للبدء ، قم بإعداد إبرة فراشة 23G عن طريق قطع حماية الغلاف البلاستيكي ، بحيث تتعرض نهاية الإبرة العارية بمقدار 7 ملم. ثم قم بتوصيل إبرة الفراشة بأنابيب البوليمر بحقنة 1 ملليلتر. ضع فأرا مخدرا على إطار تجسيمي وحافظ على التخدير من خلال قناع الوجه.
بعد ذلك ، قم بإزالة الفراء على الرأس الخلفي وعنق الفئران. إصلاح رأس الفئران مع قضبان الأذن. حرك شريط الأنف للإطار التجسيمي لخفض رأس بحوالي 45 درجة عموديا.
ابحث عن سطح منخفض قليلا على الرأس الخلفي مع جانب المعين بين النتوء القذالي والعمود الفقري للأطلس. فرك السطح مع 70 ٪ من الإيثانول. لجمع السائل الدماغي الشوكي ، أدخل إبرة الفراشة عموديا في وسط السطح المكتئب على شكل معين في الصهريج العظيم حتى يتم حظر الحركة بواسطة حماية الغلاف البلاستيكي للإبرة.
ارسم مكبس المحقنة برفق للسماح للسائل الدماغي النخاعي بالتدفق ببطء عبر الإبرة. اجمع حوالي 100 ميكرولتر من السائل الدماغي النخاعي في أنابيب البوليمر. اضغط على أنبوب البوليمر بالقرب من إبرة الفراشة واقطع الأنبوب عند هذه النقطة.
ارسم العينة الواضحة في المحقنة. اطرد العينة في الأنبوب الدقيق المعقم سعة 0.2 ملليلتر واحفظها على الثلج لمدة تصل إلى ساعة واحدة. تطهير موقع انسحاب السائل الدماغي النخاعي على رأس.
إزالة الفئران من الإطار التجسيمي وإعادته إلى قفصه. ضع جانبا 2 ميكرولتر من العينة لمراقبة الجودة وقم بتخزين الباقي عند 80 درجة مئوية لمزيد من التحليل. تم إجراء سحب السائل الدماغي الشوكي المتكرر على مدار خمسة أيام في ثلاث مجموعات تجريبية من الفئران وتم التعبير عنه كنسبة مئوية من الانسحابات الناجحة التي أسفرت عن السائل الدماغي الشوكي الواضح.
في الفئران المزروعة ذات الرأس المزدوج التي تم تقنيها لسحب السائل الدماغي الشوكي ، كان معدل النجاح 71.1٪ مما يشير إلى أن القنية الموجودة على رأس قد تتداخل مع أخذ عينات السائل الدماغي النخاعي المتكررة. في المقابل ، عندما تم إجراء جمع السائل الدماغي الشوكي عن طريق ثقب الصهريج في المزروعة فقط في الأقطاب المربوطة أو القياس عن بعد ، كان معدل النجاح 86.7٪ و 88.9٪ تشير هذه النتائج إلى أن تقنية البزل أكثر ملاءمة لعمليات سحب السائل الدماغي الشوكي المتعددة في المزروعة بالأقطاب الكهربائية.
