الاستزراع المختبري والميداني ليرقات النعال ، Crepidula fornicata

Summary

وتعرض الورقة طرقا لاستزراع يرقات بطنيات الأقدام Crepidula fornicata في نظام صغير الحجم على نطاق مختبري وفي نظام mesocosm لمياه البحر المحيطة يمكن نشره في الميدان.

Abstract

تم استخدام رخويات بطنيات الأرجل كاليبتريد، Crepidula fornicata، على نطاق واسع لدراسات علم الأحياء التنموي لليرقات، وعلم وظائف الأعضاء، والبيئة. تم جمع يرقات القطيفة الحاضنة من هذا النوع عن طريق السحب على غربال بعد الإطلاق الطبيعي من قبل البالغين ، وتوزيعها في المستزرع بكثافة 200 / لتر ، وتغذيتها ب Isochrysis galbana (سلالة T-ISO) عند 1 × 10⁵ خلايا / مل. تم توثيق نمو القشرة واكتساب الكفاءة للتحول لليرقات الشقيقة التي تمت تربيتها في مزارع 800 مل جيدة التهوية مصممة لتحقيق التوازن مع الهواء المحيط أو لمخاليط غازات الغلاف الجوي المحددة. على النقيض من ظروف الثقافة المختبرية هذه ؛ كما تم جمع بيانات النمو والكفاءة لليرقات التي تمت تربيتها في ميزوكوزم مياه البحر المحيطة المتدفقة بسعة 15 لترا والتي تقع في مجموعة حقلية من البالغين الناضجين المتكاثرين. كانت معدلات النمو وتوقيت الكفاءة المتحولة في الثقافات المختبرية مماثلة لتلك التي تم الإبلاغ عنها في الدراسات المنشورة سابقا. نمت اليرقات التي تربى في حقل mesocosm بشكل أسرع بكثير وتحولت في وقت أقرب مما تم الإبلاغ عنه في أي دراسات معملية. هذه الطرق معا مناسبة لاستكشاف تطور اليرقات في ظل ظروف مضبوطة محددة مسبقا في المختبر وكذلك في ظل الظروف التي تحدث بشكل طبيعي في الحقل.

Introduction

يتم تمثيل النعال ، Crepidula fornicata (Gastropoda: Calyptraeidae) ، بشكل جيد في الأدبيات البحثية الحالية والتاريخية بسبب فائدته كنموذج تنموي وبسبب تأثيراته الواسعة النطاق كنوع غازي. كان بمثابة مثال تأسيسي للتطور الحلزوني في العصر الكلاسيكي لعلم الأجنة التجريبي¹ وشهد ولادة جديدة للاهتمام مع تطبيق أدوات التصوير والجينوم الحديثة لتشريح آليات التطور المبكر lophotrochozoan ^2,3. في الطرف الآخر من تاريخ حياتها ، ركزت تحقيقات أخرى على تأثيرات السكان البالغين لمهندس النظام البيئي هذا في البيئات البحرية الساحلية المعتدلة البعيدة عن توزيعها الأصلي في شرق أمريكا الشمالية^....

Protocol

1. المناورات الروتينية لإنشاء والحفاظ على مزارع اليرقات من C. fornicata

ملاحظة: تبدأ هذه الطريقة بوعاء جالون (3.8 لتر) من مياه البحر يحتوي على C. fornicata البالغة التي أطلقت للتو يرقات veliger الحضنة. يمكن جمع البالغين ميدانيا أو الحصول عليها من مورد مذكور في جدول المواد. البالغون هم خنثى بروتاندروس يعيشون في مداخن التزاوج مع إناث حاضنة لاطئة في قاع المكدس. لا تفتت أكوام الكبار. تم وصف موسمية التكاثر وطرق تكييف البالغين للتفريخ خارج الموسم^{سابقا 17}. من الأفضل جمع اليرقات في غضون 2-3 ساعات بعد إطلاقها عندما تكون سلبية بقوة وستركز بالقرب من سطح الجرة.

1. اصنع غ....

النتائج

تم قياس نمو اليرقات واكتساب الكفاءة للتحول في 4 تكرارات متزامنة من 800 مل من المستنبتات المهواة ، كل منها يحتوي على 160 يرقة ، مشتقة من مجموعة شقيقة من اليرقات التي فقست من كتلة بيضة واحدة والتي تم تغذيتها Isochrysis galbana بكثافة 1 × 10⁵ خلايا / مل. كان الرقم الهيدروجيني 7.9-8.0 ، وكانت درجة الحر?.......

Discussion

على الرغم من أن يرقات C. fornicata سهلة نسبيا للاستزراع مقارنة باليرقات البحرية الأخرى ذات التغذية العوالق، إلا أن الاهتمام بأساسيات ممارسة الاستزراع الجيد لا يزال ضروريا^17،19. يجب أن تبدأ اليرقات السليمة في التغذية مباشرة بعد الفقس. يمكن التحقق من ذلك بسهول.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bucket, Polyethylene, 7 gallon	US Plastic	16916	for mesocosm
Crepidula fornicata	Marine Biological Laboratory, Marine Resources Center	760	adult broodstock
Hotmelt glue, Infinity Supertac 500	Hotmelt.com	INFINITY IM-SUPERTAC-500-12-1LB	good for bonding polyethylene
Jar, glass, 32 oz, with polypropylene lid	Uline	S-19316P-W	for 800 mL ventilated cultures
Nitex mesh, 236 µm	Dynamic Aqua Supply Ltd.	NTX236-136	for mesocosm
Nut, hex, nylon, 10-32 thread	Home Depot	1004554441	for fastening tubing barbs
Rivets, nylon, blind, 15/64" diameter, 5/32"-5/16" grip range, pack of 8	NAPA auto parts	BK 6652844	4 packs needed per mesocosm
Tubing barb 1/8" x 10-32 thread	US Plastic	65593	2 needed per culture jar
Tubing, polyethylene, 2.08 mm OD	Fisher Scientific	14-170-11G	for ventilating gas stream inside culture jar
Tubing, Tygon, 1/8"x3/16"x1/32"	US Plastic	57810	fits barbs for ventilating cultures