Oral Submucous Fibrosis Tissue Sample Preparation for Hematoxylin-Eosin Staining

للبدء ، باستخدام microtome ، قم بقطع أنسجة التليف تحت المخاطي للبارافين الثابت بالفورمالين إلى أقسام مستمرة بسمك ثلاثة في 10 ميكرومتر ، ثم افتح الأقسام في الماء. ضع ثلاثة أقسام ميكرون على شريحة مجهر الالتصاق أو الشريحة A ، و 10 ميكرون على شريحة غشاء القلم أو الشريحة B.ضع كلتا الشريحتين على طبق ساخن عند 60 درجة مئوية. بعد ساعتين ، ضع الشريحتين A و B في الزيلين لمدة 10 دقائق ، ثم رطب الشرائح بتركيزات الإيثانول المتدرجة لمدة دقيقة واحدة في كل تركيز.

بعد ذلك ، ضع الشرائح في ماء مقطر عالي النقاء لمدة 30 ثانية. نقع الشرائح في محلول صبغة الهيماتوكسيلين هاريس لمدة 90 ثانية. اغسل الشرائح مرة أخرى ثلاث مرات في ماء مقطر عالي النقاء لمدة 30 ثانية لكل منهما.

بعد ذلك ، اغمر الشرائح في محلول div-hematoxylin لمدة ثانيتين. أعد الشرائح إلى الماء المقطر عالي النقاء لمدة 30 ثانية ، وكرر ثلاث مرات. بعد ذلك ، اغمر الشرائح A و B في محلول 1٪ re-blue لمدة ثانيتين.

بعد غسل الشرائح بالماء المقطر ، ضعها في محلول eosin لمدة ثانيتين. اغمر الشرائح مرة أخرى في ماء مقطر عالي النقاء لمدة 30 ثانية قبل التجفيف وزيادة تركيزات الإيثانول ، ثم اغمر الشريحة A في الزيلين لمدة ثلاث دقائق. أخيرا ، ضع قطرة من وسيط التثبيت على الشريحة A ، وقم بتغطيتها بغطاء زجاجي.