للبدء ، تأكد من أن لوحات الماسحة الضوئية جاهزة مع تحميل الديدان الخيطية. بشكل عام ، حوالي 40 و 200 ميكرولتر من العشب البكتيري لكل لوحة هي الظروف المثلى لتجربة طويلة العمر. ابدأ الإعداد التجريبي بتطبيق منظف زجاج مضاد للضباب على جانبي ألواح الزجاج التي ستدعم لوحات الماسحة الضوئية.
ثم قم بتطبيق معالجة زجاجية واقية كارهة للماء على جانب الزجاج الذي سيكون ملامسا لألواح الماسح الضوئي. انتظر من خمس إلى 10 دقائق ، وقم بإزالة أي بقايا على لوح الزجاج. ضع 70٪ إيثانول لتطهير جانب الزجاج الذي سيكون ملامسا لألواح الماسح الضوئي.
اتركيه لمدة دقيقة إلى دقيقتين ثم أزيلي الإيثانول بقطعة قماش أو منشفة ورقية. لتحميل الألواح على الماسحات الضوئية ، ضع حصائر الأوتوكلاف المطاطية أعلى زجاج دعم اللوحة المعالج. خذ لوحات الماسح الضوئي المستخدمة للتصوير باستخدام الديدان الخيطية المحملة وقم بإزالة الغطاء.
ضع الألواح على مواقع حصيرة مطاطية تواجه السطح الزجاجي. افصل مراوح الماسحة الضوئية لحماية أصابع المجرب أثناء تحميل اللوحة. حرك الألواح والألواح الزجاجية التي تدعمها برفق على سطح الماسحة الضوئية.
أعد تنشيط مراوح الماسحة الضوئية وتأكد من تشغيل المراوح الأمامية والجانبية. قم بتشغيل الماسحات الضوئية في هذه المرحلة. قبل بدء التجربة ، قم بتنفيذ الخطوات الأساسية للحصول على الصورة المسبقة ، بما في ذلك الحصول على صورة التقاط معاينة لسطح الماسح الضوئي بالكامل.
باستخدام واجهة الويب ، ابحث عن قسم الحصول على الصور في الصفحة الرئيسية واتبع الرابط المسمى أجهزة الالتقاط وخوادم الصور. في المربع المفتوح ، انقر فوق البحث عن أجهزة جديدة وتأكد من ظهور كل ماسح ضوئي متصل بالخادم في مربع أجهزة التقاط الصور. حدد خانة الاختيار المقابلة لكل ماسحة ضوئية تحتوي على لوحات محملة حديثا ، ثم انقر فوق الزر طلب التقاط المعاينة.
بعد ذلك في متصفح الفيروس المتنقل ، حدد صورة فتح الملف ، ثم اختر الصورة المطلوبة لفتح كل صورة التقاط معاينة. لكل صورة، انقر لتحديد الأعمدة المقابلة للمناطق التي تحتوي على لوحات. بمجرد تحديد جميع الصور ، حدد الحصول على الصور.
قم بتعريف مناطق المسح الضوئي، واحفظ مناطق المسح الضوئي المحددة على القرص، ثم اختر الموقع المطلوب لتصدير مواصفات المنطقة إلى القرص. قم بتجميع ملف يحتوي على اسم التجربة والمواقع الفعلية لكل عمود على الماسحات الضوئية والمدة الإجمالية للتجربة وتكرار التقاط الصورة. احفظ هذا كنص وملف XML.
في متصفح الفيروس المتنقل ، انقر فوق الحصول على الصور ، وأرسل جدول التجربة ، واختر ملف XML الذي تم إنشاؤه. سيسألك متصفح الفيروس المتنقل عما إذا كان سيتم إخراج ملخص للجدول أو تشغيل التجربة. قم بإنشاء ملف ملخص ، وتحقق من تواريخ اللقطات المجدولة ، والموقع ، والاسم ، وعدد الماسحات الضوئية في الملخص.
مرة أخرى، قم بتحميل ملف XML لجدول التجربة كما هو موضح. سيطالبك متصفح الفيروس المتنقل مرة ثانية ما إذا كان سيتم إخراج ملخص للجدول أو تشغيل التجربة. هذه المرة ، اختر تشغيل التجربة.
ستعمل آلة العمر الافتراضي الآن بشكل مستقل حتى تكتمل عمليات المسح النهائية المحددة في جدول التجربة. بعد انتهاء التجربة، وتنفيذ جميع خطوات الحصول على الصور والبريد، تحقق يدويا من صحة النتائج التلقائية باستخدام مستعرض الفيروس المتنقل. في قائمة متصفح الفيروس المتنقل ، انقر فوق ملف ، وحدد التجربة الحالية ، واختر التجربة المطلوبة.
لإنشاء لوحة العمل ، انقر فوق التحقق من الصحة ، وتصفح التجربة بأكملها ، ثم حدد فورا بعد وفاة كل دودة. انقر بزر الماوس الأيمن على صورة الكائن لاستبعاد الكائنات غير المتنقلة من لوحة العمل. لاستبعاد جميع الكائنات الموجودة على الصفحة في وقت واحد ، اضغط مع الاستمرار على مفتاح التحكم وانقر بزر الماوس الأيمن على أي كائن.
انقر بزر الماوس الأيمن مرتين لإعادة تضمين كائن مستبعد في التحليل. لحفظ التعليقات التوضيحية التي تم إجراؤها أثناء التعليق التوضيحي للوحة العمل ، انقر فوق الزر حفظ. انقر بزر الماوس الأيسر مرة واحدة على أي كائن من لوحة العمل لفتح نافذة جديدة تعرض معلومات مفصلة عن السلاسل الزمنية حول هذا الكائن.
للتعليق يدويا على أوقات الوفاة ، انقر بزر الماوس الأيسر على الشريط السفلي عند النقطة المقابلة لوقت الوفاة. استخدم شريط المسافة والأسهم اليمنى أو اليسرى للوحة المفاتيح للتنقل عبر الأطر الزمنية أو انقر مباشرة على الشريط في الإطار الزمني المطلوب. قم بالتعليق يدويا على أحداث الانكماش والتوسع بالنقر بزر الماوس الأيمن على الشريط السفلي في الإطار الزمني المطلوب.
شاهد منحنيات البقاء على قيد الحياة على الجانب الأيسر ومخطط التشتت الذي يقارن وقت توقف الحركة القوية بوقت الوفاة لكل فرد على الجانب الأيمن من لوحة العمل. لإنشاء أوقات الوفاة لتجربة ما ، في متصفح الفيروس المتنقل ، حدد ملفات البيانات وأوقات الوفاة ، ثم انقر فوق إنشاء أوقات الوفاة للتجربة الحالية. يظهر تأثير التحقق اليدوي من صحة البيانات على منحنيات البقاء هنا.
تم تشويه منحنيات البقاء الأولية التي تم إنتاجها قبل التعليق التوضيحي للوحة العمل من خلال التضمين غير الصحيح للكائنات غير الدودية. بعد استبعاد الكائنات غير المتنقلة أثناء التعليق التوضيحي اليدوي للوحة العمل ، عرضت منحنيات البقاء الناتجة دقة محسنة بشكل ملحوظ. يوضح التمثيل الرسومي متوسط العمر المتبقي المقدر عبر خطوات مختلفة من تحليل اكتساب صورة ما بعد ، وارتباطه بعمر الدودة.
وقد وجد أن التعليق اليدوي لأوقات الوفاة في تحليل الشيخوخة السلوكية مهم بشكل خاص في الديدان الحية الأطول. في هذه الحالة ، أولئك الذين يتعرضون لأقل تركيزات الثيران. في الختام ، فإن تقدير وقت الموت الآلي لآلة العمر دقيق بما فيه الكفاية لمقايسات البقاء على قيد الحياة.
بينما يمكن أن تستفيد فحوصات الشيخوخة السلوكية من التعليقات التوضيحية اليدوية.
