A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
لوحة النمو هي منطقة غضروفية في العظام الطويلة للأطفال حيث يحدث النمو الطولي. عندما يصيب، يمكن أن تشكل الأنسجة العظمية وتضعف النمو. نحن تصف نموذج الفئران من إصابة لوحة النمو الذي يؤدي إلى الأنسجة إصلاح عظمي، مما يسمح لدراسة آليات إصلاح واستراتيجيات النمو لوحة تجديد.
ثلث جميع كسور الأطفال تنطوي على لوحة النمو ويمكن أن يؤدي إلى ضعف نمو العظام. لوحة النمو (أو فيسيس) هو أنسجة الغضاريف الموجودة في نهاية كل العظام الطويلة في الأطفال التي هي المسؤولة عن نمو العظام الطولية. مرة واحدة التالفة، والأنسجة الغضروف داخل لوحة النمو يمكن أن يخضع التحجر السابق لأوانه وتؤدي إلى الأنسجة غير المرغوب فيها إصلاح عظمي، الذي يشكل "شريط عظمي". في بعض الحالات، وهذا شريط عظمي يمكن أن يؤدي إلى تشوهات نمو العظام، مثل التشوهات الزاوي، أو أنه يمكن أن يوقف تماما نمو العظام الطولية. لا يوجد حاليا أي علاج السريرية التي يمكن إصلاح تماما لوحة النمو المصاب. باستخدام نموذج حيواني من إصابة لوحة النمو لفهم أفضل للآليات الكامنة وراء تشكيل شريط عظمي وتحديد سبل لمنعها هو فرصة عظيمة لتطوير علاجات أفضل للإصابات لوحة النمو. يصف هذا البروتوكول كيفية تعطيل الفئران القريبة لوحة النمو الظنبوب باستخدام عيب حفر حفرة. هذا سمال الحيوان نموذج موثوق تنتج قضيب عظمي ويمكن أن يؤدي إلى تشوهات النمو مماثلة لتلك التي ينظر إليها في الأطفال. هذا النموذج يسمح للتحقيق في الآليات الجزيئية لتشكيل شريط عظمي ويخدم كوسيلة لاختبار خيارات العلاج المحتملة للإصابات لوحة النمو.
إصابات لوحة النمو تمثل 30٪ من جميع كسور الأطفال ويمكن أن يؤدي إلى ضعف نمو العظام 1 . بالإضافة إلى الكسور، قد تكون ناجمة عن إصابات لوحة النمو من مسببات أخرى، بما في ذلك التهاب العظم والنقي 2 ، أورام العظام الأولية 3 ، والإشعاع والعلاج الكيميائي 4 ، والضرر علاجي المنشأ 5 . لوحة النمو (أو فيسيس) هي منطقة الغضروف في نهاية العظام الطويلة للأطفال التي هي المسؤولة عن نمو العظام الطولية. فإنه يدفع استطالة العظام من خلال التحجر الغضروفي. تشوندروسيتس الخضوع انتشار وتضخم ثم يتم تشكيلها من قبل أوستيوبلاستس واردة لتشكيل العظام التربيقية 6 . لوحة النمو هي أيضا منطقة ضعيفة من هيكل عظمي النامية، مما يجعلها عرضة للإصابة. القلق الرئيسي مع كسور لوحة النمو أو الإصابات هو أن الأنسجة الغضروف التالفة داخل لوحة النمو يمكن به استبدال الأنسجة غير المرغوب فيها إصلاح عظمي، المعروف أيضا باسم "شريط عظمي". اعتمادا على حجمها وموقعها داخل لوحة النمو، يمكن أن يؤدي شريط عظمي إلى تشوهات الزاوي أو وقف النمو الكامل، وهو عقبة مدمرة للأطفال الصغار التي لم تصل بعد ارتفاعها الكامل 7 .
لا يوجد حاليا أي علاج يمكن أن إصلاح تماما لوحة النمو المصاب. مرة واحدة أشكال شريط عظمي، يجب على الطبيب يقرر ما إذا كان أو لم يكن جراحيا إزالته 8 . المرضى الذين يعانون من 2 سنوات على الأقل أو 2 سم من النمو الهيكل العظمي المتبقية ومع شريط عظمي الذي يمتد أقل من 50٪ من منطقة لوحة النمو وعادة ما تكون مرشحة لعظم بار استئصال 8 . إزالة الجراحي من شريط عظمي في كثير من الأحيان تليها تدخل من الكسب غير المشروع الدهون الذاتية لمنع إصلاح الأنسجة العظمية والسماح لوحة النمو غير المصحوب المحيطة لاستعادة النمو. ومع ذلك، هذه التقنيات هي بروبلإماتيك وغالبا ما تفشل، مما يؤدي إلى تكرار عظمي بار واستمرار التأثير السلبي على النمو 9 . هناك حاجة ماسة لتطوير العلاجات الفعالة التي لا تمنع فقط تشكيل شريط عظمي، ولكن أيضا تجديد لوحة الغضروف النمو، وبالتالي استعادة استطالة العظام الطبيعية.
الآليات الجزيئية الكامنة وراء تشكيل شريط عظمي لم يتم توضيحها بالكامل. إن الفهم الأكبر لهذه الآليات البيولوجية يمكن أن يؤدي إلى تدخلات علاجية أكثر فعالية للأطفال الذين يعانون من إصابات لوحة النمو. منذ دراسة هذه الآليات في البشر من الصعب، وقد استخدمت نماذج حيوانية، وخاصة نموذج الفئران من إصابة لوحة النمو 10 ، 11 ، 12 ، 13 ، 14 ، 15 ، 16 . الطريقة المعروضة في هذايصف ورقة كيف عيب حفرة في لوحة نمو الفخذ الظنبوب يؤدي إلى الأنسجة إصلاح يمكن التنبؤ بها وقابلة للتكرار التي تبدأ التحجر في وقت مبكر بعد 7 أيام بعد الإصابة ويشكل شريط عظمي ناضجة تماما مع إعادة عرض في 28 يوما بعد الاصابة 10 . وهذا يوفر حيوان صغير في نموذج الجسم الحي الذي لدراسة الآليات البيولوجية لتشكيل شريط عظمي، وكذلك لتقييم العلاجات الجديدة التي يمكن أن تمنع شريط عظمي و / أو تجديد غضروف لوحة النمو. على سبيل المثال، يمكن استخدام هذا النموذج لاختبار المواد الحيوية تشوندروجيك التي يمكن تجديد لوحة الغضروف النمو وتقديم علاج قيمة للأطفال الذين يعانون من إصابات لوحة النمو. سوف التقنيات المعروضة في هذه الورقة تصف الطرق الجراحية المستخدمة لإنتاج إصابة لوحة النمو والتسليم اللاحق من المواد الحيوية إلى موقع الإصابة. وسوف نناقش أيضا أساليب لتقييم تشكيل شريط عظمي وإصلاح الأنسجة.
يجب أن تتم الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية من قبل المؤسسة المحلية رعاية الحيوان واستخدام اللجنة (إاكوك). تمت الموافقة على بروتوكول الحيوان للإجراءات التالية من قبل جامعة كولورادو دنفر إاكوك.
1. الحصول على الفئران
ملاحظة: ما لم تكن هناك حاجة الحيوانات المعدلة وراثيا، 6 أسابيع من العمر، غير ناضجة عظاميا هناك حاجة الفئران سبراغ-داولي في وقت الجراحة. ويمكن استخدام سلالات أخرى؛ ومع ذلك، فإن غالبية الدراسات المنشورة أجريت على الفئران سبراغ-داولي.
2. إعداد اللوازم الجراحية
3. التخدير وإعداد الحيوانات
4. إعداد تيبيا للجراحة
5. الإجراء الجراحي للوصول إلى لوحة النمو
_upload / 55571 / 55571fig1.jpg "/>
الشكل 1: نظرة عامة على الإجراء الجراحي.
أ) موقع عدة علامات التشريحية المستخدمة لخلق ناجحة إصابة لوحة النمو. كبسولة الركبة هي على الفور الخلفي إلى الرضفة (أبيض)، وفصل الساق من عظم الفخذ. ويمكن رؤية لوحة النمو الظنبوبي (الأحمر الداكن) أدنى من الركبة والتحايل على الساق. لوحة النمو القريبة هي طائرة مسطحة في الغالب، باستثناء الربع الأمامي الذي يشكل طائرة قطري. ويشكل تقاطع هاتين الطائرتين زاوية لوحة النمو، التي تستخدم لتدوير الحفر المناسب. الإدراج سيميتندينوسوس هو حيث تدرج عضلات الفخذ في الساق الخلفي. ب) شق من خلال الجانب الأمامي-الإنسي من الأنسجة اللينة الظنبوب للوصول إلى العظام القشرية. C) موقع النافذة القشرية باستخدام محاذاة مع الإدراج سيميتندينوسوس البعيدة كنقطة مرجعية. د) التقييموعمق الإصابة عن طريق محاذاة شطبة على بر الأسنان مع النافذة القشرية.
6. خلق إصابة لوحة النمو
7. إجراءات ما بعد الاصابة
نجاح إصابة لوحة النمو باستخدام هذا الأسلوب ينطوي على تعطيل مركز لوحة النمو الظنبوبي دون تعطيل سطح الغضروف المفصلي. وقد تم الإبلاغ عن الأنسجة إصلاح عظمي لتبدأ في حوالي 7 أيام بعد الإصابة ويصبح تطويرها بالكامل من قبل 28 يوما بعد الإصابة 13 ?...
نموذج نمو إصابة لوحة الحيوان يضيف إلى حد كبير إلى فهمنا للآليات البيولوجية لهذه الإصابة، مما يحتمل أن يؤدي إلى التدخلات العلاجية أكثر فعالية للأطفال الذين يعانون من إصابات لوحة النمو. لإنشاء بنجاح شريط عظمي ودراسة تشكيله في الجسم الحي باستخدام النموذج المعروض ...
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
ويعترف المؤلفون بدعم التمويل من المعهد الوطني لالتهاب المفاصل والأمراض العظمية الهيكلية والجلدية في المعاهد الوطنية للصحة (نيه) بموجب الجائزة رقم R03AR068087، وصندوق الإثراء الأكاديمي من كلية الطب كولورادو جامعة، ومركز غيتس للطب التجديدي . وأيد هذا العمل أيضا من قبل المعاهد الوطنية للصحة / نكاتس كولورادو كتسا رقم المنحة UL1 TR001082. محتويات هي مسؤولية المؤلفين وحدها ولا تمثل بالضرورة وجهات نظر المعاهد الوطنية للصحة الرسمية.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Scalpel handle | McKesson | MCK42332500 | |
Needle holder | Stoelting | RS-7824 | |
Adson tissue forceps | Sklar | 50-3048 | |
Iris Scissors | Sklar | 47-1246 | |
Rotary Tool | Dremel | 7700 | Variable speed rotary tool |
Keyless Rotary Tool Chuck | Dremel | 4486 | |
Dental Burs | Dental Burs USA | FG6 | Round carbide bur, ≤2mm |
Steinmann pins | Simpex Medical | T-078 | |
Hair clippers | Wahl | 5537N | |
3-0 PGA surutes | Oasis | MV-J398-V | |
Sterile gauze 2 x 2" | Covidien | 441211 | |
Povidone Iodine | McKesson | 922-00801 | |
Sterile saline | Vetone | 510224 | |
10 mL luer lock syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
23 gauge needle | Becton Dickinson | 305145 | |
Isopropyl alcohol pads | Dynarex | 1113 | |
Isoflurane | IsoFlo | 30125-2 | |
Caliper | Mitutoyo | 500-196-30 | |
Carprofen | Rimadyl | 27180 | |
Buprenorphine | Par Pharmaceuticals Inc | NDC 42023-179 | |
Fenestrated Surgical Drape | McKesson | 25-517 | |
Surgical Gloves | Uline | S-20204 | |
#15 Scalpel Blade | Aven | 44044 | |
9 mm wound clips | Fine Science Tools | 12032-09 | |
Reflex clip applier | World Precision Instruments | 500345 | |
Absorbant underpads | McKesson | MON 43723110 | |
Tec 3 Iso Vaporizer | VetEquip | 911103 | |
Germinator 500 | Braintree Scientific | GER 5287-120V | |
Warm water recirculator | Kent Scientific | TP-700 | |
Absorbent Underpads | Medline Industries | MSC281230 |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved