستخدام اضافية حامل التحقيق كبيرة. ملاحظة: الحد الأدنى الموصى به سرعة الحفر بت 40،000 دورة في الدقيقة.
  10. لصناعة السيارات في توليد G-كود لحج القحف حافة حادة مع 3 ثقوب في الجمجمة المسمار.
    1. وضع كافة البرامج النصية المخصصة من جدول البرامج في مجلد واحد على جهاز كمبيوتر.
    2. فتح البرنامج النصي "SharpEdgeCraniotomy.m" وتشغيل التعليمات البرمجية.
    3. حدد كلا إلى موجه "ما هو نوع من الجراحة سوف تكون المسرحية؟" (الشكل 11).
    4. حدد مخصص، لتحديد زوايا النافذة الجمجمة. ملء كل موجه لمطابقة الرقم 12.
    5. تحديد المواقف X و Y من زوايا حج القحف. كل تنسيق يجب إدخالها في الترتيب الصحيح، وفقا المثال في الشكل 13 .
    6. دخول 3 في موجه لإنتاج 3 ثقوب في الجمجمة (الشكل 14).
    7. حدد تعريف استخدام الإحداثيات، وأدخل إحداثيات كل ثقب من القالب في الشكل 15.
      ملاحظة: إذا الإحداثيات الدقيقة ليست مهمة، هناك خيار لنقطة وانقر مواقف الثقوب "على صورة لجمجمة الفئران. سيتم إنشاء مواقف تلقائيا.
    8. تعريف المعلمات الحفر. لعملية جراحية التجارب الأولى، قبول القيم الافتراضية.
      ملاحظة: هذه القيم هي التي تعتمد على المحركات السائر، والجمجمة الحيوان. كل سلالة الفئران وموقع الهدف لديه سمك الجمجمة مختلفة قليلا. لجراحات القليلة الأولى باستخدام هذا الجهاز، تكون على استعداد لاختبار أعماق الحفر وإزالة أي قطع الجمجمة المتبقية يدويا. ويمكن بعد ذلك تعديل القيم لجراحات المستقبل (الشكل 16).
    9. اسم ز رمز، بل سيتم إنشاؤه تلقائيا وسافيد إلى دليل العمل.
  11. تحميل ز رمز في البرنامج الطحن باستخدام الحاسب الآلي وجمجمة اختبار في الصكوك التجسيمي القضبان الأذن.
    1. هرول يدويا مثقاب لBregma باستخدام مفاتيح الأسهم. استخدام سرعة الركض ببطء (~ 5 بوصة / م) لضمان الدقة.
    2. بدء مثقاب الدورية في أكبر من 38،000 دورة في الدقيقة.
    3. الصحافة CycleStart؛ سوف stereotax أداء عدة تمريرات من نفس قطع، على أعماق مختلفة. بين كل تمريرة، فإن stereotax وقفة، لذلك قد يستمر الجراح أو إحباط القطع. الصحافة متابعة دورة (البديل-R) لمواصلة خفض يمر.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

والنتيجة النهائية لعملية جراحية تهدف في أساليب تكون جمجمة فأر مع حج القحف حافة حادة، و 3 ثقوب في الجمجمة (الشكل 17). ملاحظة أن الجمجمة تستخدم للتدليل على الجراحة كان أوسع بكثير من الجمجمة الفئران تنميط. حافة حج القحف حادة يمكن أن تستخدم لإدراج مجموعة ميكروسلك ?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

استخدام معدات جراحة الآلي يساعد على القضاء على بعض المشاكل الأكثر شيوعا في مجال البحوث الأعصاب. أولا، مسارات أداة هي 100٪ استنساخه. ويضمن كل خفض ليكون في نفس الموقع نسبة إلى Bregma. ثانيا، ينبغي أن يقلل الخطأ المجرب. على الرغم من أن العديد من الباحثين والجراحين ذوي المهار?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

والكتاب ليس لديهم مصالح مالية تتنافس في الكشف عنها.

Acknowledgements

وأيد هذه الدراسة من قبل المعهد الوطني لتعاطي المخدرات المنح DA 006886، وDA 032270.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
1x Standard U Frame StereotaxKopfKopfThis protocol should work with most existing stereotaxic devices.
3x 12 V, 1.6 A, 233 oz-inch Geared Bipolar Stepper MotorPhidgetsRobot ShopAny high torque geared stepper motor should do. 
1x 3 Axis CNC Stepper Motor Driver Board ControllerToshibaEbayAny 3 Axis CNC driver should do. Linked Item includes Mach3 CNC software. 
2x Arm Couplers: medial-lateral (ML) & dorsal-ventral (DV)custom machinedPart DrawingsThese must be machined by your local machine shop. (costs will vary)
1x anterior-posterior (AP) Couplercustom machinedPart DrawingsThese must be machined by your local machine shop. (costs will vary)
3x Motor to Stereotax Collarcustom machinedPart DrawingsThese must be machined by your local machine shop. (costs will vary)
View in Browser
12x NF10-32 Cup Point Set ScrewsMcMaster Carr½” LengthYou will need 6 of each.
¼” Length
12x M3 Socket Head Screws (20 mm)McMaster Carr20mm LengthYou will need 4 for each motor
1x Micro-Motor Drill Buffalo DentalX50Any Micromotor drill will work.  At least 38,000 rpm recommended
1x 12 V DC Power Supply12 Volt Adapters12v DC – 7 AmpAny 12 V DC PSU should work (ensure amperage rating is higher than the sum of the motors’ amperage).
1x Extra Large Probe HolderStoeltingStoelting
1x Grade B Rat SkullSkulls UnlimitedSkulls Unlimited
Mach 3 MillArtSoft USATrial DownloadAny Standard CNC controlling software should work.
Surgery DesignerKevin Coffey David BarkerMATLAB File ExchangeThese codes are available to modify. We accept no responsibility for your use or modification of code.

References

  1. Yin, H. H., Knowlton, B. J., Balleine, B. W. Lesions of dorsolateral striatum preserve outcome expectancy but disrupt habit formation in instrumental learning. Eur. J. Neurosci. 19 (1), 181-189 (2004).
  2. West, M. O., Woodward, D. J. A technique for microiontophoretic study of single neurons in the freely moving rat. J. Neurosci. Methods. 11 (3), 179-186 (1984).
  3. Peoples, L. L., West, M. O. Phasic firing of single neurons in the rat nucleus accumbens correlated with the timing of intravenous cocaine self-administration. J. Neurosci. 16 (10), 3459-3473 (1996).
  4. Wolske, M., Rompre, P. P., Wise, R. A., West, M. O. Activation of single neurons in the rat nucleus accumbens during self-stimulation of the ventral tegmental area. J. Neurosci. 13 (1), 1-12 (1993).
  5. Bozza, T., McGann, J. P., Mombaerts, P., &Wachowiak, M. In vivo imaging of neuronal activity by targeted expression of a genetically encoded probe in the mouse. Neuron. 42 (1), 9-21 (2004).
  6. Pitts, M. Office of Laboratory Animal Welfare. Institutional animal care and use committee guidebook. , (2002).
  7. Yoon, T., Otto, T. Differential contributions of dorsal vs. ventral hippocampus to auditory trace fear conditioning. Neurobiol. Learn. Mem. 87 (4), 464-475 (2007).
  8. Root, D. H., et al. Differential roles of ventral pallidum subregions during cocaine self-administration behaviors. J. Comp. Neurol. 521 (3), 558-588 (2012).
  9. Yang, G., Pan, F., Parkhurst, C. N., Grutzendler, J., Gan, W. B. Thinned-skull cranial window technique for long-term imaging of the cortex in live mice. Nat. Protoc. 5 (2), 201-208 (2010).
  10. Feng, L., Sametsky, E. A., Gusev, A. G., Uteshev, V. V. Responsiveness to nicotine of neurons of the caudal nucleus of the solitary tract correlates with the neuronal projection target. J. Neurophysiol. 108 (7), 1884-1894 (2012).
  11. Babaei, P., Soltani Tehrani,, B,, Alizadeh, A. Transplanted Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Improve Memory in Rat Models of Alzheimer's Disease. Stem Cells Int. 2012, 369417(2012).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

80 CAM G CNC

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved