JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

تقدم هذه الدراسة في المقام الأول تطبيق التمثيل الغذائي للكبد في التحقيق في فعالية شراب شي ليو بو شيويه في علاج فقر الدم.

Abstract

كدواء أويغوري معروف ، تم استخدام شراب Shi-Liu-Bu-Xue (SLBXS) على نطاق واسع لعلاج فقر الدم في الصين لأكثر من 20 عاما. ومع ذلك ، فإن الآليات الأساسية لفعاليته في علاج فقر الدم لا تزال غير واضحة. في هذه الدراسة ، تم استخدام أيضاب الكبد بشكل أساسي لتحديد الآليات التنظيمية المحتملة ل SLBXS في علاج فقر الدم. تم إجراء توصيف التمثيل الغذائي للكبد لتوصيف آلية عمل SLBXS في نموذج فأر يسببه أسيتيل فينيل هيدرازين لفقر الدم. تبين أن SLBXS يقلل من مؤشر الكبد وعدد خلايا الدم البيضاء وعدد الصفائح الدموية ، مع زيادة عدد خلايا الدم الحمراء والهيموجلوبين ومستويات الهيماتوكريت. تم اختيار الأهداف الأساسية للتحقق باستخدام البقع الغربية. أظهر SLBXS تأثيرا علاجيا كبيرا على فقر الدم بشكل أساسي عن طريق تنظيم استقلاب الجالاكتوز ومسار إشارات HIF-1 ، كما يتضح من تقليل تنظيم بروتينات HIF-1α و NOS3 و VEGFA و GLA في أنسجة الكبد للفئران المصابة بفقر الدم. توضح هذه الدراسة الآليات التنظيمية المحتملة لعملية التمثيل الغذائي الكبدي عن طريق إعطاء SLBXS في علاج فقر الدم.

Introduction

فقر الدم هو قضية صحية عالمية ملحة ومنتشرة ، وتؤثر على 25٪ من سكان العالم والناس من جميع الأعمار ، وخاصة المراهقين والنساء الحوامل1،2،3. يرتبط بزيادة خطر الولادة المبكرة ووفيات الأمهات ويمكن أن يؤدي إلى اضطرابات في النمو البدني وضعف أداء القلب والأوعيةالدموية 4. قد تؤثر هذه الحالة أيضا سلبا على الحالة الصحية للمراهقين ، مما يؤدي إلى الالتهابات وفشل القلب5. تشمل العلاجات الحالية في المقام الأول نقل الدم ومكملات الحديد والعلاج بالإريثروبويتين. ومع ذلك ، فإن هذه العلاجات لها عيوب وآثار جانبية ضارة ، مثل الحساسية المفرطة ، واضطراب الجهاز الهضمي ، والحمل الزائد للحديد ، وخلاياالنحل 1. لذلك ، فإن تحديد الأدوية الفعالة ذات الآثار الجانبية الأقل لعلاج فقر الدم أمر بالغ الأهمية.

يقدم الطب الصيني التقليدي ، بما في ذلك الطب الأويغوري ، العديد من المزايا ، مثل التركيبات متعددة المكونات ، والتأثيرات متعددة الأهداف ، والتفاعلات متعددة الروابط ، وآثار جانبية أقل في الوقاية من الأمراض متعددة العوامل وعلاجها. شراب شي ليو بو شيويه (SLBXS) هو عامل تقليدي بارز في الطب الأويغوري يستخدم في مقويات الدم وإنتاج الدم. وهو معترف به كدواء منظم للدم يمكن أن يقلل من حرارة الكبد وقد تم تضمينه في المبادئ التوجيهية للاستخدام السريري لأدوية الأقليات لعلاج فقر الدم. كما أنها مرخصة من قبل إدارة الغذاء والدواء الحكومية الصينية (Z20026094) 6،7،8. على مدى العقدين الماضيين ، تم استخدام SLBXS على نطاق واسع في الصين لعلاج الحالات المرتبطة بفقر الدم. ومع ذلك ، فإن آلياته المحتملة لعلاج فقر الدم لا تزال غير معروفة وتتطلب مزيدا من التحقيق. تستخدم الأيض ، التي تفحص الاستجابات الأيضية الديناميكية للأنظمة البيولوجية للأمراض أو التدخلات الدوائية أو الظروف البيئية9 ، بشكل متزايد لتوضيح آليات عمل الطب الصيني التقليدي من خلال تقييم التغيرات في المؤشرات الحيوية الأيضية في العينات البيولوجية بعد المحفزات الخارجية9،10.

وفقا لذلك ، تم اعتماد نهج استقلاب الكبد في هذه الدراسة لتحديد الآليات العلاجية الأساسية ل SLBXS في علاج فقر الدم. أولا ، تم إنشاء نموذج فأر ناتج عن أسيتيل فينيل هيدرازين (APH) لفقر الدم. بعد ذلك ، تم فحص المسارات الأيضية للمستقلبات الداخلية باستخدام التمثيل الغذائي للكبد مع قياس الطيف الكتلي الكروماتوغرافيا الغازية (GC-MS) وطرق البيانات متعددة المتغيرات بعد إدارة SLBXS. أخيرا ، تم تحليل الأهداف الرئيسية تجريبيا لتوضيح التأثيرات المضادة لفقر الدم والآليات الجزيئية ل SLBXS.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية من قبل لجنة أخلاقيات المختبر التابعة لجامعة هوبى للطب الصيني (HBUCMS201912015). تم إيواء ذكور الفئران C57BL / 6 (الوزن 20-22 جم) في غرفة محددة خالية من مسببات الأمراض مع رطوبة نسبية تتراوح بين 50٪ -60٪ ودرجة حرارة 22 درجة مئوية ± 2 درجة مئوية ، وتعرضت لدورة ضوء 12 ساعة / 12 ساعة مظلمة ، وتم تزويدها بحرية الوصول إلى الطعام والماء. قبل بدء التجربة ، سمح لجميع الفئران لمدة أسبوع بالتأقلم مع البيئة. تم تعيين الفئران عشوائيا إلى واحدة من المجموعات الأربع التالية (ن = 12): التحكم ، النموذج ، شراب Fu-Fang-E-Jiao (FFEJS ، دواء إيجابي ، يعطى عن طريق المعدة عند 7.8 مل / كجم) ، و SLBXS (يعطى داخل المعدة عند 11.7 مل / كجم). تلقت الفئران في المجموعات الضابطة والنموذجية كميات متساوية من المحلول الملحي. أعطيت الفئران في جميع المجموعات إعطاء الأدوية المقابلة داخل المعدة مرة واحدة يوميا لمدة أسبوعين. تفاصيل الأدوية والكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

1. إنشاء نموذج فقر الدم في الفئران

  1. قم بوزن 2 جم من أسيتيل فينيل هيدرازين (APH) باستخدام ميزان إلكتروني ونقله إلى دورق سعة 150 مل. أضف 100 مل من المحلول الملحي وحركه بقضيب زجاجي حتى يذوب APH تماما.
  2. إنشاء نموذج الفأر لفقر الدم عن طريق حقن تحت الجلد 2٪ APH كما تم إعداده في الخطوة 1.1 في 1شارع و4 و 7 أيام بجرعات 200 مجم / كجم و 100 مجم / كجم و 100 مجم / كجم ، على التوالي11.
    ملاحظة: ابتداء من اليوم الأول ، تم إعطاء الفئران في مجموعات FFEJS (7.8 مل / كجم) و SLBXS (11.7 مل / كجم) إعطاء المعدة مرة واحدة يوميا لمدة أسبوعين. تلقت الفئران في المجموعات الضابطة والنموذجية كميات متساوية من المحلول الملحي مرة واحدة يوميا لمدة أسبوعين.

2. تحديد مؤشر الكبد

  1. في نهاية التجربة ، قم بوزن كل فأر باستخدام ميزان إلكتروني.
  2. تخدير الفئران عن طريق استنشاق 2٪ إيزوفلوران. اضغط على مقلة عين الفئران لجعلها مفرطة الدم وبارزة. قم بإزالة مقلة العين بسرعة باستخدام ملقط وجمع الدم في أنابيب عينة هيبارينية.
  3. قم بتأمين الفئران المخدرة من الخطوة 2.2 إلى لوحة التلاعب الجراحية.
  4. قم بعمل شق كامل على طول خط الوسط من البطن بمشرط. قم بتشريح وعزل أنسجة الكبد السليمةبعناية 12 ، ثم قم بقياس وزنه بميزان إلكتروني.
    ملاحظة: يتم حساب مؤشر الكبد لكل فأر باستخدام الصيغة التالية: مؤشر الكبد = وزن الكبد / وزن الجسم.

3. تحليل الدم

  1. رج الأنبوب الذي يحتوي على عينة الدم الهبارينية برفق من الخطوة 2.2 لمنع تخثر الدم.
  2. ضع عينة الدم أسفل إبرة الحقن للتأكد من غمرها بالكامل في الإبرة.
  3. انقر فوق الزر "الكشف التلقائي" لقياس عدد خلايا الدم الحمراء (RBC) والهيماتوكريت (HCT) وعدد خلايا الدم البيضاء (WBC) ومستويات الهيموجلوبين (HGB) وعدد الصفائح الدموية (PLT) باستخدام محلل خلايا الدم الأوتوماتيكي بالكامل.

4. دراسة التمثيل الغذائي للكبد

  1. تحضير عينة الكبد
    1. تجانس عينات أنسجة الكبد (50 مجم) من الخطوة 2.4 مع 1 مل من الميثانول المبرد مسبقا. جهاز طرد مركزي عند 18,759 × جم لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية لإزالة الرواسب.
    2. انقل 200 ميكرولتر من المادة الطافية إلى قارورة عينة باستخدام ماصة وجففها بالفراغ في مجفف بالتجميد عند 35 درجة مئوية لمدة ساعتين.
    3. تفاعل العينات المجففة مع 40 ميكرولتر من محلول 40 مجم / مل من ميثوكسيأمين هيدروكلوريد في البيريدين لمدة 90 دقيقة عند 30 درجة مئوية. بعد ذلك ، أضف 80 ميكرولتر من N-Methyl-N- (trimethylsilyl) ثلاثي فلورو أسيتاميد (MSTFA) مع 1٪ Trimethylchlorosilane (TMCS) واحتضنه لمدة 60 دقيقة عند 37 درجة مئوية.
    4. أضف 10 ميكرولتر من n-hexane إلى القارورة لإنهاء تفاعل الاشتقاق.
  2. تحليل التمثيل الغذائي للكبد
    1. تحليل العينات المشتقة (1 ميكرولتر) باستخدام نظام GC-MS. افصل المشتقات باستخدام عمود شعري DB-5MS (30 م × 0.25 مم × 0.25 ميكرومتر).
      ملاحظة: تم ضبط شروط برنامج درجة حرارة الفرن على النحو التالي: 60 درجة مئوية لمدة 1 دقيقة ؛ زيادة إلى 325 درجة مئوية بمعدل 10 درجات مئوية / دقيقة والحفاظ عليها لمدة 10 دقائق. تم ضبط درجات حرارة الحاقن ومصدر الأيونات ودرجة حرارة MS على 250 درجة مئوية و 230 درجة مئوية و 150 درجة مئوية على التوالي. تم استخدام الهيليوم (99.999٪) كغاز ناقل بمعدل تدفق 1.1 مل / دقيقة ، وتم ضبط نسبة الانقسام على 10: 1. تم استخدام طاقة شعاع إلكتروني تبلغ 70 فولت ووقت تأخير مذيب يبلغ 5.9 دقيقة.
  3. معالجة البيانات وتحليلها
    1. احصل على بيانات GC-MS الأولية وحولها باستخدام برنامج MassHunter المتوافق.
    2. إجراء تحليل طيفي باستخدام أداة نظام التفكيك وتحديد الهوية الطيفية الكتلية الآلي (AMDIS)12.
    3. تحديد جميع المستقلبات باستخدام قواعد بيانات NIST و HMDB (انظر جدول المواد).
    4. قم باستيراد البيانات إلى أداة MetaboAnalyst للتحليل الجزئي للمربعات الصغرى التمييزية (PLS-DA) ، واختبارات t ، وتحليل المسار ، وتحليل الشبكة12.

5. تحليل اللطخة الغربية

  1. استخراج البروتينات الكلية من أنسجة كبد الفأر
    1. أضف 50 مجم من أنسجة الكبد من الخطوة 2.4 و 250 ميكرولتر من محللات الخلية إلى الخالط الزجاجي سعة 1 مل وطحنها على الثلج لمدة 5 دقائق.
    2. انقل أنسجة الكبد المتجانسة من الخطوة 5.1.1 إلى أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مل باستخدام ماصة ، وجهاز طرد مركزي عند 18,759 × جم لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية. ثم انقل المادة الطافية إلى أنبوب جديد سعة 1.5 مل باستخدام ماصة.
  2. تحديد تركيزات البروتين وعينات البروتين قبل المعالجة
    1. أضف 2 ميكرولتر من المادة الطافية من الخطوة 5.1.2 ، و 18 ميكرولتر من PBS ، و 180 ميكرولتر من محلول عمل BCA إلى لوحة ميكروتيتر 96بئرا 8.
    2. قم بتذبذب اللوحة على مذبذب لمدة 30 ثانية ، واتركها لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية ، وحدد الامتصاص عند 562 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة دقيقة.
  3. افصل إجمالي البروتينات باستخدام SDS-PAGE ، وانقله إلى أغشية فلوريد البولي فينيلدين ، وقم بحظر 5٪ حليب خالي الدسم8.
  4. احتضان الأغشية من الخطوة 5.3 بالأجسام المضادة الأولية ضد HIF-1α (1: 1000) ، VEGFA (1: 1000) ، GLA (1: 1000) ، NOS3 (1: 1000) ، و β-أكتين (1: 5000) بين عشية وضحاها عند 4 درجات مئوية.
  5. ضع الأغشية من الخطوة 5.4 في صندوق حضانة الأجسام المضادة ، وأضف 10 مل من TBST ، ورج أفقيا عند 111 × جم في درجة حرارة الغرفة لغسل الأجسام المضادة الأولية غير المرتبطة ثلاث مرات لمدة 5 دقائق لكل منها.
  6. أضف 200 ميكرولتر من الماعز المضاد للأرانب IgG (H + L) -HRP (1: 1000) إلى كل غشاء من الخطوة 5.5 واحتضنه لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، كرر الخطوة 5.5 لغسل الجسم المضاد الثانوي غير المرتبط (الماعز المضاد للأرانب IgG (H + L) -HRP).
  7. أضف 200 ميكرولتر من محلول التلألؤ الكيميائي ECL عالي الحساسية إلى سطح كل غشاء من الخطوة 5.6 وتصور نطاقات البروتين على الفور باستخدام نظام تحليل التصوير الكيميائي التلقائي.

6. التحليل الإحصائي

  1. تحليل البيانات باستخدام برنامج إحصائي ورسوم بيانية مع ANOVA أحادي الاتجاه متبوعا باختبار Tukey.
  2. اعرض النتائج كمتوسط ± الانحراف المعياري (SD) واعتبر قيمة P < 0.05 ذات دلالة إحصائية.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

لتأكيد التأسيس الناجح لنموذج الفأر لفقر الدم وتحليل تأثير SLBXS على فقر الدم ، تم أولا فحص مؤشر الكبد ومعايير الدم. يوضح الشكل 1 أن المجموعة النموذجية أظهرت انخفاضا كبيرا (P < 0.01) في عدد خلايا الدم الحمراء (RBC) والهيموجلوبين (HGB) والهيماتوكريت (HCT) مقارنة با?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

فقر الدم هو حالة شائعة تصيب العديد من الأشخاص في جميع أنحاء العالم ، وخاصة في البلدانالنامية 1. في الصين ، يستخدم المرضى بشكل متكرر الطب الصيني التقليدي ، بما في ذلك طب الأويغور ، للتخفيف من علامات وأعراض فقر الدم. SLBXS هو دواء الأويغوري الذي تم استخدامه في الم?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل خطة التدريب الخاصة لمواهب الأقليات في العلوم والتكنولوجيا ، ومؤسسة العلوم الطبيعية لمنطقة شينجيانغ الويغورية ذاتية الحكم (2020D03021) ، وصناديق البرنامج الرئيسي للطب الصيني التقليدي بجامعة هوبى للطب الصيني (2022ZZXZ004) ، وبرنامج فريق الابتكار في تيانشان (2020D14030).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
AcetylphenylhydrazineShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C13979660
Automatic chemiluminescence imaging analysis systemShanghai Tanon Life Science Co., Ltd.Tanon-5200
Bicinchoninic acid assay kitThermoFisher ScientificQPBCA-1KT
Capillary columnAgilent J&W Scientific, Agilent Technologies, Inc.DB-5MS
Cell lysis buffer for Western and IPBeyotime BiotechnologyP0013
ChlorotrimethylsilaneShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C104814
Electronic balanceMettler-Toledo International Inc.ME203E
Electronic scaleMettler-Toledo International Inc.LE104E
Fu-Fang-E-Jiao SyrupDong E E Jiao Co., Ltd.214020031
Fully automatic hemocyte analyzerShenzhen Mindray Animal Care Technology Co., Ltd.IDEXX ProCyte Dx
GC-MS systemAgilent Technologies, Inc.7890B-5977B 
GLA primary antibodyBioworld TechnologyBS77041
Glass homogenizerShanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-013001
Glass rod Shanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-003904
GraphPad Prism software GraphPad, La JollaVersion 9.0
Heparinized sample tubesChangde BKMAM Biotechnology Co., Ltd.B-ACT1P5
HIF-1α primary antibodyBioworld TechnologyBS3514
HMDB databasehttp://www.hmdb.ca/—
IsofluraneHebei Jindafu Pharmaceutical Co., Ltd.20231202
Male C57BL/6 miceLiaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd.No. SCXK [Liao] 2015-0001
MassHunterAgilent Technologies, Inc.B.08.00
MetaboAnalyst 5.0https://www.metaboanalyst.ca/—
Methoxyamine hydrochlorideShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.E1818113
n-hexaneShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C14878803
NIST databasehttp://webbook.nist.gov/chemistry/—
NOS3 primary antibodyBioworld TechnologyBS3625
PyridineShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.C13026996
SalineBIOSHARP LIFE SCIENCES2308262009
Shi-Liu-Bu-Xue SyrupXinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.211277
Surgical manipulation plateDIXSGZK-JPB-A
VEGFA primary antibodyBioworld TechnologyAP0742
β-actinABclonal (Shanghai) Trading Co., Ltd.AC026

References

  1. Munoz, M., Gomez-Ramirez, S., Bhandari, S. The safety of available treatment options for iron-deficiency anemia. Expert Opin Drug Saf. 17 (2), 149-159 (2018).
  2. Soliman, A. T., De Sanctis, V., Yassin, M., Wagdy, M., Soliman, N. Chronic anemia and thyroid function. Acta Biomed. 88 (1), 119-127 (2017).
  3. Pivina, L., Semenova, Y., Dosa, M. D., Dauletyarova, M., Bjorklund, G. Iron deficiency, cognitive functions, and neurobehavioral disorders in children. J Mol Neurosci. 68 (1), 1-10 (2019).
  4. Lumbiganon, P., et al. Indirect causes of severe adverse maternal outcomes: a secondary analysis of the WHO Multicountry Survey on Maternal and Newborn Health. BJOG. 121 (Suppl 1), 32-39 (2014).
  5. Shaddy, R. E., et al. Systematic literature review on the incidence and prevalence of heart failure in children and adolescents. Pediatr Cardiol. 39 (3), 415-436 (2018).
  6. China Medical Association of Minorities. Guidelines for clinical use of minority drugs. , Chinese Press of Traditional Chinese Medicine. Beijing. (2018).
  7. Yu, W. Q. Clinical efficiency of Pomegranate blood-enriching syrup in the treatment of iron deficiency anemia. J Med Pharm Chin Minor. 26 (11), 11-12 (2020).
  8. Zhang, D. N., et al. Mechanism of Shiliu Buxue Syrup for anemia using integrated metabolomics and network pharmacology. Anal Biochem. 653, 114774(2022).
  9. Nielsen, J. Systems biology of metabolism. Annu Rev Biochem. 86, 245-275 (2017).
  10. Wang, M., et al. Metabolomics highlights pharmacological bioactivity and biochemical mechanism of traditional Chinese medicine. Chem Biol Interact. 273, 133-141 (2017).
  11. Ben, C. N. Establishment and experimental research of "Blood Deficiency" animal model. Lab Animal Sci. (03), 5-10 (1994).
  12. Cao, S., et al. Integrative transcriptomics and metabolomics analyses provide hepatotoxicity mechanisms of asarum. Exp Ther Med. 20 (2), 1359-1370 (2020).
  13. Yang, H. Y., Liu, M. L., Luo, P., Yao, X. S., Zhou, H. Network pharmacology and metabolomics in the study of traditional Chinese medicine for cardiovascular diseases. Phytomedicine. 104, 154268(2022).
  14. Croci, S., Pedrazzi, G., Passeri, G., Piccolo, P., Ortalli, I. Acetylphenylhydrazine induced haemoglobin oxidation in erythrocytes studied by Mossbauer spectroscopy. Biochim Biophys Acta. 1568 (1), 99-104 (2001).
  15. Liebowitz, J., Cohen, G. Increased hydrogen peroxide levels in glucose 6-phosphate dehydrogenase deficient erythrocytes expose to acetylphenylhydrazine. Biochem Pharmacol. 17 (6), 983-988 (1968).
  16. Tarasenko, T. N., McGuire, P. J. The liver is a metabolic and immunologic organ: A reconsideration of metabolic decompensation due to infection in inborn errors of metabolism (IEM). Mol Genet Metab. 121 (4), 283-288 (2017).
  17. Topalovic, A., Knezevic, M., Gacnik, S., Mikulic-Petkovsek, M. Detailed chemical composition of juice from autochthonous pomegranate genotypes (Punica granatum L.) grown in different locations in Montenegro. Food Chem. 330, 127261(2020).
  18. Legua, P., et al. Total phenols and antioxidant capacity in 10 Moroccan pomegranate varieties. J Food Sci. 77 (1), C115-C120 (2012).
  19. Rodrigo, R., Miranda, A., Vergara, L. Modulation of endogenous antioxidant system by wine polyphenols in human disease. Clin Chim Acta. 412 (5-6), 410-424 (2011).
  20. Hussain, T., et al. Oxidative stress and inflammation: What polyphenols can do for us. Oxid Med Cell Longev. 2016, 7432797(2016).
  21. Sudheesh, S., Vijayalakshmi, N. R. Flavonoids from Punica granatum--potential antiperoxidative agents. Fitoterapia. 76 (2), 181-186 (2005).
  22. Riaz, A., Khan, R. A. Anticoagulant, antiplatelet and antianemic effects of Punica granatum (pomegranate) juice in rabbits. Blood Coagul Fibrinolysis. 27 (3), 287-293 (2016).
  23. Balasubramani, S. P., Varghese, R. K., Vishnuprasad, C. N., Venkatasubramanian, P. Pomegranate juice enhances iron dialysability and assimilation in in-vitro cell-free and cell-based models. Plant Foods Hum Nutr. 75 (2), 272-278 (2020).
  24. Jilani, T., Iqbal, M. P. Does vitamin E have a role in treatment and prevention of anemia. Pak J Pharm Sci. 24 (2), 237-242 (2011).
  25. Farrell, P. M., Bieri, J. G., Fratantoni, J. F., Wood, R. E., di Sant'Agnese, P. A. The occurrence and effects of human vitamin E deficiency. A study in patients with cystic fibrosis. J Clin Invest. 60 (1), 233-241 (1977).
  26. Ukab, W. A., Sato, J., Wang, Y. M., van Eys, J. Xylitol mediated amelioration of acetylphenylhydrazine-induced hemolysis in rabbits. Metabolism. 30 (11), 1053-1059 (1981).
  27. Ahuja, V., et al. Biological and pharmacological potential of xylitol: A molecular insight of unique metabolism. Foods. 9 (11), 1592(2020).
  28. Nikas, I. P., Paschou, S. A., Ryu, H. S. The role of nicotinamide in cancer chemoprevention and therapy. Biomolecules. 10 (3), 477(2020).
  29. Katayoshi, T., Yamaura, N., Nakajo, T., Kitajima, N., Tsuji-Naito, K. Porcine placental extract increases the cellular NAD levels in human epidermal keratinocytes. Sci Rep. 12 (1), 19040(2022).
  30. Bartoszewski, R., et al. Primary endothelial cell-specific regulation of hypoxia-inducible factor (HIF)-1 and HIF-2 and their target gene expression profiles during hypoxia. Faseb J. 33 (7), 7929-7941 (2019).
  31. Lee, S. H., Golinska, M., Griffiths, J. R. HIF-1-independent mechanisms regulating metabolic adaptation in hypoxic cancer cells. Cells. 10 (9), 2371(2021).
  32. Sato, T., Takeda, N. The roles of HIF-1α signaling in cardiovascular diseases. J Cardiol. 81 (2), 202-208 (2023).
  33. Ratcliffe, P. J. Oxygen sensing and hypoxia signalling pathways in animals: The implications of physiology for cancer. J Physiol. 591 (8), 2027-2042 (2013).
  34. Li, L. J., Huang, Q., Zhang, N., Wang, G. B., Liu, Y. H. miR-376b-5p regulates angiogenesis in cerebral ischemia. Mol Med Rep. 10 (1), 527-535 (2014).
  35. Tejero, J., Shiva, S., Gladwin, M. T. Sources of vascular nitric oxide and reactive oxygen species and their regulation. Physiol Rev. 99 (1), 311-379 (2019).
  36. Fujii, J., et al. Erythrocytes as a preferential target of oxidative stress in blood. Free Radic Res. 55 (5), 562-580 (2021).
  37. Huang, J. W., et al. High expression of HIF-1α alleviates benzene-induced hematopoietic toxicity and immunosuppression in mice. Environ Pollut. 311, 119928(2022).
  38. Zhang, Z., Yao, L., Yang, J., Wang, Z., Du, G. PI3K/Akt and HIF-1 signaling pathway in hypoxia-ischemia (Review). Mol Med Rep. 18 (4), 3547-3554 (2018).
  39. Del Balzo, U., et al. Nonclinical characterization of the hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor roxadustat, a novel treatment of anemia of chronic kidney disease. J Pharmacol Exp Ther. 374 (2), 342-353 (2020).
  40. Bhatia, S., Singh, A., Batra, N., Singh, J. Microbial production and biotechnological applications of α-galactosidase. Int J Biol Macromol. 150, 1294-1313 (2020).
  41. Conte, F., van Buuringen, N., Voermans, N. C., Lefeber, D. J. Galactose in human metabolism, glycosylation and congenital metabolic diseases: Time for a closer look. Biochim Biophys Acta Gen Subj. 1865 (8), 129898(2021).
  42. Wang, Y. Y. Investigate the effect of galacto-oligosaccharide supplementation on intestinal absorption of iron in rats. [Master's Thesis]. , Southern Medical University. (2019).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

HIF 1

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved