JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

One constraint of preclinical research in the field of bone repair is the lack of experimental control over the local mechanical environment within a healing bone lesion. We report the design and use of an external fixator for bone repair with the ability to change fixator stiffness in vivo.

Abstract

البيئة الميكانيكية حول الشفاء من كسر العظام مهمة جدا لأنه يحدد الطريقة سوف تلتئم الكسور. على مدى العقد الماضي كان هناك اهتمام سريرية كبيرة في تحسين التئام العظام عن طريق تغيير البيئة الميكانيكية من خلال تثبيت الاستقرار في جميع أنحاء الآفة. واحدة من القيد البحوث الحيوانية قبل السريرية في هذا المجال هو عدم وجود رقابة التجريبية على البيئة المحلية الميكانيكية داخل عيب قطعي كبير وكذلك خزوعات عظمية لأنها شفاء. نحن في هذه الورقة تقريرا عن تصميم واستخدام والتبعي الخارجي لدراسة شفاء قطعي عيوب العظام الكبيرة أو خزوعات عظمية. هذا الجهاز يسمح ليس فقط لصلابة المحورية التي تسيطر على آفة العظام كما أنه يشفي، لكنه تمكن أيضا تغيير صلابة أثناء عملية الشفاء في الجسم الحي. وقد أظهرت التجارب التي أجريت أن التبعي كانت قادرة على الحفاظ على 5 ملم الفجوة عيب الفخذ في الفئران في الجسم الحي خلال القفص بلا قيودالنشاط لمدة 8 أسابيع على الأقل. وبالمثل، لاحظنا أي تشويه أو التهابات، بما في ذلك التهابات دبوس خلال فترة الشفاء بأكملها. هذه النتائج تثبت أن لدينا التبعي الخارجي وضعت حديثا كان قادرا على تحقيق الاستقرار استنساخه وموحدة، وتغيير البيئة الميكانيكية في الجسم الحي الفئران عيوب العظام الكبيرة ومختلف خزوعات عظمية الحجم. هذا يؤكد أن جهاز التثبيت الخارجي هو مناسب تماما لتحقيقات البحوث قبل السريرية باستخدام نموذج الفئران في مجال تجديد وإصلاح العظام.

Introduction

هناك عدد من الدراسات قد تحسنت فهمنا للآليات البيولوجية المشاركة في العظام إصلاح الأنسجة 1-6. وقد تم دراسة آثار الظروف الميكانيكية على إصلاح العظام مثل محوري، والقص والحركات interfragmentary (نظام الإدارة المالية المتكامل) على نطاق واسع 7-15. في السنوات القليلة الماضية، بدأت المزيد والمزيد من الدراسات تظهر واصفا تأثير البيئة الميكانيكية على التئام العظام باستخدام الكسر، العظم وخلل كبير في العظام القطاعي نماذج الجسم الحي. ولذلك، هناك حاجة إلى طرق التثبيت موثوقة للحصول على نتائج الدراسة استنساخه وموثوق بها.

البيئة الميكانيكية حول كسر الشفاء مهمة جدا لأنه يحدد الطريقة سوف تلتئم الكسور. وبالتالي، فإن اختيار جهاز تثبيت مهم جدا وينبغي اختيار بعناية اعتمادا على تصميم الدراسة، وعوامل أخرى مثل حجم الفجوة ونوع الكسر. الخواص الميكانيكية لتثبيت الجهاز علىإعادة أكثر أهمية عند دراسة التئام عظمي من عيوب العظام الكبيرة لإنشاء التثبيت التي توفر ليس فقط حجم الفجوة المستمر طوال فترة التجربة من الوزن الكامل واضعة، ولكن أيضا بيئة مثالية لالميكانيكية العظام الشفاء. يتم استخدام المثبتات الخارجية عادة في كسر العظام وخلل نماذج كبيرة الشفاء التجريبية لأن لديهم ميزة على أجهزة التثبيت الأخرى. والميزة الرئيسية لالمثبتات الخارجية هي أنها تسمح للتغيير البيئة الميكانيكية في موقع خلل في الجسم الحي دون تدخل الثانوي، وهو ما يمكن تحقيقه عن طريق تغيير أو تعديل شريط استقرار الجهاز أثناء التجربة مثل تقدم التئام العظام. علاوة على ذلك، يسمح تطبيق التحفيز الميكانيكي المحلية المحددة لتعزيز إصلاح العظام، ويوفر أيضا إمكانية لقياس صلابة من النسيج الكالس في الجسم الحي. ومع ذلك، لديها أيضا عدد قليل من أجهزة عيوبالتي تشمل: تهيج الأنسجة اللينة، والالتهابات ودبوس الكسر.

للأسف، كانت هذه الغرسات غير متوفر "من على الرف" في وقت تطور الزرع، واضطر المحققون إلى العرف تصميم التبعي الخاصة بهم لاستخدام المقصود. ولذلك، كان العائق واحد من البحوث في هذا المجال لعدم وجود رقابة التجريبية على البيئة المحلية الميكانيكية داخل عيب قطعي كبير وكذلك خزوعات عظمية لأنه يشفي. يتم تعريف الخصائص الميكانيكية لالتبعي الخارجي من قبل، ويمكن عن طريق التضمين، وعدد كبير من المتغيرات التي تشمل: المسافة بين المسامير، قطر دبوس، دبوس المواد، وعدد من الدبابيس، التبعي طول شريط، شريط رقم التبعي، التبعي المواد شريط، شريط التبعي سمك والمسافة من سطح العظم إلى شريط التبعي (الإزاحة). من المستغرب، سوى قلة من الدراسات يمكن العثور التي حققت مساهمات الميكانيكية للمكونات الفرديةمن التبعي أو تكوينات الإطار كله المستخدمة في الدراسات القوارض 16،18،28. على سبيل المثال، أظهرت نتائج الدراسة أن واحد سيطر أحد العوامل الرئيسية المساهمة في تحديد صلابة الإجمالية للبناء التثبيت من المرونة من المسامير في ما يتعلق بهم أوفست، قطر وخصائص المواد 28. النتائج من الدراسات المذكورة أعلاه تشير بوضوح أن معرفة البيئة الميكانيكية التي يقدمها الجهاز تثبيت أمر مهم للغاية، ومع ذلك، لا يتم التحقيق في كثير من الحالات بالتفصيل. وتفيد الورقة التصميم والمواصفات وزرع في الجسم الحي من التبعي الخارجي الذي يتناول هذه المسألة. هذا التبعي يسمح أيضا لتعديل البيئة الميكانيكية كما تقدم الشفاء، وهي خاصية تمكن دراسة والميكانيكية حساسية مراحل مختلفة من عملية الشفاء في الجسم الحي. بالإضافة إلى ذلك، فضلا عن فرض ميكانيكي المحلية التي تسيطر عليها وقابلة للتكرارالبيئة القاعدة وإمكانية الحصول عليها كما يسمح للتعديل من هذه البيئة في مراحل مختلفة من التئام العظام.

والتبعي قمنا بتصميم وبناء على التثبيت الخارجي، والذي يستخدم على نطاق واسع لتثبيت كسر 16-21 ونماذج عيب كبيرة في حيوانات التجارب 22-27. الفرق بين التبعي لدينا الخارجي والتصاميم الأخرى القائمة التي أعلن عنها في الأدبيات هو أن شريط استقرارها هو المضمون مع مسامير لديها قبضة ضيقة مع أسلاك كيرشنر (K-الأسلاك). هذا النوع من التصميم مسامير يتطلب أن retightened كل أسبوعين (وأحيانا حتى أسبوعية) للتأكد من أن المسافة من الإزاحة يتم الاحتفاظ كما يتم تطبيق التحميل من خلال تحمل الوزن لمنع تخفيف من شريط الاستقرار. وإذا حدث هذا التخفيف، فإنه يسمح لغير المرغوب فيها ظروف التحميل إضافية مثل الزاوي، عرضية وحركات التوائية القص حتى العظم الشفاء (على أساس التجربة الشخصية والتواصل مع researcheRS). هذا مع العلم، وقد صمم لالتبعي الخارجي على هذا النحو أنه عندما صلابة من التبعي تحتاج إلى تغيير، ويمكن تحقيق ذلك عن طريق إزالة عناصر اتصال تعلق على وحدة رئيسية حيث جعلهما دبابيس المتزايدة. تم إجراء تجربة رائدة في الجسم الحي مع التبعي خارجي جديد النموذج للتأكد من أنها تلبي جميع المطالب المقترحة قبل تصنيعه بكميات أكبر.

الهدف الرئيسي لهذه الورقة هو تقديم طريقة جراحية جديدة لالتبعي الخارجي تستخدم لعيوب العظام الكبيرة وخزوعات عظمية في الفئران، مع القدرة على تغيير تصلب في الجسم الحي خلال عملية الشفاء. يتم تطبيق هذه الطريقة في تثبيت الجسم الحي على أفخاذ؛ فخذان من الفئران.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

تمت متابعة رعاية الحيوان والبروتوكولات التجريبية وفقا للمبادئ التوجيهية المعاهد الوطنية للصحة وأقرته اللجنة بيث إسرائيل ديكونيس المركز الطبي المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام، بوسطن، MA. (بروتوكول رقم: 098-2009)

1. إعداد المواد الجراحية والأدوات

  1. تعقيم جميع المواد الجراحية والأدوات المستخدمة لإجراء عملية جراحية قبل استخدامها. حزمة المواد اللازمة، مع أو بدون علبة الصك، داخل قطعة قماش مطوية أو ورقة ملفوفة وختم الشريط مع الأوتوكلاف للتعقيم بالبخار. وينبغي أن تكون درجة حرارة 125-135 درجة مئوية في الأوتوكلاف لمدة 20-25 دقيقة من وقت التعقيم، ثم 10-15 دقيقة من وقت التجفيف.
  2. تأكد من أن وقت الجراحة الفئران هي 200-250 غرام. هذا مهم جدا لأنه إذا الفئران هي أثقل في الحجم، ثم يجب استخدام التبعي مختلفة الحجم. بالنسبة للفئران يجب استخدام نسخة أثقل من 250 GA أكبر من النظام التبعي الخارجي.
  3. 2. الإجراء الجراحي وتطبيق المثبتة الخارجية

    1. شراء سبراغ داولي (أو أي سلالة أخرى) الفئران (الذكور أو الإناث، 200-250 ز) من أي مورد الحيوانية المعتمدة. اتبع رعاية الحيوانات المناسبة والبروتوكولات التجريبية وفقا للمبادئ التوجيهية الوطنية التي تتم الموافقة عليها من قبل لجنة رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام المحقق. سماح لا تقل عن 48 ساعة قبل فترة التأقلم الإجراء.
    2. لإجراء عملية جراحية، نقل الفئران إلى غرفة إجراء العمليات الجراحية المخصصة لذلك.
    3. تخدير الفئران مع isoflurane أولا عبر غرفة الاستقراء، ويستمر بعد ذلك مع قناع الوجه متصلة آلة التخدير بمعدل 1.5-2٪ في 1-1.5 لتر من O 2 / دقيقة. في بداية عملية جراحية تأكد من أن الحيوان هو تحت التخدير العميق. للقيام بذلك، استخدم تقنية دواسة المنعكس من تمديد أطرافهم ومعسر شبكة الإنترنت بين أصابع القدم مع الأصابع (وليس إصبع القدم نفسه!). الحيوان ليس سوتخدير fficiently إذا تم سحب أطرافهم، يحدث شد العضلات أو إذا كان الحيوان يجعل الضوضاء.
    4. بعد الفئران تحت التخدير العام العميق لعملية جراحية، حقن المضادات الحيوية (سيفازولين، 20 ملغ / كلغ) والبوبرينورفين مسكن (جرعة 0.08 ملغ / كلغ) عن طريق الحقن العضلي في الساق اليمنى. لتجنب فقدان كمية كبيرة من السوائل أثناء الجراحة إدارة دافئ ملحي معقم تحت الجلد في 3-5٪ من وزن الجسم قبل الجراحة، وإذا كان من الضروري في نهاية المطاف. تطبيق مرهم العين معقم للعين للحفاظ على رطب لمنع إصابة القرنية.
    5. بعد حقن المخدرات، ويحلق وتنظيف الساق الخلفية اليمنى بأكمله من الفئران مع chlorohezadine أو غيرها من الحل تعقيم ونقل الحيوان إلى طاولة الجراحة. (المحطة تعمل عليها يجب أن تكون نفس تلك التي تم حقن.)
    6. وضع الحيوان على سطح ساخن في وضعية الانبطاح (الشكل 1A). تأكد من يبقى قناع على الأنف والفم الخلفإيه نقل إلى طاولة الجراحة، والحفاظ على نظام التخدير المذكورة في 2.3). ثنى مجال إجراء العمليات الجراحية مع ثنى منوفذة معقمة بحيث تتعرض فقط الساق المقصود لعملية جراحية.
    7. إجراء شق تقريبي من 3-4 سم (الشكل 1B) من خلال الجلد تشغيل craniolateral على سطح عظمة الفخذ اليمنى من المدور الكبير للمنطقة فوق اللقمة في الركبة باستخدام مشرط (الشكل 1C). فضح رمح من عظم الفخذ عن طريق تشريح لطيف فصل فافة العريضة، والتأكد من أن الأنسجة العضلية لا قطع. بعد ذلك، فصل عدا العضلة المتسعة الوحشية M. العضلة ذات الرأسين الفخذية و م ورفع M. الموترة للفافة العريضة لفضح كامل طول عظم الفخذ (التأكد من أن يتم الحفاظ على العصب الوركي. الشكل 1D).
    8. في المنطقة المخططة من العظم، وإعداد عظم الفخذ على طول منطقة منتصف الطريق من diaphysis عن طريق الإفراج عن الأنسجة العضلية المحيطة من الحديدالمر. أولا، تبدأ من خلال وضع المصعد Henahan عمودي على السطح المعرض من عظم الفخذ، ثم استخدام مشرط، والإفراج عن العضلات في المنطقة المتاخمة.
      1. تواصل من خلال دفع إلى الأمام ويرحل عظم الفخذ، والبقاء على مقربة من سطح العظم، حتى يتم تحرير جميع الأنسجة العضلية المحيطة من الجزء الأوسط بأكمله من العظم (حيث سيتم إنشاء عيب)، ويتم تنظيف الأنسجة العضلية تماما من العظام. حين نفعل ذلك، من المهم جدا للبقاء على مقربة من سطح العظم لتجنب قطع أي الأوعية الكبرى.
    9. ل5 مم عيب كبير العظام، حلقة 2 قطعة من سلك رأى جيجلي (0.22 مم) حول العظام في التوجه ميديو الأطراف (الشكل 1E، F). بعد حلقات المنشار الأسلاك، ووضع قطعة واحدة على الجانب الأعلى من عظمة الفخذ، بالقرب من مفصل الركبة، والقطعة الثانية على الجانب القريب بالقرب من مفصل الورك. المشبك السلك جيجلي شهد قطع على كل جانب باستخدام S-الشكل المنحني تشريح ودوريملقط لدى عودتهم، بحيث يبقى في المكان المقصود. إذا تم التخطيط لقطع العظم واحدة، ثم استخدم فقط قطعة واحدة من رأى السلك.
    10. استخدام لوحة التبعي الخارجية كقالب لتحديد الموضع الدقيق للزرع. موقف التبعي الخارجي يجب أن يكون أقرب ما يمكن إلى مركز عظم الفخذ.
      1. وضع لوحة التبعي الخارجية على السطح الأمامي الوحشي للعظم. ويتحقق هذا من خلال تناوب خارجيا عظم الفخذ. في هذا الموقف طبقة الأنسجة الناعمة في نحافة، والذي يمنع الإفراط في توتر الأنسجة الرخوة تحت صفيحة التبعي بعد إغلاق الجرح.
      2. ثم رفع طفيف لوحة التبعي الخارجية من السطح العظام للتأكد من أن الثقوب من لوحة تتركز على سطح العظم. عقد التبعي الخارجي مع المشبك صغير من أجل أن يبقى موازيا للمحور الطولي للعظم، ومن ثم استخدام أداة السلطة أو حفر يد لpredrill أول حفرة على الجانب القريب من عظم الفخذ مع 0.79مم مثقاب. قبل التقدم إلى الأمام، وتأكد من أن غيض من قمة الحفر لا تزال تتركز على سطح العظم.
      3. إذا غيض من الحفر وتبقي الانزلاق، استخدم 1.00 ملم مضادة الغطاس (الشكل 8F) لتوسيط موقف أول حفرة. يجب استخدام ثقالة مضادة لوضع جميع المسامير المتبقية المتزايدة. وهذا يضمن تشكيلة كاملة من الحفر ولوحة التبعي بالنسبة لسطح العظم.

    3. الخارجية التبعي طريقة زرع عن طريق دليل المنشار

    1. تأكد من أن لوحة للالتبعي خارجي لم يتم تحميل رأسا على عقب قبل لقطة على دليل المنشار. تحديد ذلك من خلال مقارنة حجم الثقوب على لوحة. الجانب الصحيح مع قطر الحفرة أكبر في مواجهة. إذا كان الفرق بين حجم الثقوب داخل التبعي غير واضح، استخدم ثقالة مضادة.
      1. إدراج غيض من ثقالة مضادة في واحدة من الثقوب فيلوحة التبعي، إذا كان ثقالة مضادة تناسبها بسهولة في حفرة ثم وهذا هو الاتجاه الصعودي للالتبعي، ومع ذلك، إذا غيض من ثقالة مضادة لا يصلح ثم وهذا هو الجانب السفلي من التبعي، وليس له أن انقلبت لغرس وفقا لذلك.
        (هام: تأكد لحفر عمودي على المحور الطولي للعظم حيث سيؤدي ذلك إلى ضمان التوجيه الأمثل للالتبعي لسطح العظم الاتجاه من حفر حفرة الأول يحدد التوجه النهائي للالتبعي على العظام تذكر دبابيس تصاعد وطول نفس، وإذا كان التبعي ليست موازية للمحور الطولي للعظم المسافة بين التبعي والعظام سوف تختلف كثيرا، وربما تمنع من قدرة جميع المسامير الأربعة متزايدة لاختراق كل من القشور.)
      2. بعد تأكيد التوجه، مقطع لوحة على دليل منشار (الشكل 2A، B) ثم مقطع وحدة على العظم بحيث أن أول حفرة predrilledتتماشى مع أول حفرة على لوحة (الشكل 2C). استخدام 0.70 ملم مربع مربع وجع إدراجها في الحفر اليد لدفع دبوس الأول المتصاعدة في حفرة. وسوف نفعل ذلك تسمح المواقع استنساخه لالمسامير المتبقية المتزايدة.
      3. بعد تصاعد دبوس الأول في مكان، ثم حفر حفرة أبعد من دبوس تصاعد الأول على الجانب البعيد، ودفع دبوس الثاني المتصاعدة في حفرة. النظام زرع اثنين من دبابيس المتوسطة المتزايدة ليس مهما.

    4. الخارجية التبعي طريقة زرع بدون دليل المنشار:

    لا يمكن أن يؤديها تطبيق التبعي الخارجي أيضا دون استخدام دليل المنشار. الخطوات ابتداء من غرس التبعي الخارجي هي نفسها حتى يتم قص وحدة مع دليل المنشار على العظم (الخطوة 3.1). إذا لم يتم استخدام دليل رأى، من المهم جدا للحفاظ على لوحة التبعي في الاتجاه الصحيح خلالتطبيق الإجراء بأكمله. عظم الفخذ يحتاج إلى أن تكون استدارة خارجيا في الاتجاه الأمامي الوحشي.

    1. عقد لوحة التبعي الخارجية مع المشبك صغير أو S-الشكل المنحني تشريح وملقط الربطة بحيث تكون موازية للمحور الطولي للعظم (الشكل 3A). تطبيق دبوس تصاعد الأول ستحدد محاذاة التبعي، وبالتالي فإن دوران العظام لابد من الاحتفاظ بها حتى يتم إدخال رقم التعريف الشخصي الأول (الشكل 3B). بعد أول دبوس في مكان، بعناية استخدام ملقط لعقد لوحة التبعي أن يتصرف كدليل الحفر.
    2. إدراج قمة الحفر في الحفرة الثانية - وهذا هو الأكثر حفرة البعيدة إلى الفجوة العظم المخطط (الشكل 3C). قبل الحفر، تحقق للتأكد من أن ثقب الثاني له نفس التوجه وأول حفرة. أيضا التأكد من أنه بعد حفر كاملة، واخترقت كل من القشور.
    3. إدراج 0.70 ملم القاعس وجع إلى جهة الحفر ثم إدراج دبوس تصاعد في تلميح. إدراج بعناية في لوحة من التبعي الخارجي دون أن تفقد محاذاة أول حفرة predrilled.
    4. حالما طرف على اتصال مع العظم، وبدء تحول وجع مستمر تحت تحميل محوري تطبيقها على نهاية القريبة من الحفر باليد. بعد حوالي 5 يتحول الكاملة، تأكد من أن الخيط في نهاية القريبة من دبوس تصاعد يمسك الجسم لوحة التبعي الخارجي. هذا الموضوع بتأمين النظام. وقف تحويل عند نهاية الخيط العظام قريبة من السطح العلوي للعظم (الشكل 3D).
    5. بعد دبابيس على الجانب القاصي والداني الأكثر هي في مكان، predrill اثنين من الثقوب المتوسطة المتبقية. النظام زرع اثنين من دبابيس الوسطى ليس مهما (أرقام 3C).
    6. بعد التبعي الخارجي في مكان، استخدام 0.22 مم جيجلي سلك شهدت إخراج دليل منشار لجعل عيب القطاعي (شملت رقمالبريد 4A). إذا تم اختيار الأسلوب الأخير، يتم قص دليل منشار قبل اتخاذ أي عيب.
      1. لهذا، تمرير 0.22 مم جيجلي سلك رأى من خلال الأخاديد 2 تحت عظم الفخذ (الشكل 5A) لإنشاء عيب قطعي 5 ملم من قبل الحركة متبادلة ذهابا وإيابا (الشكل 5B) باستخدام الري الكافي (استخدام 5 مل حقنة الاستغناء المالحة في وقت إنشاء عيب). لتجنب الأضرار التي لحقت الأنسجة اللينة، وقطع الأسلاك قريبة منشار حتى العظم على جانب واحد بعد الانتهاء من العظم. إزالة دليل منشار (الشكل 4B).
    7. بعد إنشاء خلل أو العظم، وإزالة دليل منشار وإغلاق الجرح في طبقات، والعضلات أولا (الشكل 4C)، ثم الجلد (الشكل 4D). قبل إغلاق الجرح، وعلاج الخلل كما كان مقررا في بروتوكول الدراسة. إغلاق طبقة العضلات وفافة العريضة باستخدام Ethibond vicryl خياطة 4-0، والجلد باستخدام إثيكن] [Monocryl 3-0 قuture. تجنب سحب مواد خياطة الجروح على الأسطح غير المعقمة أثناء خياطة الجروح. ملاحظة: لتجنب عض الجرح، يجب خياطة لا نهاية البعيدة إلى أقل الزرع. وبالمثل، الغراء الجلد يمكن أن تستخدم بدلا من خياطة.
    8. في الأيام الثلاثة الأولى بعد الجراحة، وإعطاء مسكن الفئران كل 12 ساعة والمضادات الحيوية كل 24 ساعة. بطبيعة الحال، فإن نظام ما بعد الجراحة المخدرات سوف تختلف تبعا جعل العلامة التجارية والأدوية المستخدمة من قبل كل محقق (يرجى الرجوع إلى تعليمات مواصفات المخدرات).
    9. مراقبة الحيوانات كثيرا بعد العملية للتأكد من أنها التعافي من التخدير وبعد ذلك فقط إعادتها إلى منشأة سكنية. توفير السكن الانفرادي خلال الأيام القليلة الأولى بعد الجراحة للتأكد من عدم وجود مضاعفات.
    10. مراقبة المياه، وتناول الطعام ووزن الجسم بعد الجراحة للتأكد من أن الحيوانات ليست في الألم والضيق. إذا يظهر الحيوان انخفاض مستوى النشاط، وصعوبة التنقل (فشل الزرع ممكن)، ataxiلذلك، الفراء دهني غير مهذب، البورفيرين تلطيخ حول العينين والخياشيم، التقوس في الجلوس، ضيق التنفس، وانخفاض كمية الغذاء والماء، الخ استشارة الطبيب البيطري.

    5. تغيير من الخارجية التبعي تصلب في الجسم الحي

    1. إذا كان بروتوكول الدراسة يتطلب تغيير التبعي صلابة أثناء عملية الشفاء في الجسم الحي ويتحقق هذا عن طريق تغيير عناصر اتصال آمن مع مسامير المتشابكة الخاصة باستخدام 0.5 ملم مربع مربع وجع تعلق على الحفر باليد. لهذا الإجراء، تخدير الفئران (يرجى الرجوع إلى 2.3 في البروتوكول) وإعطاء تسكين (يرجى الرجوع إلى 2.4 في البروتوكول) مرة واحدة فقط في وقت الإجراء (الشكل 6A).
      1. رزين الفئران، ومن ثم إدراج غيض من مربع مربع وجع 0.50 ملم في المسمار المتشابكة التي تعلق على جانب من التبعي تجميعها، والبدء بعناية يحولها عكس اتجاه عقارب الساعة حتى دبوس هو نصف الطريق للخروج (الشكل 6B ). بعد اكتمال هذا الجزء، كرر الإجراء للدبوس الثاني الذي هو على نفس الجانب من لوحة التبعي الخارجية (الشكل 6C).
      2. عند كل العلامات على نفس الجانب هي نصف الطريق للخروج، أو استخدام ملقط المشبك لإزالة عنصر الاتصال على الجانب المقابل مع اقتراح لطيف (الشكل 6D). عنصر اتصال ينبغي أن يأتي من السهل، إذا لم يحدث ذلك، ثم القيام زوجين إضافية من الأدوار على كل من مسامير المتشابكة للتأكد من أن غيض من المسمار المتشابكة لا جعلهما في العنصر الاتصال.
      3. بعد إزالة عنصر الصدد، حرك عنصر اتصال صلابة المطلوب بدلا من إزالة واحد (الشكل 6E)، ومن الجانب الآخر باستخدام مربع وجع مربع بدء تحول حتى المسمار المتشابكة هو نصف الطريق للخروج على الجانب المعاكس (الشكل 6F). كرر نفس الإجراء المسمار المتشابكة الثاني (الشكل 6G). المهم: عشروسيتطلب التحول إلى الجانب الآخر من لوحة للتأكد من أن كلا من مسامير المتشابكة هي نصف الطريق للخروج على الجانب حيث تم استبدال عنصر الاتصال (الشكل 6H، I).
      4. بعد اكتمال هذا الجزء بنجاح، إزالة عنصر الاتصال الثاني (الشكل 6J) واستبدالها مع نفس العنصر اتصال صلابة بوصفها واحدة محل على الجانب الآخر (الشكل 6K). بعد عنصر الاتصال الثاني هو في مكان، بدء القيادة المسمار المتشابكة حتى مخارج نهاية المسمار المتشابكة الجانب الآخر من لوحة، والمتشابكة المسمار غيض وقد خرجت نفس المبلغ على كل جانب (الشكل 6L). كرر نفس الإجراء المسمار المتشابكة الثاني (الشكل 6M، N). وهذا الاجراء يستغرق حوالي 15 دقيقة لإكمال.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

مواصفات التصميم

استقرار عظمة الفخذ الفئران مع نظام التثبيت الخارجي يمكن إنشاء خزوعات عظمية 0،5-5 ملم. النظام التبعي الخارجي هو التبعي الخارجي مقفل مصنوعة من البولي كيتون الأثير (نظرة خاطفة - [الجسم الرئيسي]) وسبائك التيتانيوم والألو...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

الخطوات الأكثر أهمية من إجراء العمليات الجراحية لخلق خلل كبير العظام هي: 1) اختيار وزن الجسم المناسب من الفئران لتتناسب مع حجم التبعي الخارجي؛ 2) الحفاظ على بيئة معقمة أثناء الداخلي؛ و3) بعد بروتوكول الإجراء الجراحي.

وكانت الأهداف ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

المؤلف رومانو ماتيز هو موظف من RISystem AG دافوس، سويسرا التي تنتج يزرع، وأدوات محددة الزرع والمواد الاستهلاكية المستخدمة في هذه المقالة. المؤلف فايدا جلات ليس لديه المصالح المالية المتنافسة.

Acknowledgements

وأيد هذا العمل من قبل مؤسسة AO (S-08-42G) وRISystem AG.

نود أن نمد كبيرة جدا "شكرا!" إلى الفريق ستيفان زعيتر في في معهد أبحاث AO دافوس، سويسرا لكونها استيعاب ذلك في السماح لنا باستخدام مرافقها أو لتصوير هذا الإجراء الجراحي.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
RatExFix simple 100%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.120
RatExFix simple 70%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.123
RatExFix simple 40%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.121
RatExFix simple 10%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.122
RatExFix Connection element 100%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.130
RatExFix Connection element 70%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.131
RatExFix Connection element 40%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.132
RatExFix Connection element 10%RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.612.133
RatExFix Main bodyRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.611.101
RatExFix InterlockingScrewRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.412.110
RatExFix Mounting pin 0.85 mmRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.412.100
RatExFix Saw Guide 100% 5 mmRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.312.100
Accu Pen 6V+RISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.390.211
HandDrillRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.390.130
Drill Bit 0.79 mmRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.593.203
Gigly wire saw 0.22 mmRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.590.100
Square box wrench 0.70 mmRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.590.112
Square box wrench 0.50 mmRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.590.111
Centering bit 1.00 mmRISystem AG Davos, SwitzerlandRIS.592.205
Scalpel Blade handleFine Science tools
Scalpel Blade (Size 15)Fisher Scientific
Tissue ForcepsFine Science tools
ScissorsFine Science tools
RetractorFine Science tools
Needle HolderFine Science tools
Henahan ElevatorFine Science tools
S-shape curved dissecting and ligature forceps Fine Science tools2
Dressing ForcepsFine Science tools2
Sterile Fenestrated drapeFisher Scientificfor surgery
Sterile gauzeFisher Scientificfor surgery
5 ml syringe Fisher Scientific for irrigation of defect
24-27G needle Fisher Scientific for irrigation of defect
1 cc Insulin syringes Fisher Scientificfor drug injections
sterile saline Fisher Scientificfor bone defect irrigation
sterile glovesFisher Scientificto perform surgeries
chlorohezadineFisher Scientificdisinfecting solution for surgical site
Vicryl suture 4-0 with SH-1Fisher Scientificto suture muscle 
Ethibond suture 3-0 Fisher Scientificto suture skin
IsofluorineSigma-Aldrichfor anesthesia
BuprenorphineSigma-Aldrichanalgesia during and after the surgery
CefazolinSigma-Aldrichantibiotic during and after the surgery 
Sprague-Dawley Rats or any other strainCharles River Laboratories International, Inc. (Wilmington, MA USA) 

References

  1. Einhorn, T. A., Lane, J. M., Burstein, A. H., Kopman, C. R., Vigorita, V. J. The healing of segmental bone defects induced by demineralized bone matrix. A radiographic and biomechanical study. J Bone Joint Surg Am. 66, 274-279 (1984).
  2. Feighan, J. E., Davy, D., Prewett, A. B., Stevenson, S. Induction of bone by a demineralized bone matrix gel: a study in a rat femoral defect model. J Orthop Res. 13, 881-891 (1995).
  3. Hunt, T. R., Schwappach, J. R., Anderson, H. C. Healing of a segmental defect in the rat femur with use of an extract from a cultured human osteosarcoma cell-line (Saos-2). A preliminary report. J Bone Joint Surg Am. 78, 41-48 (1996).
  4. Jazrawi, L. M., et al. Bone and cartilage formation in an experimental model of distraction osteogenesis. J Orthop Trauma. 12, 111-116 (1998).
  5. Probst, A., Jansen, H., Ladas, A., Spiegel, H. U. Callus formation and fixation rigidity: a fracture model in rats. J Orthop Res. 17, 256-260 (1999).
  6. Richards, M., Huibregtse, B. A., Caplan, A. I., Goulet, J. A., Goldstein, S. A. Marrow-derived progenitor cell injections enhance new bone formation during distraction. J Orthop Res. 17, 900-908 (1999).
  7. Aro, H. T., Chao, E. Y. Bone-healing patterns affected by loading, fracture fragment stability, fracture type, and fracture site compression. Clin Orthop Relat Res. , 8-17 (1993).
  8. Augat, P., et al. Shear movement at the fracture site delays healing in a diaphyseal fracture model. J Orthop Res. 21, 1011-1017 (2003).
  9. Augat, P., et al. Local tissue properties in bone healing: influence of size and stability of the osteotomy gap. J Orthop Res. 16, 475-481 (1998).
  10. Claes, L., Augat, P., Suger, G., Wilke, H. J. Influence of size and stability of the osteotomy gap on the success of fracture healing. J Orthop Res. 15, 577-584 (1997).
  11. Claes, L., Eckert-Hubner, K., Augat, P. The fracture gap size influences the local vascularization and tissue differentiation in callus healing. Langenbecks Arch Surg. 388, 316-322 (2003).
  12. Duda, G. N., et al. Interfragmentary motion in tibial osteotomies stabilized with ring fixators. Clin Orthop Relat Res. , 163-172 (2002).
  13. Goodship, A. E., Watkins, P. E., Rigby, H. S., Kenwright, J. The role of fixator frame stiffness in the control of fracture healing. An experimental study. J Biomech. 26, 1027-1035 (1993).
  14. Williams, E. A., Rand, J. A., An, K. N., Chao, E. Y., Kelly, P. J. The early healing of tibial osteotomies stabilized by one-plane or two-plane external fixation. J Bone Joint Surg Am. 69, 355-365 (1987).
  15. Wu, J. J., Shyr, H. S., Chao, E. Y., Kelly, P. J. Comparison of osteotomy healing under external fixation devices with different stiffness characteristics. J Bone Joint Surg Am. 66, 1258-1264 (1984).
  16. Harrison, L. J., Cunningham, J. L., Stromberg, L., Goodship, A. E. Controlled induction of a pseudarthrosis: a study using a rodent model. J Orthop Trauma. 17, 11-21 (2003).
  17. Kaspar, K., Schell, H., Toben, D., Matziolis, G., Bail, H. J. An easily reproducible and biomechanically standardized model to investigate bone healing in rats, using external fixation. Biomed Tech (Berl). 52, 383-390 (2007).
  18. Mark, H., Bergholm, J., Nilsson, A., Rydevik, B., Stromberg, L. An external fixation method and device to study fracture healing in rats. Acta Orthop Scand. 74, 476-482 (2003).
  19. Mark, H., Nilsson, A., Nannmark, U., Rydevik, B. Effects of fracture fixation stability on ossification in healing fractures. Clin Orthop Relat. Res. , 245-250 (2004).
  20. Mark, H., Rydevik, B. Torsional stiffness in healing fractures: influence of ossification: an experimental study in rats. Acta Orthop. 76, 428-433 (2005).
  21. McCann, R. M., et al. Effect of osteoporosis on bone mineral density and fracture repair in a rat femoral fracture model. J Orthop Res. 26, 384-393 (2008).
  22. Betz, O. B., et al. Direct percutaneous gene delivery to enhance healing of segmental bone defects. J Bone Joint Surg Am. 88, 355-365 (2006).
  23. Cullinane, D. M., et al. Induction of a neoarthrosis by precisely controlled motion in an experimental mid-femoral defect. J Orthop Res. 20, 579-586 (2002).
  24. Dickson, G. R., Geddis, C., Fazzalari, N., Marsh, D., Parkinson, I. Microcomputed tomography imaging in a rat model of delayed union/non-union fracture. J Orthop Res. 26, 729-736 (2008).
  25. Jager, M., Sager, M., Lensing-Hohn, S., Krauspe, R. The critical size bony defect in a small animal for bone healing studies (II): implant evolution and surgical technique on a rat's femur. Biomed Tech (Berl). 50, 137-142 (2005).
  26. Betz, V. M., et al. Healing of segmental bone defects by direct percutaneous gene delivery: effect of vector dose. Hum Gene Ther. 18, 907-915 (2007).
  27. Glatt, V., et al. Ability of recombinant human bone morphogenetic protein 2 to enhance bone healing in the presence of tobramycin: evaluation in a rat segmental defect model. J Orthop Trauma. 23, 693-701 (2009).
  28. Willie, B., Adkins, K., Zheng, X., Simon, U., Claes, L. Mechanical characterization of external fixator stiffness for a rat femoral fracture model. J Orthop Res. 27, 687-693 (2009).
  29. Hess, T., Hopf, T., Fritsch, E., Mittelmeier, H. Comparative biomechanical studies of conventional and self-tapping cortical bone screws. Z Orthop Ihre Grenzgeb. 129, 278-282 (1991).
  30. Glatt, V., Evans, C. H., Matthys, R. Design, characterisation and in vivo testing of a new, adjustable stiffness, external fixator for the rat femur. Eur Cell Mater. 23, 289-298 (2012).
  31. Glatt, V., et al. Improved healing of large segmental defects in the rat femur by reverse dynamization in the presence of bone morphogenetic protein-2. J Bone Joint Surg Am. 94, 2063-2073 (2012).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

92 mechanobiology

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved