للبدء ، ضع قطع المكوس من عينات المشيمة في برنامج تلفزيوني. تخلص من الصفيحة المشيمية ، و decidua الأم ، وأي احتشاء مرئي من العينة. تشريح عينة الأنسجة المتبقية إلى نباتات زغبية يبلغ قطرها العرضي حوالي 0.5 سم.
انقل النباتات إلى طبق بتري مليء ببرنامج تلفزيوني طازج. باستخدام زوج من الملقط ، هز كل نبات في برنامج تلفزيوني لإزالة كل الدم. تحت غطاء معقم ، استخدم أقفال luer لتوصيل خمس غرف بزجاجة الخزان.
اقلب الغرف رأسا على عقب وأزل القاع. الآن استخدم ملقط لوضع الألواح المعدنية مركزيا في الأجزاء العلوية من الغرف مع توجيه المسامير لأعلى. املأ نصف الغرف بمليلتر واحد من وسط الثقافة المسخن.
أضف 20 ملليلتر إضافية من الوسط إلى الخزان. باستخدام الملقط ، ضع بعناية الزرع الزغبي على إبر اللوحة المعدنية في الغرفة. ضع أربعة نباتات في غرفة واحدة.
أعد توصيل الجزء السفلي من الغرف لإغلاقه. بعد ذلك ، قم بتوصيل أنبوب المضخة بالمضخة لتوصيل دائرة التدفق بالمضخة التمعجية داخل المفاعل الحيوي. إصلاحه في المرحلة الرابعة.
ضمن قائمة المضخات، اختر الوضع اليدوي. اضبط سرعة المضخة على ملليلتر واحد في الدقيقة وانقر فوق تشغيل لبدء الضخ. أمسك الغرف بزاوية أثناء التعبئة لضمان الملء الكامل.
عند الانتهاء من عملية التعبئة ، اقلب الحجرة مرة أخرى. تأكد من أن الغرف آمنة وأغلق كلا غطاءي المفاعل الحيوي. بمجرد اكتمال حضانة الأنسجة ، انقر فوق إجهاض لإيقاف المضخة.
في وقت واحد ، افتح غطاءين للمفاعل الحيوي وغرفة تدفق واحدة. استخدم الملقط لإزالة النباتات بعناية من اللوحة المعدنية لمزيد من التحليل. أظهرت النباتات الملطخة بالأنسجة المناعية الكيميائية عرضا مرئيا منظما ومنظما جيدا للهيكل الخلوي في أنسجة الثقافة الطازجة والتدفقية.
بمرور الوقت ، لوحظ تراكم الشعيرات الدقيقة بشكل متزايد في النباتات الثابتة ، مما يدل على تدهور البنية الهيكلية الخلوية. تم تأكيد تناقص سلامة الأنسجة خلال وقت الزراعة من خلال ذكر الهيماتوكسيلين ويوزين. أظهرت الأنسجة الطازجة سدى كثيفة ومعبأة بإحكام.
بعد 48 ساعة من ثقافة التدفق ، شوهدت شظايا منفصلة جزئيا من الأرومة المخلوية. لم يتم الحفاظ على سلامة الأنسجة بشكل كاف بالفعل بعد 24 ساعة في حالة مزرعة ثابتة ، والتي تدهورت أكثر بعد 48 ساعة. أظهر تلطيخ الخلايا البطانية خلايا منظمة بشكل مميز في الأنسجة الطازجة.
تم الحفاظ على السلامة المورفولوجية على نطاق واسع حتى بعد 48 ساعة في ثقافات التدفق. ومع ذلك ، أظهر الزرع الثابت انهيارا جزئيا حتى بعد 24 ساعة ، والذي تدهور أكثر بعد 48 ساعة.
