Dissection and Removal of the Temporal Bone to Collect Auditory Epithelia from Newborn Mice

للبدء ، أمسك رأس الفئران حديثي الولادة بإحكام في مكانه. باستخدام مقص التشغيل الصغير ، افتح فروة الرأس على طول الخيط السهمي. ثم ، افصل وشل فروة الرأس بشكل ثنائي بالأصابع.

استخدم المقص لقطع الجمجمة وقلبها للأمام للوصول إلى الجمجمة. استخدم مصعدا صغيرا للسمحاق لاستخراج الدماغ ثم استخدم طرف المقص لكشط الدماغ برفق ، وكشف قاعدة الجمجمة. الآن ، افحص العظام الصدغية الثنائية في قاعدة الجمجمة.

استخدم مقصا لشق قاعدة الجمجمة على طول خط الوسط. ثم ، كشط الجلد والقضاء على أي عظام غير ضرورية. الحفاظ على العظام الصدغية ونقلها إلى أطباق بتري معقمة 35 ملم مليئة HBSS الطازجة.

بعد ذلك ، استخدم زوجا من 5 ملقط مدبب للتخلص من البولا والأنسجة المحيطة بها من الجزء الصخري من العظم الصدغي. امسك الملقط بيد واحدة لتثبيت الجزء شبه الدائري من العظم الصدغي. استخدم اليد الأخرى لإدخال الطرف السفلي من الملقط في مكان النافذة المستديرة ، مع فصل العظم الجانبي للقوقعة عن مقياس الدهليز.

قم بإزالة الجزء الصخري من العظم الصدغي بعناية دون الاتصال بظهارة كورتي. ثم ، افصل بدقة واستخرج المتاهة العظمية للقوقعة ، بدءا من القاعدية إلى النهاية القمية. باستخدام 5 ملقط مدبب للأرقام ، قم بعزل الظهارة الحسية لجهاز كورتي بعناية عن modiolus.

بعد ذلك ، استخدم ملقط التشغيل الدقيق لتثبيت الرباط الحلزوني ، وفصله برفق عن الأوعية الدموية السطورية. انقل الظهارة السمعية النظيفة ، باستخدام ماصة 200 ميكرولتر ، إلى طبق مزرعة معقم ثلاثة ملليمترات يحتوي على HBSS. ضع الظهارة السمعية المعزولة في طبق بتري معقم 100 ملم مملوء ب HBSS لخطوات التحضير اللاحقة.