ابدأ بتنظيف قشر البيض برفق من بيض الدجاج الأبيض المخصب بمناديل مبللة بالإيثانول خالية من النسالة. احتضان البيض حادة في نهاية المطاف حتى المرحلة المطلوبة ، وعادة ما HH20 إلى 21. قبل البدء في الإجراء ، قم بإعداد العدد المطلوب من العقد عن طريق ربط عقدة علوية فضفاضة في خياطة طولها 1.5 سم 10 صفر.
تأكد من أن العقدة ليست ضيقة وكبيرة بما يكفي لتناسب الأذينين. افتح قشر البيض برفق بالطرف الخلفي للملاقط ، وادعم البيضة بإحكام لمنع التشققات غير المرغوب فيها. افتح نافذة من الطرف الحاد للبيضة وقم بإزالة الأغشية الخارجية والداخلية.
استخدم المقص الصغير لإزالة غشاء vitelline الضروري فقط. بمجرد أن يصبح الجنين خاليا من غشاء vitelline ، ضع الملقط ذو الطرف المغلق أسفل الجزء الظهري من الجنين واقلبه برفق لكشف الجانب الأيسر. قم بإزالة جميع الأغشية حول البرعم الأذيني مباشرة عن طريق إزالة الأغشية الخشنة أولا ، ثم استخدام ملاقط أدق لإزالة الغشاء الدقيق.
ضع العقدة المعدة مسبقا بالقرب من الجنين. قم بتوجيه العقدة المفتوحة بشكل صحيح فوق برعم الأذين الأيسر لتنفيذ شد العقدة. باستخدام مقص صغير ، قم بقص نهايات الخيط الزائدة في أقرب وقت ممكن من البرعم وإزالة قطع الخياطة الزائدة بالملاقط.
أخيرا ، باستخدام ملاقط مغلقة ، أعد الجنين إلى موضعه الأصلي. بعد الانتهاء من الجراحة المجهرية ، قم بتغطية البويضة بطبقة مزدوجة من المعلمة وأعدها إلى الحاضنة. أظهر الربط الأذيني الأيسر ، أو نماذج LAL ، أنه تم تحقيق بنية عضلة القلب أكثر إحكاما مع تغيرات مورفولوجية كبيرة مقارنة بالتطور الطبيعي.
لوحظ ترسب مصفوفة خارج الخلية حول الخلالي القلبي ، يشبه تليف عضلة القلب. كشفت قياسات المسامية المورفومترية عن تجويف البطين الأيسر الأصغر والضغط التربيقي في نماذج LAL. في HH 25 من نموذج LAL ، لوحظ تجويف البطين الأيمن الموسع ، والهندسة التربيقية المتغيرة ، وحجم عضلة القلب.
أظهر التصوير المقطعي للتماسك البصري لنماذج LAL انخفاضا كبيرا في حجم البطين الأيسر وقطره مقارنة بالسيطرة. أظهرت مجموعات LAL أيضا زيادة في سمك الجدار مقارنة بالمجموعات الضابطة في HH 25.
