للبدء ، انقل 70 ملليلترا من وسط النسر المعدل من Dulbecco الذي تم تسخينه مسبقا إلى طبق بتري في خزانة معقمة للسلامة الحيوية وأضف ديكساميثازون بتركيز 100 نانو مولر. قم بتجميع الأدوات الجراحية اللازمة للتشريح ، والتي تشمل ملقط ناعم ومستقيم ورفيع. ملقط مستقيم ذو طرف رفيع بأسنان مسننة ومقص ناعم حاد مستقيم.
لتشريح نباتات الأطراف الخلفية. حدد موقع مفصل الورك لفأر القتل الرحيم الموضوعة مستلقا على سطح المقعد المبطن بوسادات ماصة تحت الوسادات. استخدم مقصا دقيقا لعمل شق صغير على الجلد يغطي الجوانب القريبة والأمامية من الجزء العلوي من الساق.
ثم استخدم الأصابع لسحب الشق بعيدا لتوسيع وقرص الجزء العلوي من الساق المكشوفة. اسحب الجلد بعناية بعيدا لإزالة قفاز الطرف الخلفي إلى مستوى الكاحل. أدخل شفرة مقص واحدة برفق تحت الجلد على طول الجانب الظهري للقدم.
ثم قم بعمل شق يمتد نحو أصابع القدم واستمر في سحب الجلد بعيدا حتى تتم إزالته تماما. ضع الماوس للحصول على رؤية واضحة لإدخال وتر العرقوب على الجانب الخلفي من العقبي بالقرب من الكاحل. لإزالة وتر شرفة النبات ، أدخل طرفا واحدا من ملقط الطرف الناعم الأملس بين الوترين.
مرر الطرف الإنسي تحت وتر أخمصي. ثم اسحبه بالقرب لتمزيق العضلة الأخمصية. ثم باستخدام ملقط مسنن ذو طرف رفيع ، أمسك الطرف القريب المنفصل من وتر أخمص النبات واسحبه بعيدا لإزالته تماما.
في مفصل الورك ، استخدم مقصا دقيقا لقطع الحوض بدقة ، وعزل الطرف الخلفي. استخدم المقص لإزالة الحوض المتبقي برفق ، وكشف رأس الفخذ. في خزانة السلامة الحيوية ، قم بنقل نبات الطرف الخلفي إلى الطبق الذي يحتوي على وسائط زراعة الخلايا وديكساميثازون.
نقل الطبق إلى الحاضنة وإخضاعه للمعالجة المسبقة لمدة 48 ساعة.
