JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

هدف الاختبارات السلوكية المقدمة هنا الكشف عن عجز وظيفي في الفئران بعد إصابات الدماغ الرضية. وتعرض أربعة اختبارات محددة التي تكشف عن عجز في السلوكيات تعكس الضرر الذي لحق بمناطق محددة من الدماغ يمتد أحياناً إلى سنة واحدة بعد الإصابة.

Abstract

مع تزايد حالات إصابات الدماغ الرضية (تبي) في السكان المدنيين والعسكريين على حد سواء، تبي يعتبر الآن من أمراض مزمنة؛ ومع ذلك، حققت بضعة دراسات الآثار الطويلة الأجل للإصابات في نماذج القوارض من تبي. المعروضة هنا هي التدابير السلوكية التي راسخة في البحوث تبي مرات مبكرا بعد الإصابة، مثل أسبوعين، حتى شهرين. بعض هذه الطرق سابقا قد استخدمت في وقت لاحق بعد الإصابة، تصل إلى سنة واحدة، ولكن بعدد قليل جداً من المختبرات. الأساليب أثبتت هنا يتم إجراء تقييم عصبية قصيرة لاختبار ردود الفعل، شعاع توازن لاختبار التوازن، على شعاع-سيرا على الأقدام اختبار التوازن والتنسيق الحركي، وإصدار ذاكرة العاملة من المتاهة موريس المياه التي يمكن أن تكون حساسة للعجز في الإشارة إلى الذاكرة. ذكور الفئران تم التعامل معها وتدريبهم مسبقاً للعصبية، التوازن، والتنسيق الحركي اختبارات قبل استلام باراساجيتال قرع السوائل الإصابة (الاستثمار في الحوافظ المالية) أو الإصابة الصورية. يمكن اختبار الفئران على تقييم عصبية قصيرة (نيوروسكوري)، الشعاع-التوازن، والشعاع-سيرا على الأقدام عدة مرات، بينما تقوم باختبار في متاهة المياه يمكن أن يتم إلا مرة واحدة. ويرجع هذا الفرق الفئران يمكن أن نتذكر هذه المهمة، وبالتالي الخلط النتائج إذا كان تكرار الاختبار هو محاولة في الحيوان نفسه. عند اختبار من واحد إلى ثلاثة أيام بعد الإصابة، تم الكشف عن اختلافات كبيرة في المهام غير المعرفية الثلاثة. ومع ذلك، لم تكن الاختلافات في المهمة شعاع-سيرا على الأقدام يمكن كشفها في نقاط زمنية لاحقة (بعد 3 أشهر). تم الكشف عن العجز في 3 أشهر في الشعاع-التوازن وفي 6 أشهر في نيوروسكوري. تم الكشف عن حالات العجز في الذاكرة العاملة بها لمدة 12 شهرا بعد الإصابة، وعجزا في ذاكرة مرجع ظهرت للمرة الأولى في غضون 12 شهرا. وهكذا، يمكن أن تكون اختبارات السلوكية القياسية تدابير مفيدة لاستمرار العجز السلوكية بعد الاستثمار في الحوافظ المالية.

Introduction

الأساليب المقدمة هنا مصممة للكشف عن عجز وظيفي في مناطق محددة من الدماغ الناجم عن نموذج تجريبي من تبي في الفئران. وسيجري وصف أربعة اختبارات سلوك مختلف. أولاً، يمكن إجراء تقييم عصبية قصيرة، يشار إلى نيوروسكوري، دون الحاجة إلى أي معدات متخصصة ولكن تتطلب الممارسة؛ هذا الاختبار بالكشف عن حالات العجز في ردود الفعل. ثانيا، اختبار التوازن شعاع يكشف العجز في القدرة على تحقيق التوازن بين. هذه المهمة تتطلب معالج إلى نقاط الفئران استناداً إلى مقياس ترتيبي ويتطلب بعض التدريب للمعالج. اختبار التوازن شعاع يتطلب شعاع ضيق وحساس للعجز في النظام الدهليزية. ويقيم الاختبار الثالث التنسيق فيستيبولوموتور. هذا الاختبار يعرف باسم المهمة شعاع-سيرا على الأقدام، وعلى الرغم من أن بعض التدريب المسبق للفئران مطلوب، هذا الإجراء أكثر موضوعية من السابقتين كما زمن الوصول لاجتياز الشعاع تدبير موضوعية لا تعتمد على التهديف ذاتية. هذا الاختلاف أن يتم قياس الوقت لاجتياز شعاع ضيقة للوصول إلى خزنه. يتطلب الاختبار سيرا على الأقدام شعاع شعاع أطول من الشعاع-التوازن، فضلا عن وجود مربع هروب. هذا الاختبار يقيس العجز في التنسيق الحركي والتوازن وبالتالي هو حساسية للأضرار التي لحقت المخيخ ومناطق الدماغ المتصلة السيارات. إصدار الذاكرة العامل المتاهة المائية موريس (MWM-وات) أساسا اختبارات وظيفة هيبوكامبال والتكامل مع قشرة prefrontal أو الوظيفة التنفيذية. يمكن أيضا استخدام إصدار المتاهة المائية موريس سيظهر للكشف عن حالات العجز في مرجع الذاكرة1.

تم اختيار هذه الأساليب بناء على سجل المسار الراسخة في الأدب. كل واحدة كانت فعالة في أيدي العديد من مختبرات مختلفة مع سلالات متعددة من الفئران على مدى سنوات عديدة من البحث. ومع ذلك، في الماضي، تدابير الإصابة بعد تصل إلى أسبوعين بعد الإصابة كانت تعتبر النقاط الزمنية "مزمنة". وهكذا فعل هذه الأساليب المعروفة بحاجة إلى تقييم لحساسية للكشف عن تبي إنشاء التقنيات السلوكية لدراسة التأثيرات المزمنة من تبي في القوارض، العجز في نقاط زمنية أطول بعد الإصابة. بينما هناك الآن عدة نماذج القوارض من تبي، نموذج الاستثمار في الحوافظ المالية هي واحدة من الأكثر استخداماً، ويطبق في هذه الدراسة. نشر هذا النموذج لأول مرة في عام 19502، ومنذ ذلك الحين، استخدمت أوراق 1,000 أكثر من الاستثمار في الحوافظ المالية في الفئران3. أمراض الأعصاب لهذا النوع من الإصابات قد وصفت جيدا من قبلنا4 وآخرون5،،من67. بإيجاز، لقد ثبت إصابة الخلايا العصبية في قرن آمون أن تكون الجرعة تعتمد على استخدام مخفضات اليشم التلوين في وقت قصير بعد الإصابة، أي، ح 24-48؛ بينما ضمور الإجمالي والتجويف ذكرت بما في ذلك رقيق الكبسولة الداخلية والقشرة في غضون سنة واحدة بعد الإصابة6،7.

ويتم تقييم التمثيل الأكثر وضوحاً من وظيفة المخ باستخدام مقاييس النتائج السلوكية بعد إصابة الدماغ تجريبية. ولكن الغالبية العظمى من تجارب الاستثمار في الحوافظ المالية التي تستخدم النتائج السلوكية جعل التدابير في وقت مبكر نسبيا، عادة من 1 إلى 14 يوما بعد الإصابة. استخدام الأساليب أثبتت هنا، يمكن الكشف عن بعض حالات العجز السلوكية بها لمدة 12 شهرا بعد الإصابة1. وظيفة الجهاز العصبي والدالة فيستيبولوموتور الإجمالي والتنسيق الحركي غرامة قيمت على الإصابة بعد أيام (PIDs) 1-3، و 3، 6، و 12 شهرا بعد الجراحة، باستخدام إجراء تقييم عصبية قصيرة (نيوروسكوري؛ تعديل من شاليرت8)، فإن المهمة شعاع-التوازن، وسيرا على الأقدام شعاع المهمة9،10،11. تم تقييم مرجع والذاكرة العاملة باستخدام إصدار ذاكرة عامل موريس المياه المتاهة1،،من1213.

Protocol

أولاً الموافقة على جميع التجارب على الحيوانات برعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة لجامعة "تكساس فرع طبية"، غالفيستون، تكساس حسب توجيهات "المعاهد الوطنية للصحة دليل" لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (الطبعة الثامنة، المجلس الوطني للبحوث).

1-العمليات الجراحية وقرع السوائل تبي

  1. الحصول على الذكور البالغين 300 غرام الفئران سبراغ داولي من بائع وبيت اثنين في القفص مع الغذاء والمياه libitum الإعلانية في فيفاريوم مع ظروف ثابتة: دورة الضوء (600 ح ح 1,800)، درجة الحرارة (21 درجة مئوية إلى 23 درجة مئوية)، والرطوبة (40-60 في المائة).
  2. قبل الجراحة، والتعامل مع الفئران لمدة ثلاثة إلى خمسة أيام، وبعد ذلك تدريب الفئران نيوروسكوري، شعاع-التوازن، والإجراءات سيرا على الأقدام شعاع من واحد إلى ثلاثة أيام قبل تقييم خط الأساس. إجراء التقييم الأساس اليوم أو صباح قبل الجراحة.
    ملاحظة: دائماً إعداد الفئران التحكم، مثل الشام تعمل أو جراحيا السذاجة الفئران بنفس الطريقة كتلك التي سوف تتلقى ضرر، وأما عشوائياً أو بطريقة متوازنة، مجموعة الفئران إلى مجموعات العلاج.
  3. إجراء عمليات جراحية تحت ظروف معقمة (الصكوك العقيمة والعباءات الجراحية نظيفة والقفازات المعقمة، أقنعة وأغطية الرأس).
  4. تخدير الفئران باستخدام إيسوفلوراني في 4% لتحريض و 1.5-2% للصيانة. التنبيب وتهوية ميكانيكية الفئران (باستخدام إيسوفلوراني في الهواء: الأكسجين (مشروعاتها) والتحضير للضرر السوائل-قرع باراساجيتال كما سبق وصف14،15.
  5. اختراق مواقع بوبيفيكاني 0.10 في المائة قبل خياطة الجرح وإدراج أسيتامينوفين المستقيم لبوس (120 ملغ/كغ) قبل الصحوة من التخدير. رصد الفئران على الأقل 4 ح خلال فترة الانتعاش، وفي اليوم التالي لعلامات الإصابة، إصابة عصبية شديدة (مثل الشلل) أو مشقة شديدة (مثل موقف زغبة المستمرة).
    ملاحظة: الفئران العارضة أي من هذه الأعراض يجب أن تكون euthanized (4% إيسوفلوراني في دائرة لمخدر متبوعاً بقطع الرأس).

2-نيوروسكوري التدريب والاختبار

  1. التدريب نيوروسكوري
    1. للتدريب على الفئران من المعروف أن تجريبيا من السذاجة، تشغيل من خلال الاختبارات بالترتيب التالي (الخطوات 2.2.1-2.2.5) من البداية إلى النهاية، العودة إلى القفص المنزل لمدة 1 دقيقة، ثم كرر حتى يتم تحقيق درجة صفر.
    2. عشرات علامة على ورقة نقاط لسجل المحاكمات التدريبية لكل الفئران. بعد التدريب، تنفيذ دورة اختبار واحدة (انظر أدناه) وفي اليوم نفسه أو التالية.
      ملاحظة: إذا لا تنتج الدورة اختبار درجة صفر لخط الأساس، قد يتكرر التدريب والاختبار أو الفئران قد تحول إلى تجربة غير السلوك.
  2. اختبار نيوروسكوري
    ملاحظة: تشغيل من خلال الاختبارات بالترتيب التالي، العودة إلى القفص المنزل لمدة 1 دقيقة، ثم كرر مرتين لما مجموعة ثلاث مرات.
    1. اختبار الانحناء فوريليمب
      1. ترفع الفأر من ذيله وعقد حوالي 6-12 بوصة فوق سطح طاولة.
      2. مراقبة ما إذا كانت الفئران يمتد أو تنثني واﻷمامية. نقاط وجود الانحناء (1) أو عدم وجود (0).
        ملاحظة: انثناء غير طبيعي. درجة ممكنة من 1 × 3 = 3 (ممكن المجموع = 3).
    2. اختبار الانحناء اللكتات
      1. ترفع الفأر من ذيله وعقد حوالي 6-12 بوصة فوق سطح طاولة.
      2. مراقبة ما إذا كانت الفئران يمتد أو تنثني هيندليمبس. نقاط وجود الانحناء (1) أو عدم وجود (0).
        ملاحظة: انثناء غير طبيعي. درجة ممكنة من 1 × 3 = 3 (ممكن "المجموع التراكمي" = 6).
    3. تشغيل اختبار وضع بصريا
      1. ترفع الفأر من ذيله.
      2. انخفاض ببطء الفئران نحو حافة الجدول حتى الآنف حوالي 10 سم من الحافة.
      3. نقل الفئران ببطء نحو الحافة (عدم السماح بشعيرات للمس على حافة).
      4. مراقبة ما إذا كانت الفئران تصل إلى، ويمتد فوريباوس نحو الجدول. نقاط وجود (0) أو عدم (1) توسيع نطاق فوريباوس.
        ملاحظة: الوصول إلى الجدول في الاستجابة للإشارات المرئية عادي. درجة ممكنة من 1 × 3 = 3 (ممكن "المجموع التراكمي" = 9).
    4. تشغيل الاتصال وضع الاختبار
      1. عقد الفئران، مع الهيئة في متناول اليد، موازية إلى حافة الجدول وخالية اليدين.
      2. انخفاض ببطء الفئران نحو حافة الجدول حتى شعرات على جانب واحد لمس حافة الجدول.
      3. مراقبة عما إذا كانت الفئران تمتد فوريليمب على نفس الجانب كشعيرات أنه لمس الطاولة نحو حافة الجدول بمجرد لمسة شعيرات.
        ملاحظة: الاستثارة من هذا الرد يأخذ الممارسة كبيرة ويتعين أن الباحثين المدربين تدريبا جيدا لإجراء هذا الاختبار دائماً.
      4. نقاط وجود (0) أو (1) نظراً لعدم التوصل إلى اتجاه الجدول.
        ملاحظة: التوصل إلى استجابة للتحفيز عن طريق اللمس عادي. درجة ممكنة من 1 × 3 = 3 (ممكن المجموع = 12).
      5. كرر الخطوات 2.2.4.1-2.2.4.4 للجانب الآخر. درجة ممكنة من 1 × 3 = 3 (ممكن "المجموع التراكمي" = 15).
    5. اختبار منعكس استيعاب هيندباو
      1. عقد الفئران في ناحية الإبهام والسبابة حول الصدر تحت الأمامية.
      2. اللمس بلطف كف هيندباو واحد مع السبابة الأخرى.
      3. مراقبة ما إذا كانت الفئران يمسك السبابة. نقاط وجود (0) أو عدم (1) لاستيعاب.
        ملاحظة: استيعاب أمر طبيعي. درجة ممكنة من 1 × 3 = 3 (ممكن المجموع = 18).
      4. كرر الخطوات 2.2.5.1-2.2.5.3 للجانب الآخر. درجة ممكنة من 1 × 3 = 3 (ممكن مجموع = 21).
    6. وسجل
      1. مجموع النقاط ليصبح مجموع تراكمي ممكن 7 × 3 = 21. نقاط صفر أمر طبيعي.

3-شعاع-توازن تدريب واختبار

  1. المعدات
    1. تعيين استخدام شعاع 60 سم في الطول، 1.75 سم في العرض، 4.0 سم في الارتفاع، 90 سم قبالة الكلمة، بحاجز 30 سم في الارتفاع، 30 سم في العرض. تأمين الحزم إلى جدول مع الحاجز تعلق حتى يبرز أن 50 سم من الشعاع من الحاجز، بعيداً عن الجدول.
    2. ضع مربع سلامة خففت تحت الشعاع التخفيف من أثر الفئران التي تقع.
  2. التدريب والتوازن شعاع
    1. في 24-48 ساعة قبل الجراحة، وضع الفئران في شعاع لمحاكمة s 60.
    2. في حال عدم التوازن بمفردها الفئران، السماح للفئران لتندرج في خانة السلامة.
    3. يبدأ التوقيت عند وضع الفئران بشكل أمن على الشعاع.
    4. مراقبة الفئران لفترة ثانية ومعدل 60 أدائها استناداً إلى الجدول التالي: 1 = يظهر توازن مستقر (تهيئ، يمشي، يحاول تسلق الجدار)، 2 = يظهر توازن هش (يمسك جانبي شعاع و/أو لديه حركات متقلب)، 3 = يحاول التوازن لكن زلات س r يدور على الشعاع، توقف في طريق تعانق الشعاع، 4 = يحاول إلى التوازن، ولكن يقع بعد 10 ق، 5 = توقف أكثر أو من الحزم ويقع قبالة في أقل من 10 ق، 6 = يقع قبالة، مما يجعل أي جهد لتحقيق التوازن أو تشبث الشعاع.
    5. تسجيل النقاط في ورقة العمل.
    6. السماح للفئران للراحة لمدة 15 ثانية في قفص المنزل، ثم كرر الخطوات 3.2.1-3.2.5 حتى الفئران يحقق ثلاث درجات من 1 أو 2. وتعتبر الفئران ثم تدريبهم.
    7. إجراء تقييم مسبق واحد في 24 ساعة أو في اليوم من الجراحة قبل الجراحة.
  3. اختبار التوازن شعاع
    1. ابتداء من 24 ساعة بعد الجراحة ومستمرة لمدة 4 أيام، اختبار على الفئران يوميا.
      1. وضع الفئران في الشعاع وبدء تشغيل جهاز ضبط الوقت. ملاحظة الفئران عن كثب لسجل س. 60 نقاط على ورقة العمل.
      2. تعود الفئران إلى القفص المنزل لفترة راحة قصيرة (1-3 دقيقة).
      3. كرر الخطوات 3.3.1.1-3.3.1.2 لمجموعة اختبارات الثلاثة.

4-شعاع-سيرا على التدريب والاختبار

  1. المعدات
    1. استخدام شعاع خشبية 100 سم في الطول، 2.5 سم في العرض، و 4.0 سم في الارتفاع.
    2. إعداد حامل قابل لضبط وجدول قابل لتعديل وأوتاد أربعة، 2 سم في الارتفاع، وهدف أسود مربع 28 سم في طول و 18 سم في الارتفاع 18 سم في العرض، مع فتحه في أحد نهاية كبيرة بما يكفي للفئران ليمر.
    3. إرفاق نهاية الهدف الشعاع إلى جانب فتح مربع الهدف التي يتم وضعها في الجدول قابل للتعديل. مكان مولد الضوء والضوضاء بيضاء مشرقة قرب نهاية بداية الشعاع. بداية نهاية الشعاع ثابتة على حامل قابل لضبط ذلك الشعاع ومربع على نفس المستوى، حوالي 1 متر فوق الأرض.
  2. شعاع-سيرا على الأقدام التدريب
    1. البدء في تدريب ح 24-48 قبل الجراحة.
    2. وضع الفئران في مربع الهدف لمدة 1 دقيقة. وبعد 1 دقيقة، إزالة الفئران وبدء المحاكمة.
    3. لبدء المحاكمة، تشغيل الضوء والضوضاء البيضاء ووضع الفئران في الشعاع في موقع حفرة شماعة الأقرب إلى مربع الهدف والسماح للفئران لإدخال في مربع الهدف.
    4. عند أقدام الجبهة للفئران عبور العتبة في مربع الهدف، فورا إيقاف مصادر الضوء والضوضاء (هذا هو نهاية محاكمة واحدة).
    5. السماح للفئران للراحة في مربع الهدف لمدة 30 ثانية بين كل محاكمة.
    6. كرر الإجراء في الخطوة 4.2.3-4.2.5 مرتين في كل مكان الوتد ومن نقطة الانطلاق. إدراج أوتاد في الثقوب وتشغيل الحزمة كاملة واحدة-سيرا على الأقدام مع أوتاد في المكان.
    7. تشغيل ثلاث محاكمات سيرا على الأقدام شعاع موقوت.
      1. إزالة الفئران من مربع الهدف. قم بتشغيل الضوء والضوضاء البيضاء وبدء تشغيل ساعة الإيقاف عند وضع الفئران في الشعاع. إيقاف مراقبة وقف على الفور عند أقدام الجبهة للفئران عبور العتبة في مربع الهدف، ثم قم بتشغيل فورا بعيداً عن النور والضوضاء.
      2. سجل الوقت على ورقة العمل.
      3. كرر الخطوات 4.2.7.1-4.2.7.2 حتى الفئران حققت ثلاث مرات من 5 s أو أقل. يعتبر الآن من الفئران المدربة.
  3. شعاع-سيرا على الأقدام تقييم خط الأساس
    1. في اليوم أو صباح قبل الجراحة، القيام بثلاث محاكمات موقوت بأوتاد في المكان.
    2. ابدأ بوضع الفئران في مربع الهدف لإزالة س. 30 الفئران من مربع الهدف ودورة عن الضوضاء البيضاء والخفيفة. وضع الفئران في بداية نهاية الشعاع وفي نفس الوقت بدء التوقف عن مشاهدة. عند أقدام الجبهة للفئران عبور العتبة في مربع الهدف، فورا إيقاف مصادر الضوء والضوضاء وإيقاف جهاز ضبط الوقت.
    3. سجل الوقت على ورقة العمل. السماح للفئران للبقاء في مربع الهدف لمدة 30 ثانية.
    4. كرر الخطوات 4.3.2-4.3.3 حتى الاختفاء الثلاثة مسجلة على ورقة العمل. العودة الفئران إلى القفص المنزل بعد الانتهاء من المحاكمات الثلاث المحددة زمنياً.
  4. اختبار الحزمة--سيرا على الأقدام
    1. اختبار على الفئران يوميا ابتداء من 24 ساعة بعد الجراحة ومستمرة لمدة تصل إلى 4 أيام. إجراء ثلاث تجارب توقيت كما هو الحال في الخطوات 4.3.

5-تعمل ذاكرة المياه المتاهة

  1. المعدات
    1. استخدام خزان مليئة بالمياه بارتفاع 28 سم والإبقاء على 26 ± 1 درجة مئوية.
    2. استخدام منصة زجاج اكريليك واضحة 10 سم في القطر على الوقوف 26 سم في الطول.
      ملاحظة: السطح العلوي للمنهاج ينبغي أن تكون مغلفة بالسيليكون على شكل دائرة مع X عبرها. هذا يسمح للفئران إلى الصعود على المنصة ويعطيهم الجر حيث أنها لا تنزلق قبالة.
    3. جمع ساعة توقيت ومصباح حرارة والمناشف المتاح، ومنصات ماصة، أقفاص إضافي وأسماك الزينة الصغيرة، والتعامل معها منذ فترة طويلة صافي. استخدام فيديو محوسبة تتبع نظام متصل بكاميرا فيديو لتسجيل السباحة الفئران وإرسال البيانات إلى جهاز الكمبيوتر. حفظ الفيديو والبيانات على جهاز الكمبيوتر لتحليلها في وقت لاحق.
  2. تعمل ذاكرة المياه اختبار المتاهة
    1. إعطاء الفئران أربعة أزواج من تجارب كل يوم لمدة خمسة أيام متتالية ووضع منهاج العمل في كل من الأرباع الأربعة وتبدأ الفئران من كل مجموعة من أربع نقاط انطلاق (ن، ق، ه، ث) كما هو موضح أدناه.
    2. أولاً تعريف أزواج موقع منصة انطلاق لاستخدامها في جميع أنحاء هذه التجربة.
      ملاحظة: ترتيب الأرباع حيث يقع المنصة واستخدامها نقطة انطلاق الاحتياجات لتكون في ترتيب مختلف لكل يوم من الأيام الخمسة للسباحة، ولكن نفسه بالنسبة لكل الفئران.
      1. استخدام أربع نقاط انطلاق (ن، ق، ه، أو W) وأربعة مواقع منصة (الأرباع 1، 2، 3، أو 4؛ الشكل 1). على سبيل المثال، (N، 2؛ ه، 4؛ S، 1؛ ث، 3؛ انظر الشكل 1). خطة نظام متوازن (غير عشوائية) لتجنب نقاط انطلاق قريبة جداً من الأنظمة الأساسية (لا نقطة البداية هي رباعي نفس كموقع منصة). قم بإعداد ورقة بيانات باستخدام منصة الأرباع وأربع نقاط الانطلاق.
      2. كتابة بروتوكول للفيديو تتبع البرامج لاستخدام الترتيب بالفيديو على الفئران السباحة وجمع البيانات المحددة (مثل، مدة السباحة والسرعة والمسافة سافر قبل إيجاد منهاج العمل).
        ملاحظة: تتبع البرمجيات سيتم تلقائياً بإيقاف التسجيل بعد المدة المحددة. البروتوكول ينبغي أن تسمح بتحديد حيث يتم وضع منهاج العمل، عدد من المحاكمات لتشغيل كل الحيوانات، وسوف تختبر كم عدد الحيوانات في الدورة الواحدة، ويسمح أيضا بالحد الأقصى لمدة (مثلاً، 120 s).
      3. اختبار الفئران 4-6 في الدورة الواحدة.
        ملاحظة: إنشاء مشكلة في التوقيت بين الفئران الفئران أكثر من 6 ويمكن أن يؤدي إلى الخطأ بواسطة معالج. كما أصبحت مربعات الاحترار مزدحمة.
    3. الابتدائية 1
      1. فتح الفيديو تتبع البرامج وتحميل البروتوكول الصحيح بما في ذلك خريطة المتاهة المائية.
      2. وضع منهاج العمل في موقع معين (مثلاً، 2؛ الشكل 1) وتحقق من أن يطابق الخريطة في البرنامج. إعداد تتبع البرمجيات لبدء عند الفئران يدخل مجال الرؤية من كاميرا الفيديو.
      3. وضع الفئران في الدبابة التي تواجه الجدار في موقع معين (مثلاً، ن؛ الشكل 1) وفور بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت.
      4. تسمح s الفئران 120 لإيجاد منهاج العمل. عندما يرى الفئران المنهاج، إيقاف جهاز ضبط الوقت وتسجيل الوقت في ورقة العمل. في حال عدم العثور المنصة الفئران، يؤدي ذلك إلى المنصة باليد وتسجيل 120 السماح s. s الفئران 15 البقاء على المنصة.
    4. المحاكمة 2
      1. تحقق من أن البرنامج مستعد للمحاكمة 2. مكان الفئران مرة أخرى في الخزان في نفس الموضع البداية (N). كرر الخطوة 5.2.3.4.
    5. بعد المحاكمة 2، وضع الفئران في الضميمة ساخنة لدقيقة 4 تحرك النظام الأساسي إلى الموقع الثاني (4؛ الشكل 1)، وتحقق من أن يطابق الخريطة في البرنامج.
    6. يتم إكمال تكرار المحاكمة 1 و 2 الإجراءات (الخطوات 5.2.3-5.2.4) حتى الأربعة ابتداء من الازدواجات الموقع/منصة.

6-بيانات التحليل

  1. نيوروسكوري
    1. نقل النتائج المكتوبة بخط اليد إلى جدول بيانات كمبيوتر يدوياً.
    2. مجموع النتائج لكل محاكمة للحصول على الدرجات الثلاث كل الفئران في كل يوم.
    3. تنسيق البيانات للتحليل الإحصائي (أما بتنسيق طويل أو على نطاق واسع اعتماداً على تفضيل البرمجيات).
      ملاحظة: تنسيق طويلة يحتوي على عمود واحد للعلاج (في هذه الحالة، نشر مع "السذاجة" أو "صورية"، أو "تبي")، عمود واحد لليوم (في هذه الحالة "0" أو "1" أو "2" أو "3")، وعمود واحد للمحاكمة ("1"، "2" أو "3"). التنسيق على نطاق واسع بعمود واحد لكل تركيبة من مستويات عوامل (حيث عمود مفرد للسذاجة، اليوم 0، 1 المحاكمة، عمود آخر للسذاجة، اليوم 0، 2 للمحاكمة، إلخ)
    4. متوسط النقاط لكل الحيوانات في كل يوم. إذ كانت هناك ثلاث محاكمات القيام به في كل يوم سيكون هناك ثلاث قيم لكل الحيوانات في اليوم الواحد.
    5. تقييم ما إذا كان يتم عادة توزيع البيانات. استخدام اختبار nonparametric إحصائية (مثلاً، كروسكال-واليس) لتحليل ما إذا كانت النتيجة في كل يوم يختلف بين المجموعات. في هذه الحالة، حيث أن هذه البيانات ليست مستمرة، أنها ليست عادة موزعة.
    6. لتحديد أين تكمن الاختلافات، القيام باختبارات وظيفة مخصصة ، مثل تحليل الوظيفة المخصصة توكي.
      ملاحظة: هنا، حزمة البرامج الإحصائية ص16، الدالة Kruskal.test() والداله posthoc.kruskal.nemenyi.test داخل بيرويس متعددة مقارنة ليعني صفوف الحزمة (بمكمر)17 استخدمت.
    7. بالإضافة إلى ذلك، بإجراء اختبار لمعرفة إذا كان هناك أي اختلافات بين الأيام داخل كل مجموعة.
      ملاحظة: على سبيل المثال، لمعرفة إذا كان الشام الحيوانات تتصرف بشكل مختلف في اليوم 0 مقارنة بيوم 1 أو 2 يوم أو 3 يوم. للقيام بذلك، قم بتشغيل تدابير متكررة أحادي اتجاه ANOVA. يمكن أن يتحقق هذا في البحث والتطوير باستخدام الدالة ازانوفا ضمن الحزمة لوبيز.
    8. لتشغيل تدابير متكررة ANOVA، تحقق أولاً من الافتراض حول كروية.
      ملاحظة: هنا، تشير البيانات إلى أنه داخل معامل (اليوم) هل يجتمع افتراض كروية للسذاجة والشام، ولكن ليس من أجل تبي. وهكذا، تصحيح ليس من الضروري للسذاجة أو الشام. للبيانات تبي، استخدام التصحيح يكون الاحتباس الحراري.
    9. إذا تم العثور على اختلافات كبيرة، قم بتشغيل اختبار وظيفة مخصصة لتحديد أين تكمن أوجه الاختلاف. ويتحقق ذلك باستخدام اقتران تيآر-اختبار الدالة. ارسم النتائج كقطعة أرض مربع، كما هو مبين في نتائج الممثل (الشكل 2).
  2. شعاع-التوازن
    1. نقل عشرات مكتوبة بخط اليد إلى جدول بيانات كمبيوتر يدوياً. تنسيق البيانات للتحليل الإحصائي (أما بتنسيق طويل أو على نطاق واسع اعتماداً على تفضيل البرمجيات). راجع الملاحظة في الخطوة 6.1.3.
    2. متوسط الدرجات لكل الفئران في كل يوم حتى يكون كل فأر 01:20 ص يوميا. لاختبار ما إذا كانت النتيجة في كل يوم يختلف بين السذاجة والشام تبي، تقييم ما إذا كان يتم عادة توزيع البيانات.
      ملاحظة: في هذه الحالة، نظراً للبيانات ليست مستمرة، هذه البيانات ليست عادة موزعة. ولذلك، استخدم اختبار إحصائية nonparametric (مثلاً، اختبار كروسكال-واليس).
    3. لتحديد أين تكمن الاختلافات، القيام باختبارات وظيفة مخصصة ، مثلاً، تحليل الوظيفة المخصصة في توكي. تدابير التشغيل المتكررة اتجاه واحد لاختبار الفروق بين الأيام داخل كل مجموعة العلاج، ANOVA (راجع الخطوة 6.1.7). تحقق الافتراض حول كروية.
      ملاحظة: في هذه الدراسة، تشير البيانات التي داخل معامل (اليوم) لا يفي بافتراض كروية لأي من الجماعات، حتى تستخدم استمرارية التصحيحات. استخدام التصحيح استمرارية غرير الاحتباس الحراري.
    4. ارسم النتائج على قطعة أرض مربع كما هو موضح في نتائج الممثل (الشكل 3).
  3. شعاع-سيرا على الأقدام
    1. نقل النتائج المكتوبة بخط اليد إلى جدول بيانات كمبيوتر يدوياً. متوسط الاختفاء شعاع-سيرا على الأقدام ثلاثة لكل الحيوانات لكل يوم. تنسيق البيانات للتحليل الإحصائي (راجع الخطوة 6.1.3).
    2. تقييم ما إذا كان يتم توزيع البيانات عادة.
      ملاحظة: في هذه الحالة، البيانات مستمر، ويتم توزيع عادة. ولذلك، استخدام ANOVA أحادي اتجاه تحديد ما إذا كان الكمون كل يوم مختلفة بين السذاجة والشام تبي.
    3. لمعرفة ما إذا كان هناك أي فرق بين أيام ضمن مجموعة معالجة، تشغيل تدابير متكررة أحادي اتجاه ANOVA. تحقق أولاً من الافتراض حول كروية.
      ملاحظة: في هذه الدراسة، تشير البيانات التي داخل معامل (اليوم) لا يفي بافتراض كروية لأي من مجموعاتنا، حيث تستخدم تصحيحات الاستمرارية. استخدام التصحيح غرير الاحتباس الحراري.
    4. ارسم النتائج على قطعة أرض مربع كما هو موضح في نتائج الممثل (الشكل 4).
  4. تعمل ذاكرة المياه المتاهة
    1. نقل البيانات من ورقة العمل أو الكمبيوتر برنامج التتبع إلى جدول بيانات. حدد النتائج التي يتم تحليلها.
      ملاحظة: تتوفر العديد من النتائج المحتملة للتحليل من تتبع برامج الكمبيوتر. أمثلة عن النتائج المحددة للتحليل قد تشمل: الكمون وطول المسار، ثيجموتاكسيا، والسباحة بسرعة. الأكثر شيوعاً هو نتيجة الكمون، كما تستخدم في المثال المتوفر.
    2. تنسيق البيانات للتحليل الإحصائي (أما بتنسيق طويل أو على نطاق واسع اعتماداً على تفضيل البرمجيات).
      ملاحظة: تنسيق طويلة يحتوي على عمود واحد للعلاج (في هذه الحالة، نشر مع "السذاجة" أو "صورية"، أو "تبي")، عمود واحد لليوم (في هذه الحالة "1" أو "2" أو "3", "4" أو "5") وعمود واحد للمحاكمة (أما "1"، "2"، "3"، "4"، "5" ، "6"، "7"، أو "8"). نحن أيضا بحاجة إلى عمود إضافي لتحديد هذه المحاولة ("1" أو "2"). تنسيق واسعة بعمود واحد لكل تركيبة من مستويات عوامل (عمود مفرد للسذاجة، على سبيل المثال، اليوم 1، محاولة للمحاكمة 1، 1، عمود آخر للسذاجة، اليوم 1، محاولة تجريبية 2، 2). أيضا، يمكن حسابها لكل دورة الفرق بين المحاكمة 1 و 2 المحاكمة وتحليلها كنقاط اختلاف.
    3. لمعرفة إذا كان هناك فرق عموما بين الفئات الإصابة، نفذ الخطوات التالية.
      1. أولاً، متوسط زمن المتاهة المائية لكل الحيوانات ليوم 1.
        ملاحظة: هناك أربع جلسات في كل يوم، وحتى متوسط القيم الأربعة للحيوان الواحد لكل 1 المحاكمة والمحاكمة 2. هذا الحساب في الأيام المتبقية، وكذلك.
      2. للتحقق من وجود اختلافات الإصابة عموما، تشغيل تدابير متكررة اتجاهين ANOVA. هناك عاملين وإصابة اليوم. الضرر بين الفريق العامل واليوم داخل الفريق العامل. ملاحظة: هنا استخدمت R.
      3. إذا كانت النتائج تشير إلى اختلاف كبير بسبب الإصابة، ثم قم بتشغيل توكي وظيفة مخصصة اختبار لمعرفة أين تكمن أوجه الاختلاف.
    4. للعثور على خارج عما إذا كانت هناك اختلافات بين المجموعات الإصابة في أيام محددة بالخطوات التالية.
      ملاحظة: يوم 1 يستخدم كمثال، والتحليل نفسه يحتاج إلى القيام بذلك لجميع الأيام التالية. أيضا، وهذا التحليل يتم بعدة طرق، أولاً للمحاكمة 1 فقط، الثانية للمحاكمة 2 فقط، والثالث للفرق بين المحاكمة 1 و 2 المحاكمة. المحاكمة 1 يستخدم كمثال؛ نفس الخطوات بحاجة إلى استخدامها للتحليلات الأخرى.
      1. أولاً، متوسط زمن المتاهة المائية لكل الحيوانات ليوم 1. نظراً لوجود أربعة من التكرار "المحاكمة 1" في كل يوم، متوسط القيم الأربعة لكل الحيوانات.
      2. تقييم ما إذا كان يتم توزيع البيانات عادة.
        ملاحظة: في هذه الحالة، البيانات مستمر، ويتم توزيع عادة. ولذلك، استخدام ANOVA في اتجاه واحد لتحديد إذا كان الكمون المتاهة المائية في يوم 1 مختلفة بين السذاجة والشام تبي. تم استخدام حزمة البرامج الإحصائية R والدالة aov() هنا.
      3. استخدام دلالة لمستوى 5%. إذا كان الناتج فالقيمه أقل من 0.05، فهناك اختلافات كبيرة بين المجموعات.
      4. لتحديد أين تكمن تلك الاختلافات، استخدم اختبار الوظيفة المخصصة توكي. وهذه هي الدالة TukeyHSD() في ر.
    5. لمعرفة ما إذا كانت هناك اختلافات بين أيام ضمن مجموعات علاجية، اتبع الخطوات التالية.
      1. أولاً، قم بتشغيل تدابير متكررة أحادي اتجاه ANOVA. يمكن أن يتحقق هذا في البحث والتطوير باستخدام الدالة ازانوفا ضمن الحزمة لوبيز.
      2. قبل تشغيل تدابير متكررة ANOVA، تحقق أولاً من الافتراض حول كروية.
        ملاحظة: داخل عاملاً يجتمع (اليوم) على افتراض كروية لجميع المجموعات، وبالتالي ليست هناك حاجة لاستخدام التصحيحات الاستمرارية.
      3. إذا تم العثور على الاختلافات بين الأيام (فقيم أقل من 0.05)، ثم قم بتشغيل اختبار وظيفة مخصصة لتحديد بالضبط أين تكمن أوجه الاختلاف. وتتم هذه الخطوة في البحث والتطوير باستخدام الدالة pairwise.t.test.
    6. الرسم البياني النتائج باستخدام الرسوم البيانية خط (الشكل 5). أيضا، يمكن رسوم بيانية المحاكمة الابتدائية 1 2.

النتائج

وتبين النتائج الداخلي نيوروسكوري (الشكل 2) كل من إمكانات إيجابية كاذبة (مجموعات الشام وتبي يوم 0) وحساسية هذا الاختبار للكشف عن الاختلافات الصغيرة. يمكن أن يحدث المغلوطة عند الفئران ليس جيدا اعتادوا على الإجراءات، حتى أنها ليست مريحة تماما. اليوم 0 مثالي قبل الجراحة، وحتى جميع الفئران ينبغي التوصل إلى معيار درجة صفر قبل الدخول في دراسة. الأيام 1-3 إبداء حساسية هذا الاختبار للكشف عن تغيرات صغيرة في النتيجة. بينما هناك إمكانات لتصل إلى 21 درجة، درجات أعلى من 3 غير معتادة في هذا النموذج. في هذا المثال، تكرار التدابير ANOVA وكشف أية اختلافات بين الأيام للسذاجة (p = 0.78) أو الصورية (ف = 0.09)؛ بيد أن الفريق تبي هناك اختلافات بين أيام (ف < 0.05). الوظيفة المخصصة عشوائية مقارنة بينت أن اليوم 0 تختلف اختلافاً كبيرا عن أيام 1 و 2 و 3. هذه النتيجة تبين أن الضرر الذي ينتج تغييرات صغيرة ولكنها هامة في تقييم الجهاز العصبي.

مزيد من التحليل باستخدام اختبار كروسكال-واليس مقارنة ساذجة والشام تبي كل يوم، تليها توكي وظيفة مخصصة اختبار لتحديد بالضبط أين تكمن أوجه الاختلاف. اليوم 0، تم إحصاء الاختبار 13.37، ف = 0.001، والشام كانت تختلف اختلافاً كبيرا عن السذاجة (p = 0، 008). ومن الناحية المثالية، ينبغي أن يكون هناك أية فروق بين المجموعات في اليوم 0، لا علاج أو إجراءات قد تم إدارتها. في هذه الحالة، على الفئران ينبغي كذلك اعتادوا على الإجراء، أو نقلها إلى دراسة السلوك. 1 يوم، تم إحصاء الاختبار 32.39، ف = 9.75e-8، مع اختبار وظيفة مخصصة ، تشير إلى أن الشام وتبي قد تختلف اختلافاً كبيرا من السذاجة (p = 0.002، ف = 5.9e-7، على التوالي). ليوم 2، تم إحصاء الاختبار 23.39، ف = 8.34e-6، والشام وتبي كانت مختلفة من السذاجة (p = 0.002، ف = 6.8e-5). ليوم 3، تم إحصاء الاختبار 38.4، ف = 4.59e-9، ومرة أخرى، كانت الشام وتبي تختلف اختلافاً كبيرا من السذاجة (p = 0.001، ف = 2.1 e-8، على التوالي). هذه النتائج تشير إلى أن إعداد الشام تنتج أيضا بعض أوجه القصور في تقييم العصبية في بعض الأحيان مبكرا بعد الإصابة.

تبين النتائج الممثل شعاع-التوازن (الشكل 3) حساسية الاختبار شعاع-التوازن إلى عجز بعد وقت قصير من إصابة (الشكل 3، اليسار) وعند نقطة وقت أطول بعد الإصابة (الشكل 3، حق). يقلل حساسية اختبار التوازن شعاع لآثار إصابة في الدماغ على مر الزمن، لأن الفئران يصب في السن وزيادة الوزن، زادت صعوبة الموازنة على الشعاع. في وقت لاحق النقاط الزمنية، يتم تشغيل الشعاع حتى الفئران هي موازنة الجانب الأوسع للشعاع. ومع ذلك، قبل 6 أشهر بعد الإصابة، هذا الاختبار لم يعد الحساسة لآثار الإصابة حسب العمر و/أو الوزن الخلط بين القدرة على أداء المهمة (الشكل 3، حق). وبدلاً من ذلك، الشفاء قد حدثت في نظام الدهليزية، وتعبر بدقة عن هذه البيانات أن الفئران القدرة على تحقيق التوازن بين تصل إلى نفس مستوى مجموعات التحكم.

في المقارنة بين السذاجة والشام تبي كل يوم، قمنا باستخدام اختبار كروسكال-واليس. النتائج للنقاط الزمنية في وقت مبكر بعد الإصابة وترد في الشكل 3، غادر. في اليوم 0، وجد اختبار كروسكال-واليس قيمة إحصائية الاختبار أن تكون 6.81، ف = 0.033. وكان هناك فرق كبير بين المجموعات، مع اختبار الوظيفة المخصصة توكي تبين أن من السذاجة الفريق كان يختلف عن الشام (p = 0.038)؛ بيد أن جميع الفئات الثلاث يعني أقل من 2.0، مما يشير إلى أن جميع الفئران قد استوفت معايير مواصلة. أنه سيكون من الأفضل أن يكون أية فروق بين المجموعات في اليوم 0، ولكن نظراً لجميع الفئات أقل من 2، يمكن أن تستمر في الدراسة. 1 PID، تم إحصاء اختبار كروسكال-واليس 69.72، ف = 7.25e-16. اختبار الوظيفة المخصصة توكي أظهرت أن المجموعة تبي تختلف اختلافاً كبيرا عن المجموعات كلا من السذاجة والشام (p = 4.9e--14، ف = 9.1e-08، على التوالي). في اليوم 2، تم إحصاء اختبار كروسكال-واليس 62.84 و p = 2.26e--14، مع اختبار وظيفة مخصصة تظهر تبي مختلفة من السذاجة والشام (p = 1.0 e-10، ف = 2.1 e-10 على التوالي). في يوم 3، كان إحصاء اختبار كروسكال-واليس 62.69 و p = 2.44e-14. وأظهر اختبار وظيفة مخصصة تبي مختلفة من السذاجة والشام، (p = 9.6e-12، ف = 1.7 e-08، على التوالي). بالإضافة إلى ذلك بحثنا لمعرفة ما إذا كانت هناك أية اختلافات بين الأيام داخل كل مجموعة. المتكررة باستخدام تدابير ANOVA، للسذاجة، لم تكن هناك فروق بين الأيام (p = 0.367). للشام وتبي كانت هناك اختلافات بين الأيام (p = 0.002، ف = 3.90e-29، على التوالي). مقارنات عشوائية الوظيفة المخصصة وكشف للشام يوم 1 يختلف كثيرا عن يوم 2 و 3 يوم (p = 0.001، ف = 0.01، على التوالي)، وهو اليوم 0 تبي، شكلاً مختلفاً إلى حد كبير أيام 1 و 2 و 3 (ف < 2e-16، p = 5.5e-16، و p = 2.7e-13، على التوالي). 1 اليوم أيضا تختلف اختلافاً كبيرا عن 3 يوم (p = 0.036).

في 6 أشهر بعد الإصابة، أجريت مقارنات بين السذاجة والشام تبي كل يوم باستخدام اختبار كروسكال-واليس (الشكل 3، حق). اليوم 0، كانت قيمة إحصائية الاختبار 3.36 و p = 0,187، حيث لم تكن هناك فروق في اليوم 0. وكانت جميع الوسائل أقل من 2، مشيراً إلى أن جميع الفئران ومجموعات تفي بمعايير الاستمرار في الدراسة. 1 PID، تم إحصاء الاختبار 6.11، ف = 0.047؛ ومع ذلك، تحليل الوظائف المخصصة باستخدام اختبار توكي الوظيفة المخصصة أظهر أن أيا من الجماعات تختلف اختلافاً كبيرا عند المحاسبة لاختبار الفرضية متعددة. في اليوم 2، تم إحصاء الاختبار 4.09، ف = 0.13، ns، وفي يوم 3، تم إحصاء الاختبار 2.91، ف = 0.23، ns. وهكذا، لم تكن هناك فروق بين المجموعات الإصابة في أي يوم من الأيام.

بالإضافة إلى ذلك، النظر في الاختلافات بين أيام ضمن مجموعات علاجية، تدابير متكررة ANOVA كشفت عن اختلافات كبيرة بين الأيام للسذاجة والشام تبي (p = 0.0003، p = 2.61e-5، ف = 5.59e-7، على التوالي؛ الشكل 3، حق). أظهرت اختبارات الوظيفة المخصصة الاختلافات التالية. للسذاجة، وكان يوم 0 تختلف اختلافاً كبيرا عن أيام 1 و 2 و 3 (p = 0.002، ف = 0.044، p = 0.004، على التوالي). للشام، جميع أيام كانت تختلف اختلافاً كبيرا عن بعضها البعض: اليوم 0 وكان يختلف اختلافاً ملحوظا عن أيام 1 و 2 و 3 (p = 0.0006، ف = 0.001، ف = 0.0006، على التوالي)؛ كان يوم 1 تختلف اختلافاً كبيرا عن أيام 2 و 3 (p = 0.031، ف = 0.0006، على التوالي)؛ وتختلف اختلافاً كبيرا عن 3 يوم 2 يوم (p = 0.044). أجل تبي، اليوم 0 يختلف كثيرا عن أيام 1 و 2 و 3 (p = 0.0005، ف = 0.0008، ف = 0.0005، على التوالي).

وترد نتائج اختبار الحزمة--سيرا على الأقدام في نقطتين الوقت (الشكل 4). مشابهة للشعاع-التوازن، يكشف هذا الاختبار العجز مبكرا بعد الإصابة (الشكل 4من اليسار). ومع ذلك، هناك قبل 6 أشهر بعد الإصابة، لا توجد اختلافات كبيرة بين المجموعات (الشكل 4، حق)، مما يوحي بشفاء حدثت في الفريق المتضرر. هذه النتيجة قد تعكس آثار سن متقدمة أكثر وزيادة في الوزن.

لمقارنة ساذجة والشام تبي في كل يوم في وقت مبكر بعد الإصابة، استخدمت ANOVA أحادي اتجاه. لم تكن هناك فروق في اليوم 0 (F = 0.859، ف = 0.426) وجميع الاختفاء كانت أقل من 5 s، مشيراً إلى أن جميع الفئران تفي بمعايير الاستمرار في الدراسة. 1 PID، كان هناك إحصائية اختبار كبيرة من 15.36، ف = 1.18e-6. اختبار الوظيفة المخصصة في توكي أشار إلى اختلاف كبير بين تبي والسذاجة (ف = 0.000004) ومن تبي والشام (p = 0.0001). في اليوم 2، كان هناك فارق كبير بين المجموعات (F = 9.49، p = 0.0002). اختبار وظيفة مخصصة تكشف عن فروق بين تبي والسذاجة (ف = 0.0002) تبي والشام و (p = 0.005). في يوم 3، يساوي إحصاء الاختبار العام 6.27، ف = 0.0025، مما يشير إلى وجود اختلافات بين الجماعات. وأظهر اختبار الوظيفة المخصصة في توكي أنه مختلفة من السذاجة والشام مرة أخرى، تبي (p = 0.003، ف = 0.035، على التوالي).

باستخدام مقياس متكررة أحادي اتجاه ANOVA، تم استكشاف الاختلافات بين أيام ضمن مجموعات علاجية. أولاً تم فحص افتراض كروية لكل مجموعة. داخل معامل (اليوم) لا تفي بافتراض كروية للفئات ساذجة أو الصورية، وبالتالي تصحيح الاستمرارية، والاحتباس الحراري-غرير تم تطبيقها على تلك المجموعات. للشام، لم تكن هناك فروق بين الأيام (ف = 0.066)، والسذاجة وهناك تبي (p = 0.006، ف = 2.89E-7، على التوالي). أظهرت المقارنات وظيفة مخصصة للسذاجة، كان الفارق بين اليوم 0 و 1 يوم (p = 0.003). أجل تبي، كانت الاختلافات بين اليوم 0 وأيام 1 و 2 و 3 (ف = 9.2e-6، ف = 0.0005، ف = 0.002، على التوالي)، وكان هناك فرق بين يوم 1 و 3 يوم (p = 0.018).

في 6 أشهر بعد الإصابة، كانت هناك لا اختلافات هامة بين السذاجة، أو الشام، أو تبي في أي يوم (اليوم 0 و = 0.315، p = 0.732؛ يوم 1، F = 0.336، p = 0.717؛ يوم 2، F = 0.5، p = 0.61؛ يوم 3، F = 1.17، p = 0.322؛ الرقم 4، حق). عند مقارنة الاختلافات بين الأيام داخل كل مجموعة، كان هناك اختلاف كبير في المجموعة تبي (ف = 0.026)، مع يوم 0 تختلف عن أيام 1 و 2 و 3 (ف = 0.026، ف = 0.002، p = 0.002). لم تكن هناك فروق بين أي عدد من الأيام للسذاجة أو الصورية (p = 0.104، p = 0.063، على التوالي).

يمكن رسوم بيانية البيانات من إصدار الذاكرة العامل المتاهة المائية موريس في مجموعة متنوعة من الطرق. هنا نظهر النتائج لمدة 3 أشهر (الشكل 5، اليسار) وخط 12 شهرا (الشكل 5، حق) بعد إصابة كليهما باستخدام الرسوم البيانية لتمثيل الوقت بالطبع، والمؤامرات مربع لتقديم موجز إجمالي للبيانات (الشكل 5، أسفل). فإننا يمكن أن ثم تصور مقارنات 1 المحاكمة ومقارنات 2 المحاكمة بشكل مستقل في كل يوم، فضلا عن الاختلافات العامة سبب الإصابة. الاختفاء المحاكمة 1 تمثل الذاكرة المرجعية والاختفاء 2 المحاكمة تصوير الذاكرة العاملة.

ويبين الشكل 5، اليسار البيانات من الفئران 3 أشهر بعد الإصابة. للمحاكمة 1 (الشكل 5، أعلى اليسار)، وعند مقارنة ساذجة والشام تبي، إلا يوم 4 أظهرت فرقا كبيرا بين المجموعات (F = 4.12، ف = 0.025)، مع اختبار توكي وظيفة مخصصة ليشير إلى أن تبي كان مختلفاً عن ساذجة (p = 0,019). لمحاكمة 2 (الشكل 5، وسط اليسار)، كان هناك اختلاف كبير في يوم 1 (و = 5.93، ف = 0.006)، مع تحليل الوظائف المخصصة مما يبين أن تبي مختلفة من الشام (p = 0.005). التدابير المتكررة ANOVA لم يجد فرق عموما بين الفئات إصابة في 3 أشهر (p = 0.56). توحي هذه النتائج أن هذه الفئران قد عجز صغيرة ولكنها هامة في مرجع، فضلا عن ذاكرة العمل في 3 أشهر بعد الإصابة.

عند 12 شهرا بعد الإصابة، مقارنة ساذجة 1 المحاكمة والشام تبي (الشكل 5، يمين)، كرر التدابير ANOVA تبين أثر شاملة من الإصابة (F = 3.94، p = 0.03). كشف مقارنات عشوائية أن تبي تختلف اختلافاً كبيرا عن كل من السذاجة والشام (p = 0.043 و p = 0.006.، على التوالي) (الشكل 5، أسفل اليمين). وباﻹضافة إلى ذلك، اكتشفت فرق كبير بمقارنة المجموعات الإصابة في كل يوم، استخدام ANOVA اتجاه واحد، في يوم 3 (F = 7.28، p = 0.003). كشف مقارنة الوظائف المخصصة أن تبي مختلفة من الشام (p = 0.0018) (الشكل 5، أعلى اليمين). 2 المحاكمة، وجد التدابير المتكررة ANOVA فرقا كبيرا بسبب الإصابة (F = 3.97، ف = 0.029)، مع مقارنات عشوائية الوظيفة المخصصة الكشف عن الفرق بين تبي والشام (ف = بين 0.017) (الرقم 5 ، أسفل اليمين). أحادي الاتجاه ANOVA في كل يوم وجدت اختلافات كبيرة في أيام 2 و 4. 2 في اليوم (و = 4.02، ف = بين 0.028)، وجد اختبار الوظيفة المخصصة في توكي أن تبي مختلفة من الشام (p = 0.023). في يوم 4 (و = 4.12، ف = 0.026)، تحليل الوظائف المخصصة وجد اختلاف بين تبي والشام (p = 0.025) (الشكل 5، الأوسط الأيسر).

figure-results-12554
رقم 1. الرسم التخطيطي للمتاهة المائية- يوضح هذا الرسم التخطيطي بمواقع منصة ممكنة (1، 2، 3، 4) ونقطة انطلاق (ن، ق، ه، ث) للمتاهة المائية موريس الذاكرة العاملة. ويسمح الفئران تجربتان من كل زوج الموقع/منصة انطلاق. وهناك 15 s الفاصل الزمني بين المحاكمة وباقي 4 دقيقة في غرفة الاحترار بين أزواج من المحاكمات لما مجموعة أربعة أزواج من المحاكمات لكل جلسة عمل اليومية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

figure-results-13219
رقم 2. نتائج test. نيوروسكوري وتم تدريب جميع الفئران لمهام الاختبار منعكس بسيط قبل يوم 0 (انظر نص لمزيد من التفاصيل حول التدريب والاختبار، وسجل). وتظهر نتائج كالوسيط (الخط الأسود) و quartiles الأولى والثالثة (حدود مربع)، و 10th ومقاييس النسبة المئويةال 90 (أشرطة الخطأ). ويرد أيضا يعني بالخطوط الحمراء والنقاط النائية كنقاط سوداء. وترد البيانات الأساس اليوم 0 والإصابة بعد انتهاء أيام 1-3. نتائج تي بوست-المخصص-اختبار لكل نقطة وقت ترد على الرسوم البيانية: * ف < 0.001 مقابل "تبي اليوم" 0؛ ^ p < 0.001 مقابل نفس اليوم ساذجة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

figure-results-14096
الشكل 3. نتائج test. شعاع-التوازن وتم تدريب جميع الفئران لتحقيق التوازن في الشعاع حتى يمكن تحقيق التوازن بين 60 ثانية لثلاث محاكمات على التوالي (انظر النص للحصول على تفاصيل عن التدريب والاختبار وسجل). في الاختبارات اللاحقة، وقد سجل الفئران على مقياس من 1-6 مع 1 مما يدل على التوازن الطبيعي، ومما يدل على أية محاولة للبقاء على الشعاع 6. وتظهر نتائج كالوسيط (الخط الأسود) و quartiles الأولى والثالثة (حدود مربع)، و 10th ومقاييس النسبة المئويةال 90 (أشرطة الخطأ). ويرد أيضا يعني بالخطوط الحمراء والنقاط النائية كنقاط سوداء. وترد البيانات لخط الأساس اليوم 0 نقاط والإصابة بعد انتهاء أيام 1-3 (إلى اليسار)، ومدة 6 أشهر بعد الإصابة (يمين). نتائج تي بوست-المخصص-اختبار لكل نقطة وقت ترد على الرسوم البيانية. أيام 0-3: * ف < 0.001مباراة "اليوم تبي" 0؛ ^ p < 0.001 مقابل نفس اليوم ساذجة؛ @ ف < 0.001 مقابل الشام في اليوم نفسه. لمدة 6 أشهر: * ف < 0.001مقابل "تبي اليوم" 0; # p < 0.001 مقابل "ساذجة اليوم" 0؛ & ف < 0.001 مقابل الشام اليوم 0. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

figure-results-15415
الشكل 4. نتائج test. شعاع-سيرا على الأقدام وتم تدريب جميع الفئران لاجتياز الشعاع بينما النسيج بين الوظائف الهروب إلى مربع سلامة. أنهم تدربوا حتى أنها تفي بمعايير ≤ 5 s في ثلاث محاكمات على التوالي (انظر النص للحصول على تفاصيل عن التدريب والاختبار وسجل). اختبار خط الأساس واكتمل في اليوم 0 والفئران خضعت فيما بعد في أيام 1-3 بعد الإصابة (على اليسار). مجموعة فرعية فئران تم اختبارها أيضا في 6 أشهر بعد الإصابة (يمين). هي رسوم بيانية النتائج كالوسيط (الخط الأسود) و quartiles الأولى والثالثة (حدود مربع)، و 10th ومقاييس النسبة المئويةال 90 (أشرطة الخطأ). ويرد أيضا يعني الخطوط الحمراء والنقاط النائية كنقاط سوداء. وترد نتائج اختبارات الوظائف المخصصة لكل نقطة الوقت على الرسوم البيانية. أيام 0-3: * ف < 0.001مباراة "اليوم تبي" 0؛ ^ p < 0.001 مقابل نفس اليوم ساذجة؛ @ ف < 0.001 مقابل نفس اليوم صورية؛ لمدة 6 أشهر: * ف < 0.001مقابل "تبي اليوم" 0- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

figure-results-16635
الرقم 5. النتائج من الذاكرة العاملة موريس المياه المتاهة. يتم إظهار النتائج لمجموعات منفصلة من الفئران في 3 أشهر (العمود الأيمن) و 12 شهرا (العمود الأيمن). تظهر لوحات العلوي الاختفاء متوسط (الوقت المستغرق على الفئران لإيجاد منصة المخفية) في المحاكمات الأولى للأقران محاكمة اثنين لكل منهما من خمسة أيام الاختبار. تظهر لوحات الأوسط الاختفاء متوسط المحاكمات الثانية في كل يوم. تظهر نتائج تحليل الوظائف المخصصة على الرسوم البيانية (* مقابل < 0.05 ف نفس اليوم الشام؛ ^ مقابل < 0.05 p ساذج في اليوم نفسه). لوحات أقل تلخيص النتائج التي تظهر 10th و 25th ومقاييس النسبة المئويةال 75 (حدود مربع)، و الوسيط (الخط الأسود)مقاييس النسبة المئويةال 90 (أشرطة الخطأ). ويرد أيضا يعني بالخطوط الحمراء والنقاط النائية كنقاط سوداء. تظهر نتائج تحليل الوظائف المخصصة على الرسوم البيانية (* مقابل < 0.05ف نفس المحاكمة شام، ^ ف < 0.05 مقابل نفس المحاكمة السذاجة). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Discussion

عند إجراء أي نوع من اختبار سلوكية، من المهم أن تكون متسقة. ويشمل هذا التفصيل العديد من الاعتبارات التي تبدو تافهة ولكن لها أثر كبير على الاستجابة للحيوان. خطوة هامة يمكن تجاهله هو التأقلم للحيوانات إلى حالة المنزل-قفص/الإسكان قبل أي تجربة. هذا الإعداد يقلل من آثار الإجهاد الفسيولوجية استجابة الحيوانات، والذي يمكن أن يغير النتائج السلوكية18. وبالمثل، من الضروري تماما أن يتم بذل كل جهد للتعامل مع جميع الحيوانات بنفس الطريقة. وتتضمن هذا الاتساق، كالتأقلم المذكورة آنفا، للإسكان، وكذلك التأقلم للمناولة والنقل بين الغرف قبل التدريب أو الاختبار. لا يمكن المبالغة في هذا المفهوم. التعامل مع الحيوانات قذرة كارثة لأي اختبار سلوكية19. وبالمثل، كل جهد يحتاج إلى إجراء اختبار الحيوانات في نفس الوقت من اليوم، سواء أثناء دورتهن داكن أو فاتح. للاختبارات التي تمت مناقشتها هنا، اختبار أثناء مرحلة الضوء أو الظلام مقبولة، طالما أنه يتم إجراء الاختبارات الدوام. اختبار فعلت في أوقات مختلفة خلال دورة الإيقاعية قد ثبت أن يغير النتائج السلوكية18،20. بالإضافة إلى ذلك، يجب أن يكون المعالج، فضلا عن الحيوان في دولة حرة، والهدوء إجهاد بغية تحقيق أقصى قدر من دقة النتائج.

وفي حالة نيوروسكوري، لا سيما شائعة كاذبة إيجابيات وسلبيات. عادة ما تحدث المغلوطة عند حيوان هو عدم اعتادوا تماما لمعالجة واختبار. يجب أن يكون الحيوان استرخاء تماما حتى رد الملاحظ انعكاسي وليس بسبب العضلات تشديد من رد فعل على التوتر أو الخوف. معالج متوترة يمكن أن تؤثر على النتائج التي تحيل الإجهاد للحيوان. ولذلك، عقد الفئران ضيقة جداً أو فضفاضة جداً على حد سواء يمكن إشكالية. بالإضافة إلى ذلك، إذا كان المعالج الجهاز العصبي، وهذا الخلط بين رد فعل على الفئران. وهناك أيضا خطر أن مراقب عديمي خبرة سوف يسيء تفسير استجابة للفئران. التدريب الجيد والكثير من الممارسة ضرورية لنجاح واتساق نيوروسكوري.

وبصفة عامة، اهتمام كبير بهذه التجارب هو عدم وجود فرق كبير، وفي بعض الأحيان لا فرق بين مجموعات العلاج. منذ الحيوانات يمكن أن تتفاعل بشكل مختلف إلى معالجات مختلفة، والضوضاء، وأوقات اليوم، ويحتمل أن تكون، الفصول21، يجب بذل كل جهد ممكن للحد من جميع عوامل الخلط المحتملة.

تدل نتائج المهام التوازن شعاع وشعاع-سيرا على الأقدام المعروضة هنا أن هذه الاختبارات مفيدة مبكرا بعد الإصابة للكشف عن حالات العجز في الدالة فيستيبولوموتور. عادة حل هذه العجوزات عبر الوقت1،14. في هذا النموذج، قبل 6 أشهر بعد الإصابة، وقد حل العجز الناجم عن الإصابة. وتشير نتائج هذه النقطة الزمنية 6 أشهر إلى أنه لا توجد اختلافات بين ساذج، أو الشام، أو الفئران المصابين؛ ومع ذلك، جميع الفئران قد الاسترخاء في اقفاصها المنزل لمدة 6 أشهر، الشيخوخة، وزيادة الوزن. وهكذا، الوقت إعادة اختبارها في 6 أشهر بعد الجراحة (أو ما يعادله في حالة السذاجة)، أساسا تصبح قديمة والدهون، وذلك جميع المجموعات التي لا تؤدي، فضلا عن أنها مقارنة بخط الأساس اليوم 0 النتائج.

ثمة اعتبار هام آخر هو أن اختبار السلوك استخدام الاختبار الصحيح. على سبيل المثال، يعتقد أن الاختبارات المستخدمة هنا لتمثل الوظيفة لمناطق محددة من الدماغ. مثال واحد هو نظام الدهليزية، هو أمر هام لتحقيق التوازن. مناطق الدماغ تشارك في الدالة حسي حركي، مثل القشرة بما في ذلك قشرة حسي حركي، المهاد، والخلايا العصبية كورتيكوسبينال، ganglia القاعدية، نيجرو-المخطط، على سبيل المثال، جميع المعنيين بالتنسيق فيستيبولوموتور. وهكذا، تشير العجز في ميزان شعاع أو شعاع-سيرا على الأقدام إلى العجز المحتمل في هذه المجالات. وعلاوة على ذلك، تشارك في قرن آمون وقشرة بريفرونتال في التعلم والذاكرة وظائف اختبار المتاهة المائية الذاكرة العاملة. حتى عندما يتم اختيار الاختبار الصحيح، أن القيود المفروضة على الاختبارات التي تستخدم يجب أن يوضع في الاعتبار. على سبيل المثال، أي من الاختبارات المقدمة هنا حساسة للعجز في المزاج، مثل الاكتئاب، والقلق، أو التفاعلات الاجتماعية مثل العدوان، وصنع القرار، أو الاندفاع. أن أؤكد من جديد، من الضروري اختيار الاختبار المناسب لمنطقة الدماغ والسلوك ليتم تقييمه.

تفسير وتحليل البيانات السلوكية يجب تناولها بحذر. ينصح لتشمل تحليلات الطاقة لكل نوع من اختبار كل على حدة، لأنه، باستخدام إحدى نتائج سلوكية كتدبير العجز العصبية، بطبيعته، تدبير خام من تأثير خفية. وعلاوة على ذلك، تتطلب الاختبارات مختلف أنواع مختلفة من التحليلات الإحصائية. على سبيل المثال، الاختبارات نيوروسكوري وشعاع-التوازن المذكورة تعتمد على تفسير أحد المراقبين المدربين نقاط السلوك باستخدام مقياس ترتيبي. هذه الأنواع من البيانات ليست مستمرة ولا توزع عادة، حتى nonparametric ينبغي استخدام الإحصاءات، مثل اختبار كروسكال-واليس، كما هو موضح في المقاطع 6.1 و 6.2. وبدلاً من ذلك، الحزمة--سيرا على الأقدام واختبارات المتاهة المائية الذاكرة العامل إنتاج البيانات التي مستمرة والإحصاءات الموزعة عادة، حدودي حتى يمكن استخدامها، مثل ANOVA أحادي الاتجاه أو التدابير المتكررة ANOVA ثنائي الاتجاه، كما هو موضح في المقاطع 6.3 و 6.4.

المهام السلوكية المقدمة هنا قد صمدت أمام اختبار الزمن وإعطاء النتائج استنساخه، لا سيما عندما يقترن نموذج الاستثمار في الحوافظ المالية في الفئران، بالرغم من وجود الكثير من الطرق الأخرى لاختبار سلوكية لإصابة في الدماغ. نيوروسكوري تقييم قصيرة يؤديها مع الحد ني معدات. اختبارات أخرى لردود الفعل وقوة متاحة ويمكن أن تدمج في إجراء تقييم عصبية، مثل المهمة بولسيون الأفقي، اختبار أكينيسيا، اختبار الطائرة تميل، وقوة قبضة (انظر فوجيموتو et al. 22 والذهب et al. 23)-هي المهام شعاع-التوازن وشعاع-سيرا على الأقدام ووصف التدابير من العجز فيستيبولوموتور بعد الإصابة. ويمكن اعتبار التنسيق فيستيبولوموتور مقياس واحد للسلوك الحركي الإجمالي، بينما روتارود، القطب التناوب، وتشمل تدابير أخرى من إجمالي العجز الحركي وفتح النشاط الميداني. القدرة على السباحة، تقاس سرعة السباحة خلال المتاهة المائية، أيضا مؤشرا على التنسيق الحركي إجمالي22،23. مهمة المتاهة المائية الذاكرة العامل يكمل هذه المجموعة من الاختبارات بالكشف عن كل مرجع عجز الذاكرة (المشار إليها بواسطة 1 المحاكمة) والعامل عجز الذاكرة (يشار إليها بمحاكمة 2 أو الفرق بين المحاكمة 1 و 2 المحاكمة). وتشمل التدابير الأخرى من الوظائف المعرفية المتاهة شعاعي الذراع ثمانية والمتاهة بارنز، كائن رواية الاعتراف بالتجارب والأشكال المختلفة من المتاهة المائية. وتشمل هذه الاختلافات المتاهة المائية موريس الأصل والمتاهة الثالث ﻻشلي (مرة أخرى انظر فوجيموتو et al. 22 والذهب et al. 23). هذه البطارية من الاختبارات قد ثبت أنها مفيدة مبكرا بعد الإصابة، وبدرجات متفاوتة، خارجاً لمدة 12 شهرا بعد الإصابة1.

بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام المهام التي أظهرت هنا مع سلالات مختلفة، والجنس، والذين تتراوح أعمارهم من الفئران؛ ومع ذلك، قد تحتاج الإقامة لأحجام مختلفة وفي حالات ضعف أكبر. على سبيل المثال، الفئران الأكبر سنا، وأثقل بحاجة إلى شعاع أوسع للمهمة شعاع-التوازن والجرذان المسنين والضعفاء، قد تحتاج إلى مدة أقصر من أوقات السباحة في الماء المتاهة. وهكذا، هناك مجالاً للمرونة في هذه الاختبارات وإمكانات لتطوير اختبارات جديدة لاستيعاب مختلف الحالات والفرضيات.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgements

ونحن نشكر إيان بولدينج للمساعدة في إعداد العمليات الجراحية للمواضيع وإليزابيث سومنر لتحرير الدقيق لها. وأنجزت هذه الدراسات كجزء من فريق يمولها "المشروع مودي" "أبحاث إصابة الدماغ الصدمة متعدية الجنسيات".

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Sprague-Dawley ratsCharles Rivers Laboratories
251 Ballardvale St
Wilmington, MA 01887-1096
Phone: 800-522-7287		CD-IGS rats, strain code 001male, albino, 300-350g at arrival
NameCompanyCatalog NumberComments
Beam-Balance
Beamhome builtwood, 25" l x 1" h x 3/4" w sealed with polyurethane varnish
C-clampHome Depot1422-C2 1/2"
barrierHome Depotstyrofoam, 18" x 17 1/2"
table (for both BB & BW)generic office supply37" h x 30" w x 60" l
NameCompanyCatalog NumberComments
Beam-Walk
Beamhome builtwood 38-1/2" l x 1-3/4" h x 1" w sealed with polyurethane varnish (~ 37" off floor)
escape boxhome builtwoodpainted black 12 1/2 " l x 9" h x 7-1/4" w
nails (pegs)2"
hinges
clamps
white noise machineSan Diego Instruments
9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121
Phone: (858)530-2600		http://www.sandiegoinstruments.com/libraries/misc/datasheets/whitenoise.pdf
lightHome Depot
NameCompanyCatalog NumberComments
Morris Water Maze
fiberglass poolmanufacturer unknown
(similar to one made by SDI)San Diego Instruments7000-072372" diameter x 30" deep (~ 500 gal)
plexiglass platformhand-made by Maggie Parsley10 cm diameter, 26" tall with silicone applied to the surface of the platform to provide a gripping surface
(similar to one made by SDI)SDI7500-0272
plexiglass animal boxes w/ lidsUTMB Machine Shop2 boxes, 10" w x 16" L x 9" h
spot lights/ heat lampsHome Depot3 around pool, 2 over boxes to dry animals
AnyMazeSan Diego Instruments
9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121
Phone: (858)530-2600		/9001http://www.sandiegoinstruments.com/any-maze-video-tracking/

References

  1. Sell, S. L., Johnson, K., DeWitt, D. S., Prough, D. S. Persistent Behavioral Deficits in Rats after Fluid Percussion Injury. J Neurotrauma. 34 (5), 1086-1096 (2017).
  2. Gurdjian, E. S., Lissner, H. R., Webster, J. E., Latimer, F. R., Haddad, B. F. Studies on experimental concussion: relation of physiologic effect to time duration of intracranial pressure increase at impact. Neurology. 4, 674-681 (1954).
  3. Hellmich, H. L., Capra, B., Eidson, K., Garcia, J., Kennedy, D., Uchida, T., et al. Dose-dependent neuronal injury after traumatic brain injury. Brain Research. 1044, 144-154 (2005).
  4. Bramlett, H. M., Detrich, W. D. Long-Term consequences of Traumatic Brain Injury: Current Status of Potential Mechanisms of Injury and Neurological Outcomes. J. Neurotrauma. 32, 1-15 (2015).
  5. Pierce, J. E. S., Smith, D. H., Trojanowski, J. Q., McIntosh, T. K. Enduring cognitive neurobehavioral and histopathological changes persist for up to one year following severe experimental brain injury in rats. Neuroscience. 87 (2), 359-369 (1998).
  6. Smith, D. H., Chen, X. H., Pierce, J. E. S., Wolf, J. A., Trojanowski, J. Q., Graham, D. I., McIntosh, T. K. Progressive atrophy and neuron death for one year following brain trauma in the rat. J Neurotrauma. 14 (10), 715-727 (1997).
  7. Schallert, T. Behavioral tests for preclinical intervention assessment. NeuroRx. 3 (4), 497-504 (2006).
  8. Sell, S. L., Avila, M. A., Yu, G., Vergara, L., Prough, D. S., Grady, J. J., DeWitt, D. S. Hypertonic resuscitation improves neuronal and behavioral outcomes after traumatic brain injury plus hemorrhage. Anesthesiology. 108 (5), 873-881 (2008).
  9. Hamm, R. J. Neurobehavioral assessment of outcome following traumatic brain injury in rats: an evaluation of selected measures. J Neurotrauma. 18 (11), 1207-1216 (2001).
  10. Feeney, D. M., Gonzalez, A., Law, W. A. Amphetamine, haloperidol, and experience interact to affect rate of recovery after motor cortex injury. Science. 217, 855-857 (1982).
  11. Hamm, R. J., Temple, M. D., Pike, B. R., O'Dell, D. M., Buck, D. L., Lyeth, B. G. Working memory deficits following traumatic brain injury in the rat. J Neurotrauma. 13, 317-323 (1996).
  12. Morris, R. G., Hagan, J. J. Allocentric spatial learning by hippocampectomised rats: A further test of the "Spatial Mapping" and "Working Memory" Theories of hippocampal function. The Quart J of Exp Psych. 38 (4), 365-395 (1986).
  13. Dixon, C. E., Lyeth, B. G., Povlishock, J. T., Findling, R. L., Hamm, R. J., Marmarou, A., Young, H. F., Hayes, R. L. A fluid-percussion model of experimental brain injury in the rat. J. Neurosurg. 67, 110-119 (1987).
  14. DeWitt, D. S., Smith, T. G., Deyo, D. J., Miller, K. R., Uchida, T., Prough, D. S. L-arginine and superoxide dismutase prevent or reverse cerebral hypoperfusion after fluid-percussion traumatic brain injury. J. Neurotrauma. 14, 223-233 (1997).
  15. R Core Team. . R: A Language and Environment for Statistical Computing. , (2017).
  16. Pohlert, T. . The Pairwise Multiple comparison of Mean Ranks Package (PMCMR) R package. , (2014).
  17. Verma, P., Hellemans, K. G., Choi, F. Y., Yu, W., Weinberg, J. Circadian phase and sex effects on depressive/anxiety-like behaviors and HPA axis responses to acute stress. Physiol Behav. 99, 276-285 (2010).
  18. Schallert, T., Woodlee, M. T., Fleming, S. M. Experimental Focal Ischemic Injury: Behavior-Brain Interactions and Issues of Animal Handling and Housing. ILAR J. 44 (2), 130-143 (2003).
  19. Ruis, J. F., Rietveld, W. J., Buys, J. P. Properties of parametric photic entrainment of circadian rhythms in the rat. Physiol Behav. 50, 1233-1239 (1991).
  20. Ferguson, S. A., Maier, K. L. A review of seasonal/circannual effects of laboratory rodent behavior. Physiol Behav. 119, 130-136 (2003).
  21. Fujimoto, S. T., Longhi, L., Saatman, K. E., McIntosh, T. K. Motor and cognitive function evaluation following experimental traumatic brain injury. Neurosci & Biobehav Reviews. , (2004).
  22. Gold, E. M., Su, D., Lopez-Velazquez, L., Haus, D. L., Perez, H., Lacuesta, G. A., Anderson, A. J., Cummings, B. J. Functional assessment of long-term deficits in rodent models of traumatic brain injury. Regen. Med. 8 (4), 483-516 (2013).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

131

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved