TCPP Bead Filtration

ابدأ ترشيح حبة TCPP عن طريق تخفيف 0.8 ملليلتر من تعليق حبة TCPP ب 3.20 ملليلتر من محلول الملح المتوازن المثلج من Hanks's ، أو HBSS. دوامة تعليق حبة مخففة بأقصى سرعة لمدة 15 ثانية. بعد ذلك ، قم بإزالة المكبس من حقنة سعة خمسة ملليلتر يمكن التخلص منها وقم بتركيب المحقنة بمرشح طرف من الألياف الزجاجية بقطر 13 ميكرومتر.

بعد ذلك ، أضف أربعة ملليلتر من HBSS إلى المحقنة قبل إضافة 0.5 ملليلتر من تعليق الخرزة المخففة الدوامة. باستخدام المكبس ، قم بتصفية تعليق الخرزة من خلال مرشح المحقنة بمعدل قطرتين في الثانية تقريبا. بعد ذلك ، اغسل الخرزات عن طريق سحب خمسة ملليلتر من HBSS الطازج في المحقنة من خلال المرشح ودفع HBSS للخارج في حاوية النفايات بمعدل قطرتين في الثانية تقريبا.

لإزالة الخرزات من الفلتر ، ارسم خمسة ملليلتر أخرى من HBSS الطازج في المحقنة من خلال الفلتر. ثم قم بإزالة الفلتر بعناية من المحقنة. بعد إخراج تعليق الخرزة من المحقنة إلى أنبوب طرد مركزي مخروطي سعة 50 ملليلتر ، ضع المرشح الجديد مرة أخرى على المحقنة وكرر غسل HBSS سعة خمسة ملليلتر أربع مرات.

بمجرد الانتهاء من ذلك ، تخلص من الفلتر والمحقنة. أجهزة الطرد المركزي تعليق حبة المصفاة في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق في 1،000g. نضح المادة الطافية من كل أنبوب سعة 50 ملليلتر.

أعد تعليق الخرز برفق و 0.5 ملليلتر من HBSS الطازج. انقل الخرزات المدمجة مع ماصة P1000 الدقيقة إلى قنينة زجاجية جديدة بلون الكهرمان ، وقم بتخزينها عند أربع درجات مئوية. يظهر تأثير الترشيح على معلق حبة يتكون من حوالي 66٪ من الجسيمات هنا.

بعد الترشيح ، انخفض محتوى الجسيمات إلى حوالي 25 ٪الآثار الضارة للترشيح هي فقدان الخرز وفقدان طفيف في شدة مضان.