لاستعادة EPF من المكتبة الفطرية ، ابدأ بتلطيخ العزلات الفطرية على لوحة SDA ربع القوة. احتضانها في الظلام عند 25 درجة مئوية لمدة 10-14 يوما قبل حصاد الكونيديا. بعد ذلك ، ماصة 2-3 مل من 0.03٪ توين 80 على طبق مستزرع.
ثم استخدم حلقة التلقيح لكشط الكونيديا بها. بعد ذلك ، انقل التعليق الفطري إلى أنبوب طرد مركزي. دوامة بقوة التعليق بأعلى سرعة ، ثم ماصة خارج عينة في مقياس الدم لحساب عدد كونيديا.
تمييع الكونيديا داخل التعليق باستخدام 0.03٪ توين 80 حتى يتم الحصول على التركيز المطلوب. لتحضير غرفة التلقيح ، قم أولا بقطع قرص أوراق قطره 9 سم باستخدام طبق بتري السفلي كقالب أو بمقص. بعد ذلك ، قم بإعداد 1.5٪ أجار ماء لكل طبق باستخدام الميكروويف.
صب 30 مل من أجار الماء المبرد في طبق بتري واتركه يتجمد في غطاء التدفق الصفحي. عندما يكون سطح أجار شبه صلب ، ضع قرص الورقة مع سطحه المحوري متجها لأعلى ، ثم اضغط عليه قليلا لتثبيته في الآجار. الآن ، ضع 20 بالغا على قرص الورقة.
افتح غطاء غرفة التلقيح لرش 0.3 مل من معلق الكونيديا مباشرة على حشرات المن وقرص الأوراق. بمجرد أن يجف التعليق ، أغلق الغطاء لمنع غرق حشرات الخردل. بعد ذلك ، أغلق غرفة التلقيح باستخدام فيلم البارافين للحفاظ على ارتفاع الرطوبة.
ضع الغرفة في حاضنة مضبوطة على درجة حرارة 25 درجة مئوية مع فترة ضوئية فاتحة ومظلمة لمدة 12 ساعة لكل منهما. استخدم مجهرا مجسما لحساب معدل الوفيات كل 12 ساعة لمدة 5 أيام. كشف فحص الفوعة عن معدل بقاء ثابت لحشرات من الخردل مع إظهار المجموعة الضابطة معدل بقاء بنسبة 85٪.
أظهر كورديسيبس كاتينينولاتا أسرع قدرة على قتل المن ، مما أدى إلى أخلاق 50٪ و 90٪ في 3 أيام و 4.5 أيام بعد التلقيح ، أو DPI. أظهرت سلالات بوفيريا 141 و 143 و 153 قدرات بطيئة على قتل حشرات المن مع معدل وفيات 5٪ فقط عند 3 نقطة في البوصة. بصرف النظر عن Purpureocillium ، أظهرت معظم عزلات EPF معدلات وفيات مصححة أعلى من 70٪ في غضون 5 DPI.
أظهرت بوفيريا باسيانا أعلى معدل وفيات بنسبة 100٪ بين عزلات EPF. لوحظ فطار EPF على جثث حشرات من الخردل المصابة بأنواع Metarhizium وأنواع Beauveria و Purpureocillium lilacinum و Cordyceps cateniannulata أثناء فحص الفوعة.
