استراتيجيات التحكم في الميكروبات ومراقبتها لبيئات غرف الأبحاث والعلاجات الخلوية

Summary

يلخص البروتوكول أفضل الممارسات لتقليل الحمل البيولوجي الميكروبي في بيئة غرف الأبحاث ويتضمن استراتيجيات مثل المراقبة البيئية ومراقبة العمليات واختبار عقم المنتج. إنه مناسب لمرافق التصنيع والاختبار المطلوبة لتلبية معايير ممارسة الأنسجة الجيدة الحالية ومعايير ممارسات التصنيع الجيدة الحالية.

Abstract

يعد البرنامج الشامل الذي تم التحقق من صحته جيدا والذي يتضمن تدابير قوية للملابس والتنظيف والمراقبة البيئية ومراقبة الموظفين أمرا بالغ الأهمية لتقليل الحمل البيولوجي الميكروبي في أجنحة تصنيع العلاج الخلوي ومختبرات الاختبار المقابلة لضمان أن المرافق تعمل في حالة تحكم. يعد ضمان سلامة المنتج من خلال تدابير مراقبة الجودة ، مثل اختبار العقم ، مطلبا تنظيميا لكل من الحد الأدنى من التلاعب (القسم 361) وأكثر من الحد الأدنى من التلاعب (القسم 351) الخلايا البشرية والأنسجة والمنتجات الخلوية والأنسجة (HCT / Ps). في هذا الفيديو ، نقدم دليلا متدرجا لكيفية تطوير ودمج أفضل الممارسات المعقمة للعمل في بيئة غرف الأبحاث ، بما في ذلك ارتداء الملابس والتنظيف وتدريج المواد والمراقبة البيئية ومراقبة العمليات واختبار عقم المنتج باستخدام التلقيح المباشر ، المقدم من دستور الأدوية الأمريكي (USP<71>) وطريقة اختبار العقم البديلة للمعاهد الوطنية للصحة (NIH). يهدف هذا البروتوكول إلى أن يكون بمثابة دليل مرجعي للمنشآت المتوقع أن تلبي ممارسات الأنسجة الجيدة الحالية (cGTP) وممارسات التصنيع الجيدة الحالية (cGMP).

Introduction

يعد تنفيذ برنامج قوي لمراقبة الميكروبات من خلال المراقبة البيئية (EM) ومراقبة العمليات واختبار عقم المنتج مطلبا تنظيميا لممارسات الأنسجة الجيدة الحالية (cGTP) وممارسات التصنيع الجيدة الحالية (cGMP) في مختبرات العلاج الخلوي¹. بالإضافة إلى ذلك ، تتوقع إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) أن المختبر الذي يقوم باختبار مراقبة الجودة (QC) للمنتج يجب أن يستخدم أيضا مرافق وضوابط مماثلة لتلك المستخدمة في عمليات التعبئة^{المعقمة 2}.

يحتوي هذا البروتوكول على أربعة أقسام رئيسية: 1) الممارسات المعقمة ، بما في ذلك ارتداء ملابس الأفراد والتنظيف وتنظيم المواد. 2) EM ، بما في ذلك ثقافات الهواء والسطح القابلة للح....

Protocol

1. الممارسات المعقمة

1. ملابس الموظفين لمساحة غرف الأبحاث
   ملاحظة: يعتمد هذا الإجراء على ارتداء الملابس الأولية في مكان غير مصنف ، يليه الدخول إلى منطقة المنظمة الدولية للتوحيد القياسي (ISO) 8 ثم منطقة ISO7. هذا الإجراء مناسب للمختبرات التي تحاول تحويل المساحة الحالية إلى وظيفة غرف الأبحاث. من الناحية المثالية ، ستحدث جميع الملابس الأولية في مساحة مصنفة ISO8 (وليس في مساحة غير مصنفة).
   1. تأمين الشعر المتساقط. اغسل يديك ، وتحولها إلى مقشرات (يفضل استخدام قمم فرك طويلة الأكمام وسراويل فرك كاملة الطول). اجمع واستبدل أحذية غرف الأبحاث بأغطية الأحذية.
   2. عقم اليدين باستخدام معقم اليدين الذي يحتوي على الكحول في البداية ثم مرة أخرى بين ك....

النتائج

ويرد وصف للنتائج المتوقعة في الجدول 1. يجب مراجعة بيانات EM ومتابعتها بالتحقيق المناسب والاستجابة للإجراءات أو التنبيه أو رحلات حد ISO. في حالة حدوث رحلة للجسيمات غير القابلة للحياة ، يجب المضي قدما وفقا ل ISO 14644-Annex A ، sec A.5.5⁷. إذا كان من الممكن أن تعزى الرحلة إلى حدث غير طب.......

Discussion

هناك العديد من المجالات الحرجة في هذا البروتوكول ، بما في ذلك الحفاظ على تقنية التعقيم وتدفق الهواء أحادي الاتجاه داخل غرف الأبحاث و BSCs. تشمل أفضل الممارسات التحرك ببطء وبشكل متعمد لتقليل الاضطرابات. يجب إجراء عمليات التلاعب المعقمة من جانب المنتج ، وليس من الأعلى. يوصى بمعالجة النظام الم.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
20-25°C Incubator			Lab preference
30-35°C Incubator			Lab preference
Alcohol-based hand sanitizer			Lab preference
BacT/ALERT Dual-T instrument	BioMerieux Industry
Beard cover			Lab preference
Biosafety cabinet (BSC)			Lab preference
Cleanroom shoes			Lab preference
Fluidthioglycollate medium (FTM)	Hardy Diagnostics	U84	USP
Handheld cleaning mop	Contec	2665LF
Hypodermic needle			Lab preference
iFA+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412990
iFN+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412991
Isokinetic head			Lab preference
Laser particle counter	TSI Incorporated	9500-01
LpH III	Steris	1S16CX
Mirror			Lab preference
Non-sterile bouffant			Lab preference
Non-sterile gloves			Lab preference
Non-sterile shoe covers			Lab preference
Non-sterile sleeve covers			Lab preference
Parafilm			Lab preference
Peridox RTU	Contec	CR85335IR
Plastic bag			Lab preference
Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT)	Hardy Diagnostics	P595	USP, irradiated
Sabouraurd Dextrose Agar (SAB)	Hardy Diagnostics	W565	USP, irradiated
Safety glasses			Lab preference
Scrubs (top and bottom)			Lab preference
Spor-Klenx RTU	Steris	6525M2
Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA)	Decon CiDehol	8316
Sterile alcohol wipe			Lab preference
Sterile boot covers	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile coveralls	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile face mask			Lab preference
Sterile gloves			Lab preference
Sterile hood	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile low-lint wipes	Texwipe	TX3210
Sterile mop cleaning pads	Contec	MEQT0002SZ
Sterile sleeve covers	Kimberly Clark	36077
Sterile spreading rod	Fisher Scientific	14665231
Sterile syringe			Lab preference
Tacky mats			Lab preference
Tryptic Soy Agar (TSA)	Hardy Diagnostics	W570R	USP, irradiated
Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT)	Hardy Diagnostics	P520R	USP, irradiated
Tryptic Soy Broth (TSB)	Hardy Diagnostics	U46	USP
Tubing			Lab preference
Vesphene III	Steris	1S15CX
Viable air sampler	Hardy Diagnostics	BAS22K
Vortex			Lab preference