A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
توضح هذه الدراسة تقنية زرع قلب البطن غير المتجانسة القابلة للتكرار في الفئران والتي يمكن للمبتدئين تعلمها وأدائها. بالإضافة إلى ذلك ، يتم إنشاء نموذج جديد لقلس الأبهر في الفئران عن طريق إجراء عملية زرع قلب بطني غير متجانسة وإتلاف الصمام الأبهري للمتبرع باستخدام سلك توجيه بعد الحصاد.
على مدى السنوات ال 50 الماضية ، أبلغ العديد من الباحثين عن زرع قلب البطن غير المتجانس في الفئران والجرذان ، مع بعض الاختلافات في التقنية الجراحية. يمكن أن يؤدي تعديل إجراء الزرع لتعزيز حماية عضلة القلب إلى إطالة وقت نقص التروية مع الحفاظ على وظيفة القلب للمتبرع. النقاط الرئيسية لهذه التقنية هي كما يلي: عبور الشريان الأورطي البطني للمتبرع قبل الحصاد لتفريغ قلب المتبرع. تعطير الشرايين التاجية للمتبرع بمحلول شلل القلب البارد ؛ والتبريد الموضعي لقلب المتبرع أثناء إجراء المفاغرة. وبالتالي ، نظرا لأن هذا الإجراء يطيل وقت نقص التروية المقبول ، يمكن للمبتدئين القيام به بسهولة وتحقيق معدل نجاح مرتفع.
علاوة على ذلك ، تم إنشاء نموذج جديد لقلس الأبهر (AR) في هذا العمل باستخدام تقنية مختلفة عن التقنية الحالية ، والتي يتم إنشاؤها عن طريق إدخال قسطرة من الشريان السباتي الأيمن وثقب الصمام الأبهري الأصلي تحت توجيه تخطيط صدى القلب المستمر. تم إجراء عملية زرع قلب بطني غير متجانسة باستخدام نموذج AR الجديد. في البروتوكول ، بعد حصاد قلب المتبرع ، يتم إدخال سلك توجيه صلب في الشريان العضدي الرأسي للمتبرع ويتقدم نحو جذر الأبهر. يتم ثقب الصمام الأبهري عن طريق دفع سلك التوجيه أكثر حتى بعد الشعور بالمقاومة ، وبالتالي تحفيز AR. من الأسهل إتلاف الصمام الأبهري باستخدام هذه الطريقة مقارنة بالإجراء الموضح في نموذج AR التقليدي. بالإضافة إلى ذلك ، لا يساهم نموذج AR الجديد هذا في تداول المتلقي. لذلك ، من المتوقع أن تنتج هذه الطريقة نموذج AR أكثر شدة من الإجراء التقليدي.
تم الإبلاغ عن زرع القلب البطني غير المتجانس في الفئران لأول مرة في عام 1964 من قبل Abbott et al.1 وتم استخدامه لدراسة رفض الطعم الخيفي الحاد والمزمن ، واعتلال الأوعية الدموية في الطعم الخيفي القلبي ، وإصابة نقص التروية ، وإعادة تشكيل القلب2،3،4،5،6،7،8،9،10،11 . تمت إضافة بعض التعديلات على الإجراء على مدى السنوات ال 50 الماضية. أساسيات الإجراء الحالي هي كما يلي. يتم مفاغرة الشريان الأورطي الصاعد والشريان الرئوي (PA) للمتبرع من طرف إلى جانب إلى الشريان الأورطي البطني للمتلقي والوريد الأجوف السفلي ، على التوالي. على الرغم من أن الأذين الأيسر للمتبرع والبطين لا يتلقيان أي تدفق داخل الأجواف ، يتدفق الدم إلى الجهاز التاجي للمتبرع. لذلك ، يبدأ قلب المتبرع في النبض مرة أخرى بعد إزالة التثبيت.
أبلغ بعض الخبراء ذوي الخبرة في مئات أو آلاف العمليات عن معدل نجاح مرتفع مع وقت نقص التروية القصير لزراعة القلب البطنيغير المتجانس 2،3،4،5 ؛ ومع ذلك ، يصعب على المبتدئين تحقيق وقت نقص التروية القصير منذ البداية. تعد حماية القلب الكافية عاملا مهما للحصول على انقباض قلبي جيد لقلب المتبرع. يمكن أن تؤدي الحماية غير الكافية لعضلة القلب إلى تصلب قلب المتبرع. لذلك ، قمنا بتعديل إجراء الزرع لتعزيز حماية قلب المتبرع. أحد أهداف هذه الدراسة هو إظهار إجراء زرع قلب بطني غير متجانس قابل للتكرار يمكن للمبتدئين القيام به بسهولة لأنه يطيل وقت نقص التروية المقبول.
بالإضافة إلى ذلك ، أبلغ بعض الباحثين عن نموذج قلس الأبهر (AR) في الفئران ، والذي تم استخدامه لفحص آثار العوامل على إعادة تشكيل البطين الأيسر (LV)12،13،14،15. يشمل الإجراء التقليدي ما يلي: (1) يتم إجراء شق جانبي في الرقبة اليمنى لفضح الشريان السباتي الأيمن بعد التخدير. (2) يتم تقنية القسطرة من هذا الوعاء وتتقدم نحو جذر الأبهر ؛ و (3) يحدث AR عن طريق ثقب الصمام الأبهري الأصلي تحت توجيه تخطيط صدى القلب المستمر.
ومع ذلك ، فإن ثقب الصمام الأبهري أثناء حمل مسبار تخطيط صدى القلب والحصول على رؤية جيدة للشريان الأورطي الصاعد والصمام الأبهري والقسطرة باستخدام مخطط صدى القلب يمثل تحديا. علاوة على ذلك ، فإن فشل القلب بعد AR الحاد هو اختلاط آخر. لذلك ، تم إنشاء نموذج AR جديد ، يمكن إنشاؤه بسهولة ولا يساهم في تداول المتلقي ، في هذا العمل لحل هذه التحديات. الهدف الآخر من هذه الدراسة هو إنشاء نموذج AR باستخدام زرع قلب البطن غير المتجانس وإتلاف الصمام الأبهري للمتبرع باستخدام سلك توجيه بعد الحصاد.
تم إجراء جميع الإجراءات الحيوانية وفقا ل "مخطط قانون رعاية الحيوانات وإدارتها" و "المعايير المتعلقة برعاية المختبر وحفظها والحد من آلامها" من قبل وزارة البيئة ، حكومة اليابان و "المبادئ التوجيهية للإجراء السليم للتجارب على الحيوانات" من قبل مجلس العلوم الياباني16 ، 17,18. تمت مراجعة بروتوكولات الحيوانات والموافقة عليها من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوان بجامعة طوكيو (M-P19-065).
1. زرع قلب البطن غير المتجانس في الفئران
ملاحظة: أجريت عمليات زرع قلب البطن غير المتجانسة في ذكور الفئران Jcl: Wistar الذين تتراوح أعمارهم بين 7-9 أسابيع. تم استخدام مجهر بتكبير 6.7x إلى 45x لتنفيذ الإجراء. تم تعقيم الأدوات الجراحية للتعقيم.
2. نموذج AR جديد باستخدام زراعة قلب البطن غير المتجانسة في الفئران
ملاحظة: تم إنشاء نموذج AR جديد باستخدام زرع قلب البطن غير المتجانس باستخدام ذكور الفئران Jcl: Wistar الذين تتراوح أعمارهم بين 7-9 أسابيع. تم استخدام مجهر بتكبير 6.7x إلى 45x لتنفيذ الإجراء. تم تعقيم الأدوات الجراحية للتعقيم.
فيما يتعلق بالنموذج العادي ، تم إنشاء انكماش LV جيد بنجاح بعد إزالة التثبيت. كان وقت نقص تروية القلب المزروع ووقت تخدير المتلقي حوالي 60 دقيقة و 130 دقيقة على التوالي (الجدول 1).
كما تم الحصول على انكماش منخفض الجهد جيد بعد إزالة التثبيت في نموذج AR الجديد. كان الوقت الإقف...
تم اكتشاف خطوات رئيسية لمنع قلب المتبرع من التصلب أثناء الزرع. أولا ، من الضروري عبور الشريان الأورطي البطني للمتبرع قبل الحصاد لتفريغ قلب المتبرع 4,7. إذا تم إجراء العملية الجراحية للمتبرع دون التنبيب الرغامي ، يتوقف التنفس بعد بضع الصدر ، مما يعيق الدورة ا?...
يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
نود أن نشكر Editage (www.editage.com) على تحرير اللغة الإنجليزية.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Antisedan (atipamezole) | Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. | ||
Domitor (medetomidine) | Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. | ||
Dormicum (midazolam) | Maruishi Pharmaceutical Co., Ltd. | ||
heparin | AY Pharmaceuticals Co.,Ltd. | ||
Jcl:Wistar rats | CLEA Japan, Inc. | ||
microscope | Orinpas Co., Ltd. | SZ61 | |
modified Krebs-Henseleit cardioplegic solution | Merck KGaA | ||
sevoflurane | FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation | ||
SURGICEL FIBRILLAR | Johnson & Johnson K.K. | ||
Vetorphale (butorphanol) | Meiji Animal Health Co., Ltd. |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved